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基于网络药理学及实验验证探究黄连-厚朴药对抗幽门螺杆菌感染的作用机制

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中国现代应用药学 2024年第17期 2328-2337页

作者：毛宁锋卢必超周姝含肖骁黄超群张新悦张思依吕文亮湖北中医药大学中医学院湖北中医药大学中医药实验中心湖北省中医院

目的基于网络药理学及实验验证的方法探究黄连-厚朴药对抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的作用机制。方法利用TCMSP数据库筛选出黄连、厚朴的主要活性成分以及作用靶点，通过Drugbank、 Genecards、DisGeNET数据库筛选出Hp... 详细信息

目的基于网络药理学及实验验证的方法探究黄连-厚朴药对抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的作用机制。方法利用TCMSP数据库筛选出黄连、厚朴的主要活性成分以及作用靶点，通过Drugbank、 Genecards、DisGeNET数据库筛选出Hp感染的相关靶点，采用Cytoscape 3.7.2软件构建药物-成分-潜在靶点网络图。利用String数据库构建蛋白互作网络，筛选出核心靶点。借助Metascape数据库对交集靶点进行GO和KEGG的富集分析。通过Autodock Vina 1.1.2软件对黄连-厚朴药对的主要活性成分和对应的关键靶点进行分子对接。最后通过体外抑菌试验验证黄连-厚朴的抑菌效力，动物实验采用ELISA及Western blotting对大鼠胃黏膜相关炎症因子及蛋白进行验证。结果黄连和厚朴主要活性成分23种，作用靶点185个，与疾病交集靶点73个，核心成分为槲皮素、小檗碱、厚朴酚、和厚朴酚等，核心作用靶点为TP53、IL-6、VEGFA、TNF、AKT1。富集分析结果显示黄连-厚朴药对抗Hp感染主要涉及TNF信号通路、IL-17信号通路、Toll样受体信号通路、C型凝集素受体信号通路。分子对接显示，槲皮素、小檗碱、厚朴酚、和厚朴酚与核心靶点TP53、IL-6、VEGFA、TNF、AKT1均具有较好的结合活性。体外抑菌试验发现黄连-厚朴药对的抑菌圈与克拉霉素相近，最小抑菌浓度为31.3 mg·mL-1，其具有较强的体外抑菌效果；动物实验结果显示，与模型组相比，黄连-厚朴组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量显著下降(P<0.05或P<0.01)，同时黄连-厚朴组中P53、AKT1、TNF-α蛋白表达均明显下降趋势(P<0.05)。结论本研究证实了黄连-厚朴药对抗Hp感染多成分、多靶点、多途径的作用机制，主要是通过抑制细菌生长、参与炎症反应、细胞迁移和增殖等途径来发挥其效用，为黄连-厚朴药对抗Hp感染的机制研究提供依据。

关键词：黄连厚朴幽门螺杆菌感染网络药理学体外抑菌动物实验

连朴饮加味方对多重耐药Hp感染诱导人GES-1细胞凋亡及炎症抑制的影响

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时珍国医国药 2024年

作者：黄超群吕文亮苏成霞许丹胡运莲毛宁锋周姝含张新悦张洋湖北省中医院湖北中医药大学附属医院中医肝肾研究及应用湖北省重点实验室武汉市中医医院湖北中医药大学疫病研究所湖北中医药大学中医临床学院武汉中西医结合骨科医院(武汉体育学院附属医院)

目的探讨连朴饮加味方(以下简称连朴饮方)抑制多重耐药幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞凋亡及炎症的关系,旨在阐明连朴饮方治疗耐药Hp胃炎的作用机制。方法实验分为空白组、模型组、连朴饮组、四联... 详细信息

目的探讨连朴饮加味方(以下简称连朴饮方)抑制多重耐药幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞凋亡及炎症的关系,旨在阐明连朴饮方治疗耐药Hp胃炎的作用机制。方法实验分为空白组、模型组、连朴饮组、四联疗法组(阿莫西林+呋喃唑酮+雷贝拉唑+枸橼酸铋钾)、联合疗法组(连朴饮+四联药物),除空白组外,其余各组均体外接种耐药Hp建立耐药Hp感染模型,干预24h后噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,Transwell法测定细胞侵袭,流式细胞术测定细胞周期及细胞凋亡,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax、p65、p-p65蛋白的表达。结果与空白组比较,耐药Hp感染可显著抑制GES-1细胞增殖,降低细胞侵袭能力,促进细胞凋亡,并将细胞阻滞在G1期,同时升高IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8的表达,细胞核内的p65荧光强度显著增加,下调Bcl-2蛋白、上调Bax、p-p65蛋白的表达(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,连朴饮组和联合疗法组能够促进细胞增殖,提高细胞侵袭能力,抑制细胞凋亡,促进细胞周期生长,并能降低IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8的表达,降低细胞核内的p65荧光强度,上调Bcl-2蛋白,下调Bax、p-p65蛋白的表达(P<0.01,P<0.05)。结论连朴饮加味方能降低多重耐药Hp感染引起的细胞凋亡,促进细胞增殖,提高细胞生长的能力、降低炎症反应,可能与调控NF-kB信号通路有关。

关键词：连朴饮加味方幽门螺杆菌耐药炎症 NF-kB信号通道

口腔幽门螺杆菌与胃幽门螺杆菌相关性的研究进展

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湖北中医药大学学报 2024年第3期26卷 116-120页

作者：毛宁锋黄超群吕文亮湖北中医药大学中医临床学院湖北武汉430061 湖北省中医院湖北武汉430074

口腔是幽门螺杆菌(Hp)传播的必经关卡,也是除胃外的第二大定植地,口腔Hp可以影响胃内Hp的根除率以及复发率,在Hp的预防和治疗中至关重要。本文通过文献整理探讨口腔Hp与胃Hp之间的相互作用和影响,以期为临床防治Hp感染提供新的治疗思路。

关键词：幽门螺杆菌口腔幽门螺杆菌相关性综述

基于TGF-β1/Smad信号通路的新冠康复颗粒对肺纤维化早期大鼠上皮间质转化的影响研究

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时珍国医国药 2023年第12期34卷 2892-2895页

作者：段妍君张新悦吕文亮毛宁锋高清华湖北中医药大学湖北武汉430065 湖北时珍实验室湖北武汉430065

目的观察新冠康复颗粒对博来霉素诱导肺纤维化早期大鼠上皮间质转化及TGF-β1/Smad信号通路的蛋白表达的影响。方法50只SPF级雄性wistar大鼠随机分为正常组、模型组和新冠康复颗粒低剂量(16.28g·kg^(-1))、中剂量(32.55g·kg^(-1))、... 详细信息

目的观察新冠康复颗粒对博来霉素诱导肺纤维化早期大鼠上皮间质转化及TGF-β1/Smad信号通路的蛋白表达的影响。方法50只SPF级雄性wistar大鼠随机分为正常组、模型组和新冠康复颗粒低剂量(16.28g·kg^(-1))、中剂量(32.55g·kg^(-1))、高剂量(65.10g·kg^(-1))组,每组10只。除正常组外,其他组通过气管注射博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型。术后第5天开始,新冠康复颗粒组大鼠分别灌服不同浓度中药颗粒剂冲剂,正常组和模型组大鼠灌服等体积生理盐水,于术后第11天麻醉取材。HE和Masson染色观察肺组织病理形态、肺泡炎症及肺纤维化程度,酶联免疫吸附法检测肺组织IL-6、E-cad和a-SMA表达,蛋白免疫印迹法检测肺组织Collagen I、TGF-β1、p-Smad2、Smad2及Smad7蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织IL-6、a-SMA含量及Collagen I、TGF-β1、p-Smad2/Smad2蛋白相对含量均显著升高(P<0.01),E-cad含量和Smad7蛋白相对含量均显著降低(P<0.01);与模型组比较,新冠康复颗粒高剂量组大鼠肺组织IL-6含量及TGF-β1蛋白表达水平降低(P<0.05),a-SMA含量及Collagen I、p-Smad2/Smad2蛋白相对含量均显著降低(P<0.01),E-cad含量和Smad7蛋白相对含量均显著升高(P<0.01)。结论新冠康复颗粒的早期干预可减少炎症因子释放,抑制上皮间质转化,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路蛋白的表达有关。

关键词：新冠康复颗粒 TGF-β1/Smad信号通路上皮间质转化肺纤维化

清肺达原颗粒治疗肺纤维化早期大鼠的作用机制

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2852-2855页

作者：张新悦高清华毛宁锋段妍君吕文亮湖北中医药大学中医临床学院武汉430060 湖北中医药大学疫病研究所武汉430060 湖北中医药大学基础医学院武汉430065

目的:观察清肺达原颗粒对大鼠肺纤维化早期的干预作用并探究其作用机制。方法:30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和早期干预组,每组10只。气管注射博来霉素复制肺纤维化大鼠模型,术后第5天,早期干预组大鼠灌服清肺达原颗... 详细信息

目的:观察清肺达原颗粒对大鼠肺纤维化早期的干预作用并探究其作用机制。方法:30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和早期干预组,每组10只。气管注射博来霉素复制肺纤维化大鼠模型,术后第5天,早期干预组大鼠灌服清肺达原颗粒溶剂(32.55 g/kg),正常组和模型组大鼠灌服等体积0.9%氯化钠溶液,连续5d。1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后取材。HE和Masson染色观察肺组织病理形态,ELISA法检测肺组织白介素-6(IL-6)、E-钙黏蛋白(E-cad)和α-血管平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,Western blot法检测肺组织TGF-β1、p-Smad2、Smad2及Smad7蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织IL-6、α-SMA含量及TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),E-cad含量和Smad7蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);与模型组比较,早期干预组大鼠肺组织IL-6、α-SMA含量,以及TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),E-cad含量和Smad7蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:清肺达原颗粒的早期干预能够减轻肺纤维化模型大鼠的肺组织炎症反应,减轻肺纤维化的程度,其机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路的过度活化相关。

关键词：清肺达原颗粒既病防变 TGF-β1/Smad信号通路肺纤维化白介素-6 E-钙黏蛋白 α-血管平滑肌肌动蛋白

基于数据挖掘探讨吕文亮教授治疗慢性胃炎的用药规律

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时珍国医国药 2023年第12期34卷 3007-3010页

作者：毛宁锋杨文育刘雪峰武自伟卢必超周姝含吕文亮湖北中医药大学湖北武汉430065

目的运用数据挖掘技术探讨吕文亮教授治疗慢性胃炎的用药规律。方法采集吕文亮教授门诊医案作为数据来源,运用古今医案云平台V2.2.3系统集成的数据挖掘模块对医案处方进行频次、属性分析,聚类分析,关联分析及复杂网络分析。结果纳入病案... 详细信息

目的运用数据挖掘技术探讨吕文亮教授治疗慢性胃炎的用药规律。方法采集吕文亮教授门诊医案作为数据来源,运用古今医案云平台V2.2.3系统集成的数据挖掘模块对医案处方进行频次、属性分析,聚类分析,关联分析及复杂网络分析。结果纳入病案201则,处方201首,得出高频证型脾胃湿热证、脾胃不和证、脾胃气虚证等,高频药物蒲公英、麸炒白术、法半夏、瓦楞子、茯苓等,药性以温、平、寒为主,药味以辛、甘、苦为主,归经以脾胃、肝肺为主,关联分析出13组高度关联的中药药对,聚类分析出4大类组方,复杂网络分析得出核心药物组合。结论吕文亮教授擅从湿热角度论治慢性胃炎,创新湿热伏邪、湿热致瘀等理论,基于温病方证体系总结出连朴饮方证、柴胡温胆汤方证、三仁汤方证等,同时在治疗上注重三焦同调,分消湿热、调畅气机以及截断扭转。

关键词：数据挖掘慢性胃炎吕文亮专家经验

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吕文亮运用黄连温胆汤治疗杂病验案举隅

湖北中医药大学学报 2022年第5期24卷 116-118页

作者：毛宁锋吕文亮孙易娜湖北中医药大学中医临床学院湖北武汉430065

黄连温胆汤是在《三因极一病证方论》所载温胆汤的基础上加减化裁而成,主治多为痰热内扰所引起的多种湿热疾病。临证时,吕文亮教授不仅善用黄连温胆汤化裁治疗各种湿热类疾病,同时结合温病方证体系将黄连温胆汤扩展到内科杂病的治疗,临... 详细信息

黄连温胆汤是在《三因极一病证方论》所载温胆汤的基础上加减化裁而成,主治多为痰热内扰所引起的多种湿热疾病。临证时,吕文亮教授不仅善用黄连温胆汤化裁治疗各种湿热类疾病,同时结合温病方证体系将黄连温胆汤扩展到内科杂病的治疗,临床效果显著。举验案3则,为黄连温胆汤的临床应用提供新的思路。

关键词：吕文亮黄连温胆汤杂病临床应用专家经验

连朴饮加味方联合四联补救治疗幽门螺杆菌感染的疗效及肠道微生态分析

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时珍国医国药 2023年第6期34卷 1407-1411页

作者：黄超群吕文亮高清华段妍君魏沙孙玉洁张思依毛宁锋胡运莲苏成霞陈建辉张娟丽章茜湖北省中医院湖北武汉430061 湖北中医药大学附属医院湖北武汉430061 武汉市中医医院湖北武汉430014 湖北中医药大学疫病研究所湖北武汉430061 湖北中医药大学中医临床学院湖北武汉430061 湖北中医药大学基础医学院湖北武汉430061

目的探究连朴饮加味方联合四联补救治疗幽门螺杆菌感染的疗效及对肠道微生态的影响。方法选取2021年7月至2021年12月我院初次根除幽门螺杆菌失败的76例慢性非萎缩性胃炎(脾胃湿热证)患者作为观察对象,随机分为治疗组(38例)和对照组(38... 详细信息

目的探究连朴饮加味方联合四联补救治疗幽门螺杆菌感染的疗效及对肠道微生态的影响。方法选取2021年7月至2021年12月我院初次根除幽门螺杆菌失败的76例慢性非萎缩性胃炎(脾胃湿热证)患者作为观察对象,随机分为治疗组(38例)和对照组(38例),对照组采用雷贝拉唑+枸橼酸铋剂+阿莫西林+呋喃唑酮(14d)治疗,治疗组在对照组基础上加用连朴饮加味方(2次/d×14d),后续连朴饮加味方(2次/d×14d)治疗,观察两种方案的疗效及对肠道微生物群落的影响。结果最终纳入统计分析的70例患者中治疗组Hp根除率的符合方案(PP)与意向治疗(ITT)分析分别为89.19%、86.84%,对照组为84.85%、73.68%,两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);对照组在服药2周、停药2周、停药4周后中医证候疗效总有效率显著低于治疗组(P<0.05);治疗组在改善口黏且苦、肢体困重、口臭、脘腹饱胀单向症状疗效上优于对照组(P<0.05);两组无严重不良事件发生(P<0.05)。对肠道菌群的影响:对照组物种丰度、多样性在停药2周时明显下降,停药4周、8周、11周均高于停药2周时,停药11周时高于根除前;在属水平,对照组在停药8周时罕见小球菌属(Subdoligranulum)、粪球菌属(Coprococcus)显著高于治疗组(P<0.05)。治疗组停药2周时物种、多样性与根除前无明显差异,且在停药2周、4周时物种丰度均高于根除前,同时有益菌属毛螺菌属(Lachnospira)相对丰度显著升高(P<0.05);停药2周、4周、8周、11周时拟杆菌门(Bacteroidetes)厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度比值随时间延长逐渐升高。结论连朴饮加味方联合四联可作为Hp根除失败有效的补救方案,安全性良好,值得临床推广。连朴饮加味方可能通过促进有益菌菌群生长,减少有害菌,提高B:F值调节肠道菌群失衡,以缓解胃肠道症状。

关键词：幽门螺杆菌连朴饮加味方补救治疗肠道微生态

间歇性对河流生物多样性和生态系统的影响研究进展

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水生态学杂志 2024年

作者：毛宁苗令占侯俊河海大学环境学院

间歇性河流是水生系统的重要组成部分，其湿度状态的变化过程，是动态生物地球化学过程和微生物群落的场所，具有生态重要性，但是间歇性河流目前关注度很低，生态学相关的研究数据资源相当匮乏。随着全球气候变化和土地利用，间歇性河... 详细信息

间歇性河流是水生系统的重要组成部分，其湿度状态的变化过程，是动态生物地球化学过程和微生物群落的场所，具有生态重要性，但是间歇性河流目前关注度很低，生态学相关的研究数据资源相当匮乏。随着全球气候变化和土地利用，间歇性河流干湿交替活动变得更加频繁且持久，这极大影响着河网生态系统中群落生物多样性和生物地球化学过程。本综述概述了间歇性河流的动态水文，以及在河网中扮演的角色，讨论了间歇性河流的流动、非流动和干旱阶段的交替对不同空间尺度（从单个河段到整个河网）水生态系统动态的影响。论述了间歇性河流的干湿交替导致的独特的水文和生物地球化学变化，揭示了不同生物群落（如无脊椎动物、微生物和藻类）在干湿交替过程中的动态响应机制及其对生态恢复的关键作用。间歇性河流的生态系统多功能性表现在营养物质循环、有机物分解和初级生产力等方面具有独特的功能，迫切需要对其进行合理的管理与保护。最后，本综述阐述了间歇性河流相关的管理保护措施，并对未来亟需的研究方向、河流管理和保护策略进行了总结展望。

关键词：间歇性河流生物多样性生物地球化学生态系统多功能性