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抗人精子单克隆抗体HZ_4对人精子的作用

南京医科大学学报（自然科学版） 1994年第4期14卷 518-521页

作者：胡志刚周作民沙家豪

用人精子抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠制备抗人精子单克隆抗体。对其中ＨＺ４株进行抗生育作用测试。ＨＺ４使Ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ诱导的人精子顶体反应率由７３．３％降至２８．５％；使人精子仓鼠卵穿透率由２４％降至０；但对精子免疫制... 详细信息

用人精子抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠制备抗人精子单克隆抗体。对其中ＨＺ４株进行抗生育作用测试。ＨＺ４使Ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ诱导的人精子顶体反应率由７３．３％降至２８．５％；使人精子仓鼠卵穿透率由２４％降至０；但对精子免疫制动、精子顶体蛋白酶活性无影响。

关键词：精子单克隆抗体顶体反应穿卵试验人类

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抗精子抗体ELISA检测法及其应用

南京医学院学报 1992年第4期12卷 381-383页

作者：周作民沙家豪胡志刚张适南京医学院组织胚胎学教研室

建立了用精子可溶性抗原包被的ELISA法,检测了100例处女血清,均为阴性,17例有生育能力者和1000例不育患者血清的阳性率分别为5.9％和22％,抗体检出率符合国外多数学者的结果。重复性试验定性符合率达97％。表明用该法检测抗精子抗体具... 详细信息

建立了用精子可溶性抗原包被的ELISA法,检测了100例处女血清,均为阴性,17例有生育能力者和1000例不育患者血清的阳性率分别为5.9％和22％,抗体检出率符合国外多数学者的结果。重复性试验定性符合率达97％。表明用该法检测抗精子抗体具有敏感、特异、稳定等特点,可获较为满意的结果。

关键词：精子抗体 ELISA

表达人泛素样修饰子基因细胞株的构建及其鉴定

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南京医科大学学报（自然科学版） 2004年第4期24卷 332-334,350,F002页

作者：鲁可可朱虎胡艳秋袁娲周作民沙家豪李建民南京医科大学江苏省生殖医学重点实验室江苏南京210029

目的:构建人泛素样修饰子(hUBL)基因的逆转录病毒载体并转染293T细胞,以探讨其生物学功能。方法:将hUBL克隆到原核表达质粒PET28a中,构建重组质粒PET28a-hUBL,转化BL21菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用其纯化蛋白免疫小... 详细信息

目的:构建人泛素样修饰子(hUBL)基因的逆转录病毒载体并转染293T细胞,以探讨其生物学功能。方法:将hUBL克隆到原核表达质粒PET28a中,构建重组质粒PET28a-hUBL,转化BL21菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用其纯化蛋白免疫小鼠,获得多克隆抗体。重组蛋白用Western blot.鉴定。将hUBL基因克隆到逆转录病毒质粒中并转染293T细胞,用免疫组化染色法鉴定hUBL基因的表达。结果:hUBL在大肠杆菌中获得高效表达,并纯化了hUBL-PET28a的融合蛋白,以此为抗原制备了高效价的抗hUBL蛋白的小鼠多克隆抗体。免疫组化染色表明,hUBL重组逆转录质粒可在293T细胞中高效表达hUBL蛋白。结论:成功地构建了hUBL重组逆转录病毒载体,使得其在293T细胞中表达,获得稳定表达的细胞株。

关键词：人泛素样修饰子(hUBL) 基因克隆蛋白表达逆转录病毒载体 293T细胞

抗精子抗体对人精子表面ConA受体影响的研究

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男性学杂志 1993年第4期7卷 196-198页

作者：沙家豪周作民胡志刚张适南京医学院

本研究运用刀豆蛋白-A(ConA)-胶体金分子探针,对经兔抗人精子抗血清处理的正常人精子和免疫性不育患者的精子做分子水平的定位观察。结果表明,经兔抗人精子抗血清处理的精子和免疫性不育症患者的精子,其顶体反应的囊泡上和顶体后区胶体... 详细信息

本研究运用刀豆蛋白-A(ConA)-胶体金分子探针,对经兔抗人精子抗血清处理的正常人精子和免疫性不育患者的精子做分子水平的定位观察。结果表明,经兔抗人精子抗血清处理的精子和免疫性不育症患者的精子,其顶体反应的囊泡上和顶体后区胶体金的结合均明显低于正常,提示抗精子抗体能封闭精子顶体后区与卵细胞识别的位点,从而影响精子的受精能力。

关键词：人精子抗精子抗体 ConA受体胶体金

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人精子有效抗原的分析

男性学杂志 1993年第2期7卷 98-100页

作者：沙家豪周作民胡志刚张适南京医学院

本实验运用免疫性不育症患者血清和精浆中抗精子抗体对精子可溶性抗原的有效决定簇进行了SDS-PAGE和Westera Blot法的分析。结果表明:1.经反复冻融所提取的精子可溶性抗原具有较高的特异性。2.男性血清中抗精子抗体的靶抗原种类多于女性... 详细信息

本实验运用免疫性不育症患者血清和精浆中抗精子抗体对精子可溶性抗原的有效决定簇进行了SDS-PAGE和Westera Blot法的分析。结果表明:1.经反复冻融所提取的精子可溶性抗原具有较高的特异性。2.男性血清中抗精子抗体的靶抗原种类多于女性。3.精浆中抗精子抗体的靶抗原种类多于血清。4.精子抗原中58KD_a、69KD_a和91KD_a成份为抗精子抗体阳性的男性血清和精浆、女性血清共同识别的靶抗原。5.精子抗原中20KD_a成份可能是刺激男性生殖道淋巴组织产生与免疫不育有关抗体的特异性、功能性抗原。提示由于精子抗原对生殖道刺激产生抗体的方式、途径和部位不同,导致血清和精浆中抗精子抗体的克隆数不同。

关键词：人精子抗原抗人精子抗体 SDS-PAGE

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不液化精液的体外处理及其临床运用

男性学杂志 1991年第4期5卷 200-202页

作者：沙家豪周作民胡志刚张适南京医学院

运用BWW液洗涤不液化的精液,使精子从粘稠的精浆中释放出来,而提高精子的运动速度,在临床上已成功地用于配偶间的人工授精。洗涤前,精子前向运动速度和直线运动速度分别为25.83±7.02μm/s,29.20±8.49μm/s。洗涤后,二者分别为40.63±5... 详细信息

运用BWW液洗涤不液化的精液,使精子从粘稠的精浆中释放出来,而提高精子的运动速度,在临床上已成功地用于配偶间的人工授精。洗涤前,精子前向运动速度和直线运动速度分别为25.83±7.02μm/s,29.20±8.49μm/s。洗涤后,二者分别为40.63±5.80μm/s,43.23±6.91μm/s。我们认为本疗法步骤简单并能避免运用药物在体外处理中对精子的可能损伤。

关键词：不液化精液人工授精精子速度

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Ar13在精子变形过程中的功能研究

Ar13在精子变形过程中的功能研究

中国解剖学会第十一届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会

作者：黄晓燕祁玉娟周作民沙家豪南京医科大学组织学与胚胎学系生殖医学实验室

＜正＞精子变形（spemiogenesis）是一个复杂而又极其精确的生物学过程,包括细胞核浓缩、顶体形成、尾部形成、残余体丢失以及短暂出现的精子领结构（manchette）。而其中精子领的发育时相非常精确,形成于长形精子细胞早期,而当精子细...

＜正＞精子变形（spemiogenesis）是一个复杂而又极其精确的生物学过程,包括细胞核浓缩、顶体形成、尾部形成、残余体丢失以及短暂出现的精子领结构（manchette）。而其中精子领的发育时相非常精确,形成于长形精子细胞早期,而当精子细胞核浓缩和延伸完成时消失。研究表明,精子领如同一个"暂时的停靠码头",可以储存和运输一批与精子细胞核延伸以及精子尾部形成相关的重要蛋白。

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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精子发生基因的研究

生殖与避孕 1998年第2期18卷 67-70,86页

作者：周作民沙家豪南京医科大学组胚教研室南京210029

育龄夫妇中约有10%不能生育,其中一个重要的原因是男方生精障碍,表现为严重少精子(<200万/ml)或无精子,约占不育男子的10%.除输精管道梗阻、感染等病因外,遗传性状改变也是一重要因素.Tiepolo和Zuffardi等于1976年发现6例无精子症患者均... 详细信息

育龄夫妇中约有10%不能生育,其中一个重要的原因是男方生精障碍,表现为严重少精子(<200万/ml)或无精子,约占不育男子的10%.除输精管道梗阻、感染等病因外,遗传性状改变也是一重要因素.Tiepolo和Zuffardi等于1976年发现6例无精子症患者均有Y染色体长臂的缺失,包括远端的荧光区和与其相连的非荧光区,因此推测在Yq11上存在着“Y染色体精子生成基因”.由于许多男性无精症患者均有Yq11的异常,故将其称为“无精子因子”(azoospermia factor简称AZF)。

关键词：精子发生基因无精子症 AIF

Annexin A7在精原干细胞中的表达研究

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中华男科学杂志 2011年第6期17卷 516-522页

作者：于春梅张平王静刘明兮王晖周作民沙家豪南京医科大学江苏省生殖医学重点实验室江苏南京210029

目的:探讨Annexin A7在睾丸中的表达,尤其是在精原细胞各亚型中的分布。方法:采用原核表达法制备了Annexin A7的重组蛋白,质谱鉴定后用其吸附Annexin A7抗体,并用W estern印迹及免疫组化的方法检测了Annexin A7的表达。结果:研究发现Ann... 详细信息

目的:探讨Annexin A7在睾丸中的表达,尤其是在精原细胞各亚型中的分布。方法:采用原核表达法制备了Annexin A7的重组蛋白,质谱鉴定后用其吸附Annexin A7抗体,并用W estern印迹及免疫组化的方法检测了Annexin A7的表达。结果:研究发现Annexin A7于青春期前的小鼠睾丸中主要在精原细胞中表达,并有一定发育依赖性;在成年睾丸中主要表达于As及Apr精原细胞,且与分化型精原干细胞(SSCs)的分子标志Stra8的共表达也进一步证实上述结果。结论:Annexin A7是As及Apr精原干细胞的内在因子,可参与SSCs的生物学功能。

关键词： AnnexinA7 精原干细胞(SSCs) As精原细胞 Apr精原细胞