检索结果-南通市图书馆

非培养皮肤细胞喷雾移植技术用于小型猪创伤修复的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

军事医学 2023年第2期47卷 104-110页

作者：岳亮贠志敏李素波余群芳任延玲马瑞麟崔宏图钟鹏飞张雪宫锋檀英霞军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100850 军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的探讨非培养皮肤细胞结合喷雾移植技术用于小型猪全层皮肤损伤的修复治疗效果。方法巴马小型猪背部两侧创建6个直径3 cm的全层皮肤切除创面,分生理盐水组、脱细胞猪真皮基质粉组(ADM组)、多点注射细胞治疗组(细胞注射组)和喷洒细... 详细信息

目的探讨非培养皮肤细胞结合喷雾移植技术用于小型猪全层皮肤损伤的修复治疗效果。方法巴马小型猪背部两侧创建6个直径3 cm的全层皮肤切除创面,分生理盐水组、脱细胞猪真皮基质粉组(ADM组)、多点注射细胞治疗组(细胞注射组)和喷洒细胞治疗组(细胞喷洒组)进行治疗。术后连续监测实验动物的生理状况及创面愈合情况,切取创面组织进行HE染色和细胞角蛋白-10(CK10)、CK14及血管性血友病因子(VWF)免疫组织化学染色,评估创面皮肤损伤修复效果。结果术后14 d开始,细胞喷洒组的愈合速度更快;21 d时,细胞喷洒组创面的新生皮肤和毛发等皮肤附属器产生。HE染色结果证明,细胞治疗促进皮肤再生,且细胞喷洒组修复效率更高、新生皮肤更薄、更均一。免疫组化结果证明,术后7 d开始,细胞喷洒组中CK10阳性新生皮肤组织更长,修复速度更快;修复后期,细胞喷洒组CK10/CK14阳性新生皮肤更平整光滑,实现了美学修复。另外,细胞喷洒组VWF阳性细胞出现的时间更早,数量更多,排列更规律整齐,证明其新生皮肤富含更多的血管和毛囊,实现了功能修复。结论非培养皮肤细胞结合喷雾移植技术的应用显著提高了小型猪全层皮肤损伤的愈合效率,更重要的是实现了创面的功能及美学修复,为后续临床转化奠定了理论和技术基础。该技术为平、战时创面的早期救治开辟了一条新的有效途径,有望成为未来烧伤治疗的新模式。

关键词：非培养皮肤细胞细胞喷雾移植全层皮肤损伤创面修复毛囊再生

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

牛、猪红细胞的人源化改造研究

牛、猪红细胞的人源化改造研究

中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会

作者：张雪高红伟李素波檀英霞贠志敏杨媛媛宋锦文张士坤王颖丽季守平宫锋军事医学科学院野战输血研究所血液分子生物学实验室

目的采用酶解法和甲氧基聚乙二醇(nPEG)修饰等方法降低或遮蔽牛、猪红细胞表面的异种抗原,探讨异种输血的可能性。方法采用以下几种方法修饰猪红细胞:1)酶解法:利用脆弱杆菌来源的基因重组a-半乳糖苷酶清除猪红细胞表面的主要异种抗原a-...

目的采用酶解法和甲氧基聚乙二醇(nPEG)修饰等方法降低或遮蔽牛、猪红细胞表面的异种抗原,探讨异种输血的可能性。方法采用以下几种方法修饰猪红细胞:1)酶解法:利用脆弱杆菌来源的基因重组a-半乳糖苷酶清除猪红细胞表面的主要异种抗原a-Gal抗原;2)基因敲除法:采用TALEN技术敲除a-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因,制备GTKO的五指山小型猪;3)mPEG修饰法;4)酶解法联合mPEG修

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

大肠杆菌菌蜕装载质粒DNA实验方法的优化

生物技术通讯 2014年第4期25卷 532-536页

作者：胡岸吴婷陈翀檀英霞张士坤冷泠李素波高红伟季守平中南大学生物科学与技术学院湖南长沙410012 军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的:优化大肠杆菌菌蜕装载质粒的效率,并将装载质粒的菌蜕转染抗原提呈细胞,以提高核酸疫苗的递送水平。方法:将质粒pHH43转化大肠杆菌DH5α,制备大肠杆菌菌蜕;优化菌蜕装载质粒时菌蜕、质粒和膜囊的比例,获得更高的装载效率,通过扫描... 详细信息

目的:优化大肠杆菌菌蜕装载质粒的效率,并将装载质粒的菌蜕转染抗原提呈细胞,以提高核酸疫苗的递送水平。方法:将质粒pHH43转化大肠杆菌DH5α,制备大肠杆菌菌蜕;优化菌蜕装载质粒时菌蜕、质粒和膜囊的比例,获得更高的装载效率,通过扫描及透射电镜、流式细胞术观察其形态变化及装载效率;将装载质粒的菌蜕与抗原提呈细胞——巨噬细胞RAW264.7和树突状细胞DC2.4共孵育,观察吞噬效果。结果:优化了大肠杆菌菌蜕装载质粒的效率,当菌蜕、质粒、膜囊的比例为7∶10∶4时效率达到最佳,装载DNA效率达98%以上;抗原提呈细胞吞噬装载了质粒的菌蜕,效率达100%。结论:大肠杆菌菌蜕可高效装载核酸疫苗,且高效被抗原提呈细胞捕获,有助于提高核酸疫苗的递送和免疫效果的提高。

关键词：大肠杆菌菌蜕膜囊核酸疫苗

α-半乳糖苷酶清除猪细胞表面的α-Gal抗原

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通讯 2014年第6期25卷 849-851页

作者：贠志敏张雪李素波檀英霞冷泠季守平高红伟宫锋军事医学科学院野战输血研究所血液分子生物学研究室北京100850

目的:探讨脆弱类杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶清除猪细胞表面α-Gal抗原的作用。方法:用不同浓度的α-半乳糖苷酶酶解猪红细胞、猪胚肾细胞PK15、猪睾丸细胞ST和原代培养的猪成纤维细胞上的α-Gal抗原,酶解温度为26℃,作用时间为2 h... 详细信息

目的:探讨脆弱类杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶清除猪细胞表面α-Gal抗原的作用。方法:用不同浓度的α-半乳糖苷酶酶解猪红细胞、猪胚肾细胞PK15、猪睾丸细胞ST和原代培养的猪成纤维细胞上的α-Gal抗原,酶解温度为26℃,作用时间为2 h;用25μg/m L的FITC-IB4凝集素标记酶解前后的细胞,采用流式细胞仪检测细胞表面α-Gal抗原的清除率。结果:流式细胞检测结果表明,不同组织来源的猪细胞表面的α-Gal抗原的表达量明显不同,所需酶的剂量也不同,但其表面的α-Gal抗原均能被α-半乳糖苷酶清除。结论:脆弱类杆菌来源的α-半乳糖苷酶可以清除猪细胞表面的α-Gal抗原,提示该酶对降低异种移植引起的超急性排斥反应有重要意义。

关键词：异种抗原 α-Gal抗原超急性排斥反应 α-半乳糖苷酶

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新型α-半乳糖苷酶的稳定性研究

生物技术通讯 2013年第6期24卷 850-852页

作者：张雪高红伟李素波鲍国强檀英霞王颖丽季守平宫锋军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的：观察脆弱类杆菌来源的α-半乳糖苷酶（GAL）在不同pH缓冲液、不同温度下的稳定性，以及不同离子及还原剂对酶活性的影响。方法：以GAL对单糖底物对硝基-苯基-α-D-吡喃半乳糖苷（PNPG）的活性为主要检测指标，观察不同离子及还原... 详细信息

目的：观察脆弱类杆菌来源的α-半乳糖苷酶（GAL）在不同pH缓冲液、不同温度下的稳定性，以及不同离子及还原剂对酶活性的影响。方法：以GAL对单糖底物对硝基-苯基-α-D-吡喃半乳糖苷（PNPG）的活性为主要检测指标，观察不同离子及还原剂等对酶活性的影响；观察GAL在不同pH缓冲液中和不同温度下的稳定性。结果：钙离子、锌离子、钴离子和高浓度的锰离子增强酶的活性，DTT抑制酶的活性，螯合剂EDTA的加入提高了酶活性。GAL在pH4.6～7.5时保存1 h后稳定性很好，能保持最高活性的90％以上；在4℃～45℃下保存的稳定性最好，45℃开始活性下降。结论：GAL具有很好的温度稳定性和pH稳定性，使其适用于血型转变和异种移植。

关键词： α-半乳糖苷酶稳定性血型转变活性测定

新型α-半乳糖苷酶多克隆抗体的制备及特异性鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通讯 2013年第6期24卷 853-855页

作者：李素波高红伟张雪鲍国强檀英霞王颖丽季守平宫锋军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的:制备高效价、高特异性的新型α-半乳糖苷酶的兔多抗,并鉴定该抗体的特异性。方法:用脆弱类杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶(纯度大于90%)免疫新西兰大白兔,获得α-半乳糖苷酶的兔抗血清,并经HiTrap rProtein A柱纯化获得高纯度的... 详细信息

目的:制备高效价、高特异性的新型α-半乳糖苷酶的兔多抗,并鉴定该抗体的特异性。方法:用脆弱类杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶(纯度大于90%)免疫新西兰大白兔,获得α-半乳糖苷酶的兔抗血清,并经HiTrap rProtein A柱纯化获得高纯度的抗体;用间接ELISA法检测抗体效价,Western印迹评价抗体的特异性。结果:通过免疫法得到了α-半乳糖苷酶的兔多克隆抗体血清,抗体效价达1∶1×106,经rProtein A柱纯化后获得了高效价、高纯度的抗体,Western印迹显示该抗体特异性地与新型α-半乳糖苷酶结合。结论:获得了新型α-半乳糖苷酶的高效价、高特异性的兔多克隆抗体,可用于血型转变过程中残留α-半乳糖苷酶含量的特异性检测。

关键词： α-半乳糖苷酶多克隆抗体纯化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

酶解转变的人红细胞输注大鼠的实验研究

生物技术通讯 2013年第4期24卷 543-545页

作者：李素波高红伟鲍国强张雪檀英霞王颖丽季守平宫锋军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的:利用大鼠评价酶解转变的人红细胞的安全性。方法:人红细胞与大鼠血清进行常规配血,检测二者之间的相容性;将人B型红细胞酶解后输注大鼠,流式细胞术检测人红细胞在大鼠体内的存活率。结果:人红细胞与大鼠血清不凝集,但人红细胞输注... 详细信息

目的:利用大鼠评价酶解转变的人红细胞的安全性。方法:人红细胞与大鼠血清进行常规配血,检测二者之间的相容性;将人B型红细胞酶解后输注大鼠,流式细胞术检测人红细胞在大鼠体内的存活率。结果:人红细胞与大鼠血清不凝集,但人红细胞输注大鼠体内很快被排斥,1 h下降至50%以下,18 h被完全排斥。结论:仅依靠红细胞配血实验来选择人红细胞输血动物模型是不全面的,大鼠不适合作为酶解转变的人红细胞安全性评价的动物模型。

关键词：血型转变通用型红细胞输血动物模型

脑胶质瘤患者组织和血清MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态检测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

医学分子生物学杂志 2009年第1期6卷 1-5页

作者：郑长青季守平宫锋李安民邰军利王颖丽高红伟李素波檀英霞王璇琳章扬培军事医学科学院野战输血研究所生物化学与分子生物学实验室北京市100850 解放军总医院第一附属医院脑外科北京市100037

目的探讨脑胶质瘤患者组织和血清中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子CpG岛甲基化发生率及相关性。方法甲基化特异性PCR（MSP）检测39例脑胶质瘤组织样本及32例预处理的脑胶质瘤血清样本中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态。结... 详细信息

目的探讨脑胶质瘤患者组织和血清中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子CpG岛甲基化发生率及相关性。方法甲基化特异性PCR（MSP）检测39例脑胶质瘤组织样本及32例预处理的脑胶质瘤血清样本中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态。结果脑胶质瘤组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46．2％、10．3％和20．5％，肿瘤组织中至少有一种基因甲基化的发生率为64．1％（25／39）；在脑胶质瘤患者外周循环血液中检测到了相关基因甲基化系列，并且与组织中基因甲基化发生率明显相关。结论MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件，血清中相关基因DNA甲基化检测有可能为脑胶质瘤诊断和个体化化疗提供一种稳定的无创性检测指标。

关键词：脑胶质瘤启动子CpG岛甲基化 MGMT基因 hMLHl基因

制备抗α-半乳糖苷酶单克隆抗体用于检测B→O血型改造后的微量残留酶

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通讯 2006年第5期17卷 753-754页

作者：李素波田曙光鲍国强王璇琳檀英霞高红伟宫锋章扬培军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的:建立一种检测B→O血型改造后残留α-半乳糖苷酶的有效方法。方法:利用重组咖啡豆α-半乳糖苷酶为免疫原制备单克隆抗体,再采用间接ELISA法检测B→O血型改造后残留的工具酶α-半乳糖苷酶的量。结果:最低可检测出的残留酶量约为2.4ng... 详细信息

目的:建立一种检测B→O血型改造后残留α-半乳糖苷酶的有效方法。方法:利用重组咖啡豆α-半乳糖苷酶为免疫原制备单克隆抗体,再采用间接ELISA法检测B→O血型改造后残留的工具酶α-半乳糖苷酶的量。结果:最低可检测出的残留酶量约为2.4ng/mL。结论:为B→O血型改造后残留的工具酶的检测提供了有效的方法。

关键词： α-半乳糖苷酶单克隆抗体酶联免疫吸附测定