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快速检测乙型肝炎病毒前核心区基因变异株方法的建立与初步应用

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上海医科大学学报 1995年第3期22卷 161-164页

作者：屠红熊思东兰林李平洋闻玉梅上海医科大学卫生部医学分子病毒学重点实验室华西医科大学微生物学教研室

用聚合酶链反应（ＰＯＲ）选择性地扩增血清标本中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因前Ｃ区（Ｐｒｅ－Ｃ）后，以三种寡核苷酸探针Ｍ０（野毒株基因序列）、Ｍ１（ｎｔ．１８９８位点突变株基因序列）、Ｍ２（ｎｔ．１９９８位及ｎｔ．１９０... 详细信息

用聚合酶链反应（ＰＯＲ）选择性地扩增血清标本中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因前Ｃ区（Ｐｒｅ－Ｃ）后，以三种寡核苷酸探针Ｍ０（野毒株基因序列）、Ｍ１（ｎｔ．１８９８位点突变株基因序列）、Ｍ２（ｎｔ．１９９８位及ｎｔ．１９０１位上双点突变株基因序列）在极其严谨的条件下分别杂交，检测ＥＢＶＰｒｅ－Ｃ的最常见变异，结果本法具有根高的特异性。应用上述方法检测了３１份乙肝病人的血清标本，结果７份ＨＢｅＡｇ阳性标本中，有４份ＰＣＲ阳性，均与Ｍ０探针杂交，未出现变异；２４份抗－ＨＢｅ阳性标本中，有１０份ＰＣＲ阳性，其中８份表现为Ｍ０伴Ｍ１和（或）Ｍ２阳性，一份为野毒株，另一份与三种探针均不杂交。

关键词：血清乙型肝炎病毒基因突变寡核苷酸探针杂交

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NOD:一类新的固有免疫模式识别受体

生命的化学 2006年第2期26卷 105-107页

作者：曹清华王缨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系上海200032

哺乳动物主要通过Toll样受体(TLR)识别微生物。最近,发现一个新的蛋白质家族,核苷酸结合寡聚化结构域(NOD),参与胞内微生物的模式识别。NOD是一类位于胞质有典型的LRR-NBS结构的蛋白质家族,可以识别细菌细胞壁成分——细菌肽聚糖(peptid... 详细信息

哺乳动物主要通过Toll样受体(TLR)识别微生物。最近,发现一个新的蛋白质家族,核苷酸结合寡聚化结构域(NOD),参与胞内微生物的模式识别。NOD是一类位于胞质有典型的LRR-NBS结构的蛋白质家族,可以识别细菌细胞壁成分——细菌肽聚糖(peptidoglycan,PGN),活化NF-κB,参与固有免疫应答并诱导炎症反应和细胞凋亡。其中最有代表性的是NOD1和NOD2。最近的研究发现,NOD1和NOD2能识别细菌特殊结构。对该家族的研究将有助于防治胞内病原体感染、探索炎症性疾病的发病机制和治疗方案。

关键词： NOD 固有免疫模式识别

超抗原SEA对CD4^+T细胞TCR V_β链的取用格局

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上海免疫学杂志 2002年第5期22卷 316-318,321页

作者：张瑞华储以微王缨刘瑞梓熊思东复旦大学上海医学院免疫学系上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

用超抗原葡萄球菌肠毒素A (SEA )在体内或体外刺激C57BL/ 6小鼠 2种不同的TCRVβ链T细胞亚群 (Vβ3+ CD4+ 、Vβ1 1 + CD4+ T细胞 ) ,观察二者对超抗原的免疫应答。结果显示 :体内初次刺激后 ,2种T细胞亚群在刺激后第 2天都发生增殖 ,... 详细信息

用超抗原葡萄球菌肠毒素A (SEA )在体内或体外刺激C57BL/ 6小鼠 2种不同的TCRVβ链T细胞亚群 (Vβ3+ CD4+ 、Vβ1 1 + CD4+ T细胞 ) ,观察二者对超抗原的免疫应答。结果显示 :体内初次刺激后 ,2种T细胞亚群在刺激后第 2天都发生增殖 ,随后均逐渐下降至对照水平。但第 2次用同样剂量刺激后 ,Vβ3+ CD4+ T细胞群对SEA的再次刺激表现出增殖 ,而Vβ1 1 + CD4+ T细胞群对SEA再次刺激则表现出免疫无能。体外初次、再次刺激也分别获得与体内实验相同的结果。表明超抗原SEA可选择性地取用Vβ3+ CD4+ T细胞群并对其发生增殖 ,即超抗原SEA对CD4+ T细胞TCRVβ链的取用格局各有不同。

关键词：超抗原 TCR Vβ链取用格局葡萄球菌肠毒素A 免疫应答

梅毒患者皮损中Th1/Th2细胞因子表达与RPR试验阴转的关系

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中华皮肤科杂志 2004年第12期37卷 712-714页

作者：周平玉熊思东阎春林徐金华廖康煌上海市皮肤病性病医院性病研究室 200050 复旦大学免疫学系复旦大学华山医院皮肤科

目的了解早期显性梅毒患者皮损中Th1/Th2型细胞因子的表达及其与患者RPR试验阴转的关系。方法用ABC免疫组化检测30例早期显性梅毒患者皮损中Th1/Th2型细胞因子的表达,并于驱梅治疗结束后的第1,3,6,9,12个月随访这些患者的血清快速血浆... 详细信息

目的了解早期显性梅毒患者皮损中Th1/Th2型细胞因子的表达及其与患者RPR试验阴转的关系。方法用ABC免疫组化检测30例早期显性梅毒患者皮损中Th1/Th2型细胞因子的表达,并于驱梅治疗结束后的第1,3,6,9,12个月随访这些患者的血清快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)情况。结果10例一期梅毒患者在随访期内血清RPR试验均转阴,皮损中有9例表达Th1/Th2型细胞因子,1例仅有Th1型细胞因子表达;20例二期显性梅毒患者在随访期内血清RPR试验有12例转阴,皮损中16例有Th1/Th2型细胞因子表达,4例仅有Th2型细胞因子表达;早期梅毒皮损Th1型细胞因子的表达与梅毒RPR试验阴转呈正相关,干扰素γ表达越高,血清RPR试验越容易转阴。结论Th1型细胞因子的早期活化和持续存在在清除局部病原体的过程中起重要作用。

关键词： RPR试验表达梅毒患者皮损 Th1/Th2型细胞因子血清 Th1型细胞因子结论重要作用过程

蛋白质泛素化修饰在HIV-1复制中的作用研究进展

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生命科学 2022年第1期34卷 16-22页

作者：陈帆周光凤熊思东郑永唐苏州大学药学院苏州215021 中国科学院昆明动物研究所中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明650223

HIV-1是引起艾滋病大流行的主要病原体,在其与宿主相互作用的过程中,病毒运用各种手段逃避宿主的抗病毒免疫系统,而宿主同时会进化出相应的"武器"来对抗病毒的入侵。在这一系列的过程中,泛素化修饰作为一种重要的蛋白质翻译后修饰过程,... 详细信息

HIV-1是引起艾滋病大流行的主要病原体,在其与宿主相互作用的过程中,病毒运用各种手段逃避宿主的抗病毒免疫系统,而宿主同时会进化出相应的"武器"来对抗病毒的入侵。在这一系列的过程中,泛素化修饰作为一种重要的蛋白质翻译后修饰过程,在HIV-1复制中起重要作用。同时,泛素化的可逆过程去泛素化修饰对HIV-1的复制也具有一定的影响。该文综述了泛素化和去泛素化修饰在HIV-1复制过程中的作用研究,有助于更好地理解宿主与HIV-1之间的相互作用机制,为抗HIV-1药物的研发提供新的思路。

关键词： HIV-1 泛素化去泛素化抗病毒

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透过数字看“两会”

江苏政协 2014年第4期 14-15页

作者：熊思东全国政协民盟江苏省委苏州大学

今年3月在北京召开的全国"两会"是在全党、全国深入贯彻落实中共十八大和十八届三中全会精神、全面深化改革的重要时刻召开的重要会议。对于动员全国各族人民在以习近平同志为总书记的中共中央领导下,全面深化改革凝聚强大正能量,夺取... 详细信息

今年3月在北京召开的全国"两会"是在全党、全国深入贯彻落实中共十八大和十八届三中全会精神、全面深化改革的重要时刻召开的重要会议。对于动员全国各族人民在以习近平同志为总书记的中共中央领导下,全面深化改革凝聚强大正能量,夺取中国特色社会主义新胜利、实现中华民族伟大复兴的中国梦,具有重大而深远的意义。"两会"内容丰富,涉及经济社会发展的方方面面,印象十分深刻。下面仅以几个数字,以窥一斑。

关键词：全面深化改革中国梦窥一斑基本医保基本公共卫生补助标准基本医疗保险服务经费筹资机制合

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自噬作用：机体抵御病原入侵的第2道防线

国外医学（微生物学分册） 2005年第3期28卷 41-42页

作者：熊思东

机体的固有免疫系统和获得性免疫系统可有效地抵御病原体的入侵,其中固有免疫系统的皮肤和黏膜屏障是机体抵御病原体人侵的第1道防线,由吞噬细胞、NK细胞等介导的吞噬和杀伤作用构成了机体固有免疫的第2道防线.最近自噬体及自噬现象的... 详细信息

机体的固有免疫系统和获得性免疫系统可有效地抵御病原体的入侵,其中固有免疫系统的皮肤和黏膜屏障是机体抵御病原体人侵的第1道防线,由吞噬细胞、NK细胞等介导的吞噬和杀伤作用构成了机体固有免疫的第2道防线.最近自噬体及自噬现象的研究发现,自噬作用参与了机体对病原体入侵的免疫防御过程,是主要的机体抵御病原入侵的第2道防线.

关键词：自噬作用机体免疫病原入侵溶酶体

疫苗接种导致免疫逃逸:艾滋病疫苗研究中的新问题

维普期刊数据库评论

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国外医学（微生物学分册） 2002年第1期25卷 41-42页

作者：熊思东徐薇熊思东　

病毒的基因突变是一普遍存在的现象。物理、化学和生物的因素均可不同程度地诱导病毒基因突变。在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染中，近一半以上的艾滋病病人经常规抗HIV化学药物治疗后，可引起HIV结构或非结构基因的改变，导致耐药株的……

关键词：疫苗接种免疫逃逸艾滋病疫苗

CVB3感染对星形胶质细胞表达agrin的影响及意义

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复旦学报（医学版） 2007年第5期34卷 635-640页

作者：李宝华蒋正刚徐林李康熊思东复旦大学免疫生物学研究所-复旦大学上海医学院免疫学系上海200032

目的检测柯萨奇B3病毒(coxsackievirus group B type3,CVB3)感染体外培养的星形胶质细胞后集聚蛋白(agrin)的表达变化及其意义。方法采用免疫细胞化学的方法鉴定培养的星形胶质细胞,在显微镜下观察CVB3感染后的细胞形态,并用RT-PCR方法... 详细信息

目的检测柯萨奇B3病毒(coxsackievirus group B type3,CVB3)感染体外培养的星形胶质细胞后集聚蛋白(agrin)的表达变化及其意义。方法采用免疫细胞化学的方法鉴定培养的星形胶质细胞,在显微镜下观察CVB3感染后的细胞形态,并用RT-PCR方法扩增CVB3RNA的正负链以确证感染成功,用RT-PCR检测CVB3感染细胞后agrin的动态表达变化。用脂质体将agrin反义质粒pcDNA3-As-AG转染到星形胶质细胞,并用RT-PCR检测转染的细胞中agrin的表达。3H-TdR掺入法测定CVB3不同感染时间点的星形胶质细胞裂解液和经agrin反义质粒pcDNA-As-AG转染细胞后的细胞裂解液对T细胞增殖的影响。结果(1)CVB3感染星形胶质细胞后agrin的表达水平下调。(2)病毒感染后随着agrin表达量的降低,星形胶质细胞裂解液对T细胞的活化增殖作用也降低。未转染和空质粒转染的细胞裂解液对T细胞的活化增殖有促进作用,而用反义核酸技术下调星形胶质细胞agrin表达后,星形胶质细胞裂解液对T细胞增殖的促进作用也随之下降,进一步证实agrin表达水平的下调可影响T细胞的活化和增殖。结论CVB3感染星形胶质细胞后agrin表达水平下调,降低对T细胞活化增殖的能力,这可能是CVB3病毒性脑炎中,病毒逃逸机体免疫清除的一种机制。

关键词：集聚蛋白柯萨奇B3病毒星形胶质细胞