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肿瘤基因治疗载体在临床应用中的问题和研究进展

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西安交通大学学报（医学版） 2006年第4期27卷 313-318页

作者：楚雍烈答嵘西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系陕西西安710061

构建安全、有效、可控的载体为肿瘤基因治疗的瓶颈。肿瘤基因治疗载体分为病毒性载体和非病毒性载体。肿瘤基因治疗载体在临床应用中尚存在许多问题,目前的趋势集中于安全性、高效性、靶向特异性和多功能基因联合研究。

关键词：肿瘤基因治疗载体

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微生物基因组测序策略

西安医科大学学报 2001年第4期22卷 397-398,F003页

作者：杨朵楚雍烈西安交通大学第一医院检验科，西安710061 西安交通大学医学院微生物教研室

在复习近年来有关基因测序的文献基础上 ,综述了有关测序策略方面的进展。

关键词：基因组测序策略基因组计划微生物

左氧氟沙星对金黄葡萄球菌小RNA表达的影响

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中国病原生物学杂志 2012年第2期7卷 94-97,128页

作者：宋娟楚雍烈西安交通大学免疫与病原生物学系陕西西安710061 法国里昂第一大学法国里昂69008

目的研究左氧氟沙星对金黄葡萄球菌小RNA表达的影响及对细菌生长的作用。方法分别在不同抑菌浓度左氧氟沙星干扰情况下,培养金黄葡萄球菌实验株RN6390和RN1HG001,提取RNA,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同菌株中RNAⅢ、R... 详细信息

目的研究左氧氟沙星对金黄葡萄球菌小RNA表达的影响及对细菌生长的作用。方法分别在不同抑菌浓度左氧氟沙星干扰情况下,培养金黄葡萄球菌实验株RN6390和RN1HG001,提取RNA,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同菌株中RNAⅢ、RsaA、RsaE、RsaG、RsaH的含量,比较不同抑菌浓度左氧氟沙星作用下小RNA的表达差异。结果在MH培养液和BH培养液中左氧氟沙星对RN6390和RN1HG001的MIC均为0.25μg/ml。5种小RNA中,RNAⅢ的表达量最多,RsaG最少;当左氧氟沙星浓度≥1/4MIC时,开始对金黄葡萄球菌的生长产生明显抑制作用,5种小RNA的表达均开始下降;在RN6390菌株,1/16 MIC和1/8 MIC的左氧氟沙星能促进RsaH表达。结论不同浓度左氧氟沙星对金黄葡萄球菌小RNA表达具有抑制或者促进作用,提示除了其本身具有的阻碍细菌DNA合成的功能外还可能影响细菌基因的转录。

关键词：金黄葡萄球菌左氧氟沙星小RNA qRT-PCR

SPP对人脐静脉内皮***926细胞表达粘附分子的作用

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中国病理生理杂志 2004年第5期20卷 815-817页

作者：王晖周览楚雍烈复旦大学上海医学院微生物教研室上海200032

目的 :通过研究在N ,N -二甲基鞘氨醇 (DMS)作用下 ,人脐静脉内皮EA .hy92 6细胞株 (EA株 )表达粘附分子CD5 4 (ICAM - 1)和CD6 2p(PS)的变化 ,探讨第二信使 1-磷酸鞘氨醇 (SPP)参与动脉粥样硬化 (AS)粘附过程的机制。方法 :采用流式细... 详细信息

目的 :通过研究在N ,N -二甲基鞘氨醇 (DMS)作用下 ,人脐静脉内皮EA .hy92 6细胞株 (EA株 )表达粘附分子CD5 4 (ICAM - 1)和CD6 2p(PS)的变化 ,探讨第二信使 1-磷酸鞘氨醇 (SPP)参与动脉粥样硬化 (AS)粘附过程的机制。方法 :采用流式细胞仪分群作用衡量EA细胞株和单核细胞之间的粘附率 ,用细胞免疫组化法检测DMS作用于EA株后引起的粘附分子的表达。结果 :随着DMS作用剂量或作用时间的增加 ,CD5 4与CD6 2p的表达均减少 ,同时粘附率也相应地下降。结论 :AS早期的粘附过程可能是通过SPP来转导信息 ,以促进粘附分子表达。

关键词：鞘氨醇脐静脉细胞问粘附分子 P选择素动脉硬化

人细胞角蛋白8(CK8)基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第1期26卷 41-43页

作者：李薇寻萌楚雍烈郑建武西安交通大学医学院免疫与病原生物系分子病毒研究所陕西西安710061

目的:克隆人细胞角蛋白8(CK8)基因cDNA并在大肠杆菌中表达CK8蛋白产物。方法:运用DNA重组技术,设计CK8基因特异引物,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝细胞癌7721细胞中扩增CK8编码区cDNA,将其插入克隆载体pMD18-T simple vecto... 详细信息

目的:克隆人细胞角蛋白8(CK8)基因cDNA并在大肠杆菌中表达CK8蛋白产物。方法:运用DNA重组技术,设计CK8基因特异引物,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝细胞癌7721细胞中扩增CK8编码区cDNA,将其插入克隆载体pMD18-T simple vector中,获得重组质粒pMD18-CK8,转化感受态大肠杆菌DH5α。继而采用PCR技术从重组质粒pMD18-CK8中扩增出约1500bp目的片段,再次级克隆到原核表达质粒pET-28a(+)载体中,获得pET-28a-CK8重组原核表达质粒;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21(DE3)菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达。采用SDS-PAGE电泳及Western blot检测CK8蛋白表达水平。结果:成功建立了人CK8基因cDNA重组体的无性繁殖系。②在原核细胞中成功地表达出人CK8蛋白,该蛋白具有很好的免疫原性。结论:运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了人细胞角蛋白8(CK8)基因,为进一步研究CK8的基因型及探讨该基因编码的CK8蛋白的性质和生物学活性创造条件。

关键词：人细胞角蛋白8CK8 基因克隆原核表达

丙型肝炎病毒NS5A基因的克隆及序列比对分析

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陕西医学杂志 2006年第11期35卷 1405-1406页

作者：付慧楚雍烈成凡西安交通大学医学院病原生物学教研室西安710061 西安医学院

目的:研究HCV N S5A区基因的结构与功能,为提高干扰素(IFN)治疗HCV感染的有效性提供依据,及为建立以N S5A蛋白做抗原的新一代诊断试剂盒,提高HCV感染检出率作出有益的尝试。方法:以含HCV 1b全长cDNA的质粒HCV 17为模板,利用巢式PCR扩增... 详细信息

目的:研究HCV N S5A区基因的结构与功能,为提高干扰素(IFN)治疗HCV感染的有效性提供依据,及为建立以N S5A蛋白做抗原的新一代诊断试剂盒,提高HCV感染检出率作出有益的尝试。方法:以含HCV 1b全长cDNA的质粒HCV 17为模板,利用巢式PCR扩增出一段长约500bp的cDNA片段,以此基因片段作为目的基因,进行T-A克隆,构建PMD 18-T-N S5A。结果:经酶切及测序证实,PMD 18-T-N S5A质粒中的插入基因片段为HCV 1b N S5A区部分基因,与HCV标准株HCV J序列进行比对分析,核苷酸和氨基酸序列的同源性均为90%以上,并且该区段包含了干扰素敏感决定区(ISDR)。结论:建立HCVN S5A基因片段稳定的无性繁殖系,并进行同源性分析对研究ISDR序列与IFN疗效的关系是非常重要的;通过基因重组表达N S5A蛋白,可用于HCV诊断试剂盒的研究。

关键词：肝炎病毒/免疫学 NSSA基因克隆分子序列分析 RNA

型特异性DNA探针和单克隆抗体对单纯疱疹病毒分型的应用

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中华微生物学和免疫学杂志 1990年第2期10卷 120-122页

作者：楚雍烈房益兰

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单纯疱疹病毒分子生物学分型方法的研究

微生物学通报 1992年第3期19卷 163-168页

作者：吴强楚雍烈房益兰四安医科大学微生物教研室陕西西安71006

联合运用HSV-1和HSV-2型特异性核酸探针对28株HSV临床分离株做了鉴定分型,并与应用HSV型特异性单克隆抗体的三种免疫学方法的检测结果进行了比较。核酸探针与单克隆抗体之间的符合率为100%,但分型率不同,核酸探针为100%,单克隆抗体为64... 详细信息

联合运用HSV-1和HSV-2型特异性核酸探针对28株HSV临床分离株做了鉴定分型,并与应用HSV型特异性单克隆抗体的三种免疫学方法的检测结果进行了比较。核酸探针与单克隆抗体之间的符合率为100%,但分型率不同,核酸探针为100%,单克隆抗体为64—82%。研究结果表明,本实验所建立的HSV-McAb-APAAP桥联免疫酶染技术具有简便、敏感、实用的特点。

关键词：单纯疱疹病毒核酸探针分型

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内质网应激与prion疾病

中国病理生理杂志 2011年第1期27卷 196-199页

作者：徐琨楚雍烈西安交通大学医学院免疫与病原生物学系分子病毒研究所陕西西安710061 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京100052

1引言内质网（endoplasmic reticulum,ER）是真核细胞中钙离子贮存库,也是调节蛋白质合成及合成后加工、折叠和聚集的场所,是一种重要的细胞器。近年来,在生物医学研究领域中出现了一个新概念-＂内质网应激＂（ER stress）,即：在饥饿。

关键词：内质网内质网应激朊病毒病细胞凋亡