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1%本维莫德乳膏不同频次给药治疗甲银屑病的安全性和有效性分析

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临床皮肤科杂志 2024年第5期53卷 275-279页

作者：李薇梁景耀罗权甘奕传李倩薛如君张三泉广州医科大学皮肤病研究所、广州市皮肤病医院皮肤科广东广州510095

目的:观察1%本维莫德乳膏治疗甲银屑病的疗效和安全性,探索其起效时间,评估不同频次用药的疗效。方法:选择2020年1月至2022年1月在广州市皮肤病医院诊治的20例甲银屑病患者为研究对象,分为A组(右手指甲)和B组(左手指甲)。A组每日2次外... 详细信息

目的:观察1%本维莫德乳膏治疗甲银屑病的疗效和安全性,探索其起效时间,评估不同频次用药的疗效。方法:选择2020年1月至2022年1月在广州市皮肤病医院诊治的20例甲银屑病患者为研究对象,分为A组(右手指甲)和B组(左手指甲)。A组每日2次外用1%本维莫德乳膏,B组为每日1次,比较2组治疗后的临床疗效及不良反应。结果:治疗了16、20及24周后2组的甲银屑病严重程度指数(NAPSI)评分,A组均低于B组(均P0.05)。1%本维莫德乳膏治疗甲银屑病的主要不良反应为接触性皮炎。结论:1%本维莫德乳膏是治疗甲银屑病的一种高效且耐受性良好的新型非甾体外用药物,与每日1次用药比较,每日2次用药的起效时间更快,疗效更好。

关键词：本维莫德甲银屑病

用酵母双杂交系统筛选泛素/核糖体蛋白S27a

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癌症 2005年第1期24卷 40-46页

作者：黄功华梁景耀陈碧刘新光梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023

背景与目的:蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,在细胞增殖和分化、信号的传导和加工等方面起重要作用。CK2在多种白血病细胞中的活性比相应的正常组织高2～8倍,且CK2的变化与肿瘤的生长情况相关。... 详细信息

背景与目的:蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,在细胞增殖和分化、信号的传导和加工等方面起重要作用。CK2在多种白血病细胞中的活性比相应的正常组织高2～8倍,且CK2的变化与肿瘤的生长情况相关。为研究其在白血病细胞中的作用机制,本研究拟利用酵母双杂交系统从自行构建的HL鄄60细胞cDNA文库中筛选出与蛋白激酶CK2α'亚基相互作用的蛋白。方法:通过PCR扩增已构建成功的重组质粒pTHCK2A',获得人CK2α'亚基编码区cDNA;将PstⅠ/NdeⅠ双酶切的PCR产物连接到同样酶切的“诱饵”载体pGBKT7,构建酵母双杂交穿梭表达质粒(BD质粒),经DNA测序确证及转染感受态酵母菌AH109以排除自主激活。从体外培养的HL鄄60细胞中提取总RNA,以酵母穿梭表达质粒pGADT7鄄Rec为载体,采用CLONTECHSMART(switchingmechanismat5'endofRNAtranscript)技术,在酵母细胞中构建HL鄄60细胞的酵母双杂交cDNA文库,文库质粒为AD质粒。将上述构建成功的BD质粒、AD质粒共转染感受态酵母菌AH109,进行酵母双杂交实验。以筛选真阳性克隆(即与人蛋白激酶CK2α'相互作用的蛋白)。结果:经过酵母双杂交实验,筛选出6种与蛋白激酶CK2α'相互作用蛋白,核酸序列分析及同源性检索表明,其中1个与泛素/核糖体蛋白S27a有高度?

关键词：泛素核糖体蛋白S27a α'催化亚基蛋白激酶 CK2 人类酵母双杂交系统相互作用蛋白

重组小鼠CK2α亚基在大肠杆菌中的表达、纯化及活性测定

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中国药理学通报 2003年第10期19卷 1160-1164页

作者：梁景耀陈小文刘新光梁念慈广东医学院生物化学和分子生物学研究所湛江524023

目的　研究重组小鼠CK2α亚基在大肠杆菌中的表达 ,并进行纯化和活性的测定。方法　将已构建成功的小鼠蛋白激酶CK2α亚基cDNA的重组质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,产物依次进行DE 5 2、P11磷酸纤维素和肝素 Sepharose... 详细信息

目的　研究重组小鼠CK2α亚基在大肠杆菌中的表达 ,并进行纯化和活性的测定。方法　将已构建成功的小鼠蛋白激酶CK2α亚基cDNA的重组质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,产物依次进行DE 5 2、P11磷酸纤维素和肝素 Sepharose柱层析分离 ,SDS PAGE银染。结果　重组质粒转化表达菌经IPTG诱导后出现一分子量为 4 2ku蛋白过度表达 ,表达蛋白约占菌体总蛋白的 30 6 %。从2 87mg可溶性蛋白质中得到 4 7mg纯化蛋白。SDS PAGE银染显示纯化的蛋白为单一蛋白带。纯化的CK2α和 β亚基等摩尔分子混合可组成有完全活性的全酶。重组的CK2全酶的性质和功能与该酶的已知特性一致。

关键词：蛋白激酶CK2α亚基/小鼠原核表达蛋白质纯化

醛缩酶A可与人蛋白激酶CK2α′亚基发生特异相互作用

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第5期20卷 623-629页

作者：黄功华梁景耀陈碧刘新光梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所湛江524023

通过PCR扩增构建的重组质粒pTHCKA′获得人蛋白激酶CK2α′亚基编码区cDNA ,将PstⅠ NdeⅠ双酶切的PCR产物 ,连接到同样酶切的“诱饵”载体pGBKT7,构建为酵母双杂交穿梭表达质粒 (BD质粒 ) ,经DNA测序确证及转染感受态酵母菌AH10 9以... 详细信息

通过PCR扩增构建的重组质粒pTHCKA′获得人蛋白激酶CK2α′亚基编码区cDNA ,将PstⅠ NdeⅠ双酶切的PCR产物 ,连接到同样酶切的“诱饵”载体pGBKT7,构建为酵母双杂交穿梭表达质粒 (BD质粒 ) ,经DNA测序确证及转染感受态酵母菌AH10 9以排除自主激活 .从体外培养的HL 6 0细胞中提取总RNA ,采用CLONTECHSMART(switchingmechanismat 5′endofRNAtranscript)技术 ,在酵母细胞中构建HL 6 0细胞的酵母双杂交cDNA文库 ,将构建的BD质粒、文库cDNA、酵母穿梭表达质粒pGADT7 Rec ,共转染感受态酵母菌AH10 9进行酵母双杂交实验 .筛选与人蛋白激酶CK2α′相互作用蛋白 .筛选结果及一对一回复性实验显示 ,有 6种与CK2α′相互作用蛋白 ,核酸序列分析及同源性检索表明 ,其中 1种与醛缩酶A有高度同源性 (99 6 % ) .

关键词：醛缩酶A 人蛋白激酶CK2α’亚基酵母双杂交系统相互作用蛋白

人蛋白激酶CK2α′亚基在大肠杆菌中的克隆、表达及其重组蛋白的纯化与性质鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第2期20卷 176-182页

作者：陈小文刘新光梁景耀梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所湛江524023

通过RT PCR从HL 6 0细胞获得人蛋白激酶CK2α′亚基编码区cDNA ,将NdeⅠ HindⅢ双酶切的PCR产物和pT7 7表达载体进行定向克隆、细菌转化、电泳初筛和限制性酶切分析鉴定 .随机挑选阳性克隆进行DNA测序确证 ,筛选含与已知序列完全相符... 详细信息

通过RT PCR从HL 6 0细胞获得人蛋白激酶CK2α′亚基编码区cDNA ,将NdeⅠ HindⅢ双酶切的PCR产物和pT7 7表达载体进行定向克隆、细菌转化、电泳初筛和限制性酶切分析鉴定 .随机挑选阳性克隆进行DNA测序确证 ,筛选含与已知序列完全相符的重组质粒 (命名为pTCKA′) .将其转化BL2 1(DE3)菌 ,IPTG诱导后未见高效特异表达 .然后将人CK2α′cDNA亚克隆至GST融合蛋白表达载体 ,经同样转化和诱导步骤后可见一蛋白特异高效表达 .Western印迹结果证明 :该蛋白能与兔抗人CK2α′3 3 3 3 50 肽段抗血清发生特异性免疫反应 .采用GSH Sepharose 4B柱纯化 ,凝血酶酶切 ,最后从 4g细菌获 4 4mg纯化重组蛋白 .通过性质鉴定和酶动力学分析证明 :克隆、表达和纯化的重组蛋白是有生物学活性的人CK2α′亚基 .

关键词：人蛋白激酶CK2α'亚基大肠杆菌克隆表达纯化重组蛋白鉴定

小鼠蛋白激酶CK2β亚基的克隆、表达及活性测定

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基础医学与临床 2003年第4期23卷 392-398页

作者：陈小文郑克勤梁景耀刘新光梁念慈广东医学院生物化学和分子生物学研究所广东医学院医学遗传研究室湛江524023

通过反转录PCR从NIH 3T3小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2 β亚基编码区cDNA ;构建其表达质粒并经测序证明其编码小鼠蛋白激酶CK2 β亚基 ,但与两种已报道的小鼠CK2 β亚基cDNA编码区序列分别存在一个碱基差异 ,与大鼠、猪、兔和人C... 详细信息

通过反转录PCR从NIH 3T3小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2 β亚基编码区cDNA ;构建其表达质粒并经测序证明其编码小鼠蛋白激酶CK2 β亚基 ,但与两种已报道的小鼠CK2 β亚基cDNA编码区序列分别存在一个碱基差异 ,与大鼠、猪、兔和人CK2 β亚基cDNA的编码区相应碱基序列则一致。将其在表达菌BL2 1(DE3)中诱导表达 ,出现一 2 6kDa分子量蛋白过度表达 ,表达蛋白占菌体总蛋白的 31 7%,但大多数以不溶形式存在。Westernblot鉴定表明 :过度表达产物能与抗人CK2 β亚基抗体发生特异性免疫反应。当CK2α和 β亚基以 1:1摩尔比混合时 ,构成性的CK2全酶显示出最大活性 ,直接表明CK2 β亚基对CK2α有激活作用。这些结果有力地证明了克隆表达的重组蛋白是小鼠蛋白激酶CK2

关键词：小鼠蛋白激酶 CK2β亚基分子克隆 DNA测序免疫印迹

重组小鼠CK2α′亚基的GST融合表达、纯化及活性测定

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第四军医大学学报 2008年第19期29卷 1768-1771页

作者：黄雪坤梁景耀刘新光梁念慈佛山市第一人民医院妇产科生殖中心广东佛山528000 广东医学院生物化学和分子生物学研究所广东湛江524023

目的:研究重组小鼠CK2α′亚基在大肠杆菌中的谷胱甘肽S转移酶(GST)融合表达和纯化后活性的测定.方法:将含有小鼠CK2α′cDNA的pGEXGST-MCK2α′重组质粒转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,采用谷胱甘肽-琼脂糖珠4B柱... 详细信息

目的:研究重组小鼠CK2α′亚基在大肠杆菌中的谷胱甘肽S转移酶(GST)融合表达和纯化后活性的测定.方法:将含有小鼠CK2α′cDNA的pGEXGST-MCK2α′重组质粒转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,采用谷胱甘肽-琼脂糖珠4B柱纯化,SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳银染鉴定.将纯化的CK2α′与CK2β以不同的摩尔比混合,找到构成有完全活性的CK2全酶的最佳摩尔比.用各种已知CK2底物鉴定重组小鼠CK2全酶的性质.对纯化的CK2α′和重组CK2全酶进行动力学分析.结果:重组质粒转化表达菌经诱导后出现Mr约为38ku过度表达蛋白,约占菌体总蛋白的31.1%.SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳银染显示纯化的蛋白为单一蛋白带.纯化的CK2α′和β亚基等摩尔比混合可组成有完全活性的全酶.重组CK2全酶的性质与天然CK2一致.重组CK2全酶对ATP或GTP的米氏常数(Km)值均小于单独CK2α′,而最大反应速度(Vmax)值均大于单独CK2α′.结论:重组蛋白是小鼠蛋白激酶CK2α′亚基.

关键词：蛋白激酶类小鼠原核表达

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偏头痛与心境障碍关系的Meta分析

中国疼痛医学杂志 2013年第5期19卷 276-281页

作者：杨倩于生元梁景耀南开大学医学院天津300071 解放军总医院神经内科北京100853

目的:采用Meta分析对国内外已发表的有关偏头痛与心境障碍的相关文献进行综合分析,以探讨两者之间的相关性。方法:通过PubMed、The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE、中国期刊全文数据库(CJFD)和万方全文数据库进行检索,收集1988年1月... 详细信息

目的:采用Meta分析对国内外已发表的有关偏头痛与心境障碍的相关文献进行综合分析,以探讨两者之间的相关性。方法:通过PubMed、The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE、中国期刊全文数据库(CJFD)和万方全文数据库进行检索,收集1988年1月～2011年12月发表的偏头痛与心境障碍关系的相关文献,应用Revman 5.0软件对所得资料进行Meta分析,选用固定效应模型进行合并效应量。结果:共纳入13项研究,偏头痛患者总数为9668例,其中偏头痛与抑郁共病的患者为2464例(25.5%);偏头痛患者抑郁的发生率较非偏头痛患者高,差异有统计学意义(OR=3.18,95%CI=2.96-3.43,P<0.00001)。结论:偏头痛患者患抑郁的风险是非偏头痛患者的3.18倍,偏头痛合并心境障碍的机制尚有待于研究。

关键词：偏头痛共病抑郁双相障碍 Meta分析

Livin siRNA表达质粒的构建及其对宫颈癌HeLa细胞的作用

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中山大学学报（医学科学版） 2008年第4期29卷 435-438,443页

作者：黄雪坤梁景耀李光仪佛山市第一人民医院妇产科广东佛山528000 中山大学中山医学院药理教研室广东广州510080

【目的】构建和鉴定针对人抑凋亡基因livin的siRNA质粒载体,并研究其对宫颈癌HeLa细胞的作用。【方法】设计和合成针对人livin基因的siRNA寡核苷酸,定向克隆入质粒载体pmU6,脂质体瞬时转染入HeLa细胞中,用RT-PCR技术检测livin基因的mRN... 详细信息

【目的】构建和鉴定针对人抑凋亡基因livin的siRNA质粒载体,并研究其对宫颈癌HeLa细胞的作用。【方法】设计和合成针对人livin基因的siRNA寡核苷酸,定向克隆入质粒载体pmU6,脂质体瞬时转染入HeLa细胞中,用RT-PCR技术检测livin基因的mRNA表达水平,Western Blot技术检测Livin蛋白表达水平。用MTT法分析HeLa细胞增殖改变,流式细胞仪检测HeLa细胞周期变化。【结果】livinsiRNA表达质粒能高效而特异地剔除HeLa细胞中livin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05),将HeLa细胞阻止在G1期。【结论】livin基因的siRNA对HeLa细胞增殖和细胞周期调控有重要影响,细胞凋亡可能是导致其细胞死亡的主要原因。

关键词： livin siRNA 宫颈癌细胞凋亡