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酵母丙氨酸转移核糖核酸分子中一个十三核苷酸片段（顺序23～35）CpGpCpm2～2GpCpUpCpCpCpUpUpIpGp的合成

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1984年第2期 110-118页

作者：梁镇和,汪成尧,裘慕绥,邹碧燕,商金宝,龚佩娟,袁家珪中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所中国科学院生物物理研究所

以CpGpCpm2～2G、CpUpCpC、CpUpUpI和Gp为原料,采用T4RNA ligase催化连接的方法,通过用3′-端带有起保护怍用的磷酸单酯的寡核苷酸作供体（途径A）以及除最后一步外各步都用3′-端是自由OH基的寡核苷酸作供体（途径B）的两种途径,都合... 详细信息

以CpGpCpm2～2G、CpUpCpC、CpUpUpI和Gp为原料,采用T4RNA ligase催化连接的方法,通过用3′-端带有起保护怍用的磷酸单酯的寡核苷酸作供体（途径A）以及除最后一步外各步都用3′-端是自由OH基的寡核苷酸作供体（途径B）的两种途径,都合成了酵母丙氨酸转移核糖核酸分子中一个十三核苷酸片段（顺序23～35）CpGpCpm2～2GpCpUpCpCpCpUpUpIpGp。产率较高。产物的连接点、末端和序列都经过严格鉴定。研究表明,位于受体分子3′-端的稀有嘌呤核苷m2～2G对T4RNA ligase催化的连接反应没有不利影响,并再次证实,在用3′-端是自由OH基的寡核苷酸作供体进行T4RNA ligase催化的连接反应时,为了得到高的产率,避免或降低同时产生供体分子的自聚和环化,并不一定需要受体分子大大过量。用本法合成的CpGpCpm2～2GpCpUpCpCpCpUpUpIpGp已用于酵母丙氨酸转移核糖核酸5′-端半分子和全分子的合成中。

关键词：酵母丙氨酸转移核糖核酸自聚 CpGpCpm22GpCpUpCpCpCpUpUpIpGp 供体分子放射性物质 PGP 柱层析分离洗脱液浓度梯度产率层析法三核苷酸

DINUCLEOSIDE MONOPHOSPHATE ACTING AS THE SHORTEST ACCEPTOR IN T4 RNA LIGASE REACTION

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Science China Chemistry 1982年第12期25卷 1249-1255页

作者：梁镇和汤锦炎于大文邹碧燕陈常庆王德宝 Shanghai Institute of Biochemistry Academia Sinica

A thorough study on the reaction of 32Nwith 14 dinucleoside monophosphates including UI and CmI has been reported. The 10μl reaction mixture containing 100mM Tris （pH8.3）, 40mMMgCl, 6.6mM DIT, bovine serum albumin （20μg/ml）, 1mM ATP, 0.25mM dinucleoside monophos-phate, 0.05mM 32Nand TRNA ligase was incubated for 24 hr at 5--10℃ （or 2 hr at 37℃）.The joining yields depend on the reaction temperature, the donor species and the base compositionof acceptors,Cis the best donor. At 5--10℃, it can join in all 14 dinucleoside monophosphateswith yields ranging from 20% to 80%. The next one isA, but the yields are comparatively *** pare poor donors, which react with some dinucleoside monophosphates to give ayield of only a few percent, and sometimes no product could be obtained whatsoever.

关键词： DINUCLEOSIDE MONOPHOSPHATE ACTING AS THE SHORTEST ACCEPTOR IN T4 RNA LIGASE REACTION RNA

二核苷-磷酸在RNA连接酶酶促反应中的受体作用

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中国科学(B辑化学生物学农学医学地学) 1982年第8期 701-706页

作者：梁镇和汤锦炎于大文邹碧燕陈常庆王德宝中国科学院上海生物化学研究所

本文在前文的基础上,对含有稀有核苷的十四种二核苷-磷酸同32_pN_p的单加反应作了进一步的研究。经对各类同系层析图谱和各类酶解分析,结果说明反应温度,供体的差异性,受体的碱基差异性等等对此反应影响很大。

关键词：酶促反应碱基受体层析图谱核苷磷酸磷化合物反应温度酶解连接酶合成酶 RNA

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亮-脑啡肽基因的合成

中国科学:化学 1983年第12期 1105-1113页

作者：汤锦炎周晓雄梁镇和邹碧燕高翔杨新颖陈常庆王德宝中国科学院上海生物化学研究所

本文报道亮-脑啡肤基因的另一个合成途径。合成的基因,26个碱基对,是按照亮-脑啡肽的氨基酸顺序设计的。为了能够插入pBR 322质粒,基因带有EcoRI和BamHI限制性内切酶的单链粘性末端。化学合成的4个片段,8、9、17及18核苷酸,采用改良的... 详细信息

本文报道亮-脑啡肤基因的另一个合成途径。合成的基因,26个碱基对,是按照亮-脑啡肽的氨基酸顺序设计的。为了能够插入pBR 322质粒,基因带有EcoRI和BamHI限制性内切酶的单链粘性末端。化学合成的4个片段,8、9、17及18核苷酸,采用改良的三酯法。这些片段都具有正确的结构,最后在T-DNA连接酶的作用下,一步装配成脑啡肽基因。产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化,具有正确的连接点。

关键词：基因 DNA 内切酶粘性末端亮-脑啡肽黏性末端合成酶连接酶化学合成 DMT 一氯苯凝胶电泳

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基于无监督深度学习的航拍图像拼接算法

北京航空航天大学学报 2024年

作者：梁镇锋夏海英谭玉枚宋树祥广西师范大学电子与信息工程学院/集成电路学院广西师范大学计算机科学与工程学院/软件学院

传统的图像拼接方法过度依赖于特征的准确定位或分布，导致在复杂的航拍场景下鲁棒性差。因此，提出了一个完整的无监督深度学习航拍图像拼接框架，由无监督深度单应性估计网络和无监督图像融合网络组成。首先，无监督深度单应性估计网... 详细信息

传统的图像拼接方法过度依赖于特征的准确定位或分布，导致在复杂的航拍场景下鲁棒性差。因此，提出了一个完整的无监督深度学习航拍图像拼接框架，由无监督深度单应性估计网络和无监督图像融合网络组成。首先，无监督深度单应性估计网络旨在通过学习参考图像和目标图像之间的单应性变换，为后续的拼接工作提供准确的对齐信息。接着，无监督图像融合网络用于学习航拍图像拼接的变形规则，生成最终的拼接结果。另外，为了训练该学习框架，提供了一个用于无监督航拍图像拼接的真实数据集。在所提供的无人机航拍图像数据集上比较了SIFT+Ransac、AKAZE+BEBLID、ORB+Ransac和基于深度学习的图像拼接算法，实验结果表明，结构相似性（SSIM）的值提高了39.94%，峰值信噪比（PSNR）的值提高了36.55%，均方根误差（RMSE）的值降低了66.09%。此外，所提出的方法在真实的航拍场景下相较于现有的基于深度学习和传统的图像拼接方法具有更好的视觉拼接效果和鲁棒性。

关键词：航拍图像深度单应性估计图像拼接无监督图像融合

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易于基因产物加工和快速纯化的融合表达载体

生物工程学报 1994年第3期10卷 206-212页

作者：李伯良杨新颖江智红胡明梁镇和中国科学院上海生物化学研究所上海200031

从Protein A基因酶切分离出编码完整的结合IgG的B、C区域(PABC)的相应DNA片段,克隆进噬菌体M13。通过人工合成寡聚核苷酸引物,突变修饰B、C区域内分别含有的羟胺裂解位点,变Asn-Gly为Asn-Ala。利用突变修饰后的PBACm编码基因片段,构建... 详细信息

从Protein A基因酶切分离出编码完整的结合IgG的B、C区域(PABC)的相应DNA片段,克隆进噬菌体M13。通过人工合成寡聚核苷酸引物,突变修饰B、C区域内分别含有的羟胺裂解位点,变Asn-Gly为Asn-Ala。利用突变修饰后的PBACm编码基因片段,构建了一组含有不同阅读框架的融合蛋白表达载体。进一步分别重组克隆了含人工合成的人胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、人和牛生长激素释放因子(GRF)等基因的表达质粒,在大肠杆菌中高效表达出PABC-IGF-Ⅰ、PABC-hGRF、PABC-bGRF及其衍生型融合蛋白。经SDS-PAGE测定分析,每立升摇瓶的融合蛋白产量可达100mg以上。上述高效表达的PABC融合蛋白,通过固相亲和层析柱一步分离,获得SDS-PAGE鉴定为近均一分子量纯化的PABC融合表达产物。

关键词：蛋白A 点突变融合表达载体

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化学合成的亮氨酸脑啡肽基因在大肠杆菌中的克隆和表达

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中国科学(B辑化学生物学农学医学地学) 1983年第10期 912-918页

作者：敖世洲梁镇和汤锦炎周晓雄丁晓华陈常庆李载平中国科学院上海生物化学研究所

化学合成的亮氨酸脑啡肽(LEK)基因与质粒pBR322重组,转化大肠杆菌,经过原位杂交筛选,限制性图谱分析和Southern杂交鉴定,获得一批LEK基因重组体。插入乳糖操纵子(1ac)启动基因控制LEK基因的表达。一个lac转录方向和LEK基因转录方向相同... 详细信息

化学合成的亮氨酸脑啡肽(LEK)基因与质粒pBR322重组,转化大肠杆菌,经过原位杂交筛选,限制性图谱分析和Southern杂交鉴定,获得一批LEK基因重组体。插入乳糖操纵子(1ac)启动基因控制LEK基因的表达。一个lac转录方向和LEK基因转录方向相同的表达质粒,pLE103,能在大肠杆菌中产生LEK。用放射免疫分析方法检测,LEK的产量可达每毫克细菌蛋白426毫微克。

关键词： LEK 基因转录亮氨酸脑啡肽表达质粒大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属细菌蛋白化学合成

左手螺旋Z-DNA的研究:人工合成的Oligod(G—C)_n在PAGE中的异常泳动行为

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安徽大学学报（自然科学版） 1991年第1期15卷 83-90页

作者：黄汝多黄德民王振海梁镇和汤锦炎戴艳姿崔益本龚立三刘颂豪安徽大学上海生物化学研究所安徽光学精密机械研究所华南师范大学

为研究DNA的B,Z构象的相互转换,我们人工合成了dG-dC交替互补顺序的六聚体与十二聚体,在用PAGE法纯化过程中,发现5',3'-末端为双羟基的寡聚体的泳动速率是d(G-C)_3>d(G-C)_2>d(G-C),5'—末端带磷酸基的相应寡聚体的泳动速率则是:d~*(G-C... 详细信息

为研究DNA的B,Z构象的相互转换,我们人工合成了dG-dC交替互补顺序的六聚体与十二聚体,在用PAGE法纯化过程中,发现5',3'-末端为双羟基的寡聚体的泳动速率是d(G-C)_3>d(G-C)_2>d(G-C),5'—末端带磷酸基的相应寡聚体的泳动速率则是:d~*(G-C)>d~*(G-C)_2>d~*(G-C)_3,二者行为正好相反,而5',3'—末端为双羟基的d(G-C)_5与d(G-C)_6和5'—末端带磷酸基的十聚与十二聚体在PAGE中的泳动行为是一致的。由此推测5',3'—末端为双羟基的寡聚体在PAGE中的异常行为的转折点在六聚到十聚之间。

关键词：脱氧核糖核酸 Oligod(G-C)n PAGE

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The relationship between the connecting peptide of recombined single chain insulin and its biological function

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Science China(Life Sciences) 2001年第6期44卷 593-600页

作者：黄一丁梁镇和冯佑民 State Key Laboratory of Molecular Biology Shanghai Institute of Biochemistry and Cell Biology Shanghai Institutes for Biological Sciences Chinese Academy of Sciences Shanghai 200031 China

To investigate the relationship between the biological activity of recombined single chain insulin and the length of the connecting peptide, we designed and prepared three single chain insulin molecules, namely, PIP, [A]5PIP and [A]10PIP, by site-directed mutagenesis, in which B30 and A1 were linked through dipeptide A-K, heptapeptide A-A-A-A-A-A-K, and dodecapeptide A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-K, respectively. Their receptor binding capacities were 0.14%, 14.3% and 11.1% of that of insulin respectively and their in vivo biological activities were in consistence with their receptor binding capacity; whereas their growth promoting activities were 17%, 116.3% and 38% of that of insulin. These results suggested the following conclusions. (i) The recombined single chain insulin could also possess the same metabolic and mitogenic function as insulin. (ii) The receptor binding capacity of recombined single chain insulin to insulin receptor was closely related to the length and amino acid composition of the connecting peptide and could change from 0 to 100% of insulin depending on the different connecting peptides. This result further illustrated the necessity of B chain C-terminus swaying away from A chain N-terminus when insulin binds to its receptor. (iii) The mitogenic activity of recombined single chain insulin also depended on the length and the amino acid composition of the connecting peptide and was higher than its metabolic activity.

关键词： insulin single chain insulin receptor binding growth promoting GR2H6 cell line.

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