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施肥处理对丹参品质和内生菌群多样性影响及关键菌种功能分析

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施肥处理对丹参品质和内生菌群多样性影响及关键菌种功能分析

作者：潘阳阳河北大学

学位级别：硕士

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奶牛乳源外泌体提取方法的优化及效果评价

动物营养学报 2024年第2期36卷 1265-1276页

作者：赵莹王靖雷王萌王立斌张倩李志杰马鑫余四九潘阳阳甘肃农业大学动物医学院兰州730070 甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心兰州730070

乳源外泌体在疾病治疗及载体效应等领域应用颇为广泛,但目前乳源外泌体的提取方法仍步骤繁琐,耗时长,难以推广应用。为建立省时、高效和稳定的乳源外泌体提取方法,本试验在前期已建立的差速超速离心法、凝乳酶法、乙酸法及蔗糖密度梯度... 详细信息

乳源外泌体在疾病治疗及载体效应等领域应用颇为广泛,但目前乳源外泌体的提取方法仍步骤繁琐,耗时长,难以推广应用。为建立省时、高效和稳定的乳源外泌体提取方法,本试验在前期已建立的差速超速离心法、凝乳酶法、乙酸法及蔗糖密度梯度离心法的基础上,通过增加离心速度、改变乙酸或凝乳酶用量、调整蔗糖密度梯度、减少离心步骤进行逐一优化。通过透射电子显微镜、纳米粒子跟踪分析、蛋白浓度检测、免疫印迹鉴定比较乳源外泌体形态结构、粒径大小、蛋白浓度、粒子浓度、特异性标记蛋白的差异,筛选出最优提取方法。结果显示:4种优化后提取方法均可分离获得具有典型“茶托”形状,介于30~200 nm的细胞外囊泡,但优化后的乙酸法提取乳源外泌体最多,视野密度高达80%以上,粒径大小为(151.0±47.2)nm,粒子浓度为6.2×10^(12)个/mL,均高于其他优化方法;优化后的乙酸法提取乳源外泌体的特异性标记蛋白[肿瘤易感基因101(TSG101)、热休克蛋白70(HSP70)、CD81和CD9]均表达量较高,其他3种优化方法提取到的乳源外泌体特异性标记蛋白发生不同程度降解,且提取乳源外泌体所得样品蛋白浓度均显著高于优化的乙酸法(P<0.05)。结果表明,优化后奶牛乳源外泌体乙酸提取法具有方法简单、耗时短、纯度高、特异性标记蛋白稳定等优点,该方法为外泌体需求量大的试验、医疗、工业生产等奠定一定基础。

关键词：乳源外泌体差速超速离心法乙酸凝乳酶提取鉴定

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地西泮结合抑制剂在牦牛不同大小卵泡中的表达与定位

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2024年第8期52卷 11-17页

作者：王立斌王强龙潘阳阳黄振华赵天丁天翊刘敏清崔燕余四九甘肃农业大学动物医学院甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心甘肃兰州730070

【目的】研究地西泮结合抑制剂(diazepam binding inhibitor, DBI)在牦牛不同大小卵泡中的表达水平与定位,探讨DBI蛋白在牦牛卵泡发育过程中的调控作用。【方法】采集牦牛卵巢组织,分离不同大小(直径8 mm)的卵泡。采用实时荧光定量方法(... 详细信息

【目的】研究地西泮结合抑制剂(diazepam binding inhibitor, DBI)在牦牛不同大小卵泡中的表达水平与定位,探讨DBI蛋白在牦牛卵泡发育过程中的调控作用。【方法】采集牦牛卵巢组织,分离不同大小(直径8 mm)的卵泡。采用实时荧光定量方法(qRT-PCR)检测DBI基因mRNA在牦牛不同大小卵泡中的相对表达量,并利用蛋白免疫印迹技术(Western-blotting, WB)检测DBI蛋白的表达情况。采用免疫组织化学方法(immunohisto chemistry, IHC)定位DBI蛋白在雌性牦牛完整成熟卵泡中的分布情况。采用免疫荧光技术(immunofluorescence, IF)检测DBI在牦牛卵母细胞中的定位。【结果】DBI基因mRNA和DBI蛋白在牦牛不同大小卵泡中均表达,但表达水平存在显著差异(P<0.05),表达量随着牦牛卵泡直径的增大而显著上升。DBI蛋白在牦牛成熟卵泡中的颗粒细胞、卵丘细胞均有分布;在卵母细胞中主要定位于细胞质、细胞核。【结论】DBI在类固醇激素合成与卵母细胞成熟过程中具有重要作用。

关键词：牦牛地西泮结合抑制剂卵泡发育卵母细胞表达与定位

木犀草素对对乙酰氨基酚诱导肝损伤的保护作用

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2024年第2期52卷 12-21,31页

作者：张治杰潘阳阳姚亚乐王中一陈国雯范碧玥安志霞马小燕王萌甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

【目的】基于内质网应激(ERS)和氧化应激途径,探讨木犀草素(luteolin)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝损伤的保护效果及其潜在的作用机制。【方法】将48只昆明小白鼠随机分为6组,分别为正常对照组(NC)、木犀草素对照组(MD)、APAP肝损伤模... 详细信息

【目的】基于内质网应激(ERS)和氧化应激途径,探讨木犀草素(luteolin)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝损伤的保护效果及其潜在的作用机制。【方法】将48只昆明小白鼠随机分为6组,分别为正常对照组(NC)、木犀草素对照组(MD)、APAP肝损伤模型组(APAP)以及木犀草素低、中、高剂量组(ML、MM、MH),每组8只小鼠,NC和MD组腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠按300 mg/kg的剂量腹腔注射APAP注射液,每天2次,连续注射4 d,给药4 d后NC组和APAP组灌胃生理盐水,MD、ML、MM、MH小鼠分别按照100,25,50,100 mg/kg的剂量灌胃木犀草素药液,每天2次,连续灌胃3 d,最后一次灌胃12 h后,分别检测小鼠血液中的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性以及肝脏中的氧化应激指标(超氧化物歧化酶(SOD)活性及过氧化氢(H 2O 2)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量),在显微镜下观察各组小鼠肝组织的病理变化,并采用探针药物法测定肝脏微粒体细胞色素P4502E1酶(CYP2E1)活性,采用qRT-PCR检测CYP2E1 mRNA表达水平,用Western Blot检测肝组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、增强子CCAAT结合蛋白同源蛋白(CHOP)、CYP2E1蛋白表达水平。【结果】与NC组相比,APAP模型组的ALT和AST活性极显著升高,MD组上述2种酶活性无显著变化。与APAP模型组相比,MM、MH组ALT和AST活性显著或极显著下降。与APAP模型组相比,ML、MM、MH组的GSH含量和SOD活性均明显增加,MDA和H 2O 2含量均明显降低。小鼠肝组织病理形态显微观察结果表明,MM、MH组可以改善APAP导致的肝索消失以及肝细胞排列散乱和细胞核溶解等病理症状。探针药物法测定结果显示,0.1,0.01和0.001 mg/mL的木犀草素可以显著降低CYP2E1活性。qRT-PCR和Western Blot结果显示,木犀草素可以显著或极显著降低CYP2E1基因及其蛋白的表达水平,极显著降低GRP78和CHOP蛋白表达水平。【结论】木犀草素具有明显的抗APAP诱导的肝损伤作用,其作用机理可能是通过抑制CYP2E1的表达、减轻氧化应激和内质网应激水平,从而减轻APAP诱导的肝损伤。

关键词：木犀草素对乙酰氨基酚肝损伤内质网应激氧化应激

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部标1级优质稻新品种黄丝粤占的选育

中国稻米 2024年 2-5页

作者：王志东周少川陈宜波李宏黄道强周德贵赵雷龚蓉潘阳阳周靖波王重荣广东省农业科学院水稻研究所/农业农村部华南优质稻遗传育种实验室(部省共建)/广东省水稻育种新技术重点实验室/广东省水稻工程实验室

在保障粮食安全和消费者对稻米品质要求日益提高的双重背景下,为了培育高产、优质、广适性大品种,笔者在核心种质育种理论指导下,通过将传统系谱法、分子标记辅助选择技术和运用先进仪器设备鉴定相结合的方法,选育出部标(NY/T 83—2017)... 详细信息

在保障粮食安全和消费者对稻米品质要求日益提高的双重背景下,为了培育高产、优质、广适性大品种,笔者在核心种质育种理论指导下,通过将传统系谱法、分子标记辅助选择技术和运用先进仪器设备鉴定相结合的方法,选育出部标(NY/T 83—2017)1级优质稻新品种黄丝粤占。黄丝粤占在不同年度和不同区域试验中表现出株型理想、丰产性好、适应性广、抗稻瘟病、食味品质优异的特性,实现了高产、优质和抗病等优良基因的有效聚合。2023年黄丝粤占通过广东省农作物品种审定委员会审定,适宜广东粤北以外稻作区作早、晚稻种植,具有很大的推广潜力。

关键词：常规籼稻黄丝粤占优质高产优异基因

面向用户公平性的无人机通信系统高能效安全传输技术研究

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面向用户公平性的无人机通信系统高能效安全传输技术研究

作者：潘阳阳南京邮电大学

学位级别：硕士

与传统的地面通信系统相比,无人机通信系统因其具有视距链路概率高、移动性强和部署灵活等显著优点可有效提升通信网络覆盖范围和无线信道容量。然而,由于无线信道的广播特性,且无人机机载能量有限,安全性问题和能效性问题成为了无人机... 详细信息

与传统的地面通信系统相比,无人机通信系统因其具有视距链路概率高、移动性强和部署灵活等显著优点可有效提升通信网络覆盖范围和无线信道容量。然而,由于无线信道的广播特性,且无人机机载能量有限,安全性问题和能效性问题成为了无人机通信系统急需解决的瓶颈问题。此外,由于用户位置和通信环境等因素,不同用户的无线信道质量存在着明显差异,导致无线通信系统更加倾向于无线信道质量较好的用户而忽略无线信道质量较差的用户,无法实现整个通信网络的公平性。因此,本论文在充分考虑用户通信公平性的基础上,从无线通信安全性和能效性平衡的角度出发,对基于用户公平性的无人机通信系统高能效安全传输方法展开研究,具体研究内容如下:(1)针对多用户无人机下行通信场景,在考虑用户安全能效公平性的基础上,通过联合优化资源分配和无人机飞行航迹,实现最坏用户安全能效最大化。首先,推导出系统的信号模型,构建基于航点离散化方法的多用户安全容量模型及无人机飞行功耗模型,提出基于用户安全能效公平性的无人机通信系统指标;其次,建立了以最坏用户安全能效为优化目标,以无人机资源分配和飞行航迹为约束条件的联合优化问题,考虑到优化问题目标函数的分式形式和优化变量的耦合性导致的优化问题非凸特性,采用连续凸近似(Sequential Convex Approximation,SCA)技术将原始优化问题转化为凸优化问题,并设计了一种具有较低复杂度的迭代求解算法,以提高求解效率和准确性。仿真结果表明,所提出的方案可有效提升用户安全能效公平性。(2)针对窃听者位置信息未知的多用户无人机上行通信场景,从用户公平性角度出发,提出面向多用户安全能效公平性的全双工无人机上行通信系统高能效鲁棒安全传输方案。首先,推导出系统的信号模型,构建基于时分多址协议的多用户安全容量模型及无人机飞行功耗模型,提出面向用户安全能效公平性的无人机通信系统指标;其次,分别建立了椭圆位置误差模型下和概率位置误差模型下以最坏用户安全能效为优化目标的鲁棒优化问题。针对最坏情况下的鲁棒优化问题,设计了一种基于SCA和惩罚函数方法以及S-procedure的迭代算法对其进行求解;而对于中断概率情况,设计了一种基于SCA和惩罚函数方法以及Bernstein-type不等式的迭代算法,所提出的算法均可得到相应问题的最优解。仿真结果验证了所提方案可有效提升系统安全能效的鲁棒性。

关键词：无人机通信公平性物理层安全能量效率

复合不同剂量艾司氯胺酮时舒芬太尼引起呼吸抑制半数有效剂量的比较

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临床麻醉学杂志 2023年第9期39卷 948-951页

作者：潘阳阳乔南南徐桂萍齐庆岭天津中医药大学第一附属医院麻醉科、国家中医针灸临床医学研究中心 300073 天津市第一中心医院麻醉科新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科

目的比较复合不同剂量艾司氯胺酮时舒芬太尼引起全麻患者呼吸抑制的半数有效剂量(ED_(50))。方法选择2022年2—10月择期行气管插管全麻手术的患者150例,男86例,女64例,年龄20~50岁,BMI 18~24 kg/m^(2),ASAⅠ或Ⅱ级。将患者随机分为三组:... 详细信息

目的比较复合不同剂量艾司氯胺酮时舒芬太尼引起全麻患者呼吸抑制的半数有效剂量(ED_(50))。方法选择2022年2—10月择期行气管插管全麻手术的患者150例,男86例,女64例,年龄20~50岁,BMI 18~24 kg/m^(2),ASAⅠ或Ⅱ级。将患者随机分为三组:A组、B组和C组,每组50例。A组静注咪达唑仑0.03 mg/kg;B组静注咪达唑仑0.03 mg/kg和亚麻醉剂量艾司氯胺酮0.25 mg/kg;C组静注咪达唑仑0.03 mg/kg和麻醉剂量艾司氯胺酮0.5 mg/kg;5 min后三组单次静注舒芬太尼。舒芬太尼单次注射剂量按Dixon序贯法确定,初始剂量0.05μg/kg,相邻剂量梯度为0.025μg/kg。若出现呼吸抑制,则下一例患者舒芬太尼降低一个剂量梯度;若未出现呼吸抑制,则下一例升高一个剂量梯度。呼吸抑制标准为SpO_(2)≤92%或RR100次/分2例,经相应处理后未影响研究进行。A组、B组和C组达到呼吸抑制时舒芬太尼的ED_(50)及95%CI分别为0.152μg/kg(95%CI 0.142~0.164μg/kg)、0.199μg/kg(95%CI 0.186~0.212μg/kg)和0.109μg/kg(95%CI 0.100~0.118μg/kg)。结论咪达唑仑0.03 mg/kg辅助镇静时,单用舒芬太尼静脉注射致呼吸抑制的ED_(50)为0.152μg/kg;复合艾司氯胺酮0.25 mg/kg可以提高舒芬太尼静脉注射致呼吸抑制的ED_(50);复合艾司氯胺酮0.5 mg/kg可以降低舒芬太尼静脉注射致呼吸抑制的ED_(50)。

关键词：艾司氯胺酮舒芬太尼呼吸抑制半数有效剂量

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初生及成年牦牛大脑皮质的转录组分析

畜牧兽医学报 2023年第11期54卷 4605-4614页

作者：张倩崔燕余四九何俊峰潘阳阳王萌甘肃农业大学动物医学院兰州730070

旨在分析初生和成年牦牛大脑皮质转录组表达谱,筛选影响大脑皮质发育的候选基因。本研究选取初生(1~7日龄(NYB),n=3)和成年(3~4岁(AYB),n=3)牦牛,放血处死,采集大脑皮质,利用Illumina HiSeq平台对转录组进行测序与分析,筛选得到差异表... 详细信息

旨在分析初生和成年牦牛大脑皮质转录组表达谱,筛选影响大脑皮质发育的候选基因。本研究选取初生(1~7日龄(NYB),n=3)和成年(3~4岁(AYB),n=3)牦牛,放血处死,采集大脑皮质,利用Illumina HiSeq平台对转录组进行测序与分析,筛选得到差异表达基因,在此基础上对差异基因进行GO功能注释、KEGG富集分析和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法验证。测序结果共分析得到了4790个显著差异表达的基因(P<0.05),其中包括2670个上调表达的差异基因,2120个下调表达的差异基因。随机选取了9个差异基因进行qRT-PCR验证,表达趋势与转录组测序结果一致,表明测序结果可靠。GO功能注释发现其中占比较多的条目为与蛋白合成及ATP利用相关的转录调控、RNA聚合酶II正调控转录、蛋白结合及ATP结合;KEGG富集分析发现占比较多与大脑发育相关的通路为调控轴突发育及重塑的轴突导向通路,与神经胶质细胞增殖相关的MAPK信号通路,与突触传递相关的神经活性配体-受体相互作用、PI3K-Akt、钙信号及磷脂酶D信号通路,与免疫防御相关的Toll样受体通路,与低氧适应调控相关的HIF信号通路。从富集通路中发现,Slit2、SEMA 5A、BDNF、Rab 3a、FGF18、HIF 1α、HIF 2α、NGF、VEGF A、CaMK 2A、PLD1、TLR1、TLR 4基因可能是影响牦牛大脑皮质发育的候选基因。上述结果提示,成年牦牛大脑皮质的突触发育、可塑性和传递、免疫防御可能更活跃,并且低氧适应性更强,这为进一步探讨牦牛大脑发育潜在分子机理提供了一定参考。

关键词：牦牛大脑皮质初生成年转录组

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免疫细胞在牦牛附睾和输精管的分布规律

畜牧兽医学报 2022年第6期53卷 1925-1933页

作者：张倩崔燕余四九何俊峰潘阳阳王萌甘肃农业大学动物医学院兰州730070

旨在研究免疫细胞在健康雄性牦牛附睾和输精管的分布。采用免疫组织化学和实时荧光定量(qRT-PCR)方法对幼龄(5~6月龄)及成年(3~4岁)牦牛附睾(头、体、尾)和输精管中CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞... 详细信息

旨在研究免疫细胞在健康雄性牦牛附睾和输精管的分布。采用免疫组织化学和实时荧光定量(qRT-PCR)方法对幼龄(5~6月龄)及成年(3~4岁)牦牛附睾(头、体、尾)和输精管中CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞的分布特征及其表面标志分子的表达水平进行研究。结果显示:CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞主要分布在附睾管和输精管的上皮和间质;另外,CD68和CD3 mRNA和蛋白水平在各年龄组牦牛附睾头和附睾体显著高于附睾尾和输精管(P<0.05),而CD79α、IgA和IgG mRNA和蛋白水平在附睾尾和输精管显著高于附睾头和附睾体(P<0.05);此外,在成年牦牛附睾和输精管CD3、CD79α、IgA、IgG、CD68 mRNA和蛋白水平均显著高于幼龄牦牛(P<0.05)。综上提示,牦牛附睾头可能主要是细胞免疫发生的位点,而附睾尾和输精管则主要进行体液免疫应答,此外,成年牦牛附睾和输精管的局部免疫可能更完善,以上数据为进一步研究高原牦牛局部生殖免疫和病理提供了形态学资料。

关键词：牦牛附睾输精管免疫细胞