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Ⅰ型和Ⅲ型17β-羟甾脱氢酶在小鼠睾丸发生过程中的表达

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生殖与避孕 1997年第5期17卷 296-299页

作者：沙家豪 O'ShaughnessyPJ 南京医科大学组织胚胎教研室南京210029 DepartmentofVet.Physiology UniversityofGlasgowG611QHU.K.

17β-羟甾脱氢酶（17β-HSD）催化雄甾烯二酮转化成睾酮，已知Ⅰ型和Ⅲ型17β－HSD为催化还原反应的同功酶，本研究测定了小鼠胚胎期和出生后这二种还原型同功酶的mRNA水平。在胚胎期和刚出生的睾丸，Ⅰ型和Ⅲ型同功酶的mRNA均为高表达... 详细信息

17β-羟甾脱氢酶（17β-HSD）催化雄甾烯二酮转化成睾酮，已知Ⅰ型和Ⅲ型17β－HSD为催化还原反应的同功酶，本研究测定了小鼠胚胎期和出生后这二种还原型同功酶的mRNA水平。在胚胎期和刚出生的睾丸，Ⅰ型和Ⅲ型同功酶的mRNA均为高表达，出生后第5天为峰值，而后，二者的表达明显降低并持续到出生第30天，第30天起，Ⅲ型同功酶的表达明显增高。结果提示：在缺乏Ⅲ型同功酶而致的男性假二性畸型中，胚胎期Ⅰ型17β－HSD的表达可能与Wolffian管的分化有关。

关键词：睾丸 17β羟甾脱氢酶 mRNA

小鼠 Ⅲ 型 17β-羟甾脱氢酶的序列及其表达

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解剖学报 1997年第3期28卷 276-280页

作者：沙家豪 O'ShaughnesyPJ 南京医科大学组织学胚胎学教研室

１７β－羟甾脱氢酶（１７β－ＨＳＤ）催化１７－酮类固醇与１７β－羟类固醇相互转换。本研究从小鼠睾丸中纯化出小鼠Ⅲ型１７β－ＨＳＤ的ｃＤＮＡ克隆，最长的ｃＤＮＡ核苷酸数为１１３１，包含一个短的５′非编码序列、９１８个核... 详细信息

１７β－羟甾脱氢酶（１７β－ＨＳＤ）催化１７－酮类固醇与１７β－羟类固醇相互转换。本研究从小鼠睾丸中纯化出小鼠Ⅲ型１７β－ＨＳＤ的ｃＤＮＡ克隆，最长的ｃＤＮＡ核苷酸数为１１３１，包含一个短的５′非编码序列、９１８个核苷酸编码序列和１５５个核苷酸３′非编码序列；其起始密码子为ＡＴＧ，终止密码子为ＴＡＧ，开读框架编码为３０５个氨基酸的多肽。该研究为进一步了解１７β－ＨＳＤ的缺乏和性激素代谢的分子机理奠定了基础。

关键词：睾丸 Ⅲ型17β-HSD 序列分析 DNA 小鼠

原位RTPCR测定雄性幼鼠肾上腺中Ⅰ、Ⅲ型17β羟甾脱氢酶的表达

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解剖学报 2002年第1期33卷 102-104页

作者：祝辉林敏周作民沙家豪南京医科大学生殖医学江苏省重点实验室南京210029

目的　探讨生后 5d小鼠肾上腺X带细胞的功能及其与雄性性分化的关系。　方法　应用原位RT PCR技术分别测定 5d小鼠肾上腺中Ⅰ、Ⅲ两型 17βHSD的表达。　结果　在肾上腺皮、髓质交界的X带细胞中有Ⅰ、Ⅲ两型 17βHSD的表达。　结论　... 详细信息

目的　探讨生后 5d小鼠肾上腺X带细胞的功能及其与雄性性分化的关系。　方法　应用原位RT PCR技术分别测定 5d小鼠肾上腺中Ⅰ、Ⅲ两型 17βHSD的表达。　结果　在肾上腺皮、髓质交界的X带细胞中有Ⅰ、Ⅲ两型 17βHSD的表达。　结论　未成年小鼠肾上腺X带细胞能合成雄激素 ,并与睾丸合成的雄激素共同促进雄性性分化。

关键词：肾上腺 17β羟甾脱氢酶原位RT-PCR

半定量PCR比较正常小鼠和Tfm小鼠Leydig细胞17α－羟化酶mRNA的水平

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生殖与避孕 1996年第4期16卷 300-304页

作者：沙家豪周作民王黎熔林敏南京医科大学组胚教研室

本研究运用反转录合成ｃＤＮＡ和半定量ＰＣＲ的方法，测定了正常小鼠和Ｔｆｍ小鼠Ｌｅｙｄｉｇ细胞中１７α－羟化酶ｍＲＮＡ／β－肌动蛋白ｍＲＮＡ的比值，以比较二者睾丸Ｌｅｙｄｉｇ细胞中１７α－羟化酶ｍＲＮＡ的水平。结果显示... 详细信息

本研究运用反转录合成ｃＤＮＡ和半定量ＰＣＲ的方法，测定了正常小鼠和Ｔｆｍ小鼠Ｌｅｙｄｉｇ细胞中１７α－羟化酶ｍＲＮＡ／β－肌动蛋白ｍＲＮＡ的比值，以比较二者睾丸Ｌｅｙｄｉｇ细胞中１７α－羟化酶ｍＲＮＡ的水平。结果显示：１．正常小鼠Ｌｅｙｄｉｇ细胞的１７α－羟化酶和β－肌动蛋白ｃＤＮＡ的ＰＣＲ扩增指数期均在２８个循环时完成，Ｔｆｍ小鼠的β－肌动蛋白ｃＤ－ＮＡ的ＰＣＲ扩增指数期在２８个循环完成，而１７α－羟化酶ｃＤＮＡ的ＰＣＲ扩增指数期直至３２个循环仍没完成；２．在指数期时，正常小鼠Ｌｅｇｄｉｇ细胞中１７α－羟化酶ｃＤＮＡ／β－肌动蛋白ｃＤＮＡ为４．２８±０．８８，Ｔｆｍ小鼠为０．０７９±０．０４；正常小鼠１７α－羟化酶ｍＲＮＡ的水平高于Ｔｆｍ小鼠５４．１８倍。结果进一步证实Ｔｆｍ小鼠Ｌｅｙｄｉｇ细胞１７α－羟化酶ｍＲＮＡ水平低下是导致该酶活性降低的根本原因。

关键词： Tfm小鼠 Leydig细胞羟化酶 mRNA 聚合酶链反应

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人精子表面ConA受体在顶体反应中的改变

生殖与避孕 1993年第5期13卷 376-378页

作者：沙家豪周作民胡志刚张适南京医学院南京210029

运用胶体金标记的ConA 为分子探针,观察人精子表面ConA 受体在顶体反应中的改变。结果表明:1.人精子表面ConA 受体被一些大分子物质所掩盖,孵育前不被显示。2.孵育后人精子顶体后区质膜集聚ConA 受体,提示该区ConA 受体在精子与卵子识... 详细信息

运用胶体金标记的ConA 为分子探针,观察人精子表面ConA 受体在顶体反应中的改变。结果表明:1.人精子表面ConA 受体被一些大分子物质所掩盖,孵育前不被显示。2.孵育后人精子顶体后区质膜集聚ConA 受体,提示该区ConA 受体在精子与卵子识别的过程中起重要作用。

关键词：人精子 ConA受体胶体金

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线粒体DNA与人精子活力间的相关性分析

解剖学报 2000年第1期31卷 34-38页

作者：郑英周作民沙家豪扬州大学医学院组织学胚胎学教研室扬州225001 南京医科大学江苏省生殖医学重点实验室南京210029

目的　探讨线粒体 DNA与人精子活力间的关系。　方法　用长链 PCR技术 ,对 6 0例精子活力正常和 40例精子活力异常不育患者的精子线粒体 DNA(mt DNA)进行了多重缺失的分析。　结果　两组不育患者中共有 8例具有 m t DNA的多重缺失 (其... 详细信息

目的　探讨线粒体 DNA与人精子活力间的关系。　方法　用长链 PCR技术 ,对 6 0例精子活力正常和 40例精子活力异常不育患者的精子线粒体 DNA(mt DNA)进行了多重缺失的分析。　结果　两组不育患者中共有 8例具有 m t DNA的多重缺失 (其中精子活力正常不育患者 6名 ,精子活力异常不育患者 2名 ) ,但缺失型 mt D-NA(S5除外 )在总 mt DNA中所占比例很小 (0 .16 %～ 1.85 % ) ,1例精子活力正常的不育患者 (S5 )具有 2 .6 kb的缺失型 mt DNA,且缺失型 mt DNA占总 m t DNA的 91.0 2 % ,其序列分析发现 mt DNA编码区域大部分缺失。　结论　精子活力与 mt DNA的多重缺失间无相关性。

关键词：线粒体 DNA 精子活力长链聚合酶链反应

碳酸酐酶Ⅱ在人睾丸、精子中的表达及其临床意义

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中华男科学杂志 2010年第10期16卷 911-914页

作者：赵纯周作民沙家豪潘世扬南京医科大学第一附属医院医学检验科江苏南京210029 轲京医科大学生殖医学重点实验室江苏南京210029

目的:观察碳酸酐酶Ⅱ(CA2)在人睾丸、精子中的表达定位及比较CA2在生育男性和弱精子症患者精子中的表达差异。方法:通过免疫组化观察CA2在人睾丸中的定位;通过免疫荧光观察CA2在人精子中的定位;收集健康生育男性和弱精子症患者的精液标... 详细信息

目的:观察碳酸酐酶Ⅱ(CA2)在人睾丸、精子中的表达定位及比较CA2在生育男性和弱精子症患者精子中的表达差异。方法:通过免疫组化观察CA2在人睾丸中的定位;通过免疫荧光观察CA2在人精子中的定位;收集健康生育男性和弱精子症患者的精液标本各16份,60%Percoll分离精液标本,排除生精细胞和白细胞,采用Western印迹方法,从蛋白水平检测CA2的表达。结果:免疫组化结果显示CA2在人睾丸中特异性定位于长形精子的尾部;免疫荧光结果显示CA2在人精子的尾部有较强表达。Western印迹结果显示弱精子症患者精子中CA2的表达显著高于生育男性(1.84±0.32vs1.41±0.26,P<0.05)。结论:CA2在睾丸生精周期的长形精子阶段才表达,定位于精子的尾部。CA2在弱精子症患者精子中表达显著增高,提示其可能与精子活动力下降有关。

关键词：精子睾丸碳酸酐酶Ⅱ 弱精子症精子运动

成人睾丸中一种新的calpastatin同源蛋白的克隆和分析(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第5期23卷 68-72页

作者：朱虎周作民李建民祝辉成丽俊单玉喜尹岚岚沙家豪中国 210029 南京医科大学江苏省生殖医学重点实验室南京医科大学江苏省生殖医学重点实验室南京

目的:克隆人精子发生相关的基因.方法:使用人胚胎和成人睾丸cDNA探针与本室制作的人睾丸dDNA微阵列杂交,差异杂交的克隆进行序列测定和分析.结果:发现Calpastatin在睾丸中表达的一种新的同源蛋白,在睾丸中高度表达.结论:calpastatin在... 详细信息

目的:克隆人精子发生相关的基因.方法:使用人胚胎和成人睾丸cDNA探针与本室制作的人睾丸dDNA微阵列杂交,差异杂交的克隆进行序列测定和分析.结果:发现Calpastatin在睾丸中表达的一种新的同源蛋白,在睾丸中高度表达.结论:calpastatin在睾丸中是以一种新的同源蛋白形式表达,可能与精子发生相关.

关键词：睾丸氨基酸序列卡配因分子克隆对比研究人类信使RNA 核酸序列同源性

HSG2表达精子抗原在抗精子抗体检测中的应用

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生殖与避孕 1995年第3期15卷 229-230页

作者：周作民沙家豪胡志刚王黎熔林敏南京医科大学组胚教研室

ＨＳＧ２表达精子抗原在抗精子抗体检测中的应用周作民，沙家豪，胡志刚，王黎熔，林敏（南京医科大学组胚教研室，南京，２１００２９）抗精子抗体的研究对于免疫性不孕症的诊治和免应避孕疫苗的研究有着极其重要的意义。这一研究的首... 详细信息

ＨＳＧ２表达精子抗原在抗精子抗体检测中的应用周作民，沙家豪，胡志刚，王黎熔，林敏（南京医科大学组胚教研室，南京，２１００２９）抗精子抗体的研究对于免疫性不孕症的诊治和免应避孕疫苗的研究有着极其重要的意义。这一研究的首要前提是建立一个灵敏、准确的抗体检...

关键词：抗精子抗体检测精子抗原 HSG2