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乌头汤通过lncRNANEAT1调控IRE1α/XBP1途径减轻软骨细胞内质网应激的作用

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中华中医药杂志 2024年第3期39卷 1238-1245页

作者：金灵璐涂海水谢新宇马德尊叶锦霞郑春松仲卫红付长龙福建中医药大学中西医结合研究院福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福州350122 福建省康复技术重点实验室福州350003 福建中医药大学附属康复医院福州350003

目的:探讨乌头汤通过lncRNA NEAT1调控IRE1α/XBP1途径减轻毒胡萝卜素(TG)诱导的软骨细胞内质网应激的作用与机制。方法:采用荧光原位杂交(FISH)检测25μmol/L TG诱导的软骨细胞中lncRNA NEAT1分布情况;构建lncRNA NEAT1沉默软骨细胞,Re... 详细信息

目的:探讨乌头汤通过lncRNA NEAT1调控IRE1α/XBP1途径减轻毒胡萝卜素(TG)诱导的软骨细胞内质网应激的作用与机制。方法:采用荧光原位杂交(FISH)检测25μmol/L TG诱导的软骨细胞中lncRNA NEAT1分布情况;构建lncRNA NEAT1沉默软骨细胞,Real-time PCR检测其IRE1α、XBP1 mRNA水平变化;Western Blot检测其IRE1α、XBP1蛋白表达。使用第一代软骨细胞进行后续实验,设置空白组(10%DMEM)、TG组(25μmol/L TG+10%DMEM)、乌头汤含药血清组(25μmol/L TG+不同浓度含药血清)。Real-time PCR检测TG诱导的软骨细胞中lncRNA NEAT1 mRNA水平变化;Western Blot检测TG诱导的软骨细胞中IRE1α、XBP1、EDEM1、CHOP蛋白表达。免疫荧光染色观察各组软骨细胞中IRE1α、Caspase-12的荧光表达量。流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率情况。结果:FISH结果显示,lncRNANEAT1主要分布于软骨细胞的胞核中。与TG+Lenti-control组比较,TG+sh-NEAT1组IRE1α、XBP1 mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。与TG组比较,乌头汤含药血清组lncRNA NEAT1水平及IRE1α、XBP1、EDEM1、CHOP蛋白表达显著降低(P<0.01),IRE1α、Caspase-12的荧光表达量显著降低(P<0.05),软骨细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。结论:乌头汤可通过lncRNA NEAT1调控IRE1α/XBP1途径减轻TG诱导的软骨细胞内质网应激,延缓软骨细胞退变。

关键词：骨关节炎乌头汤内质网应激软骨细胞 lncRNANEAT1

乌头汤调控IncRNA MALAT1/miR-124途径抑制软骨细胞焦亡的机制研究

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中医康复 2024年第8期1卷 9-15页

作者：林艳铭付长龙李宇涛涂海水陈悦仲卫红福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建中医药大学中医学院福建福州350122 福建中医药大学附属康复医院福建福州350003 福建省康复技术重点实验室福建福州350003

目的:探讨乌头汤是否通过调控Lnc RNA MALAT1/mi R-124途径抑制软骨细胞焦亡。方法:使用LPS(1μg/mL)24h+ATP(5.5mmol/L)4h诱导软骨细胞发生细胞焦亡反应;构建lncRNA MALAT1沉默细胞株;将软骨细胞随机分为空白对照组(Lenti-control组)... 详细信息

目的:探讨乌头汤是否通过调控Lnc RNA MALAT1/mi R-124途径抑制软骨细胞焦亡。方法:使用LPS(1μg/mL)24h+ATP(5.5mmol/L)4h诱导软骨细胞发生细胞焦亡反应;构建lncRNA MALAT1沉默细胞株;将软骨细胞随机分为空白对照组(Lenti-control组)、病毒沉默组(sh-MALAT1)、模型对照组(LPS+ATP+Lenti-control组)、模型沉默组(LPS+ATP+sh-MALAT1)。制备乌头汤含药血清,再将细胞再随机分为空白组、模型组(LPS+ATP)、乌头汤组(LPS+ATP+WTD含药血清)进行干预。Real-time PCR检测各组软骨细胞中的lncRNA MALAT1、miR-124基因水平变化;Western Blot检测各组软骨细胞中中NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白含量表达。结果:lncRNA MALAT1在LPS+ATP诱导的细胞焦亡软骨细胞核中表达增高。与空白对照组相比,模型沉默组中NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白含量下降(P<0.05),而与模型对照组相比,病毒沉默组中上述指标蛋白含量下降(P<0.05)。与模型组相比,乌头汤组中lncRNA MALAT1及上述指标表达降低(P<0.05),miRNA-124 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:乌头汤可通过调控lnc RNA MALAT1/miR-124途径抑制软骨细胞焦亡。

关键词：乌头汤 lncRNA MALAT1 miR-124 细胞焦亡软骨细胞

灵芝多糖改善类风湿关节炎病理进展的作用机制探析

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风湿病与关节炎 2024年第7期13卷 39-42,46页

作者：李超陆诗雨常善博林艳铭涂海水付长龙福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建中医药大学福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

类风湿关节炎是一种复杂疾病,其发病机制尚未完全阐明,治疗药物也随着发病机制的研究在不断的开发和探索中。近年来,天然药物在治疗类风湿关节炎中的研究取得了显著成就,如在抗炎、抗氧化、免疫调节、促凋亡、抑制血管生成等方面具有丰... 详细信息

类风湿关节炎是一种复杂疾病,其发病机制尚未完全阐明,治疗药物也随着发病机制的研究在不断的开发和探索中。近年来,天然药物在治疗类风湿关节炎中的研究取得了显著成就,如在抗炎、抗氧化、免疫调节、促凋亡、抑制血管生成等方面具有丰富的治疗靶点。灵芝多糖是从中药灵芝子实体中获取的最丰富的生物活性成分之一。依据现代药理学的研究,推测灵芝多糖可通过抑制血管生成、抑制氧化应激、抑制骨破坏、阻断炎症细胞因子的表达、调节免疫作用等途径干预类风湿关节炎病理进程,缓解病情。通过探讨灵芝多糖对类风湿关节炎的作用机制及潜在治疗靶点,以期为临床治疗类风湿关节炎提供理论依据。

关键词：类风湿关节炎灵芝多糖作用机制

中医药调控骨代谢防治强直性脊柱炎的研究进展

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风湿病与关节炎 2024年第2期13卷 57-60,71页

作者：郑桔蓉郑志煌涂海水林艳铭李超邱志伟付长龙福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建中医药大学福建福州350122

骨代谢紊乱在加剧强直性脊柱炎的病理进程中扮演了重要角色。强直性脊柱炎出现局部过度骨化的同时,存在全身骨量的流失,此外免疫及炎症反应也与骨代谢紊乱密切相关。通过检索国内外文献,对中医药维持强直性脊柱炎骨代谢平衡的分子学机... 详细信息

骨代谢紊乱在加剧强直性脊柱炎的病理进程中扮演了重要角色。强直性脊柱炎出现局部过度骨化的同时,存在全身骨量的流失,此外免疫及炎症反应也与骨代谢紊乱密切相关。通过检索国内外文献,对中医药维持强直性脊柱炎骨代谢平衡的分子学机制进行综述,认为中医药通过抑制强直性脊柱炎成骨相关的异位骨化,延缓强直性脊柱炎破骨相关的骨量流失,调节免疫及炎症反应维持强直性脊柱炎骨代谢平衡,发挥防治强直性脊柱炎的作用。

关键词：强直性脊柱炎骨代谢异位骨化骨量流失中医药研究进展综述

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牛磺熊去氧胆酸治疗骨关节炎的作用研究初探

风湿病与关节炎 2024年第8期13卷 54-57页

作者：林艳铭常善博李超陆诗雨王缤毅涂海水付长龙福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

近年来,骨关节炎的发病率逐年增高,但目前现有的医疗技术治疗骨关节炎仍然十分局限。牛磺熊去氧胆酸是一种天然存在的亲水性胆汁酸,具有两亲性、生物利用率高、高效低毒的优势。现有研究数据表明,牛磺熊去氧胆酸具有缓解内质网应激、促... 详细信息

近年来,骨关节炎的发病率逐年增高,但目前现有的医疗技术治疗骨关节炎仍然十分局限。牛磺熊去氧胆酸是一种天然存在的亲水性胆汁酸,具有两亲性、生物利用率高、高效低毒的优势。现有研究数据表明,牛磺熊去氧胆酸具有缓解内质网应激、促进软骨细胞增殖、抗炎、抗凋亡、降低细胞内胆固醇、增加膜流动性等作用,能改善软骨退化,延缓骨关节炎的发展。牛磺熊去氧胆酸有望将来可以作为一种有效或联合治疗的潜力药物,但其治疗骨关节炎的具体作用机制仍需进一步探讨。

关键词：骨关节炎牛磺熊去氧胆酸软骨细胞作用机制

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褪黑激素治疗骨关节炎的作用研究探析

风湿病与关节炎 2024年第2期13卷 48-51页

作者：林艳铭涂海水金灵璐叶锦霞黄艳峰马德尊付长龙福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建中医药大学福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

骨关节炎是一种常见的退行性全关节疾病,其发病机制为软骨细胞密度降低、细胞外基质合成与分解代谢失衡、异常炎症信号转导和过度氧化应激反应。褪黑激素及其衍生物是一种高效的自由基解毒剂和广谱抗氧化剂,具有抗氧化、抗炎症反应和抗... 详细信息

骨关节炎是一种常见的退行性全关节疾病,其发病机制为软骨细胞密度降低、细胞外基质合成与分解代谢失衡、异常炎症信号转导和过度氧化应激反应。褪黑激素及其衍生物是一种高效的自由基解毒剂和广谱抗氧化剂,具有抗氧化、抗炎症反应和抗衰老作用,通过调节多种分子信号,能够针对骨关节炎的发病机制发挥保护作用。总结褪黑激素介导其作用对骨关节炎发病机制的影响,旨在为褪黑激素临床治疗骨关节炎提供支持。

关键词：骨关节炎褪黑激素软骨细胞细胞外基质发病机制

狗脊多糖调控lncRNA NEAT1延缓椎间盘终板软骨细胞衰老的作用研究

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风湿病与关节炎 2024年第2期13卷 1-5页

作者：付长龙涂海水张文键陈毅涛陆诗雨李超金灵璐郑春松福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建中医药大学福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建中医药大学福建福州350122

目的:探讨狗脊多糖通过调节lncRNA NEAT1延缓椎间盘终板软骨细胞衰老的作用机制。方法:将15只C57BL/6小鼠的椎间盘终板软骨细胞进行体外培养;经10 ng·mL-1白细胞介素-1β(IL-1β)干预24 h诱导软骨细胞;将软骨细胞随机分为空白对照组、... 详细信息

目的:探讨狗脊多糖通过调节lncRNA NEAT1延缓椎间盘终板软骨细胞衰老的作用机制。方法:将15只C57BL/6小鼠的椎间盘终板软骨细胞进行体外培养;经10 ng·mL-1白细胞介素-1β(IL-1β)干预24 h诱导软骨细胞;将软骨细胞随机分为空白对照组、模型对照组(10 ng·mL-1IL-1β)和狗脊多糖各剂量组(100,200,400μg·mL-1);Real-time PCR及Western blot分别检测狗脊多糖对IL-1β诱导软骨细胞lncRNA NEAT1、衰老相关通路p53-p21中p53、p21水平及衰老相关分泌表型的基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、CollagenⅡ、Caspase-3蛋白表达情况;流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率情况。结果:Real-time PCR结果显示,经IL-1β诱导的椎间盘终板软骨细胞中lncRNA NEAT1、p21、p53水平显著增高;与模型对照组比较,狗脊多糖各剂量组lncRNA NEAT1、p21、p53水平显著降低;与空白对照组比较,经IL-1β诱导的椎间盘终板软骨细胞中MMP-13、Caspase-3蛋白表达含量显著增高,CollagenⅡ蛋白表达降低;经狗脊多糖干预后,可显著改善MMP-13、CollagenⅡ、Caspase-3蛋白表达;此外,与模型对照组比较,狗脊多糖各剂量组椎间盘终板软骨细胞凋亡率呈现下降趋势。结论:狗脊多糖通过调控lncRNA NEAT1影响p53、p21、MMP-13、CollagenⅡ、Caspase-3表达,降低软骨细胞凋亡率,进而延缓椎间盘终板软骨细胞衰老。

关键词：椎间盘退变狗脊多糖软骨细胞长链非编码RNA NEAT1 衰老小鼠

荣筋拈痛方调控lncRNA MGC-Mirg减轻骨关节炎软骨细胞内质网应激的作用

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中华中医药杂志 2023年第6期38卷 2561-2566页

作者：付长龙谢新宇邱志伟林晴金灵璐涂海水叶锦霞福建中医药大学中西医结合研究院福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福州350122

目的:探讨荣筋拈痛方调控lncRNA MGC-Mirg减轻骨关节炎(OA)软骨细胞内质网应激的作用与机制。方法:构建lncRNA MGC-Mirg沉默软骨细胞;采用荧光原位杂交实验检测25μmol/L毒胡萝卜素(T G)诱导的软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg的分布及表达;Re... 详细信息

目的:探讨荣筋拈痛方调控lncRNA MGC-Mirg减轻骨关节炎(OA)软骨细胞内质网应激的作用与机制。方法:构建lncRNA MGC-Mirg沉默软骨细胞;采用荧光原位杂交实验检测25μmol/L毒胡萝卜素(T G)诱导的软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg的分布及表达;Real-timePCR检测lncRNA MGC-Mirg沉默后的软骨细胞中EDEM1、Caspase-3 mRNA水平变化;使用第一代软骨细胞进行后续实验,设置空白组、模型组、荣筋拈痛方组,其中空白组予以含10%胎牛血清的DMEM培养;模型组先以25μmol/L TG干预4 h,再予以含10%胎牛血清的DMEM继续培养;荣筋拈痛方组先以25μmol/L TG干预4 h,再更换含300μg/mL的荣筋拈痛方继续培养12 h。采用Real-time PCR检测TG诱导的软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg、EDEM1、PERK、ATF4、BIP、GADD153、Caspase-3基因相对表达水平;流式细胞术检测软骨细胞凋亡率。结果:lncRNA MGCMirg主要分布于软骨细胞的胞质中,与对照组比较,模型组软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg相对拷贝数明显增多。与TG+sh-NC组比较,TG+sh-Mirg组EDEM1、Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg、EDEM1、PERK、ATF4、BIP、GADD153、Caspase-3 mRNA相对表达水平显著增高(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组lncRNA MGC-Mirg、EDEM1、PERK、ATF4、BIP、GADD153、Caspase-3 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。模型组软骨细胞凋亡率高于空白组和荣筋拈痛方组。结论:荣筋拈痛方可通过调控lncRNA MGC-Mirg,减轻OA软骨细胞内质网应激反应,延缓软骨细胞退变。

关键词：骨关节炎荣筋拈痛方内质网应激痹证软骨细胞 lncRNA MGC-Mirg

乌头汤对白细胞介素-1β诱导的退变软骨细胞外基质稳态的影响

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福建中医药 2023年第8期54卷 35-38页

作者：邱志伟付长龙李宇涛金灵璐涂海水仲卫红福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建中医药大学中医学院福建福州350122 福建中医药大学附属康复医院福建福州350003 福建省康复技术重点实验室福建福州350003

目的探讨乌头汤对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的退变软骨细胞外基质稳态的影响,为乌头汤的临床应用提供理论依据。方法选取4周龄SPF级雄性SD大鼠10只,5%异氟醚吸入麻醉后剔取大鼠双膝关节软骨,使用机械-酶消化法分离后培养软骨细胞,... 详细信息

目的探讨乌头汤对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的退变软骨细胞外基质稳态的影响,为乌头汤的临床应用提供理论依据。方法选取4周龄SPF级雄性SD大鼠10只,5%异氟醚吸入麻醉后剔取大鼠双膝关节软骨,使用机械-酶消化法分离后培养软骨细胞,并将软骨细胞随机分为空白组、模型组和乌头汤组。空白组使用含10%FBS的DMEM培养基进行培养;模型组采用10 ng/mL IL-1β溶液干预24 h复制退变软骨细胞模型;乌头汤组采用10 ng/mL IL-1β干预24 h后使用150μg/mL乌头汤水提物干预24 h。采用qPCR和Western blot检测3组软骨细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-4和ADAMTS-5的mRNA相对表达水平和蛋白表达量。结果与空白组比较,模型组中MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA相对表达水平和蛋白表达量均明显提高(P均<0.05);与模型组比较,乌头汤组MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA相对表达水平和蛋白表达量均明显降低(P均<0.05)。结论乌头汤通过抑制软骨细胞中MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4和ADAMTS-5的表达,来维持软骨细胞外基质稳态,延缓骨关节炎软骨退变。

关键词：骨关节炎乌头汤软骨细胞软骨细胞外基质