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鲎血细胞提取物生物活性的初步研究

海洋科学 2000年第10期24卷 48-50页

作者：张海涛梁景耀翁云祝其锋广东医学院生物化学与分子生物学研究所湛江524023

采用酸抽提法和SephadexG 50凝胶层析从鲎血细胞中分离出含有一低分子量组分的提取物 ,SDS PAGE显示一条区带。提取物可以抑制内毒素诱导的鲎试剂 (TAL)反应 ,抑制金色葡萄菌和大肠杆菌的生长 ,并发现25mg/L的提取物对HL 60细胞的生长... 详细信息

采用酸抽提法和SephadexG 50凝胶层析从鲎血细胞中分离出含有一低分子量组分的提取物 ,SDS PAGE显示一条区带。提取物可以抑制内毒素诱导的鲎试剂 (TAL)反应 ,抑制金色葡萄菌和大肠杆菌的生长 ,并发现25mg/L的提取物对HL 60细胞的生长有强烈的抑制作用。

关键词：鲎血细胞 HL-60细胞提取物生物活性酸抽提法

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特应性皮炎转录组学及靶点治疗研究进展

中华皮肤科杂志 2018年第2期51卷 157-159页

作者：陈丽洁梁景耀刘玉梅邵蕾王建琴广州医科大学皮肤病研究所、广州市皮肤病防治所 510095

随着基因研究的不断发展，曾经耳熟能详的中心法则“DNA-mRNA-蛋白质”模式已经无法解释许多复杂的生命过程，从全基因组层面研究各种生理病理过程是目前重要的研究方向之一。

关键词：特应性皮炎靶点治疗转录组学全基因组生命过程中心法则病理过程蛋白质

姜黄素逆转系统性红斑狼疮患者外泌体诱导的巨噬细胞吞噬功能受损

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中华皮肤科杂志 2019年第6期52卷 378-382页

作者：张淑娟唐亚萍梁景耀刘玉梅广州市皮肤病防治所皮肤科 510095

目的探讨姜黄素对系统性红斑狼疮(SLE)患者外泌体刺激后巨噬细胞吞噬能力的影响。方法选取2016年2月至2017年11月广州市皮肤病防治所和中山大学孙逸仙纪念医院诊治的活动期SLE患者18例,健康对照18例。提取受试者血清外泌体,分为健康对... 详细信息

目的探讨姜黄素对系统性红斑狼疮(SLE)患者外泌体刺激后巨噬细胞吞噬能力的影响。方法选取2016年2月至2017年11月广州市皮肤病防治所和中山大学孙逸仙纪念医院诊治的活动期SLE患者18例,健康对照18例。提取受试者血清外泌体,分为健康对照者外泌体(CON-exo)、SLE患者外泌体(SLE-exo)、CON-exo +姜黄素.SLE-exo +姜黄素用于刺激THP-1源性巨噬细胞,pHrodo-Red指示剂与巨噬细胞共孵育,流式细胞仪检测平均荧光强度,免疫荧光染色计算pHrodo-Red阳性细胞比例,评价巨噬细胞吞噬功能。Western印迹法检测CON-exo组、SLE-exo组、SLE-exo +姜黄素(浓度分别为1、5、20μmol/L)组CD14蛋白水平。两组比较使用Student-Z检验,多组间对比采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果流式细胞仪检测显示,CON-exo组、CON-exo +姜黄素组>SLE-exo组、SLE-exo +姜黄素组相对荧光强度分别为101.3%± 14.05%,94.27 ± 14.13%、41.02%± 9.54%.87.33%± 15.01%,差异有统计学意义(F= 10.81,P < 0.01);免疫荧光染色pHrodo检测显示,阳性细胞比例分别为82.16%± 5,20%.81.33%± 4.51%.54.20%± 9.31%.71.23%± 5.43%,差异有统计学意义(F=12.42, P< 0.01), SLE-exo组巨噬细胞荧光强度、阳性细胞比例均低于CON-exo组Q值分别为5.***.5.35,均P <0.01)和SLE-exo +姜黄素组Q值分别为3.***.3.26,均P <0.05)。Western印迹法显示,CON-exo组、SLE-exo组SLE-exo +姜黄素(浓度分别为1、5、20μmol/L)组细胞CD14蛋白水平分别为96.33%± 13.65%.30.67%± 5.86%,45.24%±&89%,72.81 %± 6.62%.90.67%±12.66%,差异有统计学意义(F = 24.57,P < 0.01), SLE-exo 组低于 Con-exo组(t= 8.06, P< 0.001)和SLE-exo +姜黄素(5、20μmol/L)(t值分别为5.***.7.38,均P<0.001),随着姜黄素剂量增加,CD14水平有升高的趋势。结论SLE患者外泌体明显抑制巨噬细胞吞噬功能,而姜黄素可逆转SLE患者外泌体的作用。

关键词：红斑狼疮,系统性外泌体姜黄素巨噬细胞细胞吞噬作用

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蛋白激酶CK2与肿瘤发生

国外医学（生理病理科学与临床分册） 2004年第3期24卷 277-279页

作者：梁景耀刘新光梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023

蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝 /苏氨酸蛋白激酶。CK2在肿瘤细胞中活性升高 ,它可作为癌基因与其它癌基因起协同作用 ,并具有抗凋亡作用 ,提示蛋白激酶CK2可能与肿瘤发生发展密切相关。

关键词：蛋白激酶CK2 肿瘤癌基因细胞凋亡

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淋球菌耐药现况及淋病治疗策略研究进展

临床皮肤科杂志 2020年第1期49卷 58-61页

作者：陈慧姮梁景耀梁晓冬邓婕张锡宝东莞市第八人民医院/东莞市儿童医院广东东莞523324 广州医科大学皮肤病研究所广东广州510095

淋病是目前全球最常见、对生活质量及生殖能力危害最大的性传播疾病之一。近年来,淋球菌对抗生素的耐药性日趋严峻,严重影响对淋病的有效治疗及传播的控制。应对日益严重的淋球菌耐药问题,除了研究病原菌的遗传特征及基因变异之外,如何... 详细信息

淋病是目前全球最常见、对生活质量及生殖能力危害最大的性传播疾病之一。近年来,淋球菌对抗生素的耐药性日趋严峻,严重影响对淋病的有效治疗及传播的控制。应对日益严重的淋球菌耐药问题,除了研究病原菌的遗传特征及基因变异之外,如何加强药物的科学应用,提高治疗效能,尽量减少耐药菌株的产生及控制其传播一直是研究的热点。尤其在治疗淋病药物使用的策略方面,如何既能提高治疗效能加强疗效,又可抑制耐药菌株的产生与传播进行了有益的研究,通过监测菌株对常用抗生素的最小抑菌浓度(MIC)制定有效的治疗方案,适度增大用药剂量、多种药物联合治疗等综合措施有效预防及控制淋球菌耐药菌株的形成与传播。

关键词：淋球菌耐药头孢曲松大观霉素监测

microRNA在炎症性皮肤病中作用的研究进展

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中华皮肤科杂志 2021年第2期54卷 178-182页

作者：叶瑞贤薛如君梁景耀刘焕颜熊绮颖董良娇张锡宝广州医科大学皮肤病研究所广州市皮肤病防治所皮肤科510095

microRNA(miRNA)是一类转录后调控基因表达的非编码RNA分子,参与皮肤各种病理生理过程。近年来,miRNA表达谱的变化已被报道与部分炎症性皮肤病相关,例如miR-203、miR-146a、miR-21在银屑病皮损中表达上调;miR-155、miR-146a在特应性皮... 详细信息

microRNA(miRNA)是一类转录后调控基因表达的非编码RNA分子,参与皮肤各种病理生理过程。近年来,miRNA表达谱的变化已被报道与部分炎症性皮肤病相关,例如miR-203、miR-146a、miR-21在银屑病皮损中表达上调;miR-155、miR-146a在特应性皮炎皮损中表达上调;miR-21、miR-223、miR-142-3p、miR142-5p在过敏性接触性皮炎皮损表达上调;而miR-146a、miR-155在系统性红斑狼疮患者外周血表达下调;miR-223在皮肌炎皮损中表达下调等。本文综述miRNA与部分炎症性皮肤病发生、发展之间的联系。

关键词：微RNAs 炎症皮肤疾病

酵母双杂交系统在研究蛋白激酶CK2中的应用

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国外医学（临床生物化学与检验学分册） 2003年第3期24卷 151-153页

作者：黄功华梁景耀刘新光梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所湛江524023

酵母双杂交系统是研究蛋白质间相互作用的一种有效方法 ,蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝 /苏氨酸蛋白激酶 ,在细胞增殖和分化、信号的传导和加工等方面起重要作用。

关键词：蛋白激酶CK2 性质酵母双杂交系统原理相互作用蛋白

酵母细胞中构建HL-60细胞的酵母双杂交cDNA文库

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广东医学院学报 2004年第1期22卷 1-3页

作者：黄功华梁景耀刘新光梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023

目的 :以酵母穿梭表达质粒 pGADT7 Rec为载体 ,采用CLONTECHSMART(switchingmechanismat 5′endofRNAtranscript)技术 ,在酵母细胞中构建HL 6 0细胞的酵母双杂交cDNA文库。方法 :从体外培养的HL 6 0细胞中提取总RNA ,利用经修饰的CDSⅢ... 详细信息

目的 :以酵母穿梭表达质粒 pGADT7 Rec为载体 ,采用CLONTECHSMART(switchingmechanismat 5′endofRNAtranscript)技术 ,在酵母细胞中构建HL 6 0细胞的酵母双杂交cDNA文库。方法 :从体外培养的HL 6 0细胞中提取总RNA ,利用经修饰的CDSⅢ引物合成cDNA第一链 ,在链的末端可自动延伸CCC ,在反应体系中加入SMARTⅢTMOligo作为cDNA第二链合成的引物 ,进行长距离 (LD) PCR合成双链cDNA ,后者经CLONTECHCHROMASPIN +TE 4 0 0 0柱纯化后 ,与线性质粒pGADT7 Rec共转化感受态酵母菌AH10 9,二者在酵母细胞中利用酵母细胞内具有较高的同源重组酶活性 ,进行同源重组成环行的有复制活性的文库质粒 ,在缺亮氨酸 (LEU)培养板上筛选出所有克隆 ,即为人HL 6 0细胞的酵母双杂交cDNA文库。结果 :共获得 1.0 3× 10 6转化子 ,文库扩增后 ,插入cDNA长度在 0 .1kb～ 1.5kb之间。结论 :在酵母细胞中利用CLONTECHSMART技术成功构建了HL 6 0细胞的酵母双杂交cDNA文库。

关键词：酵母细胞 HL-60细胞 cDNA文库 SMART技术同源重组

酵母穿梭表达质粒pGBKT7-hCK2α'的构建

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广东医学院学报 2004年第4期22卷 319-322页

作者：梁景耀黄功华刘新光梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023

目的 :用人蛋白激酶 CK2α'(h CK2α') c DNA片段构建酵母双杂交体系中“诱饵”载体。方法 :通过 PCR扩增已构建成功的重组质粒 p Th CKA'获得人 CK2 α'亚基编码区 c DNA,将 Pst /Nde 双酶切的 PCR产物连接到同样酶切的“诱饵”载体 p ... 详细信息

目的 :用人蛋白激酶 CK2α'(h CK2α') c DNA片段构建酵母双杂交体系中“诱饵”载体。方法 :通过 PCR扩增已构建成功的重组质粒 p Th CKA'获得人 CK2 α'亚基编码区 c DNA,将 Pst /Nde 双酶切的 PCR产物连接到同样酶切的“诱饵”载体 p GBKT7,转化感受态细胞 DH5α获得转化子 ,琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化子 ,将阳性克隆进行限制性内切酶酶切与 DNA测序的方法鉴定。将 DNA测序验证的 p GBKT7- h CK2α'转染感受态酵母株 AH1 0 9,Western blot鉴定 h CK2α'蛋白表达 ,检测表达产物对报道基因的激活作用及对酵母株AH1 0 9的毒性。结果 :限制性酶切结果表明 ,插入片段和重组质粒的大小与理论值推测值相符。重组质粒 p GBKT7- h CK2α'转染的酵母株AH1 0 9中能够表达 h CK2 α'蛋白 ,p GBKT7- h CK2 α'无自主激活报道基因的能力及对酵母的生长无毒性。结论 :p GBKT7- h CK2 α'酵母双杂“诱饵”载体构建获得成功 ,可应用于酵母双杂交体系。

关键词：蛋白激酶CK2 酵母双杂交 PCR