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CELⅠ(celery)酶在水稻基因多态性检测中的应用

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农业生物技术学报 2009年第5期17卷 877-881页

作者：傅曼琴李晓方罗文永毛兴学杨俊华南师范大学生命科学学院广东省农业科学院水稻研究所

CELⅠ(celery)酶是定向诱导基因组局部突变(target inginducedlocal lesions in genomes,TILLING)技术中的关键酶,能够特异地识别并切割单碱基错配和扭曲的DNA异源双链。从芹菜(Apium graveolens)中提取了CELⅠ酶,针对脯氨酸代谢途径中... 详细信息

CELⅠ(celery)酶是定向诱导基因组局部突变(target inginducedlocal lesions in genomes,TILLING)技术中的关键酶,能够特异地识别并切割单碱基错配和扭曲的DNA异源双链。从芹菜(Apium graveolens)中提取了CELⅠ酶,针对脯氨酸代谢途径中关键酶的基因设计32对引物,并以水稻(Oryzasativa)中二软占分别与另外35份国内外水稻材料形成的杂合双链作为底物,检测了CELⅠ酶的错配切割活性,结果有13对引物在水稻中二软占与其它35份材料之间有多态性,表明CELⅠ酶可在不同材料的DNA所形成的异源双链的错配处准确切割。通过CELⅠ酶在水稻基因多态性检测中的应用,为基因多态性检测提供一种简单易行的方法。

关键词： CELⅠ酶基因多态性定向诱导基因组局部突变(TILLING) 杂合双链DNA

AtpH Is a Chilling-Repressed Gene in Rice

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Acta Botanica Sinica 2003年第4期45卷 484-487页

作者：毛兴学庄楚雄彭新湘梅曼彤缪征新郭振飞李明启华南农业大学生命科学学院广州510642

A chilling-repressed cDNA fragment was cloned from rice ( Oryza sativa L.) seedlings by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) differential display. Database comparison of the cDNA sequence is identical to atpH encoded by rice chloroplast genome. Northern hybridization showed that its RNA transcript was reduced greatly on the first day and fully inhibited after 2 d of chilling treatment.

关键词： rice chilling atpH

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一套研究水稻抗瘟性材料体系的建立和应用

中国农业科学 2003年第2期36卷 121-127页

作者：李晓方罗文永肖昕毛兴学刘彦卓广东省农业科学院水稻育种新技术重点实验室广东省农业科学院水稻育种新技术重点实验室广东省农业科学院水稻育种新技术重点实验室广东省农业科学院水稻育种新技术重点实验室广东省农业科学院水稻育种新技术重点实验室广州510640 湖北农学院荆州434103 广州510640 广州510640 广州510640 广州510640

以中国华南地区曾普遍使用的抗瘟性水稻材料外选 35、目前广东省水稻生产上种植面积最大的具有水平抗瘟性和高收获指数特点的水稻品种粤香占和广东最早的优质食味好的品种七丝占为亲本材料 ,通过杂交后代单粒传递方法和DNA杂交方法 ,创... 详细信息

以中国华南地区曾普遍使用的抗瘟性水稻材料外选 35、目前广东省水稻生产上种植面积最大的具有水平抗瘟性和高收获指数特点的水稻品种粤香占和广东最早的优质食味好的品种七丝占为亲本材料 ,通过杂交后代单粒传递方法和DNA杂交方法 ,创造了一套对抗瘟性基因及抗性机理和优质等农艺性状研究具有重要价值的材料体系 ,分别为重组自交系群体 (recombinationinbredline ,RIL)、扩展重组自交系群体 (expendrecombinationinbredline ,ERIL)和突变体重组自交系群体 (transfered mutantrecombinationinbredline,TRIL)。在RIL群体中 ,鉴定出该材料体系中对鉴定稻瘟病菌株的各种抗性基因组合材料 ,为“基因对基因学说”提供了直接的材料证据。用同一对照和同样方法 ,在ERIL群体中 ,肯定了表现水平抗性的粤香占具有多个主效抗性基因和多个微效抗性基因 ,为水平抗性的多基因控制提供了初步证据。还创造出了一套可用于研究水平抗性的稳定材料群体。用野生稻外源DNA电激导入方法获得粤香占水平抗性突变为垂直抗性的突变株 ,并从简单重复序列多态性 (SSLP)方面 ,证明了突变体群体的变异情况。这些研究和材料体系为抗瘟性机理研究、基因克隆、抗性基因尤其是水平抗性基因研究提供了重要的新材料

关键词：水稻抗瘟性重组自交系群体

单粒活体稻谷种子直链淀粉含量的近红外透射光谱分析

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中国水稻科学 2003年第3期17卷 287-290页

作者：肖昕陈奕罗文永刘彦卓毛兴学李晓方广东省农业科学院水稻研究所广东省水稻育种新技术重点实验室广东广州510640

利用FOSSTecator公司的Infratec 12 5 5型带单粒定标器的近红外谷物分析仪 ,对 2 2 2粒单粒稻谷进行扫描并测定了直链淀粉含量的参比数据。借助于功能强大的近红外定标器软件 (WinISI) ,采用多种计量数学处理方法和不同的回归统计方法... 详细信息

利用FOSSTecator公司的Infratec 12 5 5型带单粒定标器的近红外谷物分析仪 ,对 2 2 2粒单粒稻谷进行扫描并测定了直链淀粉含量的参比数据。借助于功能强大的近红外定标器软件 (WinISI) ,采用多种计量数学处理方法和不同的回归统计方法进行定标曲线的开发和比较 ,优化得到了单粒水稻种子直链淀粉含量测定的近红外定标方程。其定标标准偏差(SEC)、交叉检验标准误差 (SECV)、检验工作标准误差 (SEP)和定标相关系数 (RSQ)分别为 2 .82 8、3.0 88、2 .792、0 .848。

关键词：直链淀粉含量近红外透射光谱分析水稻单粒种子

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用SSR标记分析高州野生稻的遗传多样性

科学通报 2006年第5期51卷 551-558页

作者：李晨潘大建毛兴学涂从勇周汉钦范芝兰李晓方广东省农业科学院水稻研究所农业部重点实验室广州510640

利用24对SSR引物比较了来自广东高州、江西、福建、云南等地区及东南亚不同国家共计240份普通野生稻材料的遗传多样性.结果表明,24对引物中平均有17个位点表现出了多态性,平均多态位点比率为69%;平均总等位基因数、平均每个位点的等位... 详细信息

利用24对SSR引物比较了来自广东高州、江西、福建、云南等地区及东南亚不同国家共计240份普通野生稻材料的遗传多样性.结果表明,24对引物中平均有17个位点表现出了多态性,平均多态位点比率为69%;平均总等位基因数、平均每个位点的等位基因数和多态位点的平均等位基因数分别为51.1,2.04和2.43;平均基因多样性为0.8447.高州野生稻5个居群间已经出现了较显著的分化.上述遗传多样性参数均表明,高州镇江镇朋山村(陂头洞)野生稻应该是高洲野生稻的一个遗传分化中心和遗传多样性中心.高州野生稻很可能是广东普通野生稻、华南和中国普通野生稻最大的一个遗传分化中心和遗传多样性中心.

关键词：高州野生稻 SSR标记遗传多样性遗传分化

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核酸探针中放射性同位素的快速检测

细胞生物学杂志 2004年第3期26卷 324-326页

作者：罗文永胡骏刘文华陈建伟毛兴学李晓方广东省农业科学院水稻研究所农业部水稻遗传改良重点实验室及广东省水稻育种新技术重点实验室广州510640 中山大学植物基因工程教育部重点实验室广州510275

利用尼龙膜作为介质,以0.4 mol/L的NaOH为层析液,进行膜上层析,分离经放射性同位素标记的核酸探针和未掺入的放射性游离单核苷酸,再经放射性强度测定即可计算出标记后的核酸探针的放射性比活。方法简单快捷,产生的放射性废物少,完全可... 详细信息

利用尼龙膜作为介质,以0.4 mol/L的NaOH为层析液,进行膜上层析,分离经放射性同位素标记的核酸探针和未掺入的放射性游离单核苷酸,再经放射性强度测定即可计算出标记后的核酸探针的放射性比活。方法简单快捷,产生的放射性废物少,完全可以替代经典的三氯乙酸沉淀法及滤膜吸附法。

关键词：核酸探针放射性同位素快速检测核酸杂交尼龙膜

181份多样性籼稻种质苗期和成熟期镉积累表型评价

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分子植物育种 2018年第18期16卷 6080-6087页

作者：赵均良张少红杨梯丰董景芳刘清付华毛兴学刘斌广东省农业科学院水稻研究所广州510640 广东省水稻育种新技术重点实验室广州510640

近年来,中国稻米镉污染问题较为严重,对人们生活和健康带来严重的威胁。选育低镉积累水稻品种是解决此问题最简单有效的途径,而筛选低镉积累水稻资源是低镉积累水稻品种选育的前提和基础。本研究以引进的来自31个国家(地区)的181份多样... 详细信息

近年来,中国稻米镉污染问题较为严重,对人们生活和健康带来严重的威胁。选育低镉积累水稻品种是解决此问题最简单有效的途径,而筛选低镉积累水稻资源是低镉积累水稻品种选育的前提和基础。本研究以引进的来自31个国家(地区)的181份多样性丰富的籼稻种质为研究材料,利用水培和中度镉污染的农田分别对这些种质的苗期地上部分镉吸收和成熟期稻米镉积累进行测定。研究结果表明,苗期地上部分和成熟期稻米镉积累量在品种间有很大差异。苗期地上部分镉含量变异范围为9.90~106.80 mg/kg,而稻米镉含量的变异范围为0.12~1.23 mg/kg。鉴定出稻米镉含量低于0.20 mg/kg的种质3份,地上部和稻米镉含量均较高的种质16份。相关性分析结果表明,苗期镉吸收与稻米镉积累极显著相关(r=0.3861, p<0.000 1),苗期镉吸收低的稻种,其稻米镉含量亦相对较低,苗期镉吸收可作为稻米镉累积的重要指示之一。本研究结果为籼稻低镉积累品种选育和镉污染农田的植物修复提供良好的材料基础。

关键词：籼稻镉积累表型评价苗期谷粒

应用近红外透射光谱法测定水稻种子直链淀粉含量的初步研究

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中国农业科学 2004年第11期37卷 1709-1712页

作者：肖昕谢新华陈奕罗文永陈建伟刘彦卓毛兴学李晓方广东省农业科学院水稻研究所农业部水稻遗传改良重点开放实验室/广东省水稻育种新技术重点实验室广东省农业科学院水稻研究所农业部水稻遗传改良重点开放实验室/广东省水稻育种新技术重点实验室广州510640 广州510640西北农林科技大学食品科学与工程学院杨凌712100

以124份水稻种子为样本,利用FOSS-Tecator公司的Infratec1255型近红外谷物品质分析仪,对样本进行光谱扫描,并利用化学法测定了直链淀粉含量。借助于近红外定标软件(WinISI),采用多种计量数学处理方法和不同的回归统计方法进行定标曲线... 详细信息

以124份水稻种子为样本,利用FOSS-Tecator公司的Infratec1255型近红外谷物品质分析仪,对样本进行光谱扫描,并利用化学法测定了直链淀粉含量。借助于近红外定标软件(WinISI),采用多种计量数学处理方法和不同的回归统计方法进行定标曲线的开发和比较,得到了小样本量水稻种子直链淀粉含量测定的近红外分析定标数学模型。其定标标准偏差(SEC)、交叉检验标准误差(SECV)和定标决定系数(RSQ)分别为1.489、1.761和0.885。

关键词：近红外透射光谱水稻种子直链淀粉含量

水稻高压变异材料的SSR标记和叶片可溶性蛋白质含量分析

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中国水稻科学 2003年第4期17卷 373-375页

作者：何秀英徐世平廖耀平毛兴学翁克难陈钊明陈粤汉肖万生广东省农业科学院水稻研究所广东广州510640 中国科学院广州地球化学研究所广东广州510640

应用微卫星标记技术和可溶性蛋白质含量测定 ,对水稻品种粤香占及其由高压引起的变异材料粤压 1、2、3、4号进行分子生物学研究。结果表明 ,在选取的 88对微卫星引物中有 11对表现多态性 ,变异材料与原种的多态性频率介于 3 .4%～11.3 ... 详细信息

应用微卫星标记技术和可溶性蛋白质含量测定 ,对水稻品种粤香占及其由高压引起的变异材料粤压 1、2、3、4号进行分子生物学研究。结果表明 ,在选取的 88对微卫星引物中有 11对表现多态性 ,变异材料与原种的多态性频率介于 3 .4%～11.3 % ,多态性标记随机地分布于水稻染色体上 ,形态上与原种越相近的材料多态性位点数越少。此外 ,每一变异材料叶片可溶性蛋白质含量互不相同。

关键词：水稻高压变异材料 SSR标记可溶性蛋白质微卫星标记