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白木香AsCGT1基因克隆与表达分析

分子植物育种 2024年

作者：肖琛琪朱家红王昊郭冬陈朋伟戴好富彭世清梅文莉张久亮中国热带农业科学院三亚研究院中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省沉香工程技术研究中心华中农业大学食品科学技术学院

糖基化是修饰和丰富天然产物药理学性质的有效途径，C-糖基转移酶作为糖基化反应的有效工具可以介导产生稳定的C-糖苷。本研究根据白木香(Aquilaria sinensis)转录组数据筛选获得一个编码C-糖基转移酶的基因AsCGT1，并对该候选基因进行... 详细信息

糖基化是修饰和丰富天然产物药理学性质的有效途径，C-糖基转移酶作为糖基化反应的有效工具可以介导产生稳定的C-糖苷。本研究根据白木香(Aquilaria sinensis)转录组数据筛选获得一个编码C-糖基转移酶的基因AsCGT1，并对该候选基因进行克隆、生物信息学分析以及基因表达分析。结果表明：该基因包含一个1 404 bp的完整阅读框，编码467个氨基酸。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了AsCGT1在白木香不同组织中的表达水平，发现AsCGT1在果实中表达量最高。利用大肠杆菌外源表达AsCGT1蛋白，该蛋白主要以包涵体形式出现，并经过Ni-NTA柱纯化获得条带单一的目标蛋白。这些结果为后续AsCGT1基因功能鉴定奠定了基础。

关键词：白木香 C-糖基转移酶 AsCGT1 生物信息学表达分析

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沉香种质资源、品质评价与形成机制研究进展

中国科学:生命科学 2024年第10期54卷 1885-1906页

作者：王昊丁旭坡曾军朱家红董文化陈惠琴黄圣卓李薇梅文莉戴好富中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省沉香工程技术研究中心海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室沉香国际联合研究中心

沉香是瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属(Aquilaria)或拟沉香属(Gyrinops)植物在受到自然或人为伤害后产生的含有树脂的木材.作为名贵的香料和传统药材,沉香有抗炎、镇静安神等多种药理活性,其主要化学成分为倍半萜类和2-(2-苯乙基)色酮类... 详细信息

沉香是瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属(Aquilaria)或拟沉香属(Gyrinops)植物在受到自然或人为伤害后产生的含有树脂的木材.作为名贵的香料和传统药材,沉香有抗炎、镇静安神等多种药理活性,其主要化学成分为倍半萜类和2-(2-苯乙基)色酮类化合物.白木香是我国特有的沉香基原植物,随着白木香种植和人工结香技术的大力发展,人工沉香逐渐取代野生沉香成为国内主要的沉香原材料来源.近年来,“结香早、易结香、品质好”的白木香新品种的选育及应用,使沉香产业发展中“品种单一、人工结香品质差异大、效益周期长”等制约因素得到极大的改善. 2020年,白木香染色体水平基因组精细图谱的发布为白木香结香机制、活性成分合成基因挖掘等研究奠定了基础.本文对沉香基原植物种类,种质资源鉴定、评价及新品种选育,结香机理和人工结香技术,以及活性成分的生物合成与调控机制的研究进展进行了总结,并对今后研究趋势进行了展望,以期为深入开展沉香研究、保障产业的可持续发展提供理论参考与技术支撑.

关键词：沉香沉香属和拟沉香属鉴定与品质评价奇楠人工结香技术活性成分基因组与转录组生物合成与调控

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美丽石斛茎叶化学成分及其生物活性研究

中成药 2024年

作者：迟利航陈惠琴黄圣卓吴妃梅文莉宋希强戴好富中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南大学热带农林学院热带特色林木花卉遗传与种质创新教育部重点实验室

目的研究美丽石斛***.茎叶的化学成分及其生物活性。方法美丽石斛茎叶95%乙醇提取物采用硅胶、SephadexLH-20、半制备HPLC进行分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。通过PNPG法测定其α-葡萄糖苷酶抑制活性，以LPS... 详细信息

目的研究美丽石斛***.茎叶的化学成分及其生物活性。方法美丽石斛茎叶95%乙醇提取物采用硅胶、SephadexLH-20、半制备HPLC进行分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。通过PNPG法测定其α-葡萄糖苷酶抑制活性，以LPS诱导RAW264.7细胞产生NO为模型评价其体外抗炎活性。结果从中分离得到15个化合物，分别鉴定为coniferylp-coumarate(1)、(－)-松脂醇(2)、2，5，7-三羟基-4-甲氧基-9，10-二氢菲(3)、柚皮素(4)、spiropreussomerinA(5)、7-hydroxy-14-de-O-methyl-lasiodiplodin(6)、(4S，5S，6Z，8E)-5-hydroxydeca-6，8-dien-4-olide(7)、(6S，9R)-blumenolC(8)、对羟基苯甲酸(9)、间羟基苯甲酸(10)、对羟基苯丙酸(11)、5，7-二羟基-异苯并呋喃酮(12)、2-(4-羟基苯基)-乙醇(13)、β-谷甾酮(14)、β-谷甾醇(15)。化合物1、4具有一定α-葡萄糖苷酶抑制活性，IC50值分别为(65.60±3.31)、(98.95±2.53)μmol/L；化合物3具有抑制LPS诱导RAW264.7产生NO的作用，IC50值为(3.97±0.12)μmol/L。结论化合物5～6、8、12为首次从兰科植物中分离得到，化合物2～15为首次从该植物中分离得到。化合物1、4表现出α-葡萄糖苷酶抑制活性，化合物3表现出抗炎活性。

关键词：美丽石斛茎叶化学成分分离鉴定 α-葡萄糖苷酶抑制活性体外抗炎活性 PNPG法 RAW264.7细胞

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基于白木香转录组的SSR序列特征分析

分子植物育种 2024年第9期22卷 2971-2978页

作者：向琳曾军王昊李薇董文化戴好富梅文莉华中农业大学植物科学技术学院武汉430070 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省沉香工程技术研究中心海口市热带天然产物研究与利用重点实验室海口571101 海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海口571101

为探究白木香的简单重复序列特征,开发SSR分子标记用于白木香种质资源的遗传分化和分子鉴定,本研究鉴定了白木香转录组unigene序列的SSR位点,对其SSR的分布及序列特征进行统计分析,进而设计SSR引物,并验证其SSR引物的多态性。结果表明,... 详细信息

为探究白木香的简单重复序列特征,开发SSR分子标记用于白木香种质资源的遗传分化和分子鉴定,本研究鉴定了白木香转录组unigene序列的SSR位点,对其SSR的分布及序列特征进行统计分析,进而设计SSR引物,并验证其SSR引物的多态性。结果表明,在128712条unigene中共鉴定到9362个SSR位点,分布频率为7.27%。SSR序列中双碱基重复序列最多,占总SSR的54.90%;白木香双碱基重复序列以AG/CT、AC/GT为主,占34.22%。SSR位点重复次数主要集中在5~11次,占总SSR位点数的96.56%,其中三碱基重复5次的SSR位点数最多,共有1925个。设计并合成50对引物,其中35对引物可扩增出预期大小条带,扩增效率达到70%。以24个不同白木香个体对35对引物进行扩增,采用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测SSR引物多态性,表明SSR引物具有多态性。研究表明,白木香转录组SSR重复基元类型丰富,分布密度高,多态性高,可用于白木香资源的遗传多样性评价、遗传分化、种质鉴定和分子育种等后续研究。

关键词：白木香转录组简单重复序列序列特征种质资源

植物内生真菌Purpureocillium lilacinum的生物碱类次级代谢产物

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菌物学报 2024年第4期43卷 95-103页

作者：唐官美张丽韦媛付姣陈惠琴张雪晴梅文莉戴好富郭志勇三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室生物与制药学院湖北宜昌443002 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南海口571101

从蛛毛苣苔叶片中分离一株内生真菌GZY-Z-02,经分子生物学方法鉴定为Purpureocillium lilacinum,以大米固体培养基于室温培养30d,经乙酸乙酯浸提,以正向硅胶、凝胶色谱及HPLC等手段分离得到12个化合物,通过核磁共振、质谱及CD谱等手段... 详细信息

从蛛毛苣苔叶片中分离一株内生真菌GZY-Z-02,经分子生物学方法鉴定为Purpureocillium lilacinum,以大米固体培养基于室温培养30d,经乙酸乙酯浸提,以正向硅胶、凝胶色谱及HPLC等手段分离得到12个化合物,通过核磁共振、质谱及CD谱等手段鉴定其结构,12个化合物均为生物碱类次级代谢产物,其中新化合物1个,为lilacinumopin(1),5个环二肽类衍生物(2–6),2个简单吲哚类衍生物(7–8),3个核苷类衍生物(9–11)及核黄素(12)。通过抗菌活性筛选,发现化合物1,7和8有中等强度地抑制金黄葡萄球菌的活性。

关键词：植物内生真菌生物碱抗菌活性淡紫拟青霉

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重唇石斛地上部分化学成分及其生物活性研究

热带亚热带植物学报 2024年第2期32卷 287-293页

作者：郭东昇杨理宋希强梅文莉陈惠琴戴好富热带特色林木花卉遗传与种质创新教育部重点实验室海南大学林学院海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海口571101

为了解重唇石斛(Dendrobium hercoglossum)的化学成分,利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等方法,从其地上部分分离了14个化合物,经波谱分析,其结构分别鉴定为:3,4,5-三甲氧基苯酚(1)、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dim... 详细信息

为了解重唇石斛(Dendrobium hercoglossum)的化学成分,利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等方法,从其地上部分分离了14个化合物,经波谱分析,其结构分别鉴定为:3,4,5-三甲氧基苯酚(1)、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-propan-1-one(2)、methyl 3-(p-hydroxyphenyl)propionate(3)、justiciresinol(4)、榕醛(5)、异落叶松脂素(6)、threo-2,3-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-methoxypropanol(7)、(+)-松脂素(8)、aloifolⅠ(9)、dendrocandin T(10)、3-甲氧基-4-羟基苯丙酮(11)、1,3,5-三甲氧基苯酚(12)、香草醇(13)和丁香脂素(14),其中化合物1~12,14均为首次从重唇石斛中分离得到,化合物7、10和14为首次从石斛属植物中分离得到。化合物4、8和10具有显著的酪氨酸酶抑制活性,IC50值分别为(10.40±0.36)、(12.16±0.18)和(9.46±0.78)μmol/L。

关键词：兰科重唇石斛化学成分酪氨酸酶

斯里兰卡瓦拉沉香中2个新的5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮

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热带亚热带植物学报 2024年第4期32卷 549-554页

作者：陈乐瑶盖翠娟蔡彩虹王昊李薇戴好富梅文莉陈惠琴中国热带农业科学院热带生物技术研究所沉香国际联合研究中心海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海口571101 海南大学林学院海口570228

为了解斯里兰卡来源瓦拉(Aquilaria walla)沉香中的化学成分,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱法从其乙醇提取物中分离得到2个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过质谱、核磁共振等现代波谱学方法分别鉴定为(5R... 详细信息

为了解斯里兰卡来源瓦拉(Aquilaria walla)沉香中的化学成分,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱法从其乙醇提取物中分离得到2个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过质谱、核磁共振等现代波谱学方法分别鉴定为(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮(1)和(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]-5,6,7,8-四氢色酮(2),均为新化合物。化合物1和2对脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生NO无抑制作用,MTT法表明对5株人肿瘤细胞不具有体外生长抑制作用,200μg/m L的化合物2对酪氨酸酶具有弱抑制作用,抑制率为(21.67±1.67)%。

关键词：瓦拉沉香 5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-四氢色酮酪氨酸酶抑制新化合物

闭鞘姜7个部位α-葡萄糖苷酶抑制活性及其乙醚提取物的GC-MS分析

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武汉大学学报（理学版） 2024年第2期70卷 164-168页

作者：陈乐瑶王雅丽蔡彩虹郭东昇梅文莉戴好富陈惠琴中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南海口571101 海南热带农业资源研究院海南海口571101

用乙醚和乙醇对闭鞘姜7个部位进行提取后,用pNPG(4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷)法测试α-葡萄糖苷酶体外抑制活性,并通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法分析测定其乙醚相中的化学成分。共检出化学成分125个,通过峰面积归一化法确定各化... 详细信息

用乙醚和乙醇对闭鞘姜7个部位进行提取后,用pNPG(4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷)法测试α-葡萄糖苷酶体外抑制活性,并通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法分析测定其乙醚相中的化学成分。共检出化学成分125个,通过峰面积归一化法确定各化学成分的相对含量,结果显示,闭鞘姜7个部位化学成分差异较大。活性测试结果表明:花瓣、花萼和须根的乙醚提取物的酶抑制率均超过70%,茎的乙醚提取物和根茎的乙醇提取物的酶抑制率在50%左右。因此,闭鞘姜不同部位挥发性成分差异较大,花瓣、花萼和须根的乙醚提取物具有相对较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,可为闭鞘姜全株的资源利用提供参考。

关键词：中草药闭鞘姜 α-葡萄糖苷酶气相色谱-质谱(GC-MS)

老挝厚叶沉香中1个新的2-(2-苯乙基)色酮和木脂素杂合物及其抑制一氧化氮作用

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中草药 2024年第15期55卷 5011-5017页

作者：李薇王昊董文化曾军袁靖喆王雅丽吴妃梅文莉戴好富中国热带农业科学院热带生物技术研究所沉香国际联合研究中心/海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室/海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海南海口571101

目的研究老挝厚叶沉香Aquilaria crassna植物所产沉香的化学成分及其抑制一氧化氮作用。方法采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、高效液相色谱等多种色谱技术分离纯化得到单体化合物;通过质谱、核磁共振等谱学方法并结合理化性质鉴定其结构... 详细信息

目的研究老挝厚叶沉香Aquilaria crassna植物所产沉香的化学成分及其抑制一氧化氮作用。方法采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、高效液相色谱等多种色谱技术分离纯化得到单体化合物;通过质谱、核磁共振等谱学方法并结合理化性质鉴定其结构;采用脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7模型测试化合物抑制一氧化氮产生的抗炎活性。结果从老挝沉香的乙醇提取物中分离鉴定3个化合物,分别是厚叶沉香醇(1)、8-氯-6-羟基-2-(2-苯乙基)色酮(2)和8-氯-6-羟基-2-[2-(4-甲氧基苯)乙基]色酮(3)。化合物1对脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮具有抑制作用,其半数抑制浓度值为(47.53±2.14)μmol/L。结论化合物1为新化合物,命名为厚叶沉香醇,是从沉香中首个发现的由2-(2-苯乙基)色酮和木脂素形成的杂合物,且对脂多糖诱导的RAW264.7细胞株产生一氧化氮呈现抑制活性。

关键词：沉香厚叶沉香厚叶沉香醇 2-(2-苯乙基)色酮杂聚体抑制一氧化氮产生活性