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乳酸菌素发酵菌种筛选、工艺优化及功能研究

乳酸菌素发酵菌种筛选、工艺优化及功能研究

作者：汤惠南昌大学

学位级别：硕士

嗜酸乳杆菌是机体肠道、生殖道内重要的益生菌之一,也是公认安全的食品微生物,具有诸多益生性能。由嗜酸乳杆菌发酵脱脂乳后干燥制成的乳酸菌素,具有调整肠道微生物平衡、恢复肠粘膜屏障的功能,属于OTC乙类非处方药,在临床上主要用于小... 详细信息

嗜酸乳杆菌是机体肠道、生殖道内重要的益生菌之一,也是公认安全的食品微生物,具有诸多益生性能。由嗜酸乳杆菌发酵脱脂乳后干燥制成的乳酸菌素,具有调整肠道微生物平衡、恢复肠粘膜屏障的功能,属于OTC乙类非处方药,在临床上主要用于小儿消化不良和腹泻等疾病,市场潜力巨大。本研究的目的是从健康动物肠道菌群中筛选出具有潜在益生作用的嗜酸乳杆菌,选出一株嗜酸乳杆菌发酵乳酸菌素并进行高密度培养和高活性菌剂制备技术研究,对制备的乳酸菌素进行品质分析并探究其对Caco-2细胞在脂多糖（LPS）刺激下产生炎症时的保护作用机制。具体的研究结果如下:（1）嗜酸乳杆菌的筛选:从16份健康猪粪便样本中分离的乳酸菌经过16S r DNA鉴定以及生理生化试验筛选出10株嗜酸乳杆菌,并在南昌大学食品科学与挖掘国家重点实验室乳酸菌资源库中保存。对10株嗜酸乳杆菌的产酸能力、抑菌活性、产短链脂肪酸能力和安全性进行测定,最终选择了综合性能最佳的NCUA065021进行后续试验。（2）嗜酸乳杆菌NCUA065021高活性菌剂制备的研究:基于单因素实验、Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验和中心组合设计实验确定了嗜酸乳杆菌NCUA065021的优化培养基配方为蔗糖3.169%、酵母粉1.5%、酪蛋白胨2%、柠檬酸三胺0.3%、磷酸氢二钾0.3%、无水乙酸钠0.3%、一水合硫酸锰0.02542%、碳酸钙0.6%,吐温-80 0.192%。最佳静态培养条件为培养温度37℃,初始p H6.5,接种量2%。最佳发酵罐工艺条件为转速50 rpm,注入N2,并利用自动反馈补料系统添加25%的氨水,p H保持为6.5。此时的活菌数最高可达5.32×10～9CFU/m L,为MRS培养基中活菌数的12.05倍。进一步确定最佳的冻干工艺参数为离心条件8000 rpm、10 min,10%谷氨酸钠为保护剂,菌体与冻干保护剂的比例为1:1,此时嗜酸乳杆菌NCUA065021的冻干存活率最高可达到86.03%,活菌数为1.17×1011CFU/g。（3）乳酸菌素发酵的工艺条件研究:通过单因素实验和正交设计实验确定最佳的乳酸菌素发酵条件,即脱脂乳添加量为24%,接种量为4‰,发酵温度为40℃,以及发酵时间为84 h。（4）乳酸菌素的营养成分和风味物质检测:乳酸菌素的总酸量、蛋白质含量、干燥失重为、脂肪重量都符合中华人民共和国卫生部药品标准的规定要求。乳酸菌素含有种类丰富的氨基酸和有机酸。发酵中后期氨基酸以及有机酸的含量均显著上升。在乳酸菌素的发酵过程中检测到了142种挥发性成分,从中筛选出投影值（VIP）>1的差异性代谢物质有22种。在未经发酵的样本中,醛酮类物质是主导风味的关键成分。发酵中期主导风味的物质主要是酯类、酮类和酸类。而在发酵后期,乙偶姻占据着主导地位,赋予了乳酸菌素浓郁的奶油香。在整个发酵过程当中,醛酮酯类始终扮演着至关重要的角色。（5）乳酸菌素抑制细胞炎症的机制研究:通过CCK-8法检测LPS和乳酸菌素浓度对Caco-2细胞增殖抑制效果,根据结果选择不影响细胞活力的浓度进行后续实验。设立空白对照组（Control）、模型组（LPS）、治疗组（ZT）、保护组（BT）、预防组（YT）来检测细胞上清液的LDH泄漏水平,表明经LPS诱导后细胞产生了炎症反应。乳酸菌素干预后细胞上清液的LDH含量有显著下降,表明其对LPS诱导的肠上皮细胞损伤具有保护作用。三个试验组均能有效地降低LPS导致的TEER值下降,表明乳酸菌素对LPS诱导的单层Caco-2细胞损伤模型具有保护作用。ELISA试验结果表明乳酸菌素干预可显著下调因LPS引起的促炎因子TNF-α和IL-6的表达量,显著上调抗炎因子IL-10的表达量。采用RT-q PCR进一步验证上述细胞炎症因子的变化以及检测Caco-2细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、JAM-1和Claudin-1的表达。三个试验组相对于模型组上调了IL-4和IL-10基因水平、显著下调TNF-α和IL-6基因,这些趋势与ELISA的实验结果一致。与对照组相比,三个试验组的四种紧密连接蛋白基因表达水平均有一定的上升,说明其都能有效地改善由LPS引发的紧密连接蛋白基因表达水平的下降。

关键词：嗜酸乳杆菌乳酸菌素菌剂肠道炎症

睾酮联合PSA衍生指标对前列腺癌的诊断价值

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睾酮联合PSA衍生指标对前列腺癌的诊断价值

作者：汤高文吉林大学

学位级别：硕士

目的:探讨血清睾酮(T)水平联合PSA衍生指标在TPSA4-10ng/ml及TPSA>10ng/ml时对前列腺癌的诊断价值。方法:回顾性研究自2021年9月至2023年12月于吉林大学第二医院泌尿外科行前列腺穿刺活检或者前列腺手术后取得病理结果的215名患者,收集... 详细信息

目的:探讨血清睾酮(T)水平联合PSA衍生指标在TPSA4-10ng/ml及TPSA>10ng/ml时对前列腺癌的诊断价值。方法:回顾性研究自2021年9月至2023年12月于吉林大学第二医院泌尿外科行前列腺穿刺活检或者前列腺手术后取得病理结果的215名患者,收集其术前PSA值、血清睾酮值、前列腺体积等临床数据,并根据相应公式计算PSAD、(F/T)/PSAD。根据TPSA将纳入研究的患者分为TPSA4-10ng/ml及TPSA>10ng/ml两组,再根据病理结果将各组中的患者分为前列腺癌组和非前列腺癌组。收集到的数据首先进行正态性检验,确定本研究采集的数据均为正态性分布;使用T检验比较组间数据的差异性;然后通过Logistic单因素及多因素回归分析影响前列腺癌发生的因素,并绘制单独指标和联合指标的受试者工作特征(ROC)曲线,利用ROC曲线下面积(AUC)来评估相关指标在前列腺患者诊断中的价值。结果:本研究共纳入215名患者,根据TPSA值将其分为两组,其中TPSA4-10ng/ml组101人,前列腺癌患者41人,非前列腺癌患者60人;TPSA>10ng/ml组114人,前列腺癌患者52人,非前列腺癌患者62人。将两组中患者的临床数据分别进行统计学分析,其中睾酮水平、前列腺体积、PSAD、(F/T)/PSAD均有统计学差别。进一步行Logistic单因素及多因素回归分析示血清睾酮水平、前列腺体积、PSAD、(F/T)/PSAD在这两组中与前列腺癌均具有相关性。应用这四种指标的数据绘制两组患者的受试者工作特征(ROC)曲线,在TPSA4-10ng/ml组中,曲线下面积分别为0.759、0.827、0.814、0.837,最佳截断点分别为341.246、69.00、0.139、1.435。TPSA>10ng/ml组中,曲线下面积分别为0.767、0.810、0.912、0.900,最佳截断点为338.142、65.00、0.310、0.438。进一步行统计学分析比较两组内各参数对前列腺癌的预测价值,在TPSA4-10ng/ml组中,四种临床指标两两比较P值均>0.05,说明TPSA在此区间时睾酮、前列腺体积、PSAD、(F/T)/PSAD对前列腺癌诊断效能基本一致。在TPSA>10ng/ml组中,PSAD与(F/T)/PSAD检验效能相当,并且优于前列腺体积和睾酮,而前列腺体积和睾酮的检验效能之间无差异。分别将这四种临床指标两两联合后共形成六种联合指标:睾酮联合前列腺体积、睾酮联合PSAD、睾酮联合(F/T)/PSAD、前列腺体积联合PSAD、前列腺体积联合(F/T)/PSAD以及PSAD联合(F/T)/PSAD,分别绘制这六种联合指标的ROC曲线并评估各联合指标对前列腺癌的诊断效能。在TPSA4-10ng/ml组中,六种指标曲线下面积分别为:0.873、0.890、0.899、0.826、0.872、0.856,六种指标两两比较P值均>0.05,表明这六种联合指标在TPSA4-10ng/ml时对前列腺癌的诊断效能并无明显差异。用相同的方法在TPSA>10ng/ml组绘制六种联合指标的ROC曲线,曲线下面积分别为:0.822、0.922、0.928、0.913、0.902、0.911,对比这六种指标的在此PSA区间对前列腺癌的诊断效能,结果显示睾酮联合(F/T)/PSAD这一指标的诊断效能最高,睾酮联合PSAD、前列腺体积联合PSAD、前列腺体积联合(F/T)/PSAD、PSAD联合(F/T)/PSAD这四种指标也具有较高的诊断效能并且它们之间无明显统计学差异,而它们都优于睾酮联合前列腺体积这一指标。结论:1.本次研究纳入的四种指标及联合指标对前列腺癌诊断均有一定临床指导意义。2.在PSA灰区即TPSA4-10ng/ml时,单一指标之间及联合指标之间对前列腺癌的诊断效能均未见差异。3.在TPSA>10ng/ml时,单一指标中PSAD及(F/T)/PSAD诊断效能更高,而在联合指标中,睾酮联合(F/T)/PSAD是本次研究中最优的指标。

关键词：睾酮 PSA衍生指标前列腺癌诊断效能

基于KE/Kano模型的瑶绣文化元素家具设计研究

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家具与室内装饰 2024年第08期 48-55页

作者：杨钦汤繁稀广东职业技术学院艺术设计学院顺德职业技术学院设计学院

家具作为日常生活中必不可缺的部分，在实用功能的基础上，还兼具了美化家居环境、改善生活品质和体现用户个性的作用。现代独居青年饲养宠物的现象增多，因此本研究融合了瑶族刺绣文化与现代年轻独居群体的生活习惯进行家具设计，旨在... 详细信息

家具作为日常生活中必不可缺的部分，在实用功能的基础上，还兼具了美化家居环境、改善生活品质和体现用户个性的作用。现代独居青年饲养宠物的现象增多，因此本研究融合了瑶族刺绣文化与现代年轻独居群体的生活习惯进行家具设计，旨在打造符合现代审美且适应养宠家庭环境的瑶绣文化元素沙发。通过整合KE与Kano模型，深入分析用户感性及功能需求，利用SPSS软件评价分析感性词汇，并将其映射到具体设计要素。同时，运用KJ法和Kano模型对用户需求进行分类和优先级排序。研究深入探索现代家具设计理念，推动家具设计向人性化和宠物友好型发展，以增强用户体验。此创新设计理念不仅提升了家具的艺术美感和实用性，还满足了养宠家庭的实际需求，为家具行业市场注入新的活力，促进产品创新与市场拓展。这一综合性研究方法及设计理念对现代家具设计具有重要的理论和实践意义。

关键词：现代家具设计独居青年瑶绣文化感性工学 Kano

国网YZ供电公司营销人员绩效考核体系优化研究

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国网YZ供电公司营销人员绩效考核体系优化研究

作者：汤月明扬州大学

学位级别：硕士

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城商行设立对企业全要素生产率的影响研究

城商行设立对企业全要素生产率的影响研究

作者：汤越扬州大学

学位级别：硕士

增强内地高校港澳青年学生国家认同的实践路径

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学校党建与思想教育 2024年第9期 63-66页

作者：汤杏林王军中国青年政治学院(中央团校) 北京100089 中央民族大学教育学院北京100081

国家认同内蕴文化认同、使命认同、制度认同、情感认同等结构要素。基于此,增强内地高校港澳青年学生国家认同,要多维度增强内地高校港澳青年学生的国家文化认同,加强历史文化教育,注重传统文化体验,推进语言交流与培训;全景式增强内地... 详细信息

国家认同内蕴文化认同、使命认同、制度认同、情感认同等结构要素。基于此,增强内地高校港澳青年学生国家认同,要多维度增强内地高校港澳青年学生的国家文化认同,加强历史文化教育,注重传统文化体验,推进语言交流与培训;全景式增强内地高校港澳青年学生的使命认同,提供定制化的教育资源,强化就业指导和服务,促进港澳青年融入国家发展大局;立体化增强内地高校港澳青年学生的制度认同,完善制度教育内容,运用新媒体做好制度宣传工作;递进式增强内地高校港澳青年学生的情感认同,强化他们热爱祖国的显性情感表达,注重具有国家象征意义的情感再现,组织彰显国家治理效能的情感实践。

关键词：高校港澳青年学生国家认同

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农村红色展馆建设浅议——以海盐县彭家堰纪念馆为例

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浙江档案 2024年第7期 56-57页

作者：汤储良海盐县档案馆(县史志研究室)

近年来，农村的红色档案文献资料陆续走向开放、走向现代化、走向社会，这是历史的必然选择。农村蕴含了丰富红色资源的一个重要领域。发挥农村地区各类红色档案文献资料的价值，收集、整理、挖掘并且展示运用各类红色主题党史资料，因... 详细信息

近年来，农村的红色档案文献资料陆续走向开放、走向现代化、走向社会，这是历史的必然选择。农村蕴含了丰富红色资源的一个重要领域。发挥农村地区各类红色档案文献资料的价值，收集、整理、挖掘并且展示运用各类红色主题党史资料，因地制宜建设一些场馆进行展陈，对于教育党员干部和广大青少年不忘党的历史、传承红色基因、永远听党话跟党走具有不可替代的作用。

关键词：农村地区党史纪念馆红色档案文献资料展示实证研究

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微米级厚度金属箔杯突成形极限研究

制造技术与机床 2024年

作者：汤秀佳张莹太原学院机电与车辆工程系山东建筑大学机电与车辆工程学院

304不锈钢应用在某些精密零件上时往往需要将材料超薄化处理，因此研究超薄304不锈钢金属箔的成形性能十分有意义。以微米级厚度的304不锈钢金属箔为研究材料，研究摩擦因数、厚度异向系数及压边力对30、60、100 μm这 3种厚度试件的成... 详细信息

304不锈钢应用在某些精密零件上时往往需要将材料超薄化处理，因此研究超薄304不锈钢金属箔的成形性能十分有意义。以微米级厚度的304不锈钢金属箔为研究材料，研究摩擦因数、厚度异向系数及压边力对30、60、100 μm这 3种厚度试件的成形性能的影响。通过拉伸试验获取3种不同厚度试件的力学参数，再利用所获得的力学参数输入至LS-DYNA有限元软件进行仿真，用杯突试验对仿真结果验证，两者具有一致性。通过有限元仿真研究试件成形性能的影响因素，结果表明摩擦因数越小、厚度异向系数越大、在一定范围内压边力越小试件成形性能越好。最后采用光刻法对超薄金属箔材料进行网格印制，并以60 μm厚度的试件为例进行成形极限图的绘制。

关键词：超薄金属箔 304不锈钢拉伸试验杯突试验 LS-DYNA 网格印制成形极限图

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数据知识产权登记的制度逻辑及完善

知识产权 2024年第3期 34-53页

作者：汤贞友国家知识产权局专利局专利审查协作广东中心华南理工大学

数据知识产权登记作为知识产权领域的新型财产登记制度,其制度逻辑亟待理论阐释与建构。数据知识产权登记试点应定性为公共服务行为,是对数据财产权益归属的确认,具有确认权益的基础功能,并衍生出证明、信息管理、公示的核心功能及促进... 详细信息

数据知识产权登记作为知识产权领域的新型财产登记制度,其制度逻辑亟待理论阐释与建构。数据知识产权登记试点应定性为公共服务行为,是对数据财产权益归属的确认,具有确认权益的基础功能,并衍生出证明、信息管理、公示的核心功能及促进数据产权形成的延伸功能。其登记对象应为合法合规获取、经过一定规则处理、具有实用价值和可公开性的数据集合,可从总体情况、物理特征和社会伦理特征进行标准化描述,对登记对象采取“形式审查+实质审查”的模式,未来宜赋予登记公示公信效力。数据知识产权登记试点应逐步实现制度的标准化,统一组织形式,从公共服务转向行政管理职能,以实现内部制度整合;在外部与数据交易所形成“产权登记+数据流通”的前后端机制。

关键词：数据知识产权登记数据产权登记功能制度结构数据登记机构

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