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耳内镜下鼓膜张肌腱切断治疗梅尼埃病术中新发现及短期疗效分析

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2022年第5期57卷 602-606页

作者：石国华王坛徐金霞牟少凤黄清丽姚可青宫丽丽聊城市人民医院耳鼻咽喉科聊城252000

目的观察耳内镜下鼓膜张肌腱切断治疗梅尼埃病的术中所见以及短期疗效,初步探讨其可行性及相关机制。方法收集2020年7—12月9例行耳内镜下鼓膜张肌腱切断治疗的梅尼埃病患者的临床资料,其中男2例、女7例,右侧5例、左侧2例、双侧2例,年龄... 详细信息

目的观察耳内镜下鼓膜张肌腱切断治疗梅尼埃病的术中所见以及短期疗效,初步探讨其可行性及相关机制。方法收集2020年7—12月9例行耳内镜下鼓膜张肌腱切断治疗的梅尼埃病患者的临床资料,其中男2例、女7例,右侧5例、左侧2例、双侧2例,年龄(56.3±10.6)岁(38~75岁)。术中观察术腔情况及圆窗膜有无破裂。术后2周、1个月、3个月时随访,评估耳闷、耳鸣、听力恢复以及眩晕发作情况。结果9例患者在全身麻醉下通过耳内镜完成鼓膜张肌腱切断手术。术中发现圆窗膜破裂1例,圆窗膜及卵圆窗附近严重纤维增生并与听骨链粘连1例,卵圆窗和圆窗膜附近纤维条索及膜性增生1例,圆窗膜附近纤维增生粘连2例,单纯卵圆窗周围膜性增生和粘连1例,中耳鼓室内未见纤维增生3例。术中圆窗膜能显露4例,不能显露5例。手术无严重并发症,术后随访3个月,耳闷症状消失5/5例,耳痛消失2/2例,耳鸣改善3/8例、无变化5/8例,听觉过敏改善3/3例,听力提高4/9例、无变化5/9例;9例患者中8例眩晕无发作,1例患者术后3个月内眩晕发作2次(该患者为圆窗膜破裂者)。结论耳内镜下鼓膜张肌腱切断治疗梅尼埃病3个月内疗效显著。术中发现多数病例有内耳窗膜附近纤维条索增生,可能为内耳窗膜反复破裂修复后的表现。

关键词：梅尼埃病鼓膜张肌腱切断术圆窗,耳卵圆窗,耳

鼻咽癌细胞中增强型表达载体调控TK基因与端粒酶活性关系的研究

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2010年第4期24卷 168-173页

作者：申聪香文忠钱宇虹牟少凤关小芳南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉-头颈外科广州510282

目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因核心启动子和原核增强子CMV联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦系统对TK基因的活性改变及与鼻咽癌细胞中端粒酶活性的关系。方法:将改良构建后的增强型载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CM... 详细信息

目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因核心启动子和原核增强子CMV联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦系统对TK基因的活性改变及与鼻咽癌细胞中端粒酶活性的关系。方法:将改良构建后的增强型载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer及单启动子载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp(作为对照组)分别转染端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞株及对照组细胞人乳腺癌MCF-7细胞(端粒酶阳性)及正常人血管内皮ECV细胞(端粒酶阴性),采用荧光显微镜下观察其TK基因绿色荧光蛋白表达,实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中TK基因mRNA定量表达差异,TRAP银染法检测肿瘤细胞转染前后端粒酶活性改变并分析TK基因表达与端粒酶活性之间的关系。结果:①增强型表达载体转染鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞均有很强的荧光表达及TK基因的mRNA表达,比单启动子pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp及ECV细胞绿色荧光要强。实时荧光定量PCR显示,增强型载体组A值亦较对照组明显增高。②转染增强型载体(加GCV)后TRAP银染法检测鼻咽癌5-8F细胞端粒酶活性较转染前明显降低,但转染正常对照细胞后活性无变化。③加入GCV后,pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer对鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞体外增殖均有明显抑制作用,高于单启动子组pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp及空载体组pGL3-basic-EG-FP3及空白对照组,而pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer转染ECV细胞无明显抑制作用。结论:hTERT启动子及CMV增强子可明显增强TK基因活性,并可导致该种肿瘤细胞端粒酶活性降低,靶向杀灭该种肿瘤细胞,但这种由TK基因介导的端粒酶活性抑制机制尚不清楚。

关键词：鼻咽肿瘤增强型表达载体 TK基因端粒酶

增强型胸苷激酶基因表达载体的构建及其杀伤鼻咽癌细胞的实验研究

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2010年第5期45卷 414-419页

作者：申聪香文忠钱宇虹关小芳牟少凤南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉头颈外科广州510282

目的探讨改良构建人端粒酶催化亚单位（human telomerase catalytic subunit promoter,hTERT）启动子及巨细胞病毒原核（cytomegalovirus,CMV）增强子联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（thymidine kinase,TK）的增强型表达载体在鼻咽... 详细信息

目的探讨改良构建人端粒酶催化亚单位（human telomerase catalytic subunit promoter,hTERT）启动子及巨细胞病毒原核（cytomegalovirus,CMV）增强子联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（thymidine kinase,TK）的增强型表达载体在鼻咽癌细胞体内外实验中的靶向杀伤效应及体内应用的安全性评价.方法以pGL3-basic空载体为模板,分别酶切连接hTERT启动子、CMV增强子及TK基因构建靶向性增强型表达载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTERTp-CMV（以hTERT单启动子调控TK基因表达载体作为对照组）,转染端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞及用做对照组的人乳腺癌MCF-7细胞和端粒酶阴性的正常人脐静脉内皮细胞ECV-304,分别采用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达差异、实时荧光定量PCR检测转染后TK基因mRNA表达差异、TeloChaser法检测上述细胞中的端粒酶活性、四甲基偶氮唑蓝（MTt）联合Boyden小室实验分析增强型载体对鼻咽癌细胞增殖及侵袭抑制的作用.将鼻咽癌细胞接种于裸鼠腋部皮下,构建裸鼠鼻咽癌移植瘤模型,研究增强型载体对裸鼠移植瘤的体内生长抑制作用及对全身的毒副反应情况.结果 ①成功改良构建hTERT/CMV双调控TK基因的增强型表达载体.②转染增强型载体组及单启动子载体组的鼻咽癌5-8F细胞均有绿色荧光表达,但前者荧光数量及强度均较后者强,对照组端粒酶阳性的乳腺癌细胞也有很强的荧光表达,而ECV-304细胞几乎无绿色荧光表达.实时荧光定量PCR结果显示,增强型载体组的TK基因mRNA表达量是单启动子组的2-5倍.③ TeloChaser法结果显示,两种肿瘤细胞（5-8F细胞、MCF-7细胞）端粒酶活性均为阳性,正常对照ECV-304细胞端粒酶活性为阴性.④MTT联合Boyden小室侵袭实验结果显示,增强型表达载体对5-8F细胞体外增殖及侵袭力均有明显抑制作用.相对细胞存活率为37.0%,较对照组明显低（P〈0.01）.⑤体内实验结果显示,增强型靶向表达载体对裸鼠鼻咽癌移植瘤生长具有明显抑制作用,抑瘤率达56.3%,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,而裸鼠肝肾病理检查未发现明显损害.结论以hTERT/CMV双调控机制介导TK基因的增强型表达载体能够高效、靶向杀伤鼻咽癌细胞及移植瘤,实验动物体内应用无明显毒副作用.

关键词：胸苷激酶鼻咽肿瘤巨细胞病毒端粒,末端转移酶

hTERT及CMV双调控TK基因靶向杀灭鼻咽癌细胞的实验研究

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中国现代医学杂志 2010年第20期20卷 3048-3052页

作者：申聪香文忠关小芳牟少凤南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉-头颈外科广东广州510282 广东军区421医院五官科广东广州510318

目的探讨hTERT启动子及CMV增强子双调控表达载体调控TK基因靶向杀灭鼻咽癌细胞的效应。方法将双调控增强型载体及hTERT单启动子载体(作为对照组)分别转染两种端粒酶(+)的人鼻咽癌5-8F细胞及对照组人乳腺癌MCF-7细胞及端粒酶(-)的正常人... 详细信息

目的探讨hTERT启动子及CMV增强子双调控表达载体调控TK基因靶向杀灭鼻咽癌细胞的效应。方法将双调控增强型载体及hTERT单启动子载体(作为对照组)分别转染两种端粒酶(+)的人鼻咽癌5-8F细胞及对照组人乳腺癌MCF-7细胞及端粒酶(-)的正常人血管内皮ECV细胞,StretchPCR法验证5-8F细胞、MCF-7细胞及ECV细胞中端粒酶活性,荧光显微镜下观察TK基因绿色荧光蛋白表达差异,MTT法分析杀灭鼻咽癌细胞的效果。结果①Stretch PCR法验证人鼻咽癌细胞5-8F、人乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性呈阳性,人血管内皮ECV细胞端粒酶活性呈阴性。②增强型表达载体转染上述两种端粒酶(+)肿瘤细胞均有很强的荧光表达及TK基因的mRNA表达,单启动子亦有较强的荧光表达,但比增强型表达载体要弱,而ECV细胞几乎无绿色荧光。③加入GCV后,增强型表达载体对两种端粒酶(+)肿瘤细胞体外增殖均有明显抑制作用,且均高于单启动子组、空载体组及空白对照组,而增强型表达载体转染ECV细胞体外增殖无明显抑制作用。结论以hTERT启动子及CMV增强子双调控TK基因的表达载体能够靶向杀灭鼻咽癌细胞,且作用明显强于单启动子载体组。这种新型高效、靶向增强型载体有可能成为一种鼻咽癌临床靶向基因治疗的新策略。

关键词：鼻咽癌双调控表达载体肿瘤基因靶向治疗端粒酶

人鼻咽癌细胞株中类肿瘤干细胞的分离、培养及鉴定

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解放军医学杂志 2008年第12期33卷 1461-1464页

作者：关小芳文忠申聪香牟少凤张宏征谢民强郭梦和南方医科大学附属珠江医院耳鼻咽喉-头颈外科中心广州510282

目的检测CD133在人鼻咽癌细胞株SUNE中的表达以及CD133+肿瘤细胞的体外增殖、分化情况,并对其进行类肿瘤干细胞的鉴定。方法采用免疫荧光细胞化学技术及流式细胞仪检测鼻咽癌细胞株SUNE中CD133的表达情况以及CD133+细胞体外分化能力;免... 详细信息

目的检测CD133在人鼻咽癌细胞株SUNE中的表达以及CD133+肿瘤细胞的体外增殖、分化情况,并对其进行类肿瘤干细胞的鉴定。方法采用免疫荧光细胞化学技术及流式细胞仪检测鼻咽癌细胞株SUNE中CD133的表达情况以及CD133+细胞体外分化能力;免疫磁珠分选技术纯化CD133+肿瘤细胞;MTT法检测CD133+细胞的体外增殖能力,并将其与CD133-及未分选细胞进行比较。结果鼻咽癌细胞株SUNE中有0.35%的微量细胞呈CD133+表达;免疫磁珠富集的CD133+肿瘤细胞在无血清培养基中悬浮生长,并可以形成肿瘤细胞球,具有很强的自我更新和繁殖能力,且在3、5、7 d的紫外吸光度(A)值分别为0.317±0.007、0.370±0.002、0.558±0.004,均高于相同条件下未分选细胞和CD133-细胞(P<0.05);CD133+细胞在含血清培养基中的比例逐日下降,至培养的第12天,由第1天的89.67%下降至0.37%。结论CD133可作为鼻咽癌类干细胞的标志之一。鼻咽癌细胞株SUNE中存在类肿瘤干细胞,并具有自我更新和分化能力。

关键词：肿瘤干细胞鼻咽肿瘤细胞培养技术免疫磁珠分选 CD133

hTERT启动子调控TK基因靶向性杀伤鼻咽癌移植瘤的实验研究

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解放军医学杂志 2009年第2期34卷 155-158页

作者：牟少凤文忠郭梦和谢民强关小芳申聪香南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉头颈外科广州510282

目的研究人端粒酶反转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HSV-TK/GCV)系统对鼻咽癌移植瘤的体内杀伤作用。方法采用培养细胞移植法,将人鼻咽癌细胞系C666-1接种于裸鼠腋部皮下,建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤... 详细信息

目的研究人端粒酶反转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HSV-TK/GCV)系统对鼻咽癌移植瘤的体内杀伤作用。方法采用培养细胞移植法,将人鼻咽癌细胞系C666-1接种于裸鼠腋部皮下,建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型。将40只裸鼠随机分为5组:hTERTp/HSV-TK/PGL3/GCV组、CMV/HSV-TK/PGL3/GCV组、HSV-TK/PGL3/GCV组、GCV组及生理盐水组,每组8只。采用脂质体介导,进行瘤内直接注射,同时经腹腔给予GCV治疗,观察各组裸鼠生存状况及肿瘤相对体积、抑瘤率,并进行荷瘤裸鼠肝肾组织的常规病理检查。结果成功构建了C666-1裸鼠皮下移植瘤动物模型,hTERTp/HSV-TK/PGL3/GCV组移植瘤被明显抑制,抑瘤率达到45.51%,与HSV-TK/PGL3/GCV组、GCV组及生理盐水组(抑瘤率分别为5.52%、14.31%、0.03%)比较有显著性差异(P<0.01),肝肾病理检查发现,该组裸鼠肝肾均无明显病理学变化。CMV/HSV-TK/PGL3/GCV组的抑瘤率亦达到51.56%,但病理检查发现裸鼠出现肝肾毒性。结论hTERT启动子调控TK基因靶向治疗系统能够在体内特异性杀伤鼻咽癌移植瘤,而无明显全身毒副作用,是一种安全、有效的肿瘤靶向基因治疗系统,将为鼻咽癌临床基因治疗开辟新领域。

关键词：鼻咽肿瘤肿瘤移植 HSV-TK基因基因疗法端粒,末端转移酶

增强型表达载体调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌的体内外实验研究

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增强型表达载体调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌的体内外实验研究

分泌性中耳炎伴腺样体肥大患儿不同方法治疗效果研究

2010全国耳鼻咽喉头颈外科中青年学术会议

作者：文忠申聪香牟少凤关小芳赖肖芬于超生南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉头颈外科

目的探讨经改良构建的增强型表达载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌细胞及裸鼠移植瘤的效应。方法将改良构建后的增强型载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3及单启动子载体hTERTp/TK/egfp/pGl3(作为对照组)分别转染进端粒...

目的探讨经改良构建的增强型表达载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌细胞及裸鼠移植瘤的效应。方法将改良构建后的增强型载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3及单启动子载体hTERTp/TK/egfp/pGl3(作为对照组)分别转染进端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞株及对照

关键词：

来源： cnki会议评论

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大医生 2019年第9期4卷 157-158页

作者：牟少凤王英张明德聊城市人民医院山东聊城252000 聊城市东昌府人民医院山东聊城252000

目的分析分泌性中耳炎伴腺样体肥大患儿不同方法治疗效果。方法选取2016年1月至2018年5月聊城市人民医院收治的140例分泌性中耳炎伴腺样体肥大患儿。按照选用治疗方法的不同,将患儿分别纳入治疗Ⅰ组以及治疗Ⅱ组,在腺样体切除治疗基础... 详细信息

目的分析分泌性中耳炎伴腺样体肥大患儿不同方法治疗效果。方法选取2016年1月至2018年5月聊城市人民医院收治的140例分泌性中耳炎伴腺样体肥大患儿。按照选用治疗方法的不同,将患儿分别纳入治疗Ⅰ组以及治疗Ⅱ组,在腺样体切除治疗基础上分别实施鼓膜穿刺术以及鼓膜置管术,对比两组患儿各项临床指标。结果治疗后,治疗Ⅱ组患儿所获治疗总有效率高于治疗Ⅰ组;治疗Ⅱ组患儿的复发率低于治疗Ⅰ组,两组数据比较差异有统计学意义(P少复发,提高各项指标的改善效率。

关键词：分泌性中耳炎腺样体肥大鼓膜穿刺术鼓膜置管术

阿司匹林联合低分子肝素钠治疗复发性流产血栓前状态疗效及对凝血功能、激素水平及子宫血流动力学的影响

维普期刊数据库评论

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中国妇产科临床杂志 2024年第3期25卷 259-261页

作者：温凤云宋秀云邓翠艳牟莎莎青岛市胶州中心医院产科山东胶州1266300

目的探讨阿司匹林(ASP)联合低分子肝素钠(LMWH-Na)对复发性流产(RSA)血栓前状态疗效以及对凝血功能、激素水平及子宫血流动力学的影响。方法选择2020年2月至2022年2月在青岛市胶州中心医院接受治疗的162例RSA合并血栓前状态患者,随机将... 详细信息

目的探讨阿司匹林(ASP)联合低分子肝素钠(LMWH-Na)对复发性流产(RSA)血栓前状态疗效以及对凝血功能、激素水平及子宫血流动力学的影响。方法选择2020年2月至2022年2月在青岛市胶州中心医院接受治疗的162例RSA合并血栓前状态患者,随机将其分为对照组A(n=54)、对照组B(n=54)及观察组(n=54)。三组均给予常规治疗,对照组A加用ASP,对照组B加用LMWH-Na,观察组加用ASP与LMWH-Na。比较三组患者的妊娠结局、阴道流血、腰酸坠痛和下腹痛消失时间,治疗前、后凝血功能,D-二聚体、性激素、子宫血流动力学水平变化和治疗期间不良反应的发生情况。结果治疗后,观察组保胎成功率、活化部分凝血酶时间(APTT)、孕酮(P)、雌二醇(E2)及绒毛膜促性腺激素(hCG)均高于对照组A和对照组B,差异有统计学意义(P0.05)。结论ASP联合LMWH-Na能有效地改善RSA患者血栓前状态、凝血功能及性激素调节水平,加强子宫黏膜血流灌注,有助于获得满意的妊娠结局。

关键词：阿司匹林低分子肝素钠复发性流产血栓前状态凝血功能血流动力学