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基于网络药理学和实验验证研究仙鹤草-黄连药对抗结直肠癌炎性微环境中血管生成活性

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中国中药杂志 2024年

作者：沈鑫玲彭海燕符黄杰何亚萍李智育侯敏艳张淑娟熊晗南京中医药大学南京中医药大学附属医院浙江中医药大学

基于网络药理学和斑马鱼体内实验，探讨结直肠癌炎性微环境中仙鹤草-黄连药对对血管生成的影响和潜在机制。通过网络药理学获得结直肠癌炎性微环境中仙鹤草-黄连药对抗血管生成的有效活性成分、潜在核心靶点和信号通路，预测结直肠癌炎... 详细信息

基于网络药理学和斑马鱼体内实验，探讨结直肠癌炎性微环境中仙鹤草-黄连药对对血管生成的影响和潜在机制。通过网络药理学获得结直肠癌炎性微环境中仙鹤草-黄连药对抗血管生成的有效活性成分、潜在核心靶点和信号通路，预测结直肠癌炎性微环境中仙鹤草-黄连药对抑制血管生成的作用机制；建立斑马鱼结直肠癌模型，并进行炎性微环境造模，观察不同浓度的仙鹤草-黄连药对对斑马鱼体节间血管(ISVs)面积、数量、长度的影响，蛋白免疫印迹法检测斑马鱼血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管生长因子受体2(VEGFR2，又名kdrl、Flk1)、血管生长因子受体3(VEGFR3，又名Flt4)的蛋白表达水平，实时荧光定量聚合酶链式反应检测斑马鱼VEGFA、kdrl、Flt4 mRNA的表达水平。网络药理学筛选出仙鹤草-黄连药对中18个活性成分和488个潜在靶点，药物和疾病交集靶点108个。结合KEGG通路富集分析，选择VEGFA/VEGFR2信号通路中血管生成相关因子VEGFA、kdrl、Flt4进行验证。斑马鱼实验表明，与空白组比较，模型组斑马鱼ISVs面积、数量、长度均增加；与模型组比较，仙鹤草-黄连药对各剂量组斑马鱼ISVs面积、数量、长度均减少，且具有浓度依赖性。与空白组比较，模型组斑马鱼VEGFA、kdrl、Flt4蛋白和mRNA表达水平均上调；与模型组比较，仙鹤草-黄连药对各剂量组斑马鱼VEGFA、kdrl、Flt4蛋白和mRNA表达水平均下调，且具有浓度依赖性。结果表明，在结直肠癌炎性微环境中，仙鹤草-黄连药对能够通过多成分、多靶点、多通路抑制肿瘤血管生成，且结直肠癌炎性微环境下其抗血管生成作用可能与下调VEGFA/VEGFR2通路中血管生成相关因子VEGFA、kdrl、Flt4表达水平有关。

关键词：仙鹤草-黄连药对结直肠癌斑马鱼网络药理学炎性微环境血管生成血管生成相关因子作用机制

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基于肝主疏泄探讨原发性肝癌的治则治法

光明中医 2024年第7期39卷 1322-1325页

作者：熊晗彭海燕南京中医药大学江苏南京210029 南京中医药大学附属医院肿瘤内科江苏南京210029

原发性肝癌致死率高,治疗有效率低,中西医结合治疗有助于稳定病情,改善患者临床症状。中医理论中肝的主要生理功能为“主疏泄”,肝癌发病的病理基础也是从肝失疏泄开始,继而气滞血瘀、痰凝湿聚、邪郁化火生毒。因此治疗上提出原发性肝... 详细信息

原发性肝癌致死率高,治疗有效率低,中西医结合治疗有助于稳定病情,改善患者临床症状。中医理论中肝的主要生理功能为“主疏泄”,肝癌发病的病理基础也是从肝失疏泄开始,继而气滞血瘀、痰凝湿聚、邪郁化火生毒。因此治疗上提出原发性肝癌的论治应把握以通为要的原则,从“木郁达之”入手,行气活血,化痰利水,清热解毒,并配合柔养肝体,从而恢复“肝主疏泄”的正常状态,并以临床典型验案具体说明了攻补兼施、通利气血,使肝体阴用阳、维持正常功能的中医药治法。

关键词：癥瘕原发性肝癌肝主疏泄中医药疗法

基于LAMP2A介导的自噬探讨仙鹤草-黄连含药血清对结直肠癌细胞的作用及机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：何亚萍侯敏艳沈鑫玲李智育徐敏陈轩张淑娟熊晗彭海燕南京中医药大学第一临床医学院南京中医药大学附属医院

探讨仙鹤草-黄连 (Agrimoniae Herba-Coptidis Rhizoma，XHC-HL) 含药血清通过溶酶体相关膜蛋白2A型(lysosome-associated membrane protein type 2A，LAMP2A) 介导的自噬对人结直肠癌HT29和HCT116细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。通过生物信息学分析LAMP2A在结直肠癌的发生发展中的作用机制；蛋白免疫印迹（Western blot，WB）检测LAMP2A蛋白在结直肠癌细胞株中的表达；利用慢病毒转染技术构建LAMP2A干扰HT29及过表达HCT116结直肠癌细胞模型；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time PCR）实验检测转染效率；结直肠癌HT29和HCT116 细胞分别给予不同浓度的仙鹤草-黄连含药血清，采用cell counting kit-8 (CCK-8) 法检测细胞增殖，筛选含药血清最佳干预浓度及时间。将HT29细胞分为NC（空白对照）组、XHC-HL（仙鹤草-黄连药对处理）组、XHC-HL+shLAMP2A（仙鹤草-黄连药对处理+干扰LAMP2A）组；将HCT116细胞分为NC（空白对照）组、XHC-HL（仙鹤草-黄连药对处理）组、XHC-HL+LAMP2A（仙鹤草-黄连药对处理+过表达LAMP2A）组，CCK-8检测细胞活力；平板克隆实验检测细胞增殖能力；划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞迁移能力；Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot 技术和real-time PCR技术检测仙鹤草-黄连药对对结直肠癌细胞LAMP2A、热休克蛋白70 (the heat shock protein 70， HSC70)、热休克蛋白90 (The heat shock protein 90， HSP90)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase， GAPDH）的蛋白表达水平及 mRNA 的影响。通过差异表达分析发现结直肠癌患者相对于正常对照样本的LAMP2A表达水平有显著升高，生存分析提示伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy，CMA）关键分子LAMP2A与结直肠癌的进展密切关联，通过基因集功能富集分析发现LAMP2A高表达患者显著上调了血管生成，免疫抑制等肿瘤进展相关信号通路，且免疫浸润分析发现LAMP2A高表达患者其肿瘤微环境会有更少的CD8T细胞的浸润。仙鹤草-黄连含药血清可以抑制HT29和HCT116细胞活力，最佳干预质量分数及时间为20%、48 h。与NC组相比，仙鹤草-黄连药对均可抑制HT29和HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭，诱导细胞凋亡，药对处理干扰LAMP2A组均能进一步抑制肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力并促进凋亡，而过表达LAMP2A可逆转含药血清处理后结直肠癌细胞被抑制的增殖、迁移、侵袭能力，减少细胞凋亡率。仙鹤草-黄连药对含药血清对CMA具有抑制作用，通过LAMP2A介导的自噬，上调LAMP2A、 HSC70、HSP90蛋白和基因的表达，下调底物蛋白GAPDH的表达发挥抗CRC功能。综上，仙鹤草-黄连药对可通过下调CMA关键分子蛋白LAMP2A表达，抑制CMA活性，从而抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭，并诱导细胞凋亡。

关键词：仙鹤草-黄连药对结直肠癌 LAMP2A 分子伴侣介导自噬

全龄桑叶育繁育“茗山×碧水”一代杂交种成绩初报

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四川蚕业 2024年第1期52卷 42-43页

作者：王豫川文廷勇程洋何艳茹唐佳琪彭远坤熊晗四川省南充蚕种场四川南充637000

采用全龄桑叶育饲育小蚕人工饲料专用家蚕新品种“茗山×碧水”的原种并繁育一代杂交种,对产量、健康性及繁育情况进行调查分析。结果显示,“茗山”“碧水”全龄桑叶育整体表现良好,茧质成绩基本达到预期水平,产附优异,繁育系数表现突出... 详细信息

采用全龄桑叶育饲育小蚕人工饲料专用家蚕新品种“茗山×碧水”的原种并繁育一代杂交种,对产量、健康性及繁育情况进行调查分析。结果显示,“茗山”“碧水”全龄桑叶育整体表现良好,茧质成绩基本达到预期水平,产附优异,繁育系数表现突出,种茧育整体表现接近生产实用化水平。本次试验创新性探索了全龄桑叶繁育人工饲料专用蚕品种“茗山×碧水”一代杂交种,对今后人工饲料蚕品种繁育推广工作具有重要意义。

关键词：茗山碧水人工饲料专用蚕品种全龄桑叶育

代谢功能障碍相关的脂肪性肝病治疗及热门靶点的药物研究进展

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实用药物与临床 2024年第5期27卷 374-379页

作者：熊晗晖姜金生蔡霈谢惠平李跃忠盛敏李刚李国军邓家国常德云港生物科技股份有限公司湖南常德415001 中南大学湘雅医院湖南长沙410008 湖南省妇幼保健院湖南长沙410008

代谢功能障碍相关的脂肪性肝病发病率高、发病机制复杂性,与肥胖、代谢紊乱和心血管等疾病息息相关。随着生活水平的提高,这类疾病的患病率在我国呈逐年上升趋势,甚至超过全球平均值。治疗此类疾病的药物研发一直是各大药企和科研机构... 详细信息

代谢功能障碍相关的脂肪性肝病发病率高、发病机制复杂性,与肥胖、代谢紊乱和心血管等疾病息息相关。随着生活水平的提高,这类疾病的患病率在我国呈逐年上升趋势,甚至超过全球平均值。治疗此类疾病的药物研发一直是各大药企和科研机构关注的热点。本文概述了现有的此类疾病的治疗方法,以及最热门靶点药物的最新研究进展。

关键词：代谢功能障碍相关的脂肪性肝病非酒精性脂肪肝病甲状腺激素受体激动剂β亚型

高功率激光器中两镜型线聚焦空间滤波器的应用

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激光与光电子学进展 2017年第9期54卷 261-268页

作者：熊晗苏州科技大学数理学院江苏苏州215009

结合美国国家点火装置(NIF)的部分参数,利用两镜型线聚焦空间滤波器(SSF)来替代主放大腔中的针孔滤波器,对其在高功率激光装置中的应用进行了初步的研究。以NIF为例,SSF的应用可使远场强度降低两个数量级,使腔空间滤波器和放大腔分别缩... 详细信息

结合美国国家点火装置(NIF)的部分参数,利用两镜型线聚焦空间滤波器(SSF)来替代主放大腔中的针孔滤波器,对其在高功率激光装置中的应用进行了初步的研究。以NIF为例,SSF的应用可使远场强度降低两个数量级,使腔空间滤波器和放大腔分别缩短约6.2450m(27%)和13.8707m(30%),而放大腔中远场强度的降低以及去掉传输空间滤波器中的滤波光阑,又使得主光路中基本无等离子体堵孔的问题。同时,基于平面化离轴偏角的设计思想并结合放大腔中变形镜与反射镜互成物像面的特点,对SSF构成的放大腔进行了离轴多程设计以避免放大自发辐射,为SSF的实际应用以及高功率激光装置的进一步发展奠定了基础。

关键词：激光器线聚焦空间滤波器高功率激光像传递

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纳米晶合金二维磁特性测量装置的设计与优化

纳米晶合金二维磁特性测量装置的设计与优化

作者：熊晗三峡大学

学位级别：硕士

电工软磁材料二维磁特性的精确测量与模拟对电机和变压器的优化设计与节能具有重要意义,是提高电网运行效率的有效途径之一。二维磁特性测量先由励磁装置在待测样片上产生磁场,然后由测量系统进行测量。针对励磁装置的结构设计和测量系... 详细信息

电工软磁材料二维磁特性的精确测量与模拟对电机和变压器的优化设计与节能具有重要意义,是提高电网运行效率的有效途径之一。二维磁特性测量先由励磁装置在待测样片上产生磁场,然后由测量系统进行测量。针对励磁装置的结构设计和测量系统的搭建,本文做了如下工作:1、提出了一种基于圆形样片的新型两相绕组励磁装置,采用目前较为成熟爱泼斯坦方圈法对励磁装置磁轭硅钢片进行了不同角度的磁特性测量,得到了各个磁化角度下的磁滞回线与磁化曲线,为励磁装置电磁特性有限元分析提供数据基础。在测量数据基础上考虑磁心结构及硅钢片磁特性各向异性,建立了有限元分析模型,并对其进行了二维离散分析。将新型两相绕组磁测量装置同基于圆形样片的16极Halbach式励磁装置、感应电机式励磁装置和三相绕组式励磁装置进行了二维有限元仿真对比,分析励磁性能和磁化均匀性,得出两相绕组励磁装置具有最好的励磁性能和最优的磁化均匀性;2、构建两相绕组励磁装置的三维有限元模型,引入屏蔽层,消除绕组产生杂散磁场的影响,显著改善了装置均匀性。由于有限元算法每次计算耗时1～2小时,时间过长,提出自适应粒子群算法,提高了收敛速度和计算精度,联合支持向量机算法确定了装置将样片磁化最均匀时的结构尺寸,大大节省了时间,完成两相绕组励磁装置结构的优化。最后,通过对两相绕组装置的磁路分析和装置齿槽的结构约束完成了励磁绕组的设计;3、根据优化后数据搭建两相绕组励磁装置,设计了测量系统,采用在样片表面平行放置H线圈法测量样片的磁场强度,而纳米晶材料易碎,传统B线圈法测量磁通密度B需在样片打孔测量,破坏样片,故采用探针法测量磁通密度B,探针法只需要在样片上实现电接触即可完成测量磁通密度,提高了测量的准确性。最后,在10 k Hz的高频磁场激励下的纳米晶合金在轧制方向与垂直轧制方向上的磁滞回线与损耗特性曲线的测量。本文工作测得了纳米晶材料的一些物理性质和损耗特性,对以纳米晶合金为磁心材料的电工设备的优化设计具有指导性作用,对实现高频二维磁特性的精确测量具有重要的理论意义,从而为进一步精确分析电机、变压器能耗提供数据基础与理论支撑。

关键词：磁特性测量励磁装置磁化均匀性装置优化二维磁特性

壳聚糖基大分子引发剂引发OEGMA的SET-LRP动力学研究及其衍生物在药物控释领域的应用

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壳聚糖基大分子引发剂引发OEGMA的SET-LRP动力学研究及其衍生物在...

作者：熊晗浙江大学

学位级别：硕士

在课题组前期有关壳聚糖位点选择性衍生化改性新方法研究基础上,以O-溴化壳聚糖(CS-Br)为大分子引发剂,Cu(I)Br为催化剂,通过单电子转移-活性自由基聚合(SET-LRP),合成了壳聚糖-O-寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯(CS-O-POEGMA),用原位核磁研究... 详细信息

在课题组前期有关壳聚糖位点选择性衍生化改性新方法研究基础上,以O-溴化壳聚糖(CS-Br)为大分子引发剂,Cu(I)Br为催化剂,通过单电子转移-活性自由基聚合(SET-LRP),合成了壳聚糖-O-寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯(CS-O-POEGMA),用原位核磁研究了寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯(OEGMA)在不同聚合条件下的聚合反应动力学。结果表明：随着介质pH的降低,配体发生质子化,导致聚合速率下降;在缓冲溶液中,随着CS-Br浓度的升高,反应过程中体系发生凝胶化;pH=5.0的介质中,CS-Br中溴代异丁酸的取代度对反应动力学基本无影响,表明该介质中壳聚糖分子链较舒展,反应可控性最佳。然后用柠糠酐将产物CS-O-POEGMA的氨基部分羧基化,得到壳聚糖-O-寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯-N-柠糠酐(CS-O-POEGMA-CTA).后和模型药物Dox经透析法在缓冲溶液中制备了CS-POEGMA-CTA-Dox载药胶束,研究了CS-POEGMA-CTA-Dox胶束的载药机理、体外释药行为以及细胞毒性。结果表明CS-POEGMA-CTA和Dox可以通过静电相互作用以及氢键作用在缓冲溶液中自发形成载药胶束。CS-POEGMA-CTA-Dox胶束的Dox体外释放行为具有pH响应性,其在pH=7.4生理环境下Dox释放量较少,而在低pH值的酸性肿瘤微环境中,胶束解离,大量释放出所载的药物,相比于pH=7.4,释药量提高了3倍。HepG2细胞毒性实验表明该载体的细胞毒性较小,而载药胶束则表现出很强的细胞毒性。

关键词：壳聚糖单电子转移-活性自由基聚合寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯胶束

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高精度气流传感器的研究

高精度气流传感器的研究

作者：熊晗华中科技大学

学位级别：硕士

风速风向的准确测量在社会生产生活的多个方面有着重要作用,为了满足各个领域的使用需求,科研人员开发出种类繁多、各具特色的气流传感器。传统的机械式风速传感器(风杯式风速计)在气象监测领域应用广泛,但体积较大,并且启动风速通常在0... 详细信息

风速风向的准确测量在社会生产生活的多个方面有着重要作用,为了满足各个领域的使用需求,科研人员开发出种类繁多、各具特色的气流传感器。传统的机械式风速传感器(风杯式风速计)在气象监测领域应用广泛,但体积较大,并且启动风速通常在0.3 m/s以上,不利于低风速测量。超声波式风速传感器测量精度可达到0.01 m/s,但其价格较为昂贵。热式风速传感器在中低速气流中测量灵敏度较高,但其功耗相对较高,且易受电磁干扰。针对上述问题,基于光学传感器灵敏度高、抗电磁干扰能力强、结构简单且价格便宜等优势,本文提出了两种光学气流传感器:基于悬臂梁硅波导的高精度风速传感器和基于悬垂拉锥光纤的风速风向传感器。此两种传感器主要基于波导能量耦合理论而设计,利用特定的传感装置将气流速度、气流方向等参数信息最终转换为输出光能量的变化,通过采集这种变化进而求解出气流速度和方向信息。这两种传感器分别利用硅悬臂梁和悬垂拉锥光纤作为气流的传感单元,将气流信号转化为悬臂梁或悬垂光纤的机械形变,同时采用基于能量耦合的光学方法来测量悬臂梁或悬垂光纤的形变,从而避免了电学测量所面临的抗干扰能力差、灵敏度低等问题。其间,利用Opti BPM和COMSOL Multiphysics仿真软件分别对传感器的光学性能和机械性能进行仿真,并依据仿真结果,完成传感器器件结构的合理优化设计,以进一步提高器件的测量性能。本文对所设计的两种气流传感器均完成了原型样品的工艺制备并对它们开展了实验验证,结果表明:基于悬臂梁硅波导的风速传感器在0～60 mm/s的风速范围内,其测量精度可达0.094 mm/s;对于采用悬垂拉锥光纤的风速风向传感器而言,在0～90mm/s的风速范围内,其成功实现了对风速和风向的全方位、高精度测量,且对风速的测量误差不超过1%,对风向的测量误差不超过±3°。

关键词：气流传感器能量耦合理论悬臂梁硅波导拉锥光纤全光式风速风向传感器