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双重介导脑靶向脂质体增强荷载阿霉素的体外血-脑脊液屏障渗透率

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医学研究杂志 2024年第1期53卷 30-35页

作者：黑玉梅子陈阳滕彬宏清华大学附属北京清华长庚医院、清华大学临床医学院 100021 北京大学 100871 浙江大学医学院附属第二医院口腔正畸科杭州310003

目的探讨双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为递送载体对阿霉素(doxorubicin,DOX)血-脑脊液屏障(blood brain barrier,BBB)渗透率的影响,为脑部药物递送提供新的策略。方法利用前期构建的双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为载体包... 详细信息

目的探讨双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为递送载体对阿霉素(doxorubicin,DOX)血-脑脊液屏障(blood brain barrier,BBB)渗透率的影响,为脑部药物递送提供新的策略。方法利用前期构建的双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为载体包载DOX(DOX@RVGPR9-SSL)。培养脑毛细血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMVEC),在体外构建BBB模型,通过4h渗漏实验、跨膜电阻值(transmembrane resistance value,TEER)测量、扫描透射电镜(scanning transmission electron microscope,SEM)观察细胞间的紧密连接等,鉴定体外BBB模型构建是否成功。在BBB模型构建成功后,利用荧光共振能量转移(fluorescence a resonance energy transfer,FRET),通过激光共聚焦显微镜,考察RVGPR9-SSL体跨越BBB后的完整性。通过对比分析脂质体给药前后,BBB的形态以及TEER值,考察RVGPR9-SSL跨越BBB后对BBB完整性的影响。通过荧光分光光度计,考察DOX@RVGPR9-SSL的BBB渗透率。结果RVGPR9-SSL的包封率为97.25%。构建的BBB模型的TEER值均>200Ω·cm 2,并通过SEM观察到BMVEC细胞排列紧密,存在着明显的紧密连接,说明体外BBB模型成功建立,可用于考察BBB渗透率。DOX@RVGPR9-SSL4h累积BBB渗透率>10%,显著高于游离DOX的4h累积BBB渗透率。给药后BBB与DOX@RVGPR9-SSL均能保持较好的完整性。结论RVGPR9-SSL可以显著提高所包载的DOX的BBB渗透率,并且具有较好的安全性,是非常有前景的脑部药物递送载体。

关键词：双重介导脑靶向脂质体血-脑脊液屏障累积渗透率荧光共振能量转移

KGN诱导人脐带间充质干细胞成软骨分化的体外研究

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KGN诱导人脐带间充质干细胞成软骨分化的体外研究

作者：滕彬宏天津医科大学

学位级别：硕士

目的:评估新型小分子化合物Kartogenin（KGN）在体外二维培养环境下对人脐带间充质干细胞成软骨分化的诱导作用;制备、优化羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠自交联自愈合水凝胶,研究此水凝胶应用于软骨组织工程支架领域的可行性;探讨KGN在水... 详细信息

目的:评估新型小分子化合物Kartogenin（KGN）在体外二维培养环境下对人脐带间充质干细胞成软骨分化的诱导作用;制备、优化羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠自交联自愈合水凝胶,研究此水凝胶应用于软骨组织工程支架领域的可行性;探讨KGN在水凝胶三维培养环境中诱导人脐带间充质干细胞成软骨分化效果。方法:1.采用细胞球团培养法评估KGN诱导人脐带间充质干细胞成软骨诱导分化效果。首先,从人脐带Wharton胶内提取人脐带间充质干细胞,通过细胞流式鉴定细胞性质。将人脐带间充质干细胞通过重悬离心成细胞团块,采用不同组份的成软骨诱导液（KGN为实验组,TGF-β3为阳性对照组,DMSO为空白对照组,KGN与TGF-β3联合应用组〈TK组〉）,分别诱导人脐带间充质干细胞21天后,通过HE和AB组织学定性染色,软骨蛋白和胶原的免疫荧光染色以及成软骨相关基因RT-PCR检测,分析KGN对人脐带间充质干细胞的成软骨诱导分化作用。2.利用羧甲基壳聚糖内的氨基与氧化海藻酸钠内的醛基所发生的席夫碱反应,以不同交联比例制备水凝胶,通过扫描电镜、凝胶流变分析、体外溶胀率和降解率检测、软骨粘附性测试等方法评估不同交联度水凝胶的理化性能,探究可以应用于软骨修复再生水凝胶材料的制备方法。3.以羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠水凝胶作为培养细胞的三维体系,将人脐带间充质干细胞负载于水凝胶内,通过扫描电镜、细胞增殖（CCK8检测）、Live/Dead染色研究水凝胶的生物相容性。采用不同组份的成软骨诱导液（KGN为实验组,TGF-β3为阳性对照组,DMSO为空白对照组,KGN与TGF-β3联合应用组〈TK组〉）诱导水凝胶内的人脐带间充质干细胞成软骨向分化。体外诱导21天后,通过HE染色、软骨蛋白和胶原的免疫荧光染色以及成软骨相关基因表达量,评估KGN在三维培养环境中诱导人脐带间充质干细胞的成软骨分化效果。结果:1.通过细胞流式分析鉴定得出所分离培养的细胞为人脐带间充质干细胞。细胞以球团的形式在体外诱导21天后,软骨细胞球的组织切片、免疫组化及成软骨相关基因检测表明,单纯KGN组有一定的成软骨诱导分化效果,KGN和TGF-β3联合应用后,成软骨诱导分化效果显著增强。2.以羧甲基壳聚糖内的氨基与氧化海藻酸钠内的醛基不同交联比,制备出各组份的水凝胶。通过对各组份凝胶理化性能的评价发现:当氨基和醛基比例为1:1时,扫描电镜可见均匀和密集的多孔结构;成胶时间可控制在2min;水凝胶与软骨组织的粘附拉力为146.20±5.87Pa,明显高于氨基/醛基比例为2:1的水凝胶（粘附拉力为112.64±7.34Pa）（P＜0.05）;溶胀率和降解率都较氨基/醛基比例为2:1的水凝胶稳定。3.制备出的羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠水凝胶（氨基/醛基=1:1）对细胞的粘附、生长和增殖无影响,具有良好的生物相容性;细胞-凝胶复合体培养21天后,TK组和TGF-β3组中蛋白多糖和Ⅱ型胶原总含量明显高于KGN组和空白对照组（P＜0.05）;组织学染色及免疫组化分析和成软骨相关基因检测表明,KGN在三维培养环境中诱导人脐带间充质干细胞有一定的成软骨分化效果,但不显著,TGF-β3有明显的成软骨诱导效果,并且KGN可以加强TGF-β3的成软骨诱导分化能力。结论:1.在二维细胞培养环境下,单纯KGN诱导人脐带间充质干细胞成软骨向分化效果不显著,将KGN与TGF-β3联合应用的成软骨分化效果显著,利用其协同效应加强成软骨分化诱导作用可以作为今后软骨组织工程的一种新方法。2.当羧甲基壳聚糖内的氨基和氧化海藻酸钠内的醛基交联比1:1时,此交联度制备的水凝胶具有稳定合适的成胶时间、良好的自愈合特性、与软骨组织有一定的粘附力、较为稳定的溶胀率和降解率,有望作为一种仿生支架材料应用于软骨组织修复和再生领域。3.羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠水凝胶具有良好的生物相容性,可以负载人脐带间充质干细胞在体外构建软骨组织工程化支架。单纯KGN组在三维培养环境中对人脐带间充质干细胞有一定的成软骨诱导分化效果,将KGN与TGF-β3联合应用,对成软骨诱导分化具有协同增强作用,进一步证明了将KGN与TGF-β3联合应用于软骨组织修复和再生的可行性,为之后的体内实验奠定基础。

关键词： Kartogenin 人脐带间充质干细胞 TGF-3 自交联自愈合水凝胶软骨组织工程

软骨组织工程用羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠复合水凝胶的制备及体外评估

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华西口腔医学杂志 2019年第3期37卷 253-259页

作者：李云洁滕彬宏赵艳红杨强王连永黄颖天津医科大学口腔医院正畸科天津300070 天津医院脊柱外科天津300211 南开大学生命科学学院生物活性材料教育部重点实验室天津300071

目的优化羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠(CMCS/OSA)复合水凝胶制备工艺,并应用于软骨组织工程。方法制备氨基与醛基比例分别为2:1、1:1、1:2的CMCS/OSA复合水凝胶,并通过扫描电子显微镜观察、流变学检测、黏附拉力测试、溶胀率分析及细胞实... 详细信息

目的优化羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠(CMCS/OSA)复合水凝胶制备工艺,并应用于软骨组织工程。方法制备氨基与醛基比例分别为2:1、1:1、1:2的CMCS/OSA复合水凝胶,并通过扫描电子显微镜观察、流变学检测、黏附拉力测试、溶胀率分析及细胞实验等方法评价复合水凝胶的微观形态、物理特性以及生物相容性,以制备满足软骨再生领域需求的水凝胶。结果氨基与醛基比为1:1时,制备出的水凝胶具有良好的孔隙率、适宜的成胶时间、较强的黏附力及稳定的溶胀率等性质,对细胞有良好的生物相容性。结论氨基与醛基比为1:1时制备出的CMCS/OSA复合水凝胶是软骨组织工程优异的支架材料。

关键词：羧甲基壳聚糖氧化海藻酸钠水凝胶脐带间充质干细胞软骨组织工程

丝素蛋白-软骨脱细胞外基质复合取向支架的制备及评价

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华西口腔医学杂志 2018年第1期36卷 17-22页

作者：滕彬宏赵艳红王连永杨强李洪发李云洁天津医科大学口腔医院正畸科天津300070 南开大学生命科学学院生物活性材料教育部重点实验室天津300071 天津医院脊柱外科天津300211

目的制备丝素蛋白(SF)-软骨脱细胞外基质(CECM)仿生支架材料,检测其理化性能特性。方法采用改良温度梯度热诱导相分离(TIPS)技术结合冷冻干燥法制备出CECM取向支架,然后将CECM浆料与制备好的SF溶液按照质量比1∶1混合后配制成质量分数6... 详细信息

目的制备丝素蛋白(SF)-软骨脱细胞外基质(CECM)仿生支架材料,检测其理化性能特性。方法采用改良温度梯度热诱导相分离(TIPS)技术结合冷冻干燥法制备出CECM取向支架,然后将CECM浆料与制备好的SF溶液按照质量比1∶1混合后配制成质量分数6%的浆料,通过TIPS技术制备出SF-CECM复合取向支架。对SFCECM复合取向支架进行扫描电子显微镜(SEM)观察和组织学染色,同时测定支架孔隙率、吸水性以及力学性能。结果 SEM观察可见,支架横断面呈多孔网状结构,纵剖面呈垂直的管状结构。组织学染色显示复合支架脱细胞彻底,有蛋白多糖、胶原成分,与天然软骨成分相似。支架孔隙率、吸水率和纵向压缩弹性模量分别为95.733%±1.010%、94.309%±1.302%和(65.40±4.09)k Pa。结论 SF-CECM复合取向支架具有良好的理化特性和生物力学性能,有望成为较理想的组织工程软骨支架。

关键词：软骨丝素蛋白细胞外基质取向支架组织工程

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基于软骨细胞外基质的取向支架的制备及评价

华西口腔医学杂志 2017年第1期35卷 51-56页

作者：李坤赵艳红徐晨王连永杨强李洪发滕彬宏天津医科大学口腔医院正畸科天津300070 烟台市口腔医院正畸科烟台264000 南开大学生命科学学院生物活性材料教育部重点实验室天津300071 天津市天津医院脊柱外科天津300211

目的制备软骨细胞外基质(CECM)取向多孔支架,评价其理化特性及对脂肪干细胞(ADSCs)的相容性。方法切取新鲜猪关节软骨片,匀浆后离心筛选出直径50~500 nm左右的软骨纤维,经Triton X-100脱细胞后制备成浓度6%的CECM浆料,通过定向结晶和冷... 详细信息

目的制备软骨细胞外基质(CECM)取向多孔支架,评价其理化特性及对脂肪干细胞(ADSCs)的相容性。方法切取新鲜猪关节软骨片,匀浆后离心筛选出直径50~500 nm左右的软骨纤维,经Triton X-100脱细胞后制备成浓度6%的CECM浆料,通过定向结晶和冷冻干燥后交联即得CECM取向支架。对CECM取向支架的理化性能和细胞相容性进行评价。结果 CECM取向支架横断面为均匀的多孔网状结构,孔壁上密布软骨纤维,纵断面为垂直管状结构;支架呈苏木精-伊红红染,甲苯胺蓝、番红O、天狼星红染色均呈阳性;支架孔隙率、吸水率和纵向压缩弹性模量分别为95.455%±0.910%、95.889%±1.071%和(40.208±5.097)k Pa;ADSCs在支架上黏附和增殖,并均匀长入支架孔隙内。结论 CECM取向支架的成分与天然软骨相似,生物相容性良好,孔隙结构、孔径大小适于种子细胞黏附、增殖和长入,是一种比较理想的软骨组织工程支架。

关键词：软骨细胞外基质取向支架组织工程定向结晶冷冻干燥

软骨组织工程用羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠复合水凝胶的制备及体外评估

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软骨组织工程用羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠复合水凝胶的制备及体...

2018全国口腔生物医学学术年会

作者：赵艳红滕彬宏李云洁黄颖天津医科大学口腔医院

目的:优化羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠(CMCS/OSA)复合水凝胶制备工艺,并体外评估CMCS/OSA水凝胶应用于软骨组织工程支架的性能及可行性。材料与方法:利用羧甲基壳聚糖内的氨基与氧化海藻酸钠内的醛基所发生的席夫碱反应,以不同交联比例(...

目的:优化羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠(CMCS/OSA)复合水凝胶制备工艺,并体外评估CMCS/OSA水凝胶应用于软骨组织工程支架的性能及可行性。材料与方法:利用羧甲基壳聚糖内的氨基与氧化海藻酸钠内的醛基所发生的席夫碱反应,以不同交联比例(2:1、1:1、1:2)制备CMCS/OSA复合凝胶,通过扫描电镜、凝胶流变分析、体外溶胀率和降解率检测、软骨粘附性测试等方法评估不同交联度水凝胶的微观形态、理化性能,探究可以应用于软骨修复再生水凝胶材料的制备方

关键词：

来源： cnki会议评论

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厚板窄间隙焊接技术研究现状与应用进展

焊接学报 2024年第1期45卷 116-128,I0010页

作者：滕彬范成磊徐锴武鹏博聂鑫黄瑞生哈尔滨工业大学哈尔滨150001 中国机械总院集团哈尔滨焊接研究所有限公司哈尔滨150028

窄间隙焊接技术已经成为现代工业生产中厚板结构的首选技术,其技术和经济优势决定了它是今后厚板焊接技术发展的主要方向之一,近年来随着科技工作者的不断探索和研发,相继涌现了多种窄间隙焊接方法,文中对电弧焊、激光焊和激光-电弧复... 详细信息

窄间隙焊接技术已经成为现代工业生产中厚板结构的首选技术,其技术和经济优势决定了它是今后厚板焊接技术发展的主要方向之一,近年来随着科技工作者的不断探索和研发,相继涌现了多种窄间隙焊接方法,文中对电弧焊、激光焊和激光-电弧复合焊等窄间隙焊接制造技术进行了系统阐述,概述了不同热源窄间隙焊接制造过程中的焊接质量、焊接效率的影响因素,归纳了不同热源窄间隙焊的工艺特点及应用领域,结合国内外相关技术的发展现状,总结了窄间隙焊技术面临的问题,提出了后续的发展建议,为相关领域的科研工作者提供参考.

关键词：窄间隙焊电弧焊激光焊激光-电弧复合焊

西加盆地Cardium组薄砾岩储层水驱可行性分析

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东北石油大学学报 2024年第1期48卷 96-106,I0007,I0008页

作者：吴双滕彬彬项云飞陈桂菊陈志海中国石化石油勘探开发研究院北京102206

为明确西加盆地Cardium组Cardium A薄砾岩油藏水驱开发潜力,基于岩心观察、压汞及相渗实验、现场注水试验数据和油藏数值模拟等,划分储层类型,分析油藏水驱开发效果。结果表明:西加盆地Cardium组Cardium A薄砾岩储层类型可划分为Ⅰ类纯... 详细信息

为明确西加盆地Cardium组Cardium A薄砾岩油藏水驱开发潜力,基于岩心观察、压汞及相渗实验、现场注水试验数据和油藏数值模拟等,划分储层类型,分析油藏水驱开发效果。结果表明:西加盆地Cardium组Cardium A薄砾岩储层类型可划分为Ⅰ类纯净砾岩和Ⅱ类含杂质砾岩,油井产能受控于砾岩储层厚度和储层类型;砾岩储层非均质发育、平面岩相相变快,现场注水无法形成连片有效的水驱通道,油井动态响应呈快速水窜型和轻微受效型;水驱开发数值模拟显示温和注水方案的整体增油效果优于强化注水方案的,注水方案相比不注水方案轻微增油,Cardium A薄砾岩油藏的水驱增油可行性较低。该结果为其他同类型油藏注水开发提供参考。

关键词：西加盆地 Cardium组薄砾岩储层类型产能水驱

基于高分影像的城市黑臭水体遥感识别方法研究

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应用基础与工程科学学报 2024年第2期32卷 314-330页

作者：刘冰李天宏北京大学环境科学与工程学院北京100871 水沙科学教育部重点实验室北京100871

城市黑臭水体是一种极端的水污染现象,威胁人类的生产生活和水生态环境健康.利用遥感手段及时、准确地识别黑臭水体的时空分布,对掌握黑臭水体治理进展、推进水污染控制管理起着重要作用.以广州市为研究区域,基于黑臭水体和正常水体在... 详细信息

城市黑臭水体是一种极端的水污染现象,威胁人类的生产生活和水生态环境健康.利用遥感手段及时、准确地识别黑臭水体的时空分布,对掌握黑臭水体治理进展、推进水污染控制管理起着重要作用.以广州市为研究区域,基于黑臭水体和正常水体在高分影像上的光谱差异,构建了多个黑臭水体识别模型,并采用了一种自动阈值选取算法进行模型阈值的快速选取,进而进行了城市黑臭水体的遥感识别,探讨了影响识别精度的因素.研究结果表明,采用构建的模型识别黑臭水体总体精度最高可达96.8%;从黑臭水体识别的空间分布来看,该模型错分率较小,尤其在细小河涌中有较好的识别效果;地表水质数据和卫星影像的一致性误差、高分影像融合方法和混合像元的存在等可能是导致模型错误识别黑臭水体的原因.基于高分影像的黑臭水体识别模型和自动阈值选择方法可实现对城市黑臭水体的快速和高效识别,为黑臭水体治理和城市水环境精细管理提供有效支撑.

关键词：高分影像黑臭水体遥感识别遥感反射率自动阈值选取算法空间分布