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抑制自噬增强盐酸阿霉素诱导的人结直肠癌细胞凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第3期38卷 237-243页

作者：汤弘婷吴道秋杨瀚林杨娟张艺李梦醒刘虹麟李琴山贵州医科大学医学检验学院临床生物化学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院血液科贵州贵阳550004 北京中日友好医院临床医学研究所北京100000 贵州省产前诊断中心贵州贵阳550004

目的探讨盐酸阿霉素(DOX)抑制结直肠癌HT29、 HCT15细胞增殖的可能机制。方法 HT29、 HCT15细胞采用(0、 0.08、 0.16、 0.32、 0.64、 1.28)μmol/L DOX处理24、 48、 72 h,CCK-8法检测细胞增殖活性确定DOX最佳处理浓度和处理时间。将... 详细信息

目的探讨盐酸阿霉素(DOX)抑制结直肠癌HT29、 HCT15细胞增殖的可能机制。方法 HT29、 HCT15细胞采用(0、 0.08、 0.16、 0.32、 0.64、 1.28)μmol/L DOX处理24、 48、 72 h,CCK-8法检测细胞增殖活性确定DOX最佳处理浓度和处理时间。将HT29、 HCT15细胞分别设为对照组(只加DMSO处理)和(0.16、 0.32、 0.64、 1.28)μmol/LDOX处理组,Western blot法检测抑制自噬对凋亡的影响时添加3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、 3-MA联合DOX组。集落形成实验检测结直肠癌细胞的集落形成能力,Western blot法检测细胞B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)、 beclin 1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)的蛋白表达。结果 DOX抑制结直肠癌细胞的增殖和集落形成,促进细胞发生凋亡,呈浓度依赖性;DOX促进细胞发生自噬,beclin 1和LC3Ⅱ表达增加,呈浓度依赖性;抑制自噬后可增加DOX对结直肠癌细胞的促凋亡作用。结论 DOX抑制结直肠癌细胞增殖并促进其凋亡且抑制自噬有促凋亡作用。

关键词：结直肠癌(CRC) 盐酸阿霉素(DOX) 细胞凋亡自噬

沉默MKRN1基因表达对人胚胎肾细胞HEK-293T增殖及凋亡的影响

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中国组织工程研究 2023年第24期27卷 3838-3844页

作者：张艺吴道秋汤弘婷李梦醒刘虹麟陈忠良李琴山贵州医科大学医学检验学院临床生物化学教研室贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院血液科贵州省贵阳市550004 北京中日友好医院临床医学研究所北京市100000 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院贵州省产前诊断中心贵州省贵阳市550004

背景:研究报道敲低MKRN1可以抑制肿瘤细胞的生长,但MKRN1是否作为肿瘤相关蛋白在机体发挥作用还需进一步研究。由于siRNA介导的基因沉默是瞬时表达,持续时间短且常规慢病毒技术存在脱靶效应,利用四环素调控(Tet-on)慢病毒系统构建稳定沉... 详细信息

背景:研究报道敲低MKRN1可以抑制肿瘤细胞的生长,但MKRN1是否作为肿瘤相关蛋白在机体发挥作用还需进一步研究。由于siRNA介导的基因沉默是瞬时表达,持续时间短且常规慢病毒技术存在脱靶效应,利用四环素调控(Tet-on)慢病毒系统构建稳定沉默MKRN1基因的细胞系有着可逆的优势,且可规避上述缺点,对于深入研究MKRN1的生物学功能有重要的意义。目的:构建Tet-on慢病毒系统介导的MKRN1基因沉默载体,研究沉默MKRN1基因表达对人胚胎肾细胞HEK-293T增殖、凋亡的影响。方法:采用RNAi技术,针对MKRN1基因设计3条shRNA(命名为sh1,sh2,sh3),将3条shRNA序列连入四环素诱导表达载体pTripz中验证连入序列;通过三质粒系统转染HEK-293T细胞,并用含有1 mg/L强力霉素的完全培养基培养,进行慢病毒包装,收取48 h及72 h病毒液,将其浓缩后感染HEK-293T细胞,感染48 h后用荧光显微镜观察病毒感染效率。通过实时荧光定量PCR、Western blot检测MKRN1的敲减效率;Western blot检测四环素诱导表达系统是否构建成功;通过集落形成实验及Western blot检测沉默MKRN1表达后对HEK-293T细胞增殖、凋亡能力的影响。结果与结论:(1)设计的3条MKRN1-短发夹RNA(sh1、sh2、sh3),均成功连入Tet-on载体,且各组载体序列正确;通过慢病毒成功感染HEK-293T细胞;(2)实时荧光定量PCR及Western blot检测发现3条shRNA序列中1号序列敲低MKRN1水平明显降低(P<0.05),且沉默组不加入强力霉素诱导后目的基因的表达得到回复;(3)集落形成实验发现沉默MKRN1后HEK-293T细胞增殖能力下降(P<0.05);Western blot检测敲低MKRN1后,增殖细胞核抗原表达下调,细胞凋亡相关指标BAX表达增加,Bcl2表达下调,Bcl2/BAX的比值下调(P<0.001);(4)结论:采用Tet-on慢病毒载体系统构建了稳定沉默MKRN1的HEK-293T细胞株,且沉默MKRN1后能够抑制HEK-293T细胞的增殖,并促进其凋亡。通过构建稳定沉默MKRN1的HEK-293T细胞可为进一步研究MKRN1的生物学功能奠定基础,也为研究其他基因的生物学功能提供一个方法学上的参考。

关键词： MKRN1基因四环素诱导调控表达系统基因表达调控慢病毒

甲磺酸阿帕替尼通过p53抑制结肠癌细胞HCT116增殖的作用及机制

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天津医药 2020年第9期48卷 807-812页

作者：杨瀚林汤弘婷杨娟刘虹麟李梦醒李琴山贵州医科大学医学检验学院 550004 中日友好医院临床医学研究所贵州医科大学附属医院血液科贵州省产前诊断中心

目的探讨阿帕替尼对人结肠癌细胞HCT116及敲除野生型p53的HCT116细胞抑制作用的差异并探讨其机制。方法以0、15、30、60μmol/L阿帕替尼处理HCT116 p53^+/+、HCT116 p53^-/-细胞24、48 h,以CCK-8法检测阿帕替尼对两株细胞增殖的抑制作用... 详细信息

目的探讨阿帕替尼对人结肠癌细胞HCT116及敲除野生型p53的HCT116细胞抑制作用的差异并探讨其机制。方法以0、15、30、60μmol/L阿帕替尼处理HCT116 p53^+/+、HCT116 p53^-/-细胞24、48 h,以CCK-8法检测阿帕替尼对两株细胞增殖的抑制作用;流式细胞术(Annexin V/PI法)检测0、15、30μmol/L阿帕替尼处理细胞24 h后凋亡率变化;实时荧光定量PCR法和Western blot法检测0、15、30μmol/L阿帕替尼处理细胞24 h后,p53、NF-κB p65、Caspase-3 mRNA和蛋白表达变化。结果CCK-8结果显示,阿帕替尼能抑制HCT116 p53^+/+、HCT116 p53^-/-细胞的增殖,抑制作用具有剂量依赖性(P<0.01)。流式细胞术结果显示,阿帕替尼干预后,HCT116 p53^+/+、HCT116 p53^-/-细胞凋亡率升高(P<0.01)。与HCT116 p53^+/+细胞相比,阿帕替尼处理后HCT116 p53^-/-细胞的凋亡率较低(P<0.05)。阿帕替尼处理后,HCT116 p53^+/+、HCT116 p53^-/-细胞中p53、NF-κB p65、capsase-3 mRNA和Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。阿帕替尼干预后,HCT116 p53^+/+细胞中p53、NF-κB p65蛋白表达下调而HCT116 p53^-/-细胞中NF-κB p65蛋白表达上调(P<0.01)。结论阿帕替尼可能通过p53/NF-κB通路抑制HCT116 p53^+/+、HCT116 p53^-/-细胞增殖并促进细胞凋亡,结肠癌细胞可能通过野生型p53对阿帕替尼产生耐药。

关键词：结肠肿瘤 HCT116细胞基因,p53 NF-κB 转录因子RelA 细胞增殖细胞凋亡阿帕替尼

IL-12单克隆抗体对克罗恩病模型小鼠Th1/Th2免疫平衡的调节作用

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中华医院感染学杂志 2020年第4期30卷 497-502页

作者：杨娟杨国珍杨瀚林汤弘婷王海燕杨梅邓荣李琴山贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院贵州省产前诊断中心贵州贵阳550004 贵阳市妇幼保健院贵州贵阳550001 毕节市中医院心内科贵州毕节551700 毕节市第一人民医院眼科贵州毕节551700

目的研究白细胞介素-12(IL-12)单克隆抗体对克罗恩病模型小鼠辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)免疫平衡的调节作用。方法选择BALB/c健康小鼠30只,将30只小鼠分为正常对照组(10只)和实验小鼠(20只),实验组小鼠做克罗恩病模型,建模成... 详细信息

目的研究白细胞介素-12(IL-12)单克隆抗体对克罗恩病模型小鼠辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)免疫平衡的调节作用。方法选择BALB/c健康小鼠30只,将30只小鼠分为正常对照组(10只)和实验小鼠(20只),实验组小鼠做克罗恩病模型,建模成功后将实验组小鼠分为克罗恩病组和IL-12单克隆抗体组各10只,IL-12单抗组小鼠腹腔注射IL-12单抗(25 mg/kg),正常对照组和克罗恩病组小鼠腹腔注射0.2 ml的生理盐水。处理4周后,对三组小鼠疾病活动程度、结肠重量、结肠长度进行评价,使用酶联免疫吸附试验法检测三组小鼠结肠组织中Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-8和Th2型细胞因子IL-4、IL-10及IL-12、IL-23表达水平。结果克罗恩病组小鼠疾病活动程度评分、结肠组织中Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-12、IL-23分别为(4.12±0.23)分、(563.49±21.36)ng/ml、(120.69±6.69)ng/L、(43.73±3.58)ng/ml、(179.68±4.26)ng/ml、(148.69±6.58)ng/L、(762.58±26.58)pg/ml高于IL-12单克隆抗体组(1.62±0.17)分、(472.59±15.64)ng/ml、(106.25±3.27)ng/L、(37.62±2.16)ng/ml、(163.57±3.12)ng/ml、(98.67±5.12)ng/L、(412.68±16.98)pg/ml)和对照组,而结肠重量/长度为(42.36±3.16)mg/cm大于IL-12单克隆抗体组(33.59±2.07)mg/cm)和对照组小鼠;结肠组织中Th2型细胞因子IL-4、IL-10为(55.27±1.62)pg/ml、(90.27±3.68)pg/ml低于IL-12单克隆抗体组(61.27±2.21)pg/ml、(98.67±1.68)pg/ml)和对照组(P<0.05)。结论IL-12单克隆抗体通过改善Th1型细胞因子、Th2型细胞因子的异常表达,对Th1/Th2免疫平衡进行调节,进而抑制克罗恩病的炎症反应,起到治疗的效果。

关键词：白细胞介素-12单克隆抗体克罗恩病小鼠模型 Th1型细胞因子 Th2型细胞因子

受活字印刷启发的可用于信息存储的自愈合荧光液晶弹性体

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Science China Materials 2024年第1期67卷 355-362页

作者：高京京丛晓阳汤玉婷郭金宝 Key Laboratory of Carbon Fibers and Functional Polymers Ministry of EducationCollege of Materials Science and EngineeringBeijing University of Chemical TechnologyBeijing 100029China

信息存储材料的发展在信息社会的进步中起着关键作用.然而,在光寻址记录信息时,通常每次记录信息都需要更换不同的掩模,这在实际应用中极为不便.本文受活字印刷术的启发,开发了一种可作为信息存储和记录介质的自愈合荧光液晶弹性体.该... 详细信息

信息存储材料的发展在信息社会的进步中起着关键作用.然而,在光寻址记录信息时,通常每次记录信息都需要更换不同的掩模,这在实际应用中极为不便.本文受活字印刷术的启发,开发了一种可作为信息存储和记录介质的自愈合荧光液晶弹性体.该薄膜在温和的加热条件下经由简单的两阶段胺-丙烯酸酯aza-Michael反应制备而成.由于α-氰基取代二芳基乙烯荧光分子的光异构化,液晶弹性体薄膜表现出光可调的荧光特性.同时,动态硼酸酯键的引入使其具备了优异的自愈合和可重构形状性能.以上述荧光液晶弹性体薄膜作为存储介质,概念验证性地展示了活字印刷驱动的信息记录,该方法避免了重复更换光掩膜,并延长了存储材料的使用寿命.这项工作为开发易于使用的、可大面积制备的信息存储材料提供了有益的启示.

关键词：信息存储存储材料液晶弹性体存储介质记录介质信息记录自愈合光异构化

供应链数字化对企业创新的影响——来自中国上市公司的经验证据

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科技进步与对策 2024年第11期41卷 67-78页

作者：吴炜鹏陈金龙赵晓阳汤弘钦华侨大学工商管理学院福建泉州362021

供应链数字化是促进供应链创新链融合发展的契机。基于2008—2021年中国A股上市公司数据,采用TF-IDF方法系统构建市场导向和技术导向下的组织内供应链数字化指标,实证检验供应链数字化对企业创新的影响。结果发现,第一,供应链数字化与... 详细信息

供应链数字化是促进供应链创新链融合发展的契机。基于2008—2021年中国A股上市公司数据,采用TF-IDF方法系统构建市场导向和技术导向下的组织内供应链数字化指标,实证检验供应链数字化对企业创新的影响。结果发现,第一,供应链数字化与企业创新呈现倒U型关系。其中,分项指标物流数字化、产品流数字化与信息流数字化呈现显著倒U型关系。第二,供应链异质性是供应链数字化影响企业创新的重要渠道。第三,在吸收能力较强、供应链话语权较小的企业,供应链数字化的作用更显著。此外,组织间供应链数字化发挥创新协同效应,行业间供应链数字化发挥创新溢出效应。结论可为企业加快供应链数字化并实现高质量发展提供实践启示。

关键词：供应链数字化企业创新供应链异质性 TF-IDF

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基于概念整合的江苏旅游景区隐喻现象分析

阜阳师范大学学报（社会科学版） 2024年第1期 47-54页

作者：汤月婷南京理工大学泰州科技学院外国语学院江苏泰州225300

概念结构的形成是概念隐喻进行映射的前提,相比概念隐喻单一的从源域向目标域映射的方式,概念整合理论提出了基于心智空间的多空间映射,即在双域映射之后概念要素进入类属空间进行相似性匹配,最终进入融合空间形成新创结构。这种更为动... 详细信息

概念结构的形成是概念隐喻进行映射的前提,相比概念隐喻单一的从源域向目标域映射的方式,概念整合理论提出了基于心智空间的多空间映射,即在双域映射之后概念要素进入类属空间进行相似性匹配,最终进入融合空间形成新创结构。这种更为动态全面的隐喻加工模式,对隐喻的产生机制有着更强的解释力。本文通过三个例证,分析了概念隐喻、意象隐喻和意象图式隐喻的概念整合机制,认为概念隐喻强调概念结构之间的映射,意象隐喻通过唤起心理表征突显不同意象的比较与映射,而意象图式隐喻基于图式结构及附带的逻辑关系构成隐喻意义。

关键词：概念整合隐喻认知机制

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预见性护理对血液透析患者低血压发生的影响

现代养生 2024年第6期24卷 438-441页

作者：汤娴婷江苏省苏州市中医医院血透室

目的观察分析预见性护理对血液透析患者低血压发生的影响。方法选取2020年11月-2021年11月医院收治的血液透析的患者98例作为研究对象，根据组间基线资料均衡可比原则，采用随机数字表法分为对照组和观察组，每组各49例。比较两组患... 详细信息

目的观察分析预见性护理对血液透析患者低血压发生的影响。方法选取2020年11月-2021年11月医院收治的血液透析的患者98例作为研究对象，根据组间基线资料均衡可比原则，采用随机数字表法分为对照组和观察组，每组各49例。比较两组患者低血压发生率、营养指标、焦虑自评量表（SAS）评分、抑郁自评量表（SDS）评分、护理满意度。结果采取预见性护理的观察组患者透析次数为5025次，低血压发生31例，发生率为0.62%，低于对照组的3.20%，差异有统计学意义（P0.05）；护理干预后，两组患者各项营养相关指标均升高，但观察组患者各项营养指标均高于对照组；两组患者SAS、SDS评分均下降，但观察组患者评分均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。实施预见性护理干预的观察组患者总满意度为97.96%，高于对照组的75.51%，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论对血液透析患者采用预见性护理干预，能够有效降低患者低血压发生率，改善患者营养状况，缓解焦虑抑郁情绪，有效提高患者总体满意度。

关键词：血液透析低血压预见性护理

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地铁车站减振墙的动力特性分析

噪声与振动控制 2024年第2期44卷 230-234页

作者：赵晨金浩夏瑞萌王智弘汤世龙同济大学道路与交通工程教育部重点实验室上海201804 东南大学交通学院南京211189 北京城建设计发展集团股份有限公司北京100037

为减少地铁列车运行产生的振动能量通过车站主体结构传播至地表,本文设计了一种车站减振墙。以雄安至北京大兴国际机场快线金融岛站为研究背景,通过在车站墙体内部设置由黏弹性材料构成的阻尼层形成减振墙,分析了列车荷载作用下减振墙... 详细信息

为减少地铁列车运行产生的振动能量通过车站主体结构传播至地表,本文设计了一种车站减振墙。以雄安至北京大兴国际机场快线金融岛站为研究背景,通过在车站墙体内部设置由黏弹性材料构成的阻尼层形成减振墙,分析了列车荷载作用下减振墙的减振效果。研究结果表明:列车荷载作用下,从时程结果来看,车站减振墙最大可使车站周围土体平均振动加速度幅值减小28.6%,振动加速度峰值减小31.9%;从频谱分析来看,车站周围土体振动加速度峰值降幅最大为66.1%,平均降幅为45.1%;对应1/3倍频程谱,采用减振设计后,最大可使土体中振动加速度级降低5.5 dB,降幅达8.4%。通过在车站主体结构墙内部设置由黏弹性材料构成的阻尼层进行减振设计,可有效减少列车振动能量在车站主体结构内的传播。

关键词：振动与波结构减振数值计算地铁车站