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不同转导方式及载体形式对TALENs在小鼠胚胎干细胞打靶效率的研究

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南开大学学报（自然科学版） 2014年第4期47卷 89-94页

作者：牟春琳刘畅陈凌懿南开大学生命科学学院天津300071

通过同源重组进行小鼠胚胎干细胞基因敲除是目前应用最为广泛的基因敲除技术手段,但同源重组的效率却非常低.TALEs和FokI的剪切结构域融合的TALENs可以实现高效的基因敲除.已有报导表明,TALENs识别位点的DNA序列和长度,及间隔区的长短... 详细信息

通过同源重组进行小鼠胚胎干细胞基因敲除是目前应用最为广泛的基因敲除技术手段,但同源重组的效率却非常低.TALEs和FokI的剪切结构域融合的TALENs可以实现高效的基因敲除.已有报导表明,TALENs识别位点的DNA序列和长度,及间隔区的长短等条件影响TALENs打靶效率.但外源载体的导入方式及载体的形式(DNA或RNA)是否以及如何影响TALENs的打靶效率还不明确.用不同的转导方式将TALENs导入小鼠胚胎干细胞中,并检测TALENs切割识别位点的效率,实验发现Lipofectamine○R2000转染的TALENs比电转化能更高效地切割目的 DNA位点,而DNA质粒或体外转录的RNA表达的TALENs切割DNA位点的效率相近.数据表明,在应用TALENs进行基因敲除时,有必要选择合适的转导方式以提高突变效率.

关键词：胚胎干细胞 TALENs 细胞转染电转化

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天然染料黄桑木上染棉织物效果分析

针织工业 2022年第2期 39-42页

作者：牟春琳姜鹏程姜会钰姚金波生物质纤维及生态染整湖北省重点实验室湖北武汉430020 广州美维电子有限公司广东广州510663

通过煎煮法萃取黄桑木色素并采用冷冻干燥法制成黄桑木天然染料,采用直接染色及以明矾、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸铁、硫酸锌作为媒染剂的媒染法染色,分析不同染色工艺下黄桑木染料在棉织物上的色光、得色深度以及各项牢度变化,同时探究... 详细信息

通过煎煮法萃取黄桑木色素并采用冷冻干燥法制成黄桑木天然染料,采用直接染色及以明矾、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸铁、硫酸锌作为媒染剂的媒染法染色,分析不同染色工艺下黄桑木染料在棉织物上的色光、得色深度以及各项牢度变化,同时探究黄桑木染料上染棉织物的最佳染色工艺条件。结果显示,不同染色方法下,黄桑木染棉时的染色效果差异较大,其中用明矾预媒时染色效果最佳,在媒染剂用量1.00 g/L、媒染温度90℃、媒染时间20 min、染色温度70℃、染色时间110 min、染色pH值为6时,染色织物得色最深,且各项牢度均达3级及以上。

关键词：天然染料黄桑木棉织物染色效果色牢度

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类胡萝卜素细胞工厂——杜氏藻养殖研究进展

海洋科学进展 2010年第4期28卷 554-562页

作者：牟春琳郝晓华刘鑫陈喜文陈德富南开大学生命科学学院分子遗传学研究室天津300071

杜氏藻是目前生产天然β-胡萝卜素最好的商品化微藻,其β-胡萝卜素含量最高达细胞干重的14%(质量分数)。此外,通过紫外线或化学诱变剂处理,也能获得用来生产八氢番茄红素、番茄红素、叶黄素和玉米黄素等其他类胡萝卜素突变株。为使杜氏... 详细信息

杜氏藻是目前生产天然β-胡萝卜素最好的商品化微藻,其β-胡萝卜素含量最高达细胞干重的14%(质量分数)。此外,通过紫外线或化学诱变剂处理,也能获得用来生产八氢番茄红素、番茄红素、叶黄素和玉米黄素等其他类胡萝卜素突变株。为使杜氏藻类胡萝卜素商业开发顺利进行,分析光、温度、pH值、营养、天敌等养殖条件对杜氏藻生长和类胡萝卜素积累的影响;比较大型开放池、循环池、回旋池、级联池、大罐、异养发酵罐及封闭式光合反应器等养殖方式的利弊;同时,总结培养液再循环、藻体采集、藻泥干燥、类胡萝卜素提取等藻体采收的有益经验。

关键词：类胡萝卜素杜氏藻盐藻 β-胡萝卜素微藻生物技术

脐带间充质干细胞通过调节IL-6延缓小鼠银屑病样皮损的研究

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药物评价研究 2020年第12期43卷 2375-2379页

作者：李政楠王秀娟李伟牟春琳杨莹金星徐永胜天津长和生物技术有限公司天津301925

目的通过咪喹莫特(IMQ)乳膏涂抹诱导产生银屑病样皮损的小鼠模型,观察人源脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对其整体和局部作用效果。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和hUC-MSCs组,模型组和hUC-MSCs组每日定时在小鼠裸露背部涂抹5%IMQ... 详细信息

目的通过咪喹莫特(IMQ)乳膏涂抹诱导产生银屑病样皮损的小鼠模型,观察人源脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对其整体和局部作用效果。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和hUC-MSCs组,模型组和hUC-MSCs组每日定时在小鼠裸露背部涂抹5%IMQ乳膏62.5 mg,对照组涂抹凡士林。在开始涂抹前1天(0 d)和涂抹后的第6天,对照组和模型组sc 200μL的生理盐水,hUC-MSCs组每只小鼠sc 2×10^(6)个hUC-MSCs。采用银屑病样皮损面积和疾病严重指数(PASI)评分标准观察银屑病样小鼠模型皮损变化情况;通过HE染色观察表皮层厚度,角质层角化程度及炎性细胞浸润程度;采集小鼠的静脉血,试剂盒法检测血清白细胞介素-6(IL-6)的浓度,评估小鼠炎症反应。结果hUC-MSCs组与同期模型组比较,皮损症状轻,通过PASI积分趋势图可见,hUC-MSCs能延缓皮损出现,同时减缓皮损严重程度,加快皮损部分的恢复;HE染色显示,hUC-MSCs组角化不全的细胞明显减少,红细胞外溢真皮层增生和炎性细胞浸润程度明显低于模型组,造模后6 d表皮层厚度显著低于模型组(P<0.01);hUC-MSCs组血清IL-6浓度在造模后的第12天显著低于模型组。结论银屑病样小鼠模型sc hUC-MSCs后能延缓银屑病的发生,并减轻银屑病症状,加快银屑病样皮损部分的恢复,可能通过调节IL-6发挥免疫调节作用。

关键词：银屑病脐带间充质干细胞咪喹莫特白细胞介素-6 炎症

人脐带间充质干细胞复方电解质注射液制剂的制备及稳定性研究

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药物评价研究 2020年第12期43卷 2394-2397页

作者：王秀娟李政楠李伟牟春琳杨莹金星徐永胜天津长和生物技术有限公司天津301925

目的探索人脐带间充质干细胞复方电解质注射液制剂稳定性。方法人脐带间充质干细胞(密度5×10^(5)/mL)分别与复方电解质注射液及0.9%氯化钠注射液(分别设加/不加2%人血白蛋白组)制备制剂,通过观察24 h内不同时间节点凋亡变化趋势优选出... 详细信息

目的探索人脐带间充质干细胞复方电解质注射液制剂稳定性。方法人脐带间充质干细胞(密度5×10^(5)/mL)分别与复方电解质注射液及0.9%氯化钠注射液(分别设加/不加2%人血白蛋白组)制备制剂,通过观察24 h内不同时间节点凋亡变化趋势优选出制剂方案;探讨该制剂的光照稳定性、热循环稳定性、加速稳定性以及长期稳定性。结果复方电解质注射液制剂较0.9%氯化钠注射液制剂细胞凋亡水平低;2%白蛋白添加能够有效降低细胞凋亡水平。光照对复方电解质注射液添加2%白蛋白细胞制剂无严重影响;温度波动能导致细胞存活率快速下降;高温对细胞制剂状态有较大影响,导致絮状物大量出现,细胞存活率快速下降;在低温条件下,该制剂能长时间保持细胞存活率。结论复方电解质注射液添加2%白蛋白是一种优良的人脐带间充质干细胞制剂方法。

关键词：制剂人脐带间充质干细胞稳定性复方电解质注射液

人源脐带间充质干细胞对膝骨关节炎模型大鼠的治疗作用

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药物评价研究 2020年第12期43卷 2380-2384页

作者：李伟李政楠王秀娟牟春琳杨莹金星徐永胜天津长和生物技术有限公司天津301925

目的观察人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对SD大鼠膝骨关节炎的治疗效果。方法8周龄近交系SD雄性大鼠6只,均采用自身双侧对照研究。应用手术方法切断双膝关节前交叉韧带,手术后不固定伤肢,笼内自由活动。术后4周,右侧作为模型侧,左侧膝关... 详细信息

目的观察人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对SD大鼠膝骨关节炎的治疗效果。方法8周龄近交系SD雄性大鼠6只,均采用自身双侧对照研究。应用手术方法切断双膝关节前交叉韧带,手术后不固定伤肢,笼内自由活动。术后4周,右侧作为模型侧,左侧膝关节注射hUC-MSCs 100μL(1×10^(7)cells/mL)。注射后4周,处死所有实验组大鼠并收取双侧膝关节标本,进行HE和甲苯胺蓝染色。结果模型侧细胞排列紊乱,细胞簇集明显,有细胞消失、基质染色不均、软骨结构改变、表面凹凸不平、软骨层次较差等现象,表明软骨蜕变,骨关节炎形成;hUC-MSCs治疗侧与模型侧相比,软骨细胞排列基本整齐,呈柱状,细胞增生较多,细胞簇集明显减少,潮线较完整。软骨表面相对平滑,表明软骨处于损伤修复中。结论hUC-MSCs移植治疗有助于改善大鼠膝骨关节炎,使大鼠关节软骨破坏减轻,促进软骨组织修复。

关键词：脐带间充质干细胞骨关节炎 HE染色甲苯胺蓝染色

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脐带来源间充质干细胞的免疫抑制功能研究

药物评价研究 2020年第12期43卷 2385-2389页

作者：杨莹李政楠王秀娟李伟牟春琳金星徐永胜天津长和生物技术有限公司天津301925

目的观察人源脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对异体总淋巴细胞和不同淋巴细胞亚群增殖能力的影响,以及对细胞因子分泌的影响。方法分离并培养hUC-MSCs及健康成人外周血淋巴细胞,以淋巴细胞为阴性对照,MTT法检测共培养(淋巴细胞∶hUC-MSCs为... 详细信息

目的观察人源脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对异体总淋巴细胞和不同淋巴细胞亚群增殖能力的影响,以及对细胞因子分泌的影响。方法分离并培养hUC-MSCs及健康成人外周血淋巴细胞,以淋巴细胞为阴性对照,MTT法检测共培养(淋巴细胞∶hUC-MSCs为1∶0.5、1∶1、1∶5、1∶10)3 d后淋巴细胞的增殖情况;流式细胞仪检测共培养体系中CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)、CD3-CD16^(+)CD56^(+)、CD4^(+)CD45RA^(+)CCR7^(+)的细胞比例;ELISA法检测白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10、γ-干扰素(INF-γ)细胞因子分泌情况。结果与阴性对照组比较,hUC-MSCs对淋巴细胞的增殖具有显著抑制作用(P<0.05),抑制效果随数量增加而增强;hUC-MSCs能够显著增加共培养体系中CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)细胞比例(P<0.05),显著降低CD4^(+)CD45RA^(+)CCR7^(+)细胞比例(P<0.05),对CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)细胞比例无显著影响;hUC-MSCs能够显著降低IL-2、IL-4、INF-γ水平,显著增加IL-10的分泌水平(P<0.05)。结论hUC-MSCs具有免疫抑制功能。

关键词：脐带间充质干细胞淋巴细胞免疫反应细胞因子

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基于摄影测量的三轴土体剪切带演化规律

工程科学学报 2024年第5期46卷 927-936页

作者：牟春梅李刘悦夏燚桂林理工大学土木与建筑工程学院桂林541004 广西岩土力学与工程重点实验室桂林541004

为实现土样局部变形的定向研究,同时优化土样的变形测量精度,将数字图像测量与三轴试验结合,在不对仪器做大型改造的条件下,运用摄影测量技术改良试验.以桂林地区红黏土为研究对象,试验全程对土样全表面进行受力变形监测,并还原土样的... 详细信息

为实现土样局部变形的定向研究,同时优化土样的变形测量精度,将数字图像测量与三轴试验结合,在不对仪器做大型改造的条件下,运用摄影测量技术改良试验.以桂林地区红黏土为研究对象,试验全程对土样全表面进行受力变形监测,并还原土样的三维重构模型,以此研究其应力应变关系、局部应变特性、剪切带演化规律.研究结果表明:(1)土样表面的剪切带内外区域具有截然不同的变形特征,带外区域变形较为均匀且变形量趋于稳定,而带内区域变形不均匀且变形量不断加剧;(2)根据土样表面不同区域间的局部应变差异,确定了剪切带开始形成、停止扩张及完全贯穿的临界状态,提出了一种判别剪切带发展阶段的方法;(3)根据判别方法,将剪切带的演化过程拆分为压缩变形、表面扩张、延伸贯穿、相对滑移四个阶段,并分析了各个阶段不同的变形规律与破坏机理.经摄影测量技术改良的三轴试验,能够得到更准确的土体局部本构关系和变形特性,为探索土的应变局部化现象提供了一种精确且经济的研究方案.

关键词：剪切带摄影测量三轴试验局部应变红黏土

以高水平对外开放推进新质生产力发展——基于“四链”融合视角

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河海大学学报（哲学社会科学版） 2024年第3期26卷 74-83页

作者：徐政牟春伟中共江苏省委党校经济学教研部江苏南京210009 烟台大学马克思主义学院山东烟台264005

创新链产业链资金链人才链融合的核心在于促进科技、产业、资本、人才等要素的集聚与互动,这是实现高水平对外开放的重要基准。在新一轮科技革命和产业变革同我国转变发展方式的历史性交汇期,依托高水平对外开放,不断提升创新链效能、... 详细信息

创新链产业链资金链人才链融合的核心在于促进科技、产业、资本、人才等要素的集聚与互动,这是实现高水平对外开放的重要基准。在新一轮科技革命和产业变革同我国转变发展方式的历史性交汇期,依托高水平对外开放,不断提升创新链效能、完善产业链布局、优化资金链生态、建强人才链质量,推动全球优质要素资源的集聚配置,对于加快形成和发展新质生产力具有重大而深远的意义。从“四链”融合角度来看,现阶段以高水平对外开放推进新质生产力发展,仍然面临一些现实约束:创新链整体效能较低、产业链不稳固、资金链流动性不足、人才链建设较为薄弱,且“四链”协同互补态势尚待形成。未来应以高水平对外开放赋能新质生产力发展,增强国内国际两个市场两种资源联动效应,通过更加开放的市场和高效的资源配置,提升创新链的整体效能;处理好对外开放与维护国家安全的关系,优化产业链布局,增强产业链的稳定性和韧性;营造市场化法治化国际化一流营商环境,优化资金链生态,提升资金链流动的畅通性;加快建设世界重要人才中心和创新高地,完善人才“引育留用”体系,提高人才链建设质量;实现创新链产业链资金链人才链的各自升级与彼此融合,加快形成和发展新质生产力提供强劲动力。

关键词：新质生产力高水平对外开放 “四链”融合资源优化配置

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