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铁蛋白示踪观察甘油开放血—迷路屏障的作用

中华耳鼻咽喉科杂志 1989年第2期24卷 70-71页

作者：葛贤锡沈云珍上海市第六人民医院耳鼻咽喉科

豚鼠15只,分成对照组、铁蛋白组和甘油铁蛋白组三组,甘油铁蛋白组用50%甘油3ml/kg在注射铁蛋白前30、60和120分钟静脉注射,分别取出血管纹组织,制作超薄切片、观察甘油开放血迷路屏障的作用。实验结果证明,甘油铁蛋白组在30分钟铁蛋白... 详细信息

豚鼠15只,分成对照组、铁蛋白组和甘油铁蛋白组三组,甘油铁蛋白组用50%甘油3ml/kg在注射铁蛋白前30、60和120分钟静脉注射,分别取出血管纹组织,制作超薄切片、观察甘油开放血迷路屏障的作用。实验结果证明,甘油铁蛋白组在30分钟铁蛋白进入纹血管内皮细胞,60分钟铁蛋白进入血管纹组织、聚集在线粒体周围,并随着小管系统走行到边缘细胞顶部,经细胞膜和细胞间连接向内淋巴腔扩散,120分钟可见铁蛋白颗粒在边缘细胞表面的内淋巴腔中,以上这些现象,说明甘油具有开放血-迷路屏障的作用。

关键词：血迷路屏障美尼尔氏病甘油

腺病毒通过不同径路导入豚鼠耳蜗后的实验观察

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2009年第13期23卷 607-609页

作者：韩朝迟放鲁杨娟梅李雯沈云珍高文元复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科上海200031 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院中心实验室第二军医大学生理教研室

目的:探讨经不同径路将腺病毒导入豚鼠耳蜗后,被感染耳蜗细胞的分布情况。方法:使用构建有EGFP指示基因的腺病毒分别通过圆窗入路进入外淋巴系统,耳蜗侧壁钻孔中阶入路进入内淋巴系统,耳蜗冷冻切片和组织铺片观察腺病毒感染耳蜗细胞的... 详细信息

目的:探讨经不同径路将腺病毒导入豚鼠耳蜗后,被感染耳蜗细胞的分布情况。方法:使用构建有EGFP指示基因的腺病毒分别通过圆窗入路进入外淋巴系统,耳蜗侧壁钻孔中阶入路进入内淋巴系统,耳蜗冷冻切片和组织铺片观察腺病毒感染耳蜗细胞的分布情况。结果:由圆窗入路进入外淋巴系统的腺病毒可以感染血管纹的Ⅰ型、Ⅳ型和Ⅴ型纤维细胞、螺旋唇上细胞、前庭膜细胞、Ronsensal孔内的螺旋神经元、前庭阶和鼓阶的上皮细胞,内外毛细胞和支持细胞不被感染;而耳蜗侧壁钻孔中阶入路进入内淋巴系统的腺病毒可以感染听器的支持细胞和血管纹缘细胞等。结论:腺病毒是一种有效的豚鼠耳蜗细胞转染载体,导入耳蜗后,可以将目的基因转染到耳蜗细胞内。通过不同径路将腺病毒导入外、内淋巴系统,耳蜗被感染的细胞范围不一致。仅注入外淋巴系统的腺病毒无法感染内淋巴系统内的细胞,只有将病毒导入内淋巴系统,耳蜗支持细胞才被感染。

关键词：腺病毒耳蜗豚鼠基因治疗

鼓阶电刺激后螺旋神经节神经元Na~＋－K~＋－ATP酶和耳蜗传出神经AChE实

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中华耳鼻咽喉科杂志 1994年第2期29卷 92-95页

作者：王正敏沈雁沈云珍上海医科大学眼耳鼻喉科医院

用０．１～１．０ｍＡ电流刺激卡那霉素致聋豚鼠耳蜗３小时。三个月后，经组织学处理用积分吸光度定量测定螺旋神经节神经元（ＳＧＮ）Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋－ＡＴＰ酶和耳蜗传出纤维乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）。实验结果表明０．１ｍＡ级可... 详细信息

用０．１～１．０ｍＡ电流刺激卡那霉素致聋豚鼠耳蜗３小时。三个月后，经组织学处理用积分吸光度定量测定螺旋神经节神经元（ＳＧＮ）Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋－ＡＴＰ酶和耳蜗传出纤维乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）。实验结果表明０．１ｍＡ级可增强上述酶的活性；０．４ｍＡ级酶活性无改变；１．０ｍＡ级可显著抑制酶的活性。认为０．１～０．４ｍＡ级电流对豚鼠耳蜗是安全临界域，在人工耳蜗植入电路设计时，有参考意义。

关键词：乙酰酯酶类神经纤维螺旋神经节

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手术显微镜所致视网膜光损伤

眼外伤职业眼病杂志 1989年第1期11卷 4-7页

作者：许时昭沈云珍陈黎莉上海市第六人民医院眼科

豚鼠32只,其中3只为对照组,双眼接受手术显微镜光照射30、60和100分钟后,视网膜有水肿,视网膜电图a和b波幅明显降低、峰时延长。病理组织学观察有视网膜色素上皮细胞肿胀、空泡形成,嗜碱性颗粒散在,光受体外节段排列紊乱。严重者内外核... 详细信息

豚鼠32只,其中3只为对照组,双眼接受手术显微镜光照射30、60和100分钟后,视网膜有水肿,视网膜电图a和b波幅明显降低、峰时延长。病理组织学观察有视网膜色素上皮细胞肿胀、空泡形成,嗜碱性颗粒散在,光受体外节段排列紊乱。严重者内外核层及神经节细胞变性、核固缩。实验结果提示手术显微镜光会导致视网膜光损伤,本文对视网膜光损伤的机制和预防进行了讨论。

关键词：光损伤手术显微镜视网膜损伤

新生大鼠耳蜗增殖细胞的培养鉴定及超微结构观察

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007年第1期42卷 42-47页

作者：江红群王正敏沈云珍李雯复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科上海200031

目的研究新生大鼠耳蜗内是否存在增殖细胞,以及该增殖细胞能分化为何种细胞。方法分离新生 SD 大鼠耳蜗细胞并进行培养,加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-demoxyuridine,BrdU)检测细胞的增殖状态,通过免疫荧光鉴定细胞球及分化细胞的性... 详细信息

目的研究新生大鼠耳蜗内是否存在增殖细胞,以及该增殖细胞能分化为何种细胞。方法分离新生 SD 大鼠耳蜗细胞并进行培养,加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-demoxyuridine,BrdU)检测细胞的增殖状态,通过免疫荧光鉴定细胞球及分化细胞的性质。分离48个耳蜗 Corti 器,采用数字表格法随机分成4组进行细胞培养:对照组、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)组、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)组和 EGF+bFGF 组,每组12个,定量计数单个耳蜗培养细胞球的数量,结果进行方差分析。采用透射和扫描电镜观察细胞球的超微结构。结果耳蜗 Corti 器细胞培养可见细胞球形成,90.1%球内细胞 BrdU 表达阳性,且大部分细胞巢蛋白表达阳性。分化细胞表达毛细胞标志物肌球蛋白7A、espin 及鬼笔环肽阳性,神经元标志物神经丝蛋白(neurofilament M,NF-M)表达阳性,并且可见肌球蛋白7A 和 BrdU,espin 和 BrdU,以及 NF-M和 BedU 双标阳性的分化细胞。对照绀平均(±s,以下同)每个耳蜗 Corti 器的增殖细胞数量为(45.3±23.0)个,EGF 组(86.2±34.1)个,bFGF 组(96.5±33.6)个,EGF+bFGF 组(131.2±47.0)个。除EGF 组和 bFGF 组之间 P>0.05外,其余各组之间 P 值均<0.05,差异具有统计学意义。扫描和透射电镜下细胞球内细胞呈网球形,大小均匀一致,表面具有众多微绒毛。胞质内有丰富的内质网、微管、微丝和线粒体等细胞骨架结构和细胞器,相邻细胞之间可见紧密连接、桥粒与缝隙连接。结论大鼠耳蜗内存在增殖细胞,可分化为具有纤毛样结构的毛细胞及神经元。EGF 和 bFGF 均可诱导增殖细胞分裂增殖。该增殖细胞的超微结构显示其具有早期幼稚细胞发育的特征。

关键词：毛细胞耳蜗细胞培养成纤维细胞生长因子碱性表皮生长因子

环氧乙烷消毒的明胶海绵对耳螺旋神经节细胞的毒性研究

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临床耳鼻咽喉科杂志 2003年第1期17卷 30-31页

作者：沈雁沈云珍王正敏陈念祖王东蕾复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科上海200031

目的 :研究并观察环氧乙烷消毒的明胶海绵对耳螺旋神经节细胞的毒性作用。方法 :用比色法测定明胶海绵的环氧乙烷残留量 ,通过透射电镜观察明胶海绵放置豚鼠听泡内 3个月后 ,耳蜗螺旋神经节细胞的超微结构变化。结果 :明胶海绵的环氧乙... 详细信息

目的 :研究并观察环氧乙烷消毒的明胶海绵对耳螺旋神经节细胞的毒性作用。方法 :用比色法测定明胶海绵的环氧乙烷残留量 ,通过透射电镜观察明胶海绵放置豚鼠听泡内 3个月后 ,耳蜗螺旋神经节细胞的超微结构变化。结果 :明胶海绵的环氧乙烷残留量平均为 4 38.32mg。螺旋神经节超微结构显示 :I型螺旋神经节细胞线粒体基质电子密度增大 ,嵴模糊不清 ,细胞质内出现空泡样结构。部分神经节细胞及其外周的卫星细胞溶解破坏 ,呈典型细胞死亡征象。卫星细胞髓鞘松解 ,出现空化。结论 :明胶海绵的环氧乙烷残留量高出国家标准约4 0倍。

关键词：环氧乙烷明胶海绵螺旋神经节细胞毒性研究

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出生后大鼠螺旋神经节神经元损伤的病理变化

复旦学报（医学版） 2003年第2期30卷 103-106页

作者：朱雅颖李华伟王正敏沈云珍复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻喉科上海200031

目的　证实出生后第 2周大鼠螺旋神经节神经元对耳毒性药物敏感。方法　选用出生后 7dSD大鼠36只 ,连续 14d肌注新霉素 ,每天 15 0mg/kg ,分别于停药后 1、7、14、2 8d、3月和 6月各处死 6只。取平行蜗轴的超薄切片 ,透射电镜下观察底... 详细信息

目的　证实出生后第 2周大鼠螺旋神经节神经元对耳毒性药物敏感。方法　选用出生后 7dSD大鼠36只 ,连续 14d肌注新霉素 ,每天 15 0mg/kg ,分别于停药后 1、7、14、2 8d、3月和 6月各处死 6只。取平行蜗轴的超薄切片 ,透射电镜下观察底回、中回螺旋神经节神经元。结果　大鼠螺旋神经节神经元变性继发于毛细胞和支持结构的损伤 ;停药 1d组存在细胞凋亡现象 ;损伤早期神经元发育延迟 ,损伤晚期神经元由成熟向未分化型改变。结论　出生后第 2周是大鼠螺旋神经节神经元发育的重要阶段。

关键词：螺旋神经节神经元损伤出生后第二周药物敏感性病理学氨基甙类抗生素动物实验

蒸压釜快速冷却热能回收(简称快冷节能装置)

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蒸压釜快速冷却热能回收(简称快冷节能装置)

CCPA预制混凝土桩分会和中国硅酸盐学会钢筋混凝土制品专业委员会2013-2014年度年会暨学术交流会

作者：周刚沈云珍江苏省常州市常力锅炉制造安装有限公司江苏省常州市万象化工机械有限公司

近年来,蒸压釜在各个行业被广泛使用,特别是用蒸压釜生产新型建材的企业,在数量和规模上快速增长。根据现场调查,现有的用蒸压釜生产新型建材的生产工艺比较陈旧,普遍存在的问题是:将倒汽后的釜内剩余蒸汽、冷凝水向外排放,造成热能大...

近年来,蒸压釜在各个行业被广泛使用,特别是用蒸压釜生产新型建材的企业,在数量和规模上快速增长。根据现场调查,现有的用蒸压釜生产新型建材的生产工艺比较陈旧,普遍存在的问题是:将倒汽后的釜内剩余蒸汽、冷凝水向外排放,造成热能大量浪费和环境污染。在加气混凝土完成蒸压养护后的排汽开门过程中,采用本设计方案,在不影响产品质量的前提下,实现了快速无声排汽、加气混凝土的冷却,并将剩余热量得以充分利用,从而达到可控化生产,大大提高蒸压釜开门的的安全性,工效性,改善了生产环境,实施最佳化的节能增效,并

关键词：

来源： cnki会议评论

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嗅球摘除后嗅觉神经元凋亡的实验研究

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2006年第4期41卷 297-300页

作者：顾瑜蓉李华伟张重华沈云珍复旦大学眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科上海200031

目的研究凋亡是否参与嗅上皮正常生理更替和嗅球摘除后嗅觉神经元死亡而后再生的过程,探讨凋亡与神经元再生的关系。方法应用原位末端标记法和透射电镜观察正常成年大鼠以及摘除嗅球后大鼠嗅上皮16、32、48 h和3、7、30 d时凋亡的出现... 详细信息

目的研究凋亡是否参与嗅上皮正常生理更替和嗅球摘除后嗅觉神经元死亡而后再生的过程,探讨凋亡与神经元再生的关系。方法应用原位末端标记法和透射电镜观察正常成年大鼠以及摘除嗅球后大鼠嗅上皮16、32、48 h和3、7、30 d时凋亡的出现和改变情况。结果正常成年大鼠嗅上皮中有末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(TUNEL)的阳性细胞(1.93±0.31)个/200μm。摘除嗅球后TUNEL阳性细胞数增加,32 h达峰值(90.9±18.03)个/200μm,以后迅速下降,维持于低水平。透射电镜下见嗅球摘除术后嗅觉神经元出现胞质浓缩、胞核染色质边聚等细胞凋亡的特征性超微结构改变。尚可见少量胞质内出现自噬泡以及除线粒体以外的细胞器扩张,但胞核正常的嗅觉神经元。结论凋亡参与成年大鼠嗅觉神经元生理性更替以及实验性嗅觉神经元死亡和再生的过程。此外,尚存在自噬型和胞质型神经元死亡。

关键词：嗅觉受体神经元脱噬作用原位缺口末端标记