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中国实验血液学杂志 2008年第1期16卷 181-184页

作者：梅恒胡豫张迎红王华芳方峻郭涛魏文宁华中科技大学附属协和医院血液病研究所湖北武汉430022 湖北省生物靶向重点实验室湖北武汉430022

本研究通过融合蛋白EGFP-EGF1的表达,探讨大鼠凝血因子Ⅶ上EGF1片段与组织因子(TF)的结合功能。用RT-PCR方法自大鼠肝脏组织获得EGF1编码区基因并将其插入EGFP原核表达载体中,构建pET28a-EGFP-EGF1融合蛋白表达载体;将该重组质粒转化大... 详细信息

本研究通过融合蛋白EGFP-EGF1的表达,探讨大鼠凝血因子Ⅶ上EGF1片段与组织因子(TF)的结合功能。用RT-PCR方法自大鼠肝脏组织获得EGF1编码区基因并将其插入EGFP原核表达载体中,构建pET28a-EGFP-EGF1融合蛋白表达载体;将该重组质粒转化大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导表达EGFP-EGF1融合蛋白;采用亲和层析方法Ni柱纯化融合蛋白,将融合蛋白作用于经脂多糖刺激表达TF的大鼠血管内皮细胞;通过荧光显微镜及流式细胞术观察和检测融合蛋白与细胞结合情况。结果表明:EGFP-EGF1在转化的大肠杆菌中获得高效表达并成功纯化,SDS-PAGE证实分子量约为36kD。荧光显微镜及流式细胞术检测显示该融合蛋白能与内皮细胞膜上的TF结合。结论:大鼠凝血因子Ⅶ上EGF1区可介导FⅦ与TF特异性结合,从而可能为分子靶向抗栓治疗研究提供部分基础。

关键词：凝血因子Ⅶ 组织因子主动脉内皮细胞重组融合蛋白

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大鼠凝血因子ⅦEGF1片段结合功能的体外研究

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血栓与止血学 2007年第4期13卷 148-151页

作者：张迎红胡豫梅恒王华芳郭涛魏文宁方峻孙春艳王雅丹华中科技大学同济医学院血液病研究所湖北省生物靶向实验室武汉430022

目的探讨大鼠凝血因子ⅦEGF 1片段与脂多糖(LPS)刺激后的大鼠血管内皮细胞(RAOEC)结合能力。方法将0.1mg/L LPS作用RAOEC 2 h、4 h、6 h、18 h,应用免疫荧光法检测TF蛋白在RAOEC的表达,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测4μmol/L、8μmol/... 详细信息

目的探讨大鼠凝血因子ⅦEGF 1片段与脂多糖(LPS)刺激后的大鼠血管内皮细胞(RAOEC)结合能力。方法将0.1mg/L LPS作用RAOEC 2 h、4 h、6 h、18 h,应用免疫荧光法检测TF蛋白在RAOEC的表达,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L的大鼠凝血因子ⅦE GF 1多肽与LPS作用后的RAOEC的结合能力。结果0.1mg/L LPS能刺激RAOEC表达组织因子(TF),4 h最为明显,4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L大鼠凝血因子ⅦEGF 1能结合LPS刺激后的RAOEC。结论大鼠凝血因子ⅦEGF1片段能结合LPS刺激后RAOEC。

关键词：凝血因子Ⅶ RAOEC LPS

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基于个体化机器学习的原发性免疫性血小板减少症危重出血预测模型:一项全国前瞻性队列研究（英文）

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Science Bulletin 2023年第18期 2106-2114页

作者：安倬玉吴冶君侯宇梅恒农卫霞李文倩周虎冯茹沈建平彭军周海刘毅宋永平杨林花方美云李建勇程韵枫刘澎徐雅靖王昭罗依蔡真刘辉王景文李娟张曦孙自敏朱小玉王欣付蓉黄亮王少元杨同华苏丽萍马梁明陈协群刘代红姚红霞冯佳张红宇江明周泽平王文生申徐良白玛央金李玥颖王前飞皇秋莎付海霞朱晓璐何云江倩江浩路瑾赵翔宇常英军吴涛潘耀柱邱林高大金阿荣李薇高素君张磊侯明黄晓军张晓辉 Department of Hematology Beijing Tongren Hospital Department of Hematology Xiangya Hospital Central South University Department of Hematology Shanxi Bethune Hospital of Shanxi Medical University Institute of Hematology Union Hospital Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Institute of Hematology the First Affiliated Hospital Zhejiang University Department of Hematology Qinghai Provincial People’s Hospital Institute of Hematology Harbin the First Hospital Department of Hematology The First Affiliated Hospital Sun Yat-sen University Department of Hematology Zhongshan Hospital Fudan University Beijing Key Laboratory of Hematopoietic Stem Cell Transplantation Center of Hematologic Diseases The First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University Institute of Hematology Tongji Hospital Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Department of Hematology The Affiliated Hospital of Northwest Hospital Xi’an No.3 Hospital National Clinical Research Center for Hematologic Disease Department of Hematology Inner Mongolia People’s Hospital Department of Hematology The Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University Department of Hematology Affiliated Zhongshan Hospital of Dalian University Department of Hematology Shandong Provincial Hospital Cheeloo College of Medicine Shandong University Medical Center of Hematology Xinqiao Hospital Army Medical University Department of Hematology Senior Department of Hematology the Fifth Medical Center of PLA General Hospital Collaborative Innovation Center of Hematology Peking University Department of Hematology The First Affiliated Hospital with Nanjing Medical University (Jiangsu Province Hospital) Department of Hematology Peking University First Hospital Department of Hematology Shanxi Tumor Hospital Affiliated to Shanxi Medical University Department of Hematology the First People’s Hospital of Yunnan Province State Key Laboratory of Experimental Hematology Institute of Hematology a

原发性免疫性血小板减少症(ITP)中少见但至关重要的危重出血事件,给患者的预后、生活质量和治疗决策带来严重影响.尽管有一些研究探讨了ITP中与危重出血相关的风险因素,但目前尚缺乏大样本数据、大规模多中心研究结果以及针对ITP患者致...

原发性免疫性血小板减少症(ITP)中少见但至关重要的危重出血事件,给患者的预后、生活质量和治疗决策带来严重影响.尽管有一些研究探讨了ITP中与危重出血相关的风险因素,但目前尚缺乏大样本数据、大规模多中心研究结果以及针对ITP患者致命出血事件的预测模型.本研究首次采用国际血栓与止血学会新提出的ITP致命出血标准,利用大样本数据开发了首个基于机器学习的在线应用,用于预测ITP患者的致命出血.研究中,我们使用中国各地大型多中心数据进行开发,并对全国39家医疗中心进行为期一年的外部测试,得到了较好的训练、验证和测试数据集预测能力.该基于新算法的便捷网络工具能够快速识别ITP患者的出血风险,辅助临床决策,有望未来降低不良事件的发生.

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