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大针茅干旱胁迫下qRT-PCR内参基因的筛选及PIP2s基因的表达分析

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大针茅干旱胁迫下qRT-PCR内参基因的筛选及PIP2s基因的表达分析

作者：焦志军内蒙古农业大学

学位级别：硕士

大针茅(Stipa grandis P. Smirn)是亚洲中部特有的典型草原种,对大针茅的实生苗经干旱胁迫处理后,进行了如下研究：根据已公布的内参基因序列设计引物,利用qRT-PCR方法,从肌动蛋白基因(Act2)、微管蛋白a基因(TUB-a),微管蛋白b基因(TUB-b... 详细信息

大针茅(Stipa grandis P. Smirn)是亚洲中部特有的典型草原种,对大针茅的实生苗经干旱胁迫处理后,进行了如下研究：根据已公布的内参基因序列设计引物,利用qRT-PCR方法,从肌动蛋白基因(Act2)、微管蛋白a基因(TUB-a),微管蛋白b基因(TUB-b),18S核糖体RNA基因(18SrRNA)、甘油醛-3磷酸脱氢酶基因(GAPDH、真核延伸因子基因(EF-la)、RNA聚合酶II基因(RNA POL Ⅱ)、腺嘌呤磷酸核糖转化酶基因(APRT)、翻译因子基因(TLF)9个候选基因中,利用△Ct值分析法及geNorm、NormFinder软件分析法综合比较各个候选基因的稳定值,筛选出在干旱胁迫下大针茅根部表达最稳定的内参基因是18S rRNA,其次是EF-la和TLF,最不稳定的内参基因为RNA POL Ⅱ其中最稳定的内参基因组合为18SrRNA和EF-la。在叶片中表达稳定的内参基因顺序依次为18SrRNA、TLF和EF-la,最不稳定的内参基因是TUB-b;其中最稳定的内参基因组合为18S rRNA和TLFo根据已经克隆的大针茅PIP2；1和PIP2；2基因保守区序列设计简并引物,利用qRT-PCR方法对大针茅水孔蛋白基因PIP2;1和PIP2;2的表达进行研究,结果表明：在干旱胁迫下大针茅的PIP2；1和PIP2;2基因在根部的表达量均远远高于叶片的表达量,并且随着干旱胁迫强度的增加这两个基因的表达量都不同程度的上调,其中PIP2;1基因在干旱胁迫20d时表达量达到最高,约为对照的2.2倍,之后又有所下降；而PIP2;2在干旱胁迫15d时就已经达到了最大表达量,约为对照的2.5倍,之后表达量开始下降。说明PIP2；1和PIP2;2基因参与了大针茅的水分运输生理过程。

关键词：大针茅干旱胁迫内参基因 PIP2 1和PIP2 2基因实时荧光定量PCR

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脉冲时滞微分方程解的性质

脉冲时滞微分方程解的性质

作者：焦志军曲阜师范大学

学位级别：硕士

微分方程稳定性理论,不仅在力学、控制、工程及星际航行等科学尖端技术领域有其广泛深刻的应用,而且在现代物理、生物、化学等自然科学中得到了进一步的发展,同时它亦逐渐发展成为常微分方程学科本身许多课题理论研究的有力工具.微分方... 详细信息

微分方程稳定性理论,不仅在力学、控制、工程及星际航行等科学尖端技术领域有其广泛深刻的应用,而且在现代物理、生物、化学等自然科学中得到了进一步的发展,同时它亦逐渐发展成为常微分方程学科本身许多课题理论研究的有力工具.微分方程理论中的一个核心问题,就是Liapunov函数的构造问题.30多年来人们作了不少的努力,但对于一般非线性系统,还没有得到通用而有效的构造方法.虽然如此,针对实际问题中出现的各种非线性系统,通过定性分析并根据实际情况进行具体分析,从而构造出恰当的李亚普诺夫函数,还是取得了丰富的成果.本文主要利用Liapunov稳定性定理,不稳定理论等微分方程的方法研究了非线性时滞脉冲微分方程问题解的稳定性,得到了一些新的结果.根据内容本文分为以下四章：第一章绪论,主要介绍了本文的研究课题.第二章本章考虑了二阶微分方程方程的振动性问题.讨论了如下形式的二阶脉冲时滞微分方程解的振动性问题其中0≤t0

关键词：微分方程解非线性时滞脉冲系数性质

Notch信号途径:T细胞功能调控的新通路

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 828-830页

作者：焦志军周光炎上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海200025

Notch受体及其配体组成了脊椎动物和无脊椎动物胚胎发育中高度保守的Notch信号途径。近年来研究发现,Notch及其介导的信号转导与免疫系统也存在着密切的关系,从多个方面参与T细胞功能的调控,包括T细胞的活化和增殖,细胞因子分泌和Th1/Th... 详细信息

Notch受体及其配体组成了脊椎动物和无脊椎动物胚胎发育中高度保守的Notch信号途径。近年来研究发现,Notch及其介导的信号转导与免疫系统也存在着密切的关系,从多个方面参与T细胞功能的调控,包括T细胞的活化和增殖,细胞因子分泌和Th1/Th2分化,也参与调节性T细胞的产生、扩增和功能发挥等。这说明,Notch信号途径不仅参与免疫系统发育,同时在成熟的免疫细胞功能调节中也具有重要的作用。

关键词： Notch T细胞 Th1/Th2 调节性T细胞

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抗中性粒细胞胞浆抗体、抗核抗体联合检测

江苏医药 2008年第10期34卷 1054-1055页

作者：陈阿琴焦志军江苏大学附属医院检验科镇江212001

目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)与抗核抗体联合检测的临床意义。方法应用间接免疫荧光法(IIF)检测疑似自身免疫性疾病患者血清中的ANCA和抗核抗体(ANA),并用ELISA法进行抗丝氨酸蛋白酶3(PR3)和抗髓过氧化物酶(MPO)的定量检测。结果... 详细信息

目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)与抗核抗体联合检测的临床意义。方法应用间接免疫荧光法(IIF)检测疑似自身免疫性疾病患者血清中的ANCA和抗核抗体(ANA),并用ELISA法进行抗丝氨酸蛋白酶3(PR3)和抗髓过氧化物酶(MPO)的定量检测。结果(1)在ANA阳性组和ANA阴性组中均检出ANCA,但ANA阳性组的阳性率(15.64%)高于ANA阴性组(3.25%)(P<0.01)。(2)ANCA阳性组以抗MPO和抗PR3升高为主,与ANCA阴性组比较有统计学差异(P<0.01)。结论同时进行ANCA、ANA检测,有助于提高自身免疫性疾病的诊断。

关键词：抗中性粒细胞胞浆抗体抗核抗体间接免疫荧光法自身免疫病

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Th17细胞与肿瘤微环境

细胞与分子免疫学杂志 2010年第10期26卷 1055-1056,1058页

作者：付婷杨佩芳焦志军江苏大学附属医院妇产科江苏镇江212001 江苏大学附属医院中心实验室江苏镇江212001

Th17细胞是最近发现的一种不同于Th1和Th2的新型CD4+T细胞亚群,以IL-23依赖性分泌IL-17,而极少表达IFN-γ和IL-4为特征[1].Th17细胞具有多种生物学效应,在机体炎性反应,自身免疫性疾病,肿瘤和移植排斥等的发生,发展中发挥重要作用.作为... 详细信息

Th17细胞是最近发现的一种不同于Th1和Th2的新型CD4+T细胞亚群,以IL-23依赖性分泌IL-17,而极少表达IFN-γ和IL-4为特征[1].Th17细胞具有多种生物学效应,在机体炎性反应,自身免疫性疾病,肿瘤和移植排斥等的发生,发展中发挥重要作用.作为肿瘤免疫治疗的潜在靶点,国,内外对Th17细胞在肿瘤微环境中的调节,分化,诱导的研究尚处于起步阶段.现就Th17细胞在肿瘤微环境中的生物学效应及其与临床肿瘤关系的最新进展作一综述

关键词： Th17细胞肿瘤微环境免疫调控

Notch信号通路与消化系统肿瘤相关性的研究进展

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肿瘤 2012年第3期32卷 222-226页

作者：王旭辉焦志军江苏大学附属医院检验科中心实验室镇江市医学免疫学重点实验室镇江212000 湖南省湘乡市人民医院检验科湘乡411400

Notch信号是一种遗传进化上高度保守,反映相邻细胞间通信作用的一种信号通路,其不仅在细胞正常发育、分化增殖和凋亡中起着重要的作用,而且与多种肿瘤的发生和发展具有相关性。食管鳞状细胞癌的发生常伴随Notch-1的低表达,但食管腺癌的... 详细信息

Notch信号是一种遗传进化上高度保守,反映相邻细胞间通信作用的一种信号通路,其不仅在细胞正常发育、分化增殖和凋亡中起着重要的作用,而且与多种肿瘤的发生和发展具有相关性。食管鳞状细胞癌的发生常伴随Notch-1的低表达,但食管腺癌的发生却与Notch信号的高表达相关,且高表达的Notch信号对胃癌形成具有促进作用,其表达量提高的程度预示胃癌形成风险的高低。结肠癌中Notch-1表达的升高与病理分级、淋巴转移和病程相关,而Notch配体Dll-4可促进结肠癌中新生血管的生成有助于癌细胞的转移和远端浸润,与之相反的是Notch-2却可能起到抑制结肠癌生长的作用。总之,目前Notch信号多被视为致癌因素,可促进肿瘤的生长,但在某些肿瘤中也能够诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞的增殖,表现为致癌与抑癌两种截然相反的作用。应用γ-分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitor,GSI)、小RNA干扰技术和单克隆抗体等方法阻断Notch信号通路,将成为肿瘤治疗的一个新方向。

关键词：消化系统肿瘤受体,Notch 配体肿瘤治疗方案

代谢综合征患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C测定的临床意义

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山东医药 2009年第40期49卷 79-80页

作者：王拥军俞力焦志军江苏大学附属医院江苏镇江212001

目的探讨代谢综合征患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)升高的临床意义。方法检测100名健康体检者血清Cys C水平,确立CysC的参考范围。采用免疫透射比浊法测定100例代谢综合征患者的Cys C。结果健康人群Cys C参考范围≤1.01 mg/L,代... 详细信息

目的探讨代谢综合征患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)升高的临床意义。方法检测100名健康体检者血清Cys C水平,确立CysC的参考范围。采用免疫透射比浊法测定100例代谢综合征患者的Cys C。结果健康人群Cys C参考范围≤1.01 mg/L,代谢综合征患者的Cys C水平高于健康人群(P<0.05)。结论CysC是衡量代谢综合征患者肾功能状况的理想指标。

关键词：代谢综合征半胱氨酸蛋白酶抑制剂肾小球滤过率

RNA干扰沉默survivin基因对人肺癌细胞侵袭和Akt信号通路的影响

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中国老年学杂志 2012年第20期32卷 4454-4456页

作者：徐永中朱灵范钰焦志军江苏大学附属医院江苏镇江212001 江苏大学附属人民医院

目的探讨survivin基因小干扰RNA(siRNA)对肺癌细胞A549侵袭和Akt信号通路的影响。方法应用survivin siRNA转染处理人肺癌细胞系A549后,采用实时定量PCR和Western印迹检测survivin基因mRNA和蛋白水平,采用软琼脂集落培养试验检测锚着不... 详细信息

目的探讨survivin基因小干扰RNA(siRNA)对肺癌细胞A549侵袭和Akt信号通路的影响。方法应用survivin siRNA转染处理人肺癌细胞系A549后,采用实时定量PCR和Western印迹检测survivin基因mRNA和蛋白水平,采用软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭能力,采用Western印迹检测Akt磷酸化水平。结果与对照组比较,转染组survivin基因mRNA和蛋白水平下调。Western印迹检测结果显示,转染组Akt磷酸化水平受到明显抑制。结论 survivin siRNA可抑制人肺癌细胞侵袭,抑制Akt磷酸化水平是其机制之一。

关键词：肺肿瘤 survivin RNA干扰 siRNA 侵袭 Akt

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非发酵革兰阴性杆菌临床耐药性分析

江苏医药 2009年第9期35卷 1085-1086页

作者：谢劲松王坚焦志军南京市第二医院检验科 210003 江苏大学附属医院医学检验中心

目的了解临床常见非发酵革兰阴性杆菌的分布及耐药性的现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法临床标本按常规分离培养,用美国Dade Behring Microscan分析系统鉴定菌种,药敏试验按NCCLS规定的标准进行。结果分离出的非发酵革兰阴性... 详细信息

目的了解临床常见非发酵革兰阴性杆菌的分布及耐药性的现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法临床标本按常规分离培养,用美国Dade Behring Microscan分析系统鉴定菌种,药敏试验按NCCLS规定的标准进行。结果分离出的非发酵革兰阴性杆菌占同期病原菌的23.74%,主要有三种,铜绿假单胞菌最为常见,占61.47%,其次为不动杆菌属占22.94%,产碱杆菌6.93%。铜绿假单胞菌除对头孢他啶、亚胺培南、左氧氟沙星敏感性较高,而对其他抗生素敏感性不佳。不动杆菌对氨苄青霉素/克拉维酸、氨苄青霉素、氨苄青霉素/青霉烷砜、头孢唑啉、庆大霉素、敏感性均低于30%。产碱杆菌属对庆大霉素、氨苄青霉素/克拉维酸、氨苄青霉素、氨苄青霉素/青霉烷砜的敏感性均较低。结论非发酵革兰阴性杆菌的分离率、耐药性有升高趋势,应根据药敏试验结果选用抗菌药物。

关键词：铜绿假单胞菌不动杆菌产碱杆菌耐药性