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卵巢切片制作方法体会

实用医技杂志 2017年第9期24卷 978-980页

作者：王蕾刘亚萍陈静汤仁仙徐州医科大学基础医学院 221004

目的比较2种固定液,块染和片染,苏木精-伊红(HE)染色和masson染色对家兔卵巢切片制作的影响。方法采用HE整块染色法、HE常规片染法、Masson三色染色法对家兔卵巢切片进行染色,镜检。结果投入Bouin液固定的卵巢组织比10%甲醛液中HE染色... 详细信息

目的比较2种固定液,块染和片染,苏木精-伊红(HE)染色和masson染色对家兔卵巢切片制作的影响。方法采用HE整块染色法、HE常规片染法、Masson三色染色法对家兔卵巢切片进行染色,镜检。结果投入Bouin液固定的卵巢组织比10%甲醛液中HE染色法的染色要亮丽,结构分明。结论 Bouin液对组织固定均匀且收缩较小,染色效果艳丽。

关键词：卵巢切片制作

TRAIL联合水飞蓟素对人肝癌Huh7细胞凋亡的影响

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免疫学杂志 2014年第6期30卷 562-565页

作者：徐志辉赵金金尤红娟胡磊罗文雅李向阳郑葵阳陈明汤仁仙徐州医学院病原生物学与免疫学教研室徐州医学院感染与免疫实验室 221004 徐州医学院附属医院感染科 221002

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合水飞蓟素(Sili)对人肝癌Huh7细胞凋亡的影响。方法 CCK8法检测细胞增殖抑制;分光光度法检测细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9相对活性;Western blot检测细胞表面死亡受体4(DR4)、... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合水飞蓟素(Sili)对人肝癌Huh7细胞凋亡的影响。方法 CCK8法检测细胞增殖抑制;分光光度法检测细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9相对活性;Western blot检测细胞表面死亡受体4(DR4)、死亡受体5(DR5)的表达。结果 Sili与TRAIL联合作用Huh7细胞后,联合用药组与对照组及单独用药组相比,Huh7细胞的增殖率明显下降;caspase-3、caspase-8、caspase-9的相对活性明显提高。Sili作用Huh7细胞后能明显提高DR4、DR5蛋白表达。结论 Sili可通过上调死亡受体DR4、DR5表达而促进TRAIL诱导的Huh7细胞凋亡,为肝细胞癌的临床治疗提供了新的思路和方法。

关键词： TRAIL 水飞蓟素肝细胞癌凋亡

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CIA大鼠滑膜成纤维细胞的原代培养及鉴定

免疫学杂志 2014年第12期30卷 1096-1099页

作者：秦苏萍李慧李小翠王晓天汤仁仙孙德旭徐州医学院病原生物学与免疫学教研室 221004 徐州医学院人体解剖学教研室 221004

目的建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞的培养方法并观察细胞生物学特点。方法收集CIA和正常大鼠的膝关节滑膜组织,采用组织块贴壁法培养滑膜成纤维细胞,观察细胞游出、生长情况;HE染色观察细胞... 详细信息

目的建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞的培养方法并观察细胞生物学特点。方法收集CIA和正常大鼠的膝关节滑膜组织,采用组织块贴壁法培养滑膜成纤维细胞,观察细胞游出、生长情况;HE染色观察细胞形态;免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Masson染色观察细胞分泌胶原蛋白情况;CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜及HE染色观察细胞形态及生长特征符合滑膜成纤维细胞,且98%以上的细胞表达Vimentin蛋白。模型组滑膜成纤维细胞较正常组细胞游出时间早且细胞量多;模型组细胞分泌胶原蛋白能力及细胞增殖能力较正常组强。结论本研究确立了CIA大鼠滑膜成纤维细胞原代培养体系,并且证实CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖与分泌功能较正常滑膜成纤维细胞强。

关键词：滑膜成纤维细胞原代培养关节炎

补体C5b-9抗血清对抗胸腺细胞血清性肾炎大鼠肾组织一氧化氮合成及其病变的影响

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中国病理生理杂志 2000年第9期16卷 805-808页

作者：王迎伟何球藻秦慧莲高丰光汤仁仙徐州医学院免疫教研室江苏徐州221002 上海医科大学免疫教研室上海200032

目的 :探讨抗鼠补体C5b - 9复合物抗血清对系膜增生性肾炎大鼠肾组织合成一氧化氮 (NO)及其病变的作用。方法 :复制大鼠系膜增生性肾小球肾炎即抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)模型 ,用抗大鼠C5b - 9复合物抗血清处理 ,观察其对ATSN大鼠NO... 详细信息

目的 :探讨抗鼠补体C5b - 9复合物抗血清对系膜增生性肾炎大鼠肾组织合成一氧化氮 (NO)及其病变的作用。方法 :复制大鼠系膜增生性肾小球肾炎即抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)模型 ,用抗大鼠C5b - 9复合物抗血清处理 ,观察其对ATSN大鼠NO相关指标及其病变的影响。结果 :抗鼠C5b - 9复合物抗血清既能减少ATSN大鼠肾组织诱生性NO合酶 (iNOS)mRNA的表达和大鼠尿液中硝酸盐 /亚硝酸盐 (NO-3 /NO-2 )排泄量 ,还能减低大鼠肾组织病变的程度。NOS抑制剂L -NAME也可降低尿NO-3 /NO-3 排泄量 ,同时减轻肾组织病变程度。结论 :抗鼠C5b -

关键词：肾小球肾炎一氧化氮大鼠补体C5b-9

Experimental Study on Prevention and Treatment of Rat Passive Hermann Nephritis (PHN) with Ligustrazine

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Journal of Nanjing Medical University 2003年第4期17卷 166-172页

作者：王迎伟汤仁仙董红燕南京医科大学微生物与免疫学系南京210029 徐州医学院免疫学教研室徐州医学院电镜室

Objective: To explore the effects of ligustrazine on proteinuria, serumcreati-nine, urinary thromboxane A_2(TxA_2), metabolism of prostacyclinI_2(PGI_2)―6-keto-PGF_(1α), and renal pathological changes of SD rats with passive Hermannnephritis (PHN). Methods: The PHN model was induced by intravenous injection of rabbit anti-ratrenal tubular epithelial antigen (Tub―Ag) an-tiserum to SD rats. I. P. administration ofligustrazine to rats was given every 2 d for 1 to 5 weeks. The proteinuria, creatinine, TxA_2 and6-keto-PGF_(1α) were measured by sulfosaticylic acid, picric acid, and direct radioimmunoassayrespectively. The renal pathological changes were observed under light microscope, electronicmicroscope and by direct immunofluorescence staining rabbit and rat IgG. Results: The PHN ratstreated with ligustrazine had significantly less proteinuria, serum creatinine, urinary TxA_2 andpathological changes of kidney, and more urinary 6-keto-PGF_(1α) than those without administrationof ligustrazine. Conclusion: Ligustrazine decreases proteinuria, urinary TxA_2, and renal tissueinjury and increases urinary 6-keto-PGF_(1α). These data indicate that ligustrazine may modulatethe balance of TxA_2 and PG I_2 in rat PHN model and can be used for preventing and treatingmembranous glomerulonephritis.

关键词： passive hermann nephritis ligustrazine thromboxane prostacyclin

以大创项目为抓手提高本科生科研创新能力的培养与实践

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继续医学教育 2022年第6期36卷 65-68页

作者：潘伟孙芬芬汤仁仙徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室/医学形态实验学分中心/国家级基础医学实验教学示范中心江苏徐州221004

大学生创新创业训练计划项目(简称“大创项目”),是教育部关于高校教学质量工程建设的重要举措。在全面深化高校创新创业教育改革的背景下,高校越来越重视在校本科生创新创业能力的培养。大创项目的实施,有助于高校转变教育思想观念,提... 详细信息

大学生创新创业训练计划项目(简称“大创项目”),是教育部关于高校教学质量工程建设的重要举措。在全面深化高校创新创业教育改革的背景下,高校越来越重视在校本科生创新创业能力的培养。大创项目的实施,有助于高校转变教育思想观念,提升教学水平和创新能力,改革人才培养模式,培养创新型国家建设需要的高水平创新人才。文章结合徐州医科大学大创项目实施过程,以大创项目为抓手,探讨本科生进行大创项目研究存在的问题,着力如何调动本科生的科研积极性、激发科研兴趣与热情,以及如何整合校内资源为本科生开展大创项目研究提供条件保障等问题提出应对措施,以进一步完善针对本科生科研创新能力的培养体系,切实提升本科生的创新实践能力,培养优良科研素养。

关键词：大学生本科生创新创业训练计划大创项目科研创新培养与实践

医学院校新任教师教学能力自我提升的方法探究

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继续医学教育 2020年第4期34卷 54-55页

作者：胡敏敏于倩汤仁仙徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004 徐州医科大学基础医学国家级实验教学示范中心江苏徐州221004

当前高等医学教育改革迅速推进,在此形势下,新任高校青年教师面临诸多挑战。一方面:教学经验不足,急需传统教学训练以迅速提升课堂讲授能力;另一方面:传统以单一课堂讲授为主的大课教学模式正逐步转换为以学生为中心,以自学能力培养为目... 详细信息

当前高等医学教育改革迅速推进,在此形势下,新任高校青年教师面临诸多挑战。一方面:教学经验不足,急需传统教学训练以迅速提升课堂讲授能力;另一方面:传统以单一课堂讲授为主的大课教学模式正逐步转换为以学生为中心,以自学能力培养为目的,以岗位胜任力为导向的混合式教学新模式,结合慕课、案例讨论、虚拟教学等多样化形式的混合式教学在医学高等院校正在逐步常态化。因此,医学院校新任教师自身如何利用社会、学校、同事等各方面资源迅速提升教学能力,适应教学模式的转化是一个重大挑战。

关键词：高等医学院校新任教师教学能力培养自我提升 PBL教学法 CBL教学法

霍乱毒素B亚单位对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响

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安徽医科大学学报 2019年第4期54卷 585-589页

作者：李向阳杨莹张励才颜超孔凡运郑葵阳汤仁仙徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室江苏省免疫与代谢重点实验室徐州221004 徐州医科大学麻醉学教研室江苏省麻醉学重点实验室徐州221004

目的探讨侧脑室注射霍乱毒素B亚单位(CTB)对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响。方法 C57雌性小鼠侧脑室注射CTB,运用流式细胞术检测外周血免疫细胞亚群变化;流式微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中细胞因子及趋化因子的变化。结果 CTB能够明... 详细信息

目的探讨侧脑室注射霍乱毒素B亚单位(CTB)对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响。方法 C57雌性小鼠侧脑室注射CTB,运用流式细胞术检测外周血免疫细胞亚群变化;流式微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中细胞因子及趋化因子的变化。结果 CTB能够明显升高单核巨噬细胞、CD4^+T细胞及B细胞的比例;炎症因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-9(IL-9)及趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、B淋巴细胞趋化因子(BLC)、γ干扰素诱导的单核因子(Mig)、调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)也相应升高。结论侧脑室注射CTB能够明显改变小鼠免疫应答状态。

关键词：霍乱毒素B亚单位趋化因子细胞因子

IL-18在大鼠抗肾小球基底膜肾炎凋亡中作用的研究

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中国免疫学杂志 2010年第6期26卷 562-566页

作者：汤仁仙秦苏萍张媛媛李向阳曾令宇郑葵阳徐州医学院病原生物与免疫学教研室徐州221002

目的:探讨IL-18在大鼠抗肾小球基底膜肾炎细胞凋亡中的作用。方法:复制大鼠抗GBM肾炎模型,分别于实验第2、7、14、21和28天,行以下处理:收集24小时尿、血清样本检测大鼠24小时尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量;取肾组织经光镜、电镜观察肾... 详细信息

目的:探讨IL-18在大鼠抗肾小球基底膜肾炎细胞凋亡中的作用。方法:复制大鼠抗GBM肾炎模型,分别于实验第2、7、14、21和28天,行以下处理:收集24小时尿、血清样本检测大鼠24小时尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量;取肾组织经光镜、电镜观察肾组织病理变化;采用TUNEL法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况;RT-PCR、免疫组织化学和Western blot法分别检测肾组织中IL-18、Fas mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,肾炎模型组24小时尿蛋白、血肌酐和血尿素氮含量均明显升高(P<0.01);光镜和电镜观察到肾小球内可见新月体形成、GBM不规则增厚、足突融合等病变;肾小球内凋亡细胞于第2天开始轻度增加,随后继续增加,于第28天有所减少,但仍维持较高水平;血清IL-18含量第2天开始升高,此后一直维持较高水平;肾组织中IL-18、Fas mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01);且肾炎模型组血清、肾组织IL-18表达与Fas表达均呈正相关(P<0.01)。结论:IL-18在大鼠抗GBM肾炎凋亡中发挥重要的促进作用。

关键词： IL-18 抗肾小球基底膜肾炎 Fas 细胞凋亡