检索结果-南通市图书馆

间充质干细胞体外调控骨髓造血前体细胞向单核系分化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实验生物学报 2004年第2期37卷 139-144页

作者：岑洪林茂芳黄河蔡真浙江大学医学院第一附属医院血液科骨髓移植中心杭州310003

研究间充质干细胞(MSC)能否在体外调控造血。体外分离培养人骨髓来源的MSC,RT-PCR检测其造血生长因子的表达,并以其为饲养层细胞,接种骨髓单个核细胞(MNC),观察生长情况,并通过形态学观察和流式细胞术分析,鉴定细胞来源和分化方向。结... 详细信息

研究间充质干细胞(MSC)能否在体外调控造血。体外分离培养人骨髓来源的MSC,RT-PCR检测其造血生长因子的表达,并以其为饲养层细胞,接种骨髓单个核细胞(MNC),观察生长情况,并通过形态学观察和流式细胞术分析,鉴定细胞来源和分化方向。结果显示,MSC构成性表达SCF、Flt3L和M-CSF,不表达G-CSF和GM-CSF,在骨髓MNC和MSC共培养体系中,大约2周左右可以看到大量的圆形细胞粘附在梭型MSC上生长,细胞胞体为圆形,胞浆较丰富,胞核为圆形、半月型或肾型,部分细胞呈典型的单核细胞形态,流式细胞术分析该类细胞表达CD14,不表达CD15、CD41、glycophorin A、CD5和CD19。表明不需要添加外源性造血生长因子,间充质干细胞能在体外调控骨髓造血前体细胞向单核系分化,其定向分化可能与MSC分泌造血生长因子及MSC与造血细胞间相互作用有关。

关键词：间充质干细胞骨髓造血前体细胞定向分化单核细胞体外调控造血生长因子

Human cytomegalovirus protects multiple myeloma cell line KM3 cells from apoptosis induced by growth factor withdrawal

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Chinese Medical Journal 2004年第6期117卷 903-907页

作者：魏国庆林茂芳黄河蔡真 Department of Hematology First Affiliated HospitalCollege of Medical SciencesZhejiang University

Background There is a higher rate of cytomegalovirus (CMV) reactivation in patients with multiple myeloma after an autologous stem cell transplantation,but no attention has been given thus far to a possible pathogenetic interplay between CMV and multiple myeloma. CMV can infect many kinds of cells,and CMV infection has been shown to inhibit apoptotic responses in several cell systems. In this study the authors investigated the alterations in apoptosis in the multiple myeloma cell line KM3 after infection with CMV and proposed a possible *** KM3 cells were infected with 100,10,or 1 TCID50 of CMV and then cultured in serum-free RPMI 1640. An RT-PCR-based assay was used to detect mRNA expression of CMV-IE,glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH),and IL-6 in CMV-infected and mock-infected cells. Flow cytometry was used to detect apoptotic cells. CMV particles and apoptotic cells were also examined with an electron microscope. Results CMV-infected KM3 cells clearly expressed immediate early (IE) antigen mRNA when compared to uninfected cells,and there were fewer apoptotic cells among cells treated with 100 or 10 TCID50 of CMV after culturing in serum-free RPMI 1640. CMV particles were observable in infected cells under an electron microscope. Expression of IL-6 mRNA increased after *** CMV can infect the multiple myeloma cell line KM3,inhibit the apoptotic response in these cells after apoptosis induction in serum-free culture,and increase the expression of IL-6 mRNA.

关键词： cytomegalovirus·multiple myeloma·infection·apoptosis·IL-6

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转化生长因子β_1对树突细胞功能的影响

中华血液学杂志 2004年第8期25卷 449-452页

作者：林茂芳牟海波岑洪浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心杭州310003

目的　研究转化生长因子 β1(TGF β1)对树突细胞 (dendriticcells,DC)功能的影响。方法　在培养体系中应用不同的细胞因子培养未成熟DC (imDC ,GM CSF)和TGF β1处理的DC(TGFβ DC ,GM CSF +TGF β1) ,观察其对脂多糖 (LPS)刺激的反应... 详细信息

目的　研究转化生长因子 β1(TGF β1)对树突细胞 (dendriticcells,DC)功能的影响。方法　在培养体系中应用不同的细胞因子培养未成熟DC (imDC ,GM CSF)和TGF β1处理的DC(TGFβ DC ,GM CSF +TGF β1) ,观察其对脂多糖 (LPS)刺激的反应。透射电镜观察细胞超微结构 ,流式细胞仪检测细胞表型 ,BrdUELISA法检测DC刺激异基因T细胞增殖的能力 ,ELISA法检测DC在LPS刺激后分泌IL 12 p70的水平 ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测Toll like受体 4(TLR4 )表达。结果　与imDC相比 ,TGFβ DC在LPS刺激后仍能保持未成熟的细胞形态。TGFβ DC的CD80 ,CD86表达明显低于imDC[(4 .14± 0 .95 ) %和 (13.90± 7.2 2 ) % ;(8.6 0± 0 .75 ) %和 (2 0 .6 3± 5 .0 3) % ,P值均 <0 .0 5 ]。ImDC对LPS有更强的反应性 ,其中I Ab、CD80升高的幅度明显高于TGFβ DC(P值分别 <0 .0 1及 <0 .0 5 )。TGFβ DC在 96h的混合淋巴细胞反应中 ,DC/T细胞为 1∶4 ,1∶1时 ,TGFβ DC的异基因刺激能力较imDC弱 (P值均 <0 .0 5 )。LPS刺激TGFβ DC 2 4h后分泌IL 12p70的能力显著低于imDC(P <0 .0 1) ,TGFβ DC较imDC弱表达TLR4 (P <0 .0 5 )。结论　TGFβ能抑制DC共刺激分子的表达 ,且能抵抗LPS的促成熟作用 ,并可能与其TLR4的表达下降?

关键词：转化生长因子β1 树突细胞细胞功能 TGF-β1 DC Toll-like受体4

急性白血病患者血清可溶性肿瘤坏死因子受体水平及其临床意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 1999年第5期20卷 245-248页

作者：林茂芳孟筱坚浙江医科大学附属第一医院血液科

目的探讨急性白血病（ＡＬ）患者血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的两种可溶性受体（ｓＴＮＦＲⅠ和ｓＴＮＦＲⅡ）水平及其与临床状况，化疗效应及ＴＮＦα水平的关系。方法用ＥＬＩＳＡ法检测５７例ＡＬ及３１名正常人血清中ｓＴＮＦＲⅠ... 详细信息

目的探讨急性白血病（ＡＬ）患者血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的两种可溶性受体（ｓＴＮＦＲⅠ和ｓＴＮＦＲⅡ）水平及其与临床状况，化疗效应及ＴＮＦα水平的关系。方法用ＥＬＩＳＡ法检测５７例ＡＬ及３１名正常人血清中ｓＴＮＦＲⅠ、ｓＴＮＦＲⅡ及ＴＮＦα水平。用ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归法分析６种可能影响ＡＬ疗效的参数。结果①３１例初发未治者两种ｓＴＮＦＲｓ浓度均高于正常对照组（ｕ值分别为４５８１和３．２０３，Ｐ分别＜０．００１和＜０．００５）及１５例已获骨髓缓解（ＢＭＲ）者（ｕ值分别为３．０８１和２２０１，Ｐ分别＜０．００５和＜０．０５）。１１例复发难治者血清ｓＴＮＦＲⅠ及ｓＴＮＦＲⅡ水平均高于正常对照组（ｕ值分别为４．０７７和２．５０３，Ｐ分别＜０．００１和＜０．０５），与初发末治者比较，差异不显著（ｕ值为０４５７和０．６３９，Ｐ均＞０．０５），而其ｓＴＮＦＲⅠ水平高于ＢＭＲ组（ｕ值为２．３９２，Ｐ＜０．０５）。ＢＭＲ组与正常对照组的两种ｓＴＮＦＲｓ水平的差异均不显著（ｕ值为１．０６６和０．７８５，Ｐ均＞０．０５）。②１０例初发未治急性淋巴细胞白血病患者血清ｓＴＮＦＲⅠ浓度高于２１例急性非淋巴细胞白血病患者（ｕ值为２?

关键词：白血病急性肿瘤坏死因子 sTNFR

基于细胞因子分泌对人混合淋巴细胞反应中的T淋巴细胞进行测定和纯化(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病理生理杂志 2004年第12期20卷 2244-2247页

作者：孟筱坚林茂芳浙江大学医学院附属第一医院血液科浙江杭州310003

目的对同种异体外周血单个核细胞(PBMNCs)刺激后分泌细胞因子的T淋巴细胞进行测定和纯化,为研究介导同种异体反应的T淋巴细胞提供新的途径。方法利用新颖的细胞因子分泌检测方法(CKSA)从单细胞水平定量测定人混合淋巴细胞反应中分泌IFN-... 详细信息

目的对同种异体外周血单个核细胞(PBMNCs)刺激后分泌细胞因子的T淋巴细胞进行测定和纯化,为研究介导同种异体反应的T淋巴细胞提供新的途径。方法利用新颖的细胞因子分泌检测方法(CKSA)从单细胞水平定量测定人混合淋巴细胞反应中分泌IFN-γ,IL-4和IL-10的T淋巴细胞;对分泌IFN-γ的T细胞进行磁性纯化。结果同种异体PBMNCs刺激后检测到分泌IFN-γ的T淋巴细胞水平明显升高(112%±013%),而分泌IL-4和IL-10的T淋巴细胞则无升高(分别为012%±003%和010%±003%);分泌IFN-γ的T淋巴细胞可以被进一步纯化(938±221)倍。结论利用CKSA从单细胞水平定量测定同种异体PBMNCs刺激后分泌IFN-γ的T淋巴细胞水平显著升高,这些细胞可以被有效地纯化。

关键词：细胞因子类 T淋巴细胞

可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体在间充质干细胞微环境中对脐带血粒-单系造血前体细胞分化的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 2007年第5期28卷 294-297页

作者：岑洪林茂芳广西医科大学附属肿瘤医院化疗一科南宁530021 浙江大学医学院第一附属医院血液科骨髓移植中心

目的探讨在间充质干细胞（MSC）微环境中可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体（solu—ble M-CSF receptor，sMR）对脐带血造血前体细胞增殖和分化的影响。方法实验组[单纯细胞因子组（CK组）＋sMR组]以MSC为基质层细胞，建立基于MSC的造血... 详细信息

目的探讨在间充质干细胞（MSC）微环境中可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体（solu—ble M-CSF receptor，sMR）对脐带血造血前体细胞增殖和分化的影响。方法实验组[单纯细胞因子组（CK组）＋sMR组]以MSC为基质层细胞，建立基于MSC的造血细胞体外扩增体系，接种脐带血单个核细胞，培养体系中加入外源性造血生长因子SCF、Fh3L、TPO和IL-6，同时加入sMR，培养1、2、3、4周对扩增的细胞进行细胞计数、集落培养，对照组为无sMR的CK组。结果①培养3、4周，细胞数量迅速增加，对照组和实验组分别达108．47倍和120．67倍，细胞数量差异无统计学意义（P〉0．05）。②随体外培养时间延长集落形成细胞（colony forming cell，CFC）增加，对照组和实验组培养3周时每1×10^5细胞CFC分别达38．1×10^3和54．1×10^3，4周对照组逐渐下降至18．1×10^3，但实验组仍持续增加至84．0×10^3；从第3周开始，实验组扩增CFC的能力明显高于对照组（P〈0．01）。③红系CFC于扩增1周后迅速达到高峰，对照组和实验组每1×10^5细胞CFC分别为5891．2和5635．6，此后红系CFC数迅速下降，3周时为0，两组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。④粒单系CFC在体外扩增过程中逐渐增加，对照组和实验组培养3周时每1×10^5细胞CFC分别达31．5×10^3和54．1×10^3；对照组从第4周开始出现回落（18．3×10^3），但实验组培养4周时仍持续增加（80．8×10^3）。结论sMR能抑制脐带血造血前体细胞在间充质干细胞微环境中扩增时出现的分化，其作用体现在粒单系，对红系无明显影响。

关键词：受体巨噬细胞集落刺激因子可溶性间充质干细胞脐带血分化集落形成

同种异体反应中分泌细胞因子的T淋巴细胞的测定和纯化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2004年第19期84卷 1656-1657页

作者：孟筱坚林茂芳浙江大学医学院附属第一医院血液科杭州310003

供者T淋巴细胞及其分泌的细胞因子介导的同种异体反应,在异基因造血干细胞移植allo-SCT后发生的急性移植物抗宿主病(aGVHD)中起关键作用,对该细胞群的研究具有重要价值,但是目前国内缺乏良好的手段进行检测和进一步的纯化分析.我们将国... 详细信息

供者T淋巴细胞及其分泌的细胞因子介导的同种异体反应,在异基因造血干细胞移植allo-SCT后发生的急性移植物抗宿主病(aGVHD)中起关键作用,对该细胞群的研究具有重要价值,但是目前国内缺乏良好的手段进行检测和进一步的纯化分析.我们将国外新近开发的细胞因子分泌检测方法(CKSA)首次应用于同种异体反应,在单细胞水平检测了人混合淋巴细胞反应中分泌干扰素γ(IFN-γ),白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素10(IL-10)的T淋巴细胞水平,并对分泌IFN-γ的T淋巴细胞进行纯化;为该技术应用于介导同种异体反应的T细胞的研究提供了依据。

关键词：同种异体 T淋巴细胞分泌细胞因子 IFN-γ 混合淋巴细胞反应纯化急性移植物抗宿主病单细胞缺乏水平

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高三尖杉酯碱抗血管新生潜能的探讨

中华血液学杂志 2004年第5期25卷 296-298页

作者：叶琇锦林茂芳浙江大学医学院附属第一医院血液科杭州310003

已有研究显示,在体外高三尖杉酯碱(HHT)能诱导不同类型白血病细胞凋亡.HHT主要通过线粒体膜电位下降、细胞色素C释放和半胱天冬酶3激活而诱导细胞凋亡[1].近年来,白血病与血管新生的关系引起了人们的关注,HHT是否也能通过抗血管新生作用... 详细信息

已有研究显示,在体外高三尖杉酯碱(HHT)能诱导不同类型白血病细胞凋亡.HHT主要通过线粒体膜电位下降、细胞色素C释放和半胱天冬酶3激活而诱导细胞凋亡[1].近年来,白血病与血管新生的关系引起了人们的关注,HHT是否也能通过抗血管新生作用,发挥抗白血病效应?为此,我们以huECV304细胞和K562细胞为对象,初步探讨HHT抗血管新生作用的潜能。

关键词：高三尖杉酯碱血管新生 HHT 白血病细胞培养

同种异体反应中分泌细胞因子T淋巴细胞的测定及其临床初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华内科杂志 2004年第9期43卷 690-692页

作者：孟筱坚林茂芳浙江大学医学院附属第一医院血液科杭州310003

目的　测定同种异体反应中分泌细胞因子的T淋巴细胞水平并初步探讨其临床意义。方法　利用细胞因子分泌检测方法 (CKSA)从单细胞水平定量测定人混合淋巴细胞反应中分泌γ干扰素 (IFNγ) ,白细胞介素 4 (IL 4 )和IL 10的T细胞 ;分析 2例... 详细信息

目的　测定同种异体反应中分泌细胞因子的T淋巴细胞水平并初步探讨其临床意义。方法　利用细胞因子分泌检测方法 (CKSA)从单细胞水平定量测定人混合淋巴细胞反应中分泌γ干扰素 (IFNγ) ,白细胞介素 4 (IL 4 )和IL 10的T细胞 ;分析 2例患者外周血分泌IFNγ的T细胞和急性移植物抗宿主病 (aGVHD)的关系。结果　经同种异体外周血单个核细胞 (PBMNC)刺激后分泌IFNγ的T细胞水平 (1 12± 0 13) %明显高于对照组 (0 2 3± 0 0 7) % ,P 0 0 5。 2例患者外周血分泌IFNγ的T细胞水平和aGVHD有一定的相关性。结论　利用CKSA测定同种异体PBMNC刺激后分泌IFNγ的T细胞水平显著升高。

关键词： IFNγ 同种异体 T细胞 T淋巴细胞分泌细胞因子血分 GVHD 水平初探结论