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巨噬细胞移动抑制因子及其拮抗剂ISO-1在病理性瘢痕发病机制中的作用

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实用医学杂志 2017年第3期33卷 412-416页

作者：梁大宁柯昌能广东省深圳市龙华新区中心医院烧伤整形外科 518110

目的:探究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)参与病理性瘢痕发病的具体机制,以及其拮抗剂ISO-1对病理性瘢痕来源成纤维细胞的影响。方法:收集正常皮肤、正常瘢痕以及病理性瘢痕标本,行HE以及免疫组化染色。利用组织块培养法分离培养人成纤维细... 详细信息

目的:探究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)参与病理性瘢痕发病的具体机制,以及其拮抗剂ISO-1对病理性瘢痕来源成纤维细胞的影响。方法:收集正常皮肤、正常瘢痕以及病理性瘢痕标本,行HE以及免疫组化染色。利用组织块培养法分离培养人成纤维细胞,予以不同浓度ISO-1干预(0~100μmol/mL)。TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot以及RT-PCR检测成纤维细胞特异性蛋白以及PI3K/Akt/mTOR通路的表达情况。结果:MIF在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩中表达强于正常瘢痕和正常皮肤。无干预组凋亡细胞较少,予以不同浓度ISO-1干预后,凋亡率逐渐上升。各组各时间点组间迁徙率比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。随着干预浓度上升,Ⅰ型胶原蛋白、纤连蛋白以及结缔组织生长因子的蛋白和mRNA表达量均下降。活化PI3K以及活化Akt表达量随着ISO-1浓度增加而下降。结论:MIF在不同类型瘢痕组织中表达存在差异,ISO-1通过PI3K/Akt/mTOR通路抑制成纤维细胞生物学行为。

关键词：巨噬细胞移动抑制因子病理性瘢痕 ISO-1 成纤维细胞

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老年人皮肤多能干细胞的分离及有效扩增

中华实验外科杂志 2005年第12期22卷 1436-1437,i0020页

作者：柯昌能利天增徐盈斌祁少海黄冰谢举临中山大学附属第一医院烧伤科广州510080 中山大学眼科中心

目的探讨老年人皮肤多能干细胞分离、扩增方法。方法 6例老人皮肤标本,在限制性培养基和血清作用下筛选克隆和扩增传代;免疫细胞化学技术、克隆分析等方法评价其生理特性。结果 1 cm2老年人皮肤原代获得400～600个克隆;扩增后每代获(2... 详细信息

目的探讨老年人皮肤多能干细胞分离、扩增方法。方法 6例老人皮肤标本,在限制性培养基和血清作用下筛选克隆和扩增传代;免疫细胞化学技术、克隆分析等方法评价其生理特性。结果 1 cm2老年人皮肤原代获得400～600个克隆;扩增后每代获(2～3)×105个克隆。克隆向神经元、神经胶质、平滑肌和脂肪样细胞分化;单克隆增殖细胞也能向上述细胞分化。克隆表达 Nestine、fibronectin、c-Myc、信号转导和转录激活因子3、端粒体逆转录酶蛋白。结论老年人皮肤多能干细胞在限制性培养基和血清交替作用下能有效分离和扩增,使老年人干细胞自体移植成为可能。

关键词：干细胞皮肤老年人细胞分离有效扩增

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解毒烧伤膏的抗菌作用研究

中山大学学报（医学科学版） 2005年第B3期26卷 91-93页

作者：徐盈斌利天增祁少海赵李平柯昌能谢举临中山大学附属第一医院烧伤科广东广州510080

【目的】探讨解毒烧伤膏有无抗菌作用。【方法】采用纸片扩散法,分别将解毒烧伤膏、聚乙烯吡咯烷酮碘(聚维酮碘)软膏、京万红软膏和湿润烧伤膏涂于直径6mm 的纸片上,置于接种了烧伤创面常见菌种包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠... 详细信息

【目的】探讨解毒烧伤膏有无抗菌作用。【方法】采用纸片扩散法,分别将解毒烧伤膏、聚乙烯吡咯烷酮碘(聚维酮碘)软膏、京万红软膏和湿润烧伤膏涂于直径6mm 的纸片上,置于接种了烧伤创面常见菌种包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、不动杆菌等的琼脂平板培养皿中,37℃孵育24h,观察并测量抑菌圈直径大小。【结果】四种外用药中,以聚维酮碘软膏抗菌作用最强,解毒烧伤膏次之,再次为京万红软膏,湿润烧伤膏基本无抗菌作用。聚维酮碘软膏抑菌圈大小分别与其它三者两两比较,差异有显著性意义(P<0.01);解毒烧伤膏抑菌圈大小与京万红软膏及湿润烧伤膏两两比较,差异有显著性意义(P<0.05)。【结论】解毒烧伤膏对烧伤科常见的革兰阴性及革兰阳性菌包括部分耐药菌具有一定的抑制作用。

关键词：解毒烧伤膏烧伤创面细菌药物敏感试验

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胸苷磷酸化酶与肝癌血管新生及预后的关系

医师进修杂志（外科版） 2004年第7期27卷 31-33页

作者：刘维藩柯昌能李荣江何义舟深圳市西乡人民医院外科广东深圳518000 广东医学院附属医院外科广东湛江524023

目的　研究胸苷磷酸化酶 (TP)在原发性肝癌 (HCC)血管新生化及预后中的作用。方法　收集 6 5例HCC患者围手术期一般临床资料和病理学资料 ,并进行随访。分析TP的免疫组织化学表达与微血管密度 (MVD)计数的关系 ;对随访的 5 4例患者作生... 详细信息

目的　研究胸苷磷酸化酶 (TP)在原发性肝癌 (HCC)血管新生化及预后中的作用。方法　收集 6 5例HCC患者围手术期一般临床资料和病理学资料 ,并进行随访。分析TP的免疫组织化学表达与微血管密度 (MVD)计数的关系 ;对随访的 5 4例患者作生存分析。结果　 (1)肝癌组织TP阳性表达率明显高于正常肝组织 (P <0 .0 5 )。 (2 )肝癌组织TP阳性表达组、阴性表达组MVD计数分别为 16 .14± 5 .11、10 .11± 4 .5 5 ,两者差异具有统计学意义 (P <0 .0 1)。 (3)TP的表达与肝癌大小、Edmondson分级、包膜是否完整、有无门静脉癌栓明显相关。 (4 )TP表达阳性HCC组 1年、2年、3年复发率分别为 4 0 0 %、6 6 .7%、79.2 % ;TP表达阴性HCC组则分别为 2 7.4 %、31.3%、4 5 .7%。TP阳性HCC组 2年、3年复发率明显高于TP阴性组 (P <0 .0 1)。 (5 ) 5 4例随访患者 ,TP阳性组总体生存率明显低于阴性组 (P <0 .0 1)。结论　TP在HCC血管新生化中起重要作用 ,可作为HCC术后一个新的预后指标。

关键词：肝肿瘤预后血管生成胸苷磷酸化酶微血管密度

真皮多能干细胞复合血浆构建真皮再生模版及移植观察

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第15期13卷 2813-2817页

作者：柯昌能唐世杰易先锋朱镇森汕头大学医学院附属第二医院烧伤整形科广东省汕头市515041

背景:要实现组织工程皮肤生物学功能重建,应从重建功能正常的真皮入手,使之成为汗腺、血管、神经和脂肪再生的场所。目的:以真皮多能干细胞为种子细胞构建真皮再生模版,观察其移植后的成活状态。设计、时间及地点:单因素设计,重复观察,... 详细信息

背景:要实现组织工程皮肤生物学功能重建,应从重建功能正常的真皮入手,使之成为汗腺、血管、神经和脂肪再生的场所。目的:以真皮多能干细胞为种子细胞构建真皮再生模版,观察其移植后的成活状态。设计、时间及地点:单因素设计,重复观察,于2006-01/06在中山大学眼科中心国家重点实验室和中山大学动物中心进行。材料:6周龄BALB/c裸鼠10只,由中山大学动物中心提供。人皮肤多能干细胞来源于接受瘢痕整形手术患者的正常皮肤,由汕头大学医学院附属第二医院烧伤整形科提供。人O型血浆为大连制药有限公司产品。方法:取10mL人O型血浆,与生理盐水、氨甲环酸混匀后,添加1×105个经5-Brdu标记的人皮肤多能干细胞克隆,振荡致细胞团均匀分布在血浆中,再滴加氯化钙,放置37℃培养箱30min后成凝胶状,然后加入含胎牛血清、B27的DMEM/F12培养液,培养四五天细胞融合成片,吸干凝胶表面水分,使之成膜状,即为真皮模版。裸鼠麻醉后,背部制作全层皮肤缺损创面,然后植入真皮模版,覆盖创面。主要观察指标:真皮模版移植后观察血管化程度,创面上皮化后免疫组织化学检测模版中5-Brdu标记干细胞的成活状态。结果:人皮肤多能干细胞在血浆中增殖良好,真皮模版为白色生物膜,厚(500±254)μm,真皮模版中部分细胞仍表达nestin。真皮模版植入后,第3天模版下有少量的血管生成,第9天大量细胞迁入模版中。创面上皮化后第1,3周,皮肤组织的表皮和真皮中均可见大量5-BrdU阳性细胞分布。结论:人皮肤多能干细胞接种于血浆中构建的真皮模版移植后,能较快血管化,且真皮模版干细胞在受体组织中能成活下来。

关键词：皮肤多能干细胞组织工程真皮模版血管化

P物质对增生性瘢痕中肥大细胞释放组织胺的影响

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中华实验外科杂志 2006年第2期23卷 236-238页

作者：赵李平利天增祁少海徐盈斌谢举临柯昌能刘坡中山大学附属第一医院烧伤科广州510080

目的探讨神经肽P物质(SP)与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制。方法用透射电镜观察人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞(MC)超微结构特点及其功能状态;I型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测SP对... 详细信息

目的探讨神经肽P物质(SP)与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制。方法用透射电镜观察人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞(MC)超微结构特点及其功能状态;I型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测SP对分离的MC组织胺释放率的影响,观察时间及剂量-效应关系。结果(1)增生性瘢痕中MC占有核细胞的百分比(8.6±1.9)%显著高于非增生性瘢痕(6.1±1.5)%及皮肤组织[(5.3±1.2)%,P<0.01]。(2)多数增生性瘢痕组织中的肥大细胞呈活化状态。(3)增生性瘢痕组织中MC的组织胺释放率随SP刺激时间的延长和浓度的增加而递增,与非增生性瘢痕组及皮肤组差异有统计学意义(P<0.01)。结论SP明显提高增生性瘢痕中MC释放组织胺的水平而产生痒觉,这可能是增生性瘢痕瘙痒发生的机制之一。

关键词： P物质肥大细胞组织胺

解毒烧伤膏对猪深Ⅱ度烫伤创面愈合中肿瘤坏死因子α和转化生长因子β_1表达的影响

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中华烧伤杂志 2006年第3期22卷 225-226页

作者：赵李平利天增徐盈斌柯昌能张涛祁少海谢举临中山大学附属第一医院烧伤科广州510080

解毒烧伤膏能不同程度地促进烧伤浅Ⅱ度、深Ⅱ度和残余创面的愈合，无明显不良反应。为进一步探讨其促进创面愈合的分子机制，笔者进行了以下实验。

关键词：烫伤创面愈合解毒烧伤膏转化生长因子β1 肿瘤坏死因子α 深Ⅱ度促进创面愈合不同程度残余创面不良反应分子机制

解毒烧伤膏对深Ⅱ度烫伤创面愈合中白细胞介素8、10表达的影响

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中华烧伤杂志 2006年第2期22卷 127-128页

作者：赵李平利天增徐盈斌祁少海柯昌能张涛谢举临中山大学附属第一医院烧伤科广州510080

解毒烧伤膏能不同程度地促进浅Ⅱ、深Ⅱ度烧伤和残余创面的愈合，无明显不良反应。为进一步探讨其在促进创面愈合过程中的分子机制，笔者进行了下述实验。

关键词：烫伤创面愈合解毒烧伤膏深Ⅱ度烧伤白细胞介素8 不同程度残余创面不良反应分子机制愈合过程

原发性肝癌组织中胸苷磷酸化酶的表达及其临床意义

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中华肝胆外科杂志 2009年第8期15卷 571-574页

作者：刘维藩柯昌能李荣江深圳市西乡人民医院外科 518000

目的探讨胸苷磷酸化酶（TP）与原发性肝癌（HCC）术后预后的关系。方法收集65例HCC病人围手术期一般临床资料和病理学资料，并进行随访。分析TP的免疫组织化学表达与微血管密度（MVD）计数的关系；对随访的54例病人作生存分析。结果（... 详细信息

目的探讨胸苷磷酸化酶（TP）与原发性肝癌（HCC）术后预后的关系。方法收集65例HCC病人围手术期一般临床资料和病理学资料，并进行随访。分析TP的免疫组织化学表达与微血管密度（MVD）计数的关系；对随访的54例病人作生存分析。结果（1）肝癌组织TP阳性表达率明显高于正常肝组织（P〈0．05）。（2）肝癌组织TP阳性表达组、阴性表达组MVD计数分别为16．14±5．11、10．11±4．55，两者差异具有统计学意义（P〈0．01）。（3）TP的表达与肝癌大小、Edmondson分级、包膜是否完整、有无门静脉癌栓明显相关。（4）TP表达阳性HCC组1、2、3年复发率分别为40％、66．7％、79．2％；TP表达阴性HCC组则分别为27．4％、31．3％、45．7％。TP阳性HCC组2、3年复发率明显高于TP阴性组（P〈0．01）。（5）54例随访病人，TP阳性组总体生存率明显低于阴性组（P〈0．01）。结论TP是HCC术后一个新的评估预后的指标。

关键词：癌肝细胞预后血管生成胸苷磷酸化酶微血管密度