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利用CRISPRa技术提高乳酸克鲁维酵母凝乳酶分泌表达

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湖北大学学报（自然科学版） 2025年第1期47卷 84-90页

作者：邓宇慧王世清郑艳丽武汉轻工大学生命科学与技术学院湖北武汉430023

乳酸克鲁维酵母因其可靠的食品安全性被广泛应用于工业酶制剂生产,利用高通量的基因调控技术,如基于CRISPR-dCas9的基因表达激活平台(CRISPR activation,CRISPRa)是进一步促进酶制剂产量提高的最有效方法。本研究将激活因子VPR和LAC9分... 详细信息

乳酸克鲁维酵母因其可靠的食品安全性被广泛应用于工业酶制剂生产,利用高通量的基因调控技术,如基于CRISPR-dCas9的基因表达激活平台(CRISPR activation,CRISPRa)是进一步促进酶制剂产量提高的最有效方法。本研究将激活因子VPR和LAC9分别与dCas9融合,针对P_(LAC4)启动子上游区域序列设计gRNA,引导dCas9-激活因子融合蛋白对其进行特异性结合,促进RNA聚合酶在该区域的聚集,驱动受P_(LAC4)启动子调控的凝乳酶表达。结果显示,dCas9-VPR与dCas9-LAC9的融合形式可分别将凝乳酶表达量提高1.67倍和1.65倍。本研究为利用乳酸克鲁维酵母进行工业酶制剂生产提供了有效的工具。

关键词：乳酸克鲁维酵母 CRISPR-dCas9 LAC9激活因子 VPR激活因子凝乳酶

公物利用权的性质、功能及实现路径——基于基本权利功能理论的分析

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城市问题 2016年第8期 89-96,104页

作者：汪秋慧苏州大学王健法学院

公物利用权具有防御权功能、受益权功能和客观价值秩序功能等基本权利功能。公物利用权的上述功能常因行政主体的公物管理行为的失范而频遇困境。在现实生活中,行政主体的滥用职权的行为和怠于履行公物给付职责的行为,会导致下列后果的... 详细信息

公物利用权具有防御权功能、受益权功能和客观价值秩序功能等基本权利功能。公物利用权的上述功能常因行政主体的公物管理行为的失范而频遇困境。在现实生活中,行政主体的滥用职权的行为和怠于履行公物给付职责的行为,会导致下列后果的产生:公物利用权的防御权功能面临困境;公物利用权的受益权功能面临困境;公物利用权的客观价值秩序功能面临困境。在分析了公物利用权的性质及诸功能的基础上,提出了实现公物利用权诸功能的路径。

关键词：公物利用权基本权利功能实现路径

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技术引进促进自主创新的条件性研究

中国经济问题 2011年第5期 88-98页

作者：千慧雄南京大学南京210093

本文探讨了技术引进的"生产效应"、"学习效应"和"扩散效应"对自主创新的影响,并引入市场规模、市场结构、产品差异、研发能力等变量,系统地研究技术引进促进自主创新的条件。研究表明:技术引进对自主创新是抑制还是促进,关键取决于"生... 详细信息

本文探讨了技术引进的"生产效应"、"学习效应"和"扩散效应"对自主创新的影响,并引入市场规模、市场结构、产品差异、研发能力等变量,系统地研究技术引进促进自主创新的条件。研究表明:技术引进对自主创新是抑制还是促进,关键取决于"生产效应"、"学习效应"之和与"扩散效应"的力量对比;产品差异起着"防火墙"的作用;市场规模、研发能力等变量可以改变技术引进促进自主研发的临界市场结构。

关键词：技术引进自主创新生产效应学习效应扩散效应

智能手机媒介照片的存在形态：以“秒懂”的概念为例

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南京艺术学院学报（美术与设计） 2019年第5期 176-184页

作者：边千慧南京艺术学院设计学院

作为现代社会人们日常生存必需的信息触角和不可分割的媒介假肢,智能手机对于摄影媒介的高度推崇、紧密融合与再造,使得手机使用者个人被深度裹挟入特定的信息形式、感知模式和互动行为中。本文以“秒懂百科”词条的视频文案分析为切入... 详细信息

作为现代社会人们日常生存必需的信息触角和不可分割的媒介假肢,智能手机对于摄影媒介的高度推崇、紧密融合与再造,使得手机使用者个人被深度裹挟入特定的信息形式、感知模式和互动行为中。本文以“秒懂百科”词条的视频文案分析为切入点,以手机照片为观察对象,探讨“秒懂”作为手机媒介信息的一个核心概念,如何从媒介功能、视觉呈现和文化暗示这三个方面由浅入深地影响了作为信息数据使用的手机照片的存在形态,以及这些海量的、秒懂式的手机照片如何构筑了当下生活独特的媒介现实。

关键词：秒懂信息媒介视觉形态时效文化情境

新精活物质乙卡西酮红外和拉曼光谱的理论与实验研究

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原子与分子物理学报 2025年第5期42卷 43-49页

作者：王树栋王椰欧阳佳慧张琳郑璇张艳贵州警察学院实验中心贵阳550000 贵州警察学院刑事技术系贵阳550000 贵州警察学院侦查系贵阳550000

基于密度泛函理论,在B3LYP/6-311++G(d,p)水平对新精神活性物质乙卡西酮进行结构优化,并在相同水平计算了其拉曼光谱和红外光谱.使用标准样品,实验测定了乙卡西酮的拉曼光谱和红外光谱,实验结果与理论计算非常吻合.势能分布(Potential e... 详细信息

基于密度泛函理论,在B3LYP/6-311++G(d,p)水平对新精神活性物质乙卡西酮进行结构优化,并在相同水平计算了其拉曼光谱和红外光谱.使用标准样品,实验测定了乙卡西酮的拉曼光谱和红外光谱,实验结果与理论计算非常吻合.势能分布(Potential energy distribution,PED)分析对谱峰进行了归属,实验和理论研究对照表明,乙卡西酮的拉曼特征峰为1001、1599、1694、2891、2936和3071 cm-1;红外吸收特征峰为698、1694、2734和2934 cm-1.研究发现,乙卡西酮苯环结构、C=O对拉曼光谱和红外光谱影响较为明显,而拉曼光谱结合红外光谱将更加有助于卡西酮类物质的鉴定,取代基团对光谱的贡献是区分卡西酮类物质的关键.本研究提供了乙卡西酮的拉曼光谱和红外光谱,并对其进行了归属,研究将对乙卡西酮及其它卡西酮类物质的光谱法快速鉴定提供重要借鉴和参考.

关键词：新精活物质乙卡西酮拉曼光谱红外光谱

普通烟草PYL基因家族成员鉴定及干旱胁迫下基因表达分析

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核农学报 2025年第1期39卷 47-58页

作者：扈佳慧徐腾航刘杰王雨果刘红峰王世泽余世洲王丰贵州大学农学院贵州贵阳550025 贵州省烟草科学研究院贵州贵阳550081 河北科技师范学院农学与生物科技学院河北秦皇岛066004 贵州省烟草公司贵阳市公司贵州贵阳550001

PYR/PYL/RCAR(PYL)蛋白作为脱落酸(ABA)的直接受体,在ABA信号转导途径中发挥着关键调控作用。为探究PYL基因在烟草中的系统发育和表达模式,本研究利用生物信息学手段在普通烟草品种K326全基因组范围内进行了鉴定分析,并利用实时荧光定量... 详细信息

PYR/PYL/RCAR(PYL)蛋白作为脱落酸(ABA)的直接受体,在ABA信号转导途径中发挥着关键调控作用。为探究PYL基因在烟草中的系统发育和表达模式,本研究利用生物信息学手段在普通烟草品种K326全基因组范围内进行了鉴定分析,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了各基因在遭受干旱胁迫0、1、3、6、12、24、36和48 h的基因表达量。结果共鉴定到26个烟草PYL基因,依据系统发育和结构特点可划分为3个亚家族(Ⅰ~Ⅲ),成员数目分别为9、11和6。蛋白理化性质分析结果表明,所有烟草PYL蛋白都呈亲水性,氨基酸长度在173~586 aa之间,相对分子量在16 763.26~65 709.39 Da之间,等电点(pI)在4.73~9.05之间。顺式作用元件分析结果发现,烟草PYL基因启动子区含有MYB、NAC、WARKY、TCP、ZF-HD等逆境胁迫响应相关元件。基因表达结果显示,烟草PYL基因在遭受干旱胁迫后,除NtPYL8、NtPYL9、NtPYL17和NtPYL21基因外、其余基因表达量整体表现为上调趋势,但各亚家族成员间基因表达具有明显差异。其中亚家族Ⅱ中NtPYL1、NtPYL2、NtPYL4基因和亚家族Ⅲ中NtPYL25基因在遭受干旱胁迫6~12 h后基因表达量达到最高,且相对表达量较0 h上升显著,可作为烟草应答干旱胁迫的重要候选基因。本研究为进一步开展烟草候选抗旱PYL基因功能研究及育种利用奠定了基础。

关键词：烟草 PYL家族干旱胁迫基因表达分析脱落酸

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专家门诊汪学慧

汽车维修与保养 2017年第10期 44-45页

作者：汪学慧

Q：我是一家“平行进口车行”的维修人员，最近在出售一辆进口的新“赛纳”轿车时，发生了一件事情。在客户提车前准备帮客户洗车时，车辆刚起步准备开到洗车处时，就慢慢熄火了，一检查是新车没有汽油。

关键词：门诊专家维修人员进口车洗车客户轿车车辆

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学慧:福特金牛座空调异响的诊断方法

汽车维修与保养 2022年第8期 18-19页

作者：汪学慧深圳市消费者委员会

一辆2014款的福特金牛座,D568车型,行驶里程超过150000km。夏季以来感到空调不够冷,同时伴有轻微的“咯咯”异响声。即使长时间开空调,出风口吹出的也完全是热风,甚至比自然风还要热。检修时检查空调各管道和压缩机的接头,没有发现有泄... 详细信息

一辆2014款的福特金牛座,D568车型,行驶里程超过150000km。夏季以来感到空调不够冷,同时伴有轻微的“咯咯”异响声。即使长时间开空调,出风口吹出的也完全是热风,甚至比自然风还要热。检修时检查空调各管道和压缩机的接头,没有发现有泄漏油渍的情况,车辆头部的冷凝器外观清洁。查看得知,该车并没有发生过任何交通事故,底盘也没有碰撞的痕迹。将发动机转速提升到2000r/min以上,开启空调时观察电磁离合器,能正常吸合,维修技师用IDS检测仪进行诊断,从空调系统中没有调出任何故障码。此车故障应如何检修呢?请老师指导!

关键词：交通事故故障码检测仪电磁离合器行驶里程异响空调系统维修技师

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汪学慧专家门诊

汽车维修与保养 2023年第11期 30-30,32页

作者：汪学慧深圳市消费者委员会

停车场记忆泊车(VPA)功能详解Q一辆小鹏事故车,其因停车不当造成左后侧刮碰事故。在交流中车主称,听说记忆泊车功能可以十分安全可靠地停稳车辆,因此想具体了解此功能。我想请教老师,记忆泊车功能有何作用?该如何设定“记忆泊车”?谢谢... 详细信息

停车场记忆泊车(VPA)功能详解Q一辆小鹏事故车,其因停车不当造成左后侧刮碰事故。在交流中车主称,听说记忆泊车功能可以十分安全可靠地停稳车辆,因此想具体了解此功能。我想请教老师,记忆泊车功能有何作用?该如何设定“记忆泊车”?谢谢老师!

关键词：事故车停车场泊车车辆记忆安全可靠车主

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