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IFN-τ在绵羊体内外胚胎早期着床中的差异表达研究

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IFN-τ在绵羊体内外胚胎早期着床中的差异表达研究

作者：林自力北京农学院

学位级别：硕士

IFN-τ属于I型干扰素家族的重要亚型,是哺乳动物(尤其是牛、羊等家畜)着床前胚胎滋养层细胞分泌的一种特殊蛋白。作为绵羊胚胎着床过程中目前所知的唯一胚胎源信号,IFN-τ直接参与妊娠过程,阻止黄体退化,维持孕酮产生,因此对动物早期胚... 详细信息

IFN-τ属于I型干扰素家族的重要亚型,是哺乳动物(尤其是牛、羊等家畜)着床前胚胎滋养层细胞分泌的一种特殊蛋白。作为绵羊胚胎着床过程中目前所知的唯一胚胎源信号,IFN-τ直接参与妊娠过程,阻止黄体退化,维持孕酮产生,因此对动物早期胚胎的顺利着床起着重要调控作用。鉴于目前绵羊体外生产胚胎移植后的妊娠率始终徘徊在30-40%之间,显著低于正常配种的体内胚胎,这已成为影响IVF成功的最大难点,其瓶颈在于移植后胚胎不能成功植入子宫。因而,母-胎“对话”的调控日渐成为生殖生物学和生殖医学领域的研究焦点。国内外尚未见到有关绵羊体外胚胎移植后其早期着床分子机理的研究报道,本研究拟对体内胚胎组和体外胚胎组妊娠识别的关键时期(10-16天)中IFN-τ的表达分布进行研究,比较其体内胚胎和体外胚胎着床部位IFN-τ在胚胎和子宫中的分布和表达是否存有差异,为进一步研究绵羊体外胚胎在着床过程中基因的非正常表达与着床失败、早期流产等生殖疾病的关系,奠定基础。本研究内容分五部分。第一部分的研究目的是通过H-E染色确定胚胎组织的基本位置,为进一步研究针对发生妊娠的子宫胚胎和的相关信号表达提供基础。结果表明:体内胚胎第12、14和16天均发现胚胎存在;体外胚胎组只有第14天和第16天发现胚胎组织;试验第二部分研究目的是通过组织原位杂交的方法观察IFN-τ的mRNA表达位置,在核酸水平对IFN-τ的表达进行定性和定位的分析。结果表明:体内胚胎各组中只有第16天的胚胎滋养外胚层上有表达信号,体外胚胎各组均未检测到IFN-τ的mRNA的表达信号;试验第三部分通过半定量PCR的方法比较体内胚胎组和体外胚胎组IFN-τ的mRNA相对表达量的差异。结果表明:体内胚胎组第16天IFN-τ的mRNA相对表达量显著高于体外胚胎组第16天(P0.05)。试验的第四部分目的是通过免疫组织化学染色的方法观察IFN-τ蛋白在绵羊胚胎和子宫中的表达定位。结果表明:IFN-τ蛋白表达于子宫内膜上皮和胚胎的滋养外胚层的细胞核与细胞质中;试验第五部分目的是通过蛋白印迹分析分析各组IFN-τ的表达量的变化。结果表明:IFN-τ的条带位于17KD和23KD的Maker之间(IFN-τ的大小为22KD)。体内胚胎组第10天、12天和14天之间IFN-τ的表达量差异无显著性(P>0.05),但显著低于体内胚胎组第16天(P0.05);其中IFN-τ的表达量体内胚胎组第10天显著低于体外胚胎组第10天(P<0.05);而体内胚胎组和体外胚胎组第12和14天之间IFN-τ的表达量差异无显著性,但在第16天时,体内胚胎组IFN-τ的蛋白表达量显著高于体外胚胎组(P<0.05);本试验的结论:1.H-E染色结果确定体内胚胎组12、14和16天均有胚胎的存在,体外胚胎组中可能由于着床延迟或者其它原因,只有第14和第16找到胚胎;2.原位杂交实验结果显示各组中只有体内胚胎第16天检测到IFN-τ的mRNA信号表达;3.相对定量PCR结果显示:体内胚胎组第16天IFN-τ的mRNA表达量显著高于体外胚胎组第16天,其它各平行组间差异均不显著;4.免疫组织化学染色结果显示,各组的子宫内膜上皮和胚胎的滋养外胚层均有IFN-τ表达IFN-τ的mRNA表达量显著高于其它各组,与原位杂交的结果一致;5.蛋白印迹实验结果显示:体外胚胎各组IFN-τ的蛋白表达量以第10天为最高,显著高于体内胚胎组第10天(P<0.05);相比之下,体内胚胎10-14天各组IFN-τ的表达量比较平稳,直到第16天IFN-τ表达量增高,显著高于体外胚胎组第16天(P<0.05);可能由于体外胚胎经胚胎移植后,胚胎源信号IFN-τ持续给母体刺激,但母体未能及时应答并启动妊娠识别信号通路调控IFN-τ的表达,使IFN-τ的量持续增加;而体内胚胎组,随着胚胎的延伸,IFN-τ的产量也有所增加,以第16天为最高,同时也显著高于体外胚胎第16天的表达量。

关键词：绵羊 IFN-τ 表达差异体内、外胚胎早期着床

神经根型颈椎病患者行单节段ACDF椎间关节牵张程度和术后颈部疼痛的相关性

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神经根型颈椎病患者行单节段ACDF椎间关节牵张程度和术后颈部疼痛...

作者：林自力福建医科大学

学位级别：硕士

背景及目的神经根型颈椎病患者保守治疗无效时,需要手术治疗。颈椎前路间盘摘除减压融合内固定术（Anterior cervical discectomy and fusion,ACDF）是治疗神经根型颈椎病的常规术式。ACDF术中置入椎间融合器,对椎体间的撑开作用有助于... 详细信息

背景及目的神经根型颈椎病患者保守治疗无效时,需要手术治疗。颈椎前路间盘摘除减压融合内固定术（Anterior cervical discectomy and fusion,ACDF）是治疗神经根型颈椎病的常规术式。ACDF术中置入椎间融合器,对椎体间的撑开作用有助于神经根的减压,但过度撑开可能会损伤后方韧带、小关节,引起术后颈部疼痛不适。关于神经根型颈椎病ACDF椎间关节撑开程度的研究目前还未见报道。这项研究的目的是（1）了解神经根型颈椎病行单节段ACDF椎间关节的撑开程度是否同术后疼痛和功能学评分相关（2）椎间关节牵张程度是否同颈椎矢状面参数相关。方法回顾2013年1月-2019年6月于福建医科大学附属协和医院骨科行单节段ACDF的神经根颈椎病患者共92名,在术前和术后12月拍摄颈椎侧位片,测量椎间盘高度、椎间关节间距、手术节段Cobb角评估椎间关节牵张程度,测量常用颈椎矢状面参数,包括:C0-C2 Cobb角、C2-C7 Cobb角、C7倾斜角、T1倾斜角、C2-C7矢状位轴向垂直距离、颈椎倾角、颅倾角。通过VAS评分和NDI评分评估颈椎功能和生活质量。依据椎间关节间距进一步分组,比较组间生活质量评分的关系。结果共纳入68名患者,椎间盘高度同术前术后VAS评分差值及NDI评分差值相关性无统计学意义;椎间关节间距差同术前术后VAS评分差值相关性有统计学意义（P＜0.01）,同NDI评分差值相关性无统计学意义;术后术前手术节段Cobb差同术前术后VAS评分差值及NDI评分差值相关性无统计学意义。ROC曲线分析当术前术后VAS评分差值小于等于2设定为阳性时,术后术前椎间关节间距差的临界值为0.7mm（p=0.024,曲线下面积AUC=0.659,敏感度=46.8%,特异性=78.8%）。根据临界值,将所有患者分为适度牵张组（AD group）,以及过度牵张组（ED group）,两组间术后术前VAS评分差值存在明显差异（p＜0.05）,而两组间人口统计学数据、椎间盘高度差、手术节段Cobb角度差、各颈椎矢状面参数均无明显差异。结论神经根型颈椎病行单节段ACDF,椎间关节间距差大于0.7mm同术后颈部疼痛较严重相关,同术后NDI评分改善无关;椎间关节间距的改变同颈椎矢状面参数的改变不相关。

关键词：神经根型颈椎病颈椎前路间盘摘除减压融合内固定术椎间关节牵张视觉模拟评分法

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科技展望：飞机制造企业中装配工艺的应用

中国航班 2021年第2期 79-82页

作者：王奔林自力徐雷航空工业陕西飞机工业(集团)有限公司

飞机制造中机械装配的重要性极高,直接影响飞机制造水平,这使得相关理论研究和实践探索向来受到业界重视。基于此,本文将简单分析飞机制造企业中装配工艺基础,并深入探讨飞机制造企业中装配工艺的优化应用路径,希望研究内容能够给相关... 详细信息

飞机制造中机械装配的重要性极高,直接影响飞机制造水平,这使得相关理论研究和实践探索向来受到业界重视。基于此,本文将简单分析飞机制造企业中装配工艺基础,并深入探讨飞机制造企业中装配工艺的优化应用路径,希望研究内容能够给相关从业人员带来一定启发。相较于人工装配,机械装配能够有效提升飞机制造的装配效率和质量,在降低成本方面也能够发挥积极作用。但结合实际调研可以发现,工艺装备落后、

关键词：飞机制造企业劳动强度机械装配工艺仿真

稀释液中分别添加不同浓度咖啡因或谷胱甘肽对犬精液冷冻效果的影响

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中国农学通报 2010年第8期26卷 21-24页

作者：林自力何艳芳卢婷婷康蕊秦秀蕊张鑫倪和民北京农学院动物科学技术系北京102206

研究在冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因或谷胱甘肽对犬精液冷冻效果的影响,以优化犬精液冷冻方案,提高解冻后精子质量。在犬的常规精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因和谷胱甘肽,经细管冷冻,解冻后通过分别评价其精子的活率、... 详细信息

研究在冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因或谷胱甘肽对犬精液冷冻效果的影响,以优化犬精液冷冻方案,提高解冻后精子质量。在犬的常规精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因和谷胱甘肽,经细管冷冻,解冻后通过分别评价其精子的活率、形态(包括顶体完整率和畸形率等)等来筛选其最佳添加浓度。经解冻后的精液质量评价如下:(1)向稀释液中添加5mmol/L咖啡因对解冻后精子活率明显改善,为0.33±0.04(P<0.01),显著高于其他组;当添加浓度为12.5mmol/L时,活率仅为0.230±0.04(P<0.01),显著低于对照组;添加浓度为5mmol/L时精子畸形率最低,为0.174±0.036(P<0.01),较其他组差异显著。(2)向稀释液中添加谷胱甘肽5mmol/L,精子活率为0.31±0.054,顶体完整率为0.438±0.022,畸形率仅为0.162±0.025,均优于其他浓度组,差异显著(P<0.01)。在犬的精液冷冻液中分别添加适量浓度的咖啡因或谷胱甘肽均对冷冻效果有显著的促进作用。

关键词：犬冷冻精液冻精稀释液咖啡因谷胱甘肽

自然发情与诱导发情小鼠子宫内膜中雌激素受体α表达的比较

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中国实验动物学报 2010年第2期18卷 168-171,F0003页

作者：高雅林自力张鸿波梁鸿斌刘云海郭勇倪和民北京农学院动物科学技术系北京102206

目的从雌激素受体α(ERα)的角度探讨自然发情小鼠与诱导发情小鼠的子宫内膜上,雌激素受体α表达是否受内源雌激素的特异诱导而变化,两者之间是否存在差异。方法27只同日龄母鼠,根据处理方式的不同随机分为3个组:自然发情假孕组(对照组... 详细信息

目的从雌激素受体α(ERα)的角度探讨自然发情小鼠与诱导发情小鼠的子宫内膜上,雌激素受体α表达是否受内源雌激素的特异诱导而变化,两者之间是否存在差异。方法27只同日龄母鼠,根据处理方式的不同随机分为3个组:自然发情假孕组(对照组)、诱导发情处理假孕组和自然发情假孕第1天摘除卵巢组,3个组的小鼠在见栓后第4、6、8天分别取样后,采用免疫组织化学法观察小鼠子宫内膜中雌激素受体α的表达情况。结果免疫组化结果显示,3个处理组的小鼠子宫内膜上皮细胞核、胞质都有ERα存在,且主要表达在腺上皮;见栓第4、6、8天时,诱导发情处理组小鼠子宫内膜的ERα阳性率均显著高于自然发情组和自然发情第1天摘除卵巢组(P0.05),但见栓第4、6天时两者阳性率差异显著,自然发情处理组小鼠子宫内膜中的ERα阳性率显著高于自然发情第1天摘除卵巢组(P<0.05)。结论诱导发情处理的小鼠子宫内膜,其表面雌激素受体α表达显著高于自然发情小鼠,且两者都受其内源性雌激素的特异诱导而变化。

关键词：小鼠子宫内膜雌激素受体α 免疫组织化学

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氢化可的松对慢性功能性内脏痛的抑制作用

福建医科大学学报 2017年第1期51卷 1-5页

作者：唐影崔子芝丁运林宇斌林自力林春福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系疼痛研究室福建省神经胶质和疾病重点实验室福州350122 福建医科大学基础医学院

目的探究氢化可的松(HYD)对新生期结直肠扩张所致的慢性功能性内脏痛大鼠的痛敏反应的影响及其可能的作用途径。方法SD大鼠出生后第8~14天行结直肠扩张,8周龄后采用腹壁撤退反射评分(AWR)和痛阈测定筛选出具有慢性内脏痛的肠易激综合征(... 详细信息

目的探究氢化可的松(HYD)对新生期结直肠扩张所致的慢性功能性内脏痛大鼠的痛敏反应的影响及其可能的作用途径。方法SD大鼠出生后第8~14天行结直肠扩张,8周龄后采用腹壁撤退反射评分(AWR)和痛阈测定筛选出具有慢性内脏痛的肠易激综合征(IBS)大鼠,并随机分为4组:生理盐水组、低剂量、中剂量和高剂量HYD组;未经结直肠扩张处理的大鼠为对照组。通过AWR和痛阈测定尾静脉注射HYD前后大鼠痛敏反应程度变化;采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中皮质醇的含量及脊髓胸腰段和腰骶段内啡肽、脑啡肽的含量;行旷场实验测定大鼠心理焦虑程度。结果(1)IBS组大鼠血清中皮质醇的含量显著低于对照组大鼠(P<0.05);(2)IBS组大鼠注射中剂量和低剂量HYD后痛阈均值比注射前显著升高(P<0.05);(3)与生理盐水组比较,低剂量HYD组大鼠脊髓胸腰段内啡肽、脑啡肽含量显著升高(P<0.05);(4)旷场实验显示,IBS组大鼠注射低剂量HYD后大鼠运动总路程增加,平均速度加快(P<0.05)。结论一定剂量的HYD能减轻大鼠的痛敏反应和焦虑抑郁行为,其机制可能与脊髓胸腰段内啡肽、脑啡肽含量变化有关。

关键词：肠易激综合征氢化可的松内啡肽脑啡肽抑郁焦虑

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新质生产力理论的科学内涵和时代意义

中国高校社会科学 2024年第3期 4-14,M0003页

作者：何自力南开大学经济学院天津300071

新质生产力理论是习近平经济思想的新发展,是马克思主义生产力理论中国化时代化的最新成果,是中国特色社会主义政治经济学的重大理论创新。新质生产力理论阐明了新质生产力的科学内涵和本质特征,揭示了新质生产力的实现路径和本质要求,... 详细信息

新质生产力理论是习近平经济思想的新发展,是马克思主义生产力理论中国化时代化的最新成果,是中国特色社会主义政治经济学的重大理论创新。新质生产力理论阐明了新质生产力的科学内涵和本质特征,揭示了新质生产力的实现路径和本质要求,具有深刻的时代意义。发展新质生产力是立足新发展阶段、推动科技创新、建设现代化产业体系、实现高质量发展的根本遵循。

关键词：新质生产力现代化产业体系高质量发展

在新的起点推动社会主义市场经济体制更加成熟更加定型

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经济纵横 2024年第8期 5-9,F0002页

作者：何自力南开大学经济学院天津300071

党的二十届三中全会将全面建成高水平社会主义市场经济体制确定为进一步深化经济体制改革的重要目标,着力推动社会主义市场经济体制更加成熟更加定型,这是党中央在系统总结我国经济体制改革成功经验的基础上,对进一步深化经济体制改革... 详细信息

党的二十届三中全会将全面建成高水平社会主义市场经济体制确定为进一步深化经济体制改革的重要目标,着力推动社会主义市场经济体制更加成熟更加定型,这是党中央在系统总结我国经济体制改革成功经验的基础上,对进一步深化经济体制改革作出的重大战略部署,意义重大。一、发展社会主义市场经济是我们党的伟大创举社会主义条件下发展市场经济,是我们党对马克思主义理论的一个伟大贡献,是中国共产党为人类探索更美好社会提供的中国方案。

关键词：经济体制改革伟大创举社会主义市场经济体制全面建成重大战略部署马克思主义理论市场经济新的起点

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文章太守:宋代郡守与文学

北京大学学报（哲学社会科学版） 2024年第5期61卷 66-74页

作者：马自力深圳大学人文学院广东深圳518060

“文章太守”是指以学识渊博、才思敏捷、文辞典雅得体等为特征的长于诗文创作的郡守。它是宋人比较普遍的观念,最早由欧阳修提出,与宋代文官制度密切相关,既是对宋代以文章称道郡守风气的经典概括,也是宋代文学、政事合流倾向的必然结... 详细信息

“文章太守”是指以学识渊博、才思敏捷、文辞典雅得体等为特征的长于诗文创作的郡守。它是宋人比较普遍的观念,最早由欧阳修提出,与宋代文官制度密切相关,既是对宋代以文章称道郡守风气的经典概括,也是宋代文学、政事合流倾向的必然结果。宋代郡守普遍擅长诗文,这是“文章太守”观念最好的注脚。“文章太守”充分显示了宋代郡守与文学之间的密切联系,在观念上为研究宋代郡守与文学的关系提供了学理依据。

关键词：宋代郡守文章太守文学政事合流