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沙门菌致病岛2Ⅲ型分泌系统研究进展

微生物学报 2016年第4期56卷 561-569页

作者：殷俊磊李求春焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

沙门菌(Salmonella)是革兰氏阴性的兼性胞内菌,可引起其广泛宿主的一系列疾病,严重时可导致全身性感染,威胁生命安全。沙门菌致病岛2(SPI2)是与沙门菌全身性感染密切相关的重要毒力基因簇,其编码的Ⅲ型分泌系统2(T3SS2)在沙门菌侵入宿... 详细信息

沙门菌(Salmonella)是革兰氏阴性的兼性胞内菌,可引起其广泛宿主的一系列疾病,严重时可导致全身性感染,威胁生命安全。沙门菌致病岛2(SPI2)是与沙门菌全身性感染密切相关的重要毒力基因簇,其编码的Ⅲ型分泌系统2(T3SS2)在沙门菌侵入宿主细胞后开始组装合成,经该装置分泌的多种效应蛋白对沙门菌在宿主细胞内的生存和增殖起着重要作用。近些年来,与沙门菌T3SS2相关的研究一直都是病原微生物领域关注的焦点之一。本文简要综述了SPI2的基因特征、SPI2基因表达的调控、T3SS2的结构和组成、T3SS2的效应蛋白及与T3SS2相关的疫苗研究等方面的主要研究进展。

关键词：沙门菌沙门菌致病岛2 Ⅲ型分泌系统

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碳纳米点荧光探针对有机溶剂中水含量的检测

激光与光电子学进展 2020年第23期57卷 249-254页

作者：潘鹏涛邹凡雨殷俊磊新乡学院医学院河南新乡453003

以无水柠檬酸和邻苯二胺为碳源,采用一步溶剂热法制备出了溶剂依赖发光的碳纳米点,通过原子力显微镜对所制备的碳点进行形貌及结构表征,发现碳量子点高度在1.5 nm左右,其是由2~3层类石墨烯片层堆叠而成的。通过荧光光谱(PL)和紫外-可见(... 详细信息

以无水柠檬酸和邻苯二胺为碳源,采用一步溶剂热法制备出了溶剂依赖发光的碳纳米点,通过原子力显微镜对所制备的碳点进行形貌及结构表征,发现碳量子点高度在1.5 nm左右,其是由2~3层类石墨烯片层堆叠而成的。通过荧光光谱(PL)和紫外-可见(UV-Vis)吸收光谱对碳量子点的光学性质进行测定,发现碳量子点的吸收主要与内部碳核和表面态有关,最大吸收对应的波长分别为285 nm和430 nm。有机溶剂中最大发射波长为表面缺陷态发光波长,荧光峰位在515 nm处。随着体系中水含量的增加,最大发射峰强度降低,发射峰的位置发生红移,水含量(体积百分数)为10%~100%时,荧光信号强度与水含量呈线性关系,最优条件下水含量的检测极限为0.1%。实验结果证实,该碳量子点有望成为实时定量检测有机溶剂中水含量的荧光探针和传感器。研究结论不仅拓宽了碳纳米点的应用范围,还提供了一种简单有效检测有机溶剂水含量的方法。

关键词：材料碳量子点荧光探针水分检测

氮/铝共掺杂碳点的制备及在H_(2)O_(2)检测中的应用

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激光与光电子学进展 2021年第9期58卷 309-317页

作者：潘鹏涛邹凡雨职丽娟殷俊磊新乡学院医学院河南新乡453003 新乡学院化学与材料工程学院河南新乡453003

利用一种简便的一步溶剂热法合成了氮/铝共掺杂碳点,该碳点的水溶液在红光发射区的发光量子效率达30%。分别通过原子力显微镜(AFM)、动态光散射(DLS)粒度分析仪、荧光光谱仪、X射线光电子能谱仪(XPS)和傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)等对... 详细信息

利用一种简便的一步溶剂热法合成了氮/铝共掺杂碳点,该碳点的水溶液在红光发射区的发光量子效率达30%。分别通过原子力显微镜(AFM)、动态光散射(DLS)粒度分析仪、荧光光谱仪、X射线光电子能谱仪(XPS)和傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)等对其颗粒尺寸、表面化学结构及荧光性能进行了表征。所合成的氮/铝共掺杂碳点颗粒的平均直径为6.5 nm,在高浓度盐离子溶液、紫外光照射及温度变换下具有较强的抗漂白能力。同时,该碳点作为一种新型的荧光探针,可用于H2O2的选择性识别,检测极限为1.3μmol/L,碳点荧光淬灭效率与0.12~1 mmol/L的H2O2浓度呈线性关系。

关键词：材料铝掺杂荧光 H_(2)O_(2) 碳点

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香猪场猪支原体肺炎的病原检测

黑龙江畜牧兽医 2010年第11期 104-105页

作者：浦同灿马磊殷俊磊嵇辛勤贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵阳市花溪农业局兽疫防治站贵州贵阳550025

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鸡白痢沙门菌研究进展

中国兽医学报 2016年第9期36卷 1624-1629页

作者：殷俊磊李求春耿士忠潘志明焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

鸡白痢沙门菌是鸡白痢的病原,具有高度适应专一宿主的特点。它可引起雏鸡的急性全身性感染,发病率和病死率极高;成年鸡被感染后可引起体质量下降、产蛋率和孵化率降低、组织病变、白痢和生殖道畸形等,给很多国家的养鸡业带来巨大危害,... 详细信息

鸡白痢沙门菌是鸡白痢的病原,具有高度适应专一宿主的特点。它可引起雏鸡的急性全身性感染,发病率和病死率极高;成年鸡被感染后可引起体质量下降、产蛋率和孵化率降低、组织病变、白痢和生殖道畸形等,给很多国家的养鸡业带来巨大危害,并引起严重的经济损失。为了更好的预防和控制、甚至最终净化该病,需要对鸡白痢沙门菌进行深入的研究。本文从病原学及其基因组特征、流行病学、致病性及毒力基因、检测方法和防控措施等方面介绍了鸡白痢沙门菌的研究进展,并对其研究趋势进行了展望。

关键词：鸡白痢沙门菌鸡白痢流行病学

山羊痘DNA疫苗pVAX1-P32的构建及其安全性评估

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中国兽医科学 2010年第10期40卷 1052-1056页

作者：殷俊磊朱时杰周碧君文明杨颖李霞云樊翠华贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵州贵阳550025

为了构建山羊痘病毒(GPV)P32基因真核表达质粒pVAXl-P32,探讨pVAXl-P32重组表达质粒作为DNA疫苗在小鼠体内的组织分布和生物安全性。以pMD18-T-P32/LD为模板,通过PCR扩增GPVP32基因片段,并定向插入真核表达载体pVAX1中,构建重组表达质粒... 详细信息

为了构建山羊痘病毒(GPV)P32基因真核表达质粒pVAXl-P32,探讨pVAXl-P32重组表达质粒作为DNA疫苗在小鼠体内的组织分布和生物安全性。以pMD18-T-P32/LD为模板,通过PCR扩增GPVP32基因片段,并定向插入真核表达载体pVAX1中,构建重组表达质粒pVAX1-P32,将其转入大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆进行双酶切与PCR鉴定。大量提取纯化重组质粒pVAX1-P32,经肌肉注射免疫小鼠,于免疫后不同时间剖杀小鼠,分别采集心肌、肝、脾、肺、肾、脑、十二指肠、腿肌、血液等组织样品,抽提总DNA,利用PCR分析pVAX1-P32在小鼠组织内的动态分布及其与宿主细胞染色体的整合情况;同时,以PCR技术检测免疫小鼠粪便,分析pVAX1-P32重组表达质粒在外界环境中的释放情况。结果表明,真核表达重组质粒pVAX1-P32的双酶切鉴定及PCR扩增结果与预期结果相符;肌肉注射小鼠后,pVAX1-P32迅速分布到小鼠其他组织器官中,同时,未发现pVAX1-P32与宿主细胞染色体有整合现象;粪便中也均未检测到目的基因。表明,成功构建了真核表达重组质粒pVAX1-P32,且其作为疫苗对动物和环境是安全的。

关键词：山羊痘病毒 P32基因 DNA疫苗真核表达载体安全性

雏沙门菌S06004株毒力岛1缺失株的构建及其基本生物学特性的测定

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中国兽医科学 2015年第6期45卷 639-643页

作者：殷俊磊程瞾夏静谢晓蕾陶明新李求春耿士忠焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了解毒力岛1(SPI1)对雏沙门菌致病性的影响,初步探索研制安全有效的雏沙门菌减毒株,采用λ-red同源重组系统成功构建了雏沙门菌S06004株的SPI1(约40kb)缺失株S06004ΔSPI1。进一步的生物学特性研究显示,SPI1的缺失不影响雏沙门菌的生... 详细信息

为了解毒力岛1(SPI1)对雏沙门菌致病性的影响,初步探索研制安全有效的雏沙门菌减毒株,采用λ-red同源重组系统成功构建了雏沙门菌S06004株的SPI1(约40kb)缺失株S06004ΔSPI1。进一步的生物学特性研究显示,SPI1的缺失不影响雏沙门菌的生化特性和生长特性,且该缺失株具有良好的遗传稳定性,它对3日龄雏鸡的LD50是野生株的21倍。结果表明,SPI1的缺失则引起雏沙门菌毒力明显下降,这为进一步研究雏沙门菌SPI1的功能及制备减毒活疫苗奠定了一定的基础。

关键词：雏沙门菌 λ-red同源重组毒力岛1 生物学特性

鸡白痢沙门菌S06004株致病岛-2缺失株的构建及其生物学特性

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微生物学报 2015年第9期55卷 1154-1159页

作者：殷俊磊吴颖斐蔺志杰王晓春胡亚辰李求春耿士忠焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

【目的】了解致病岛-2(Salmonella Pathogenicity Island 2,SPI-2)对鸡白痢沙门菌致病性的影响,初步探讨研制安全有效的鸡白痢沙门菌减毒株的可行性。【方法】采用λ-red同源重组系统构建鸡白痢沙门菌S06004株的SPI-2(约40 kb)缺失株S06... 详细信息

【目的】了解致病岛-2(Salmonella Pathogenicity Island 2,SPI-2)对鸡白痢沙门菌致病性的影响,初步探讨研制安全有效的鸡白痢沙门菌减毒株的可行性。【方法】采用λ-red同源重组系统构建鸡白痢沙门菌S06004株的SPI-2(约40 kb)缺失株S06004ΔSPI2。并与野生型相比较,对该缺失株的生长特性、生化特性、遗传稳定性和致病性等基本生物学特性进行鉴定。【结果】成功构建SPI-2缺失株S06004ΔSPI2,SPI-2的缺失不影响鸡白痢沙门菌的生长特性和生化特性,且该缺失株具有良好的遗传稳定性,其对2日龄雏鸡的LD50是野生株的252倍。【结论】SPI-2的缺失引起鸡白痢沙门菌毒力的明显下降,这为进一步研究鸡白痢沙门菌SPI-2的功能及制备减毒疫苗奠定了基础。

关键词：鸡白痢沙门菌 λ-red同源重组致病岛-2 生物学特性

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贵州省新城疫分子流行病学研究

黑龙江畜牧兽医 2010年第9期 20-23页

作者：杨忠成周碧君文明殷俊磊伍祥龙温贵兰贵州省畜牧技术推广站贵州贵阳550003 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵州贵阳550025

应用PCR技术对贵州省不同时期NDV分离株包括肉鸡源P1株与BY株、蛋鸡源H2株与FW株、七彩山鸡源N98株、越南斗鸡源DQ株、鸵鸟源TN株及鸽源GZ株进行F蛋白基因的扩增,并分别进行克隆和测序,然后与国内外NDV参考毒株的对应序列进行比较分析... 详细信息

应用PCR技术对贵州省不同时期NDV分离株包括肉鸡源P1株与BY株、蛋鸡源H2株与FW株、七彩山鸡源N98株、越南斗鸡源DQ株、鸵鸟源TN株及鸽源GZ株进行F蛋白基因的扩增,并分别进行克隆和测序,然后与国内外NDV参考毒株的对应序列进行比较分析。结果表明:8株贵州省NDV分离株的F基因长度均为1 662 bp,可编码553个氨基酸;贵州省NDV分离株间的核苷酸同源性为84.0%～99.7%,氨基酸同源性为87.5%～99.3%;与国内外NDV参考毒株(La Sota株、B1株、F48E9株、CH2000株和TW2000株)的核苷酸同源性为84.2%～98.9%,氨基酸同源性为87.2%～98.6%;经系统发育进化树分析,DQ株、N98株、P1株和H2株为基因Ⅶ型(均为Ⅶd亚型),而BY株和FW株为基因Ⅸ型,GZ株和TN株为基因Ⅱ型。这些结果提示贵州省不同禽类间存在相同NDV毒株感染的可能性,不同时期NDV分离株发生了基因型改变,且近年来贵州省流行的新城疫(ND)疫情主要是由基因Ⅶ型NDV引起。

关键词：新城疫病毒(NDV) F基因序列分析基因型贵州