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NONHSAT248596.1内源性竞争miR-146a-5p调控骨关节炎软骨退变的机制

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2512-2518页

作者：杨光李彦林王国梁宁梓文杨腾云何任杰熊波涵杨兵李黎昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650032

背景:目前已有针对lncRNA\miRNA\mRNA的共表达网络对骨关节炎发生发展调控机制的研究,课题组前期研究已通过数据库筛选出符合条件的NONHSAT248596.1和miR-146a-5p,尚缺乏体内实验来验证上述调控机制。目的:探究NONHSAT248596.1在基质细... 详细信息

背景:目前已有针对lncRNA\miRNA\mRNA的共表达网络对骨关节炎发生发展调控机制的研究,课题组前期研究已通过数据库筛选出符合条件的NONHSAT248596.1和miR-146a-5p,尚缺乏体内实验来验证上述调控机制。目的:探究NONHSAT248596.1在基质细胞衍生因子1/4型趋化因子受体轴介导体内骨关节炎软骨退变进程中对miR-146a-5p发挥的竞争性内源性RNA调控作用。方法:取36只新西兰兔,通过向右侧后肢膝关节注射基质细胞衍生因子1溶液建立骨关节炎模型,采用随机数字表法分4组,lncRNA组、miRNA组、ceRNA组、对照组分别向造模膝关节内注射NONHSAT248596.1过表达的慢病毒载体、miR-146a-5p过表达的慢病毒载体、miR-146a-5p+NONHSAT248596.1过表达的慢病毒载体及空慢病毒载体。造模第4,8,12周,取膝关节软骨组织和软骨下骨组织进行相关检测。结果与结论:①苏木精-伊红与番红O固绿染色显示,4组软骨组织都有不同程度的退变表现,造模第4周时,lncRNA组软骨组织中的软骨细胞肿胀、细胞极性消失,细胞外基质破坏,出现表层糜烂、裂缝形成和软骨组织局部或全层缺失,并随时间延长软骨损伤程度逐渐加重,4组中miRNA组关节软骨炎症进展最缓慢;②qRT-PCR检测显示,相同时间点下,lncRNA组软骨组织中NONHSAT248596.1、4型趋化因子受体、基质金属蛋白酶3,9及13的mRNA表达量高于其他3组(P<0.05),miR-146a-5p、聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达量低于其他3组(P<0.05);造模后第8,12周,miRNA组软骨组织中的NONHSAT248596.1、4型趋化因子受体、基质金属蛋白酶3,9及13的mRNA表达量低于ceRNA组、对照组(P<0.05),miR-146a-5p、聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达量高于ceRNA组、对照组(P<0.05);③Western Blot检测显示,相同时间点下,lncRNA组软骨组织中的聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白表达量始终低于其他3组(P<0.05);miRNA组造模后第8,12周软骨组织中的聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白表达量高于ceRNA组、对照组(P<0.05);④结果表明,miR-146a-5p作为NONHSAT248596.1的作用靶点会受到其竞争性内源性RNA的作用造成活性被抑制,NONHSAT248596.1作用于miR-146a-5p后调控基质细胞衍生因子1/4型趋化因子受体轴,影响骨关节炎软骨组织中基质金属蛋白、Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达,造成细胞外基质的降解及蛋白多糖的丢失。

关键词：骨关节炎 lncRNA(NONHSAT248596.1) miR-146a-5p 基质细胞衍生因子1(SDF-1) 4型趋化因子受体(CXCR4) 软骨退变

滇南小耳猪自体跟腱移植前交叉韧带重建模型的构建

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3157-3163页

作者：熊波涵余洋郑礼玲杨腾云卢晓君王旭李开炜余鸿李雅娟董开颜张瑶璋刘津瑞谷梓铭胡必庚李彦林昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650032 四川省达州市渠县中医院检验科四川省渠县653200 昆明医科大学第二附属医院骨科云南省昆明市650032 四川大学华西医院心内科四川省成都市610000

背景:目前关于前交叉韧带重建术的大动物模型仍较为缺乏,而滇南小耳猪作为实验动物广泛用于其他学科基础研究,但仍未见将其用于前交叉韧带重建造模的相关报道。目的:建立自体跟腱移植前交叉韧带重建的大型动物滇南小耳猪模型。方法:选... 详细信息

背景:目前关于前交叉韧带重建术的大动物模型仍较为缺乏,而滇南小耳猪作为实验动物广泛用于其他学科基础研究,但仍未见将其用于前交叉韧带重建造模的相关报道。目的:建立自体跟腱移植前交叉韧带重建的大型动物滇南小耳猪模型。方法:选取20只成年雌性滇南小耳猪,随机平均分为自体跟腱组和假手术组。自体跟腱组取小耳猪自体跟腱作为移植物行右膝关节前交叉韧带重建术,假手术组小耳猪在右膝采取类似的操作,但对前交叉韧带不行任何处理。术前及术后12个月,分别观察小耳猪一般情况;对韧带及移植物进行大体观察及MAS评分;苏木精-伊红染色观察韧带形态学特点;免疫组化评估Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原染色与排列情况;透射电镜观察韧带胶原纤维的类型、大小、直径、比例和分布。结果与结论:①所有动物饮食活动均正常,伤口愈合良好,无明显炎症反应,局部无化脓性感染,精神及尿便情况较术前无明显改变;膝关节重建的交叉韧带连续性完整,关节无僵硬、活动度正常,前抽屉及Lachman试验均阴性。②移植物大体观察:术后12个月关节腔内移植物位置良好,完整性尚可,张力较明显,韧带色泽接近原有前交叉韧带,表面滑膜覆盖较为完整。③自体跟腱组术后12个月关节腔内韧带大部为MASⅠ型,少数为MASⅡ型;假手术组关节腔内韧带为MASⅠ型。④苏木精-伊红染色提示,术后12个月,自体跟腱组胶原纤维已开始出现束状、同向、均匀排列,同向波纹已较为明显,细胞核以线形或纺锤形为主,与假手术组正常前交叉韧带组织较相似。⑤免疫组化提示,术后12个月,自体跟腱组重建的前交叉韧带中有较大量Ⅰ型胶原表达,Ⅲ型胶原表达明显较少;两组Ⅰ型、Ⅲ型胶原染色程度相近。⑥透射电镜显示,术后12个月,自体跟腱组重建前交叉韧带中胶原纤维直径、排列、密度与原有前交叉韧带相近,说明术后12个月自体跟腱组已基本完成韧带重塑过程。⑦综合评估,实验成功建立了自体跟腱移植前交叉韧带重建的大型动物滇南小耳猪模型,具有良好的形态学、组织学及超微结构结果。

关键词：前交叉韧带动物模型免疫组化透射电镜超微结构韧带化

转化生长因子β3诱导外周血源性间充质干细胞成软骨分化的量效关系

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中国组织工程研究 2022年第1期26卷 45-51页

作者：杨腾云李彦林刘德健王国梁郑竹君昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650032 昆明医科大学第一附属医院康复科云南省昆明市650032

背景:随着软骨组织工程技术的发展,国内外已有应用外周血源性间充质干细胞修复软骨缺损的体外培养及动物实验,并取得了不错的进展,转化生长因子β3常被用于细胞体外培养以诱导间充质干细胞成软骨分化。但在实验应用中,很少涉及转化生长... 详细信息

背景:随着软骨组织工程技术的发展,国内外已有应用外周血源性间充质干细胞修复软骨缺损的体外培养及动物实验,并取得了不错的进展,转化生长因子β3常被用于细胞体外培养以诱导间充质干细胞成软骨分化。但在实验应用中,很少涉及转化生长因子β3量效探讨,涉及量效的细胞培养实验又经常误用单因素方差分析或t检验来分析这类资料。目的:采用重复测量方法分析转化生长因子β3诱导外周血源性间充质干细胞成软骨分化的量效关系,以期获得较佳的转化生长因子β3用量,获得较好的成软骨分化效果。方法:动员、提取、培养滇南小耳猪外周血源性间充质干细胞,分别加入含不同质量浓度转化生长因子β3(25-500μg/L)的成软骨诱导液进行成软骨诱导分化,对照组不作诱导处理,培养第2,4,6,8,10,12,14天,CCK-8法检测各组细胞增殖情况;培养第3,7,14,21天,收集各组细胞培养上清,ELISA法检测Ⅱ型胶原水平;培养第21天,进行甲苯胺蓝染色观察聚集蛋白聚糖表达;培养第21天,进行免疫细胞化学染色观察Ⅱ型胶原表达。结果与结论:在25-500μg/L范围内,转化生长因子β3质量浓度在40μg/L时外周血源性间充质干细胞生长增殖能力最强,转化生长因子β3质量浓度在40,80μg/L时更容易促进外周血源性间充质干细胞成软骨分化。

关键词：干细胞外周血源性间充质干细胞细胞因子转化生长因子β3 重复测量软骨组织工程 Ⅱ型胶原聚集蛋白聚糖软骨修复

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肩袖腱骨愈合中组织工程学再生的机制及问题

中国组织工程研究 2023年第18期27卷 2928-2934页

作者：王旭杨腾云熊波涵张瑶璋卢晓君龙丹赵道洪昆明医科大学第二附属医院骨科云南省昆明市650000 昆明医科大学云南省昆明市650500 昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650000

背景:近年来关节镜下进行肩袖修补术已经成为临床治疗肩袖损伤的“金标准”,但经肩袖修补术治疗后的术后再撕裂率却居高不下,其主要原因在于肩袖原有结构无法恢复,因此仅通过手术方法进行解剖学愈合是远远不够的。随着组织工程学的发展... 详细信息

背景:近年来关节镜下进行肩袖修补术已经成为临床治疗肩袖损伤的“金标准”,但经肩袖修补术治疗后的术后再撕裂率却居高不下,其主要原因在于肩袖原有结构无法恢复,因此仅通过手术方法进行解剖学愈合是远远不够的。随着组织工程学的发展,越来越多的学者发现其对肩袖愈合有着巨大的优势,可以有助于激发腱骨界面有序再生,随着研究的不断深入,各类支架、种子细胞、生长因子层出不穷,具有广阔前景。但目前国内外相关综述较少,不便临床医生及相关领域学者总体了解研究近况。目的:对近年来肩袖腱骨愈合领域研究中的组织工程学相关支架材料、种子细胞及细胞因子做一总结,以期对肩袖腱骨愈合的基础研究和临床进展起到一定的启示作用。方法:通过计算机检索中国知网及PubMed数据库,中、英文检索词为“肩袖损伤,组织工程;rotator cuff,tissue engineering”等。对检索出的10年内文献进行筛选,排除与文题无关及质量低或重复文献,并手动纳入其他相关文献,最终对纳入的69篇文献进行结果分析。结果与结论:组织工程在腱骨结合部位的再生领域中有着巨大的潜力。(1)目前的支架材料可大体分为天然材料支架、人工合成材料支架及复合材料支架3种类型,其各有优势,但复合材料支架似乎可以更好地仿生腱骨界面原有的梯度结构因此具备更大前景。(2)各类干细胞和生物因子的搭载也被证实可以激发损伤区域的修复潜能。然而干细胞种类的选择和各类生物因子内在分子信号通路的研究仍需进一步深入,进而明确具体的生物因子的介入时间节点及层次,达到精准诱导原有4层结构再生的目的。

关键词：肩袖损伤腱骨愈合组织工程支架干细胞综述

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骨关节炎软骨细胞的新型程序性死亡

中国组织工程研究 2023年第28期27卷 4571-4576页

作者：卢晓君熊波涵杨腾云王旭张瑶璋钟瑞颖李彦林昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650032 昆明医科大学第二附属医院骨科云南省昆明市650032

背景:骨关节炎是一种常见的关节退行性疾病,其发生机制复杂,目前尚未阐明。但已有的研究表明,骨关节炎的发生发展与软骨细胞程序性死亡有关。目的:总结骨关节炎软骨细胞新型程序性死亡的研究进展。方法:“Osteoarthritis,Pyroptosis,Nec... 详细信息

背景:骨关节炎是一种常见的关节退行性疾病,其发生机制复杂,目前尚未阐明。但已有的研究表明,骨关节炎的发生发展与软骨细胞程序性死亡有关。目的:总结骨关节炎软骨细胞新型程序性死亡的研究进展。方法:“Osteoarthritis,Pyroptosis,Necroptosis,Ferroptosis,ROS,L-ROS,Iron-overload”为英文检索词,以“骨关节炎、细胞焦亡、坏死性凋亡、铁死亡、铁超载、脂质活性氧”为中文检索词,使用计算机在CNKI、万方数据库、PubMed、维普数据库检索2012年7月至2022年7月有关于程序性细胞死亡的相关文章,并进行系统地归纳、总结和分析。结果与结论:焦亡与骨关节炎的关系近年来备受关注,目前的研究重点仍是NLRP3炎性小体和脂多糖。有关坏死性凋亡的研究中,骨关节炎的发展也已被证明与受体相互作用蛋白激酶1密切相关,受体相互作用蛋白激酶1有可能是治疗骨关节炎的潜在靶点。铁死亡是一种最新发现的细胞死亡方式,研究发现其通过铁超载和脂质过氧化介导了软骨细胞的死亡,但铁死亡的发生涉及多个基因的表达和调控,具有复杂的信号通路和机制,目前尚未完全阐明。细胞焦亡、坏死性凋亡和铁死亡在骨关节炎的发生发展中具有重要作用,但其相关通路、基因、miRNA仍需进一步研究。

关键词：骨关节炎程序性细胞死亡细胞焦亡坏死性凋亡铁死亡铁超载脂质过氧化

TGF-β3与BMP-2协同促进PBMSCs成软骨分化的量效关系研究

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TGF-β3与BMP-2协同促进PBMSCs成软骨分化的量效关系研究

作者：杨腾云昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]探索TGF-β3与BMP-2分别促进PBMSCs成软骨分化的量效关系,进一步探究TGF-β3与BMP-2双因子协同促进PBMSCs成软骨分化的量效关系。[方法](1)使用G-CSF与AMD3100双因子动员并采集滇南小耳猪外周血,采用密度梯度离心及贴壁法培养PB... 详细信息

[目的]探索TGF-β3与BMP-2分别促进PBMSCs成软骨分化的量效关系,进一步探究TGF-β3与BMP-2双因子协同促进PBMSCs成软骨分化的量效关系。[方法](1)使用G-CSF与AMD3100双因子动员并采集滇南小耳猪外周血,采用密度梯度离心及贴壁法培养PBMSCs,倒置相差显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测P2代PBMSCs的CD44、CD90、CD34、CD45的表达;分别用茜素红、油红O染色检测P2代PBMSCs成骨、成脂诱导多向分化能力。(2)将获取的P2代PBMSCs体外扩增培养,分别加入不同浓度TGF-β3(2.5ng/ml—500ng/ml)或BMP-2(25ng/ml—1600ng/ml)促进其成软骨分化,并设置空白对照组。于培养第2、4、6、8、10、12、14d时,CCK8检测各组细胞增殖情况。于培养第3、7、14、21d时,收集各组细胞上清液,ELISA检测上清液中Collagen Ⅱ水平。于培养第2ld时,免疫细胞化学染色观察Collagen Ⅱ表达情况;甲苯胺蓝染色观察Aggrecan表达情况。使用重复测量方差分析PBMSCs不同时间点的生长及Collagen Ⅱ变化,找到TGF-β3、BMP-2单因子分别促进PBMSCs成软骨分化的最佳用量。(3)将第二部分实验获得的单因子最佳用量40ng/ml TGF-β3、400ng/ml BMP-2为基础,交叉组合设置9个实验组,与文献常用剂量组合10ng/mlTGF-β3+100ng/mlBMP-2作对比,并设置空白对照组。对P2代PBMSCs分别加入不同浓度成软骨诱导剂诱导成软骨分化。于培养2、4、6、8、10、12、14d时,CCK8检测细胞增殖情况。于培养21d时,RT-qPCR检测SOX-9、CollagenⅡ、Collagen X、Aggrecan、MMP-13 的 mRNA 表达情况。于培养 3、7、14、21d时,ELISA试剂盒检测上清液中Collagen Ⅱ、Aggrecan的蛋白表达水平。于培养21d时,免疫荧光双标检测Collagen Ⅱ、Aggrecan的表达情况。[结果](1)G-CSF+AMD3100动员后获取的外周血PBMSCs经培养后呈集落样生长;P2代PBMSCs流式细胞仪结果显示CD34、CD45阴性,而CD44、CD90阳性。经成骨诱导21d茜素红染色显示钙结节形成;成脂诱导14d油红O染色阳性,胞浆内可见脂滴形成。(2)各单因子促进PBMSCs生长曲线大致相似,与对照组各时间点相比均有较显著差异(P0.05),同时间点与其他组相比,差异有统计学意义(P0.05),但双因子各浓度组与未加入因子的对照组均有显著性差异(P0.05),显著低于H、

关键词： TGF-β3 BMP-2 PBMSCs 干细胞动员成软骨分化

C-X-C趋化因子受体4拮抗剂延缓豚鼠关节软骨的退变

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中国组织工程研究 2022年第14期26卷 2150-2154页

作者：何璐李彦林蒙旭晗王国梁杨腾云廖欣宇周晓翔杨光昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650032

背景:近年来研究表明基质细胞衍生因子1/C-X-C趋化因子受体4信号通路在骨关节炎的发生发展中起重要作用。目的:探讨不同C-X-C趋化因子受体4拮抗剂在体内对关节软骨退变的作用。方法:选取96只6月龄雄性Hartley豚鼠随机分成4组,TN14003治... 详细信息

背景:近年来研究表明基质细胞衍生因子1/C-X-C趋化因子受体4信号通路在骨关节炎的发生发展中起重要作用。目的:探讨不同C-X-C趋化因子受体4拮抗剂在体内对关节软骨退变的作用。方法:选取96只6月龄雄性Hartley豚鼠随机分成4组,TN14003治疗组、T140治疗组、AMD3100治疗组、空白对照组,每组24只。除空白对照组不做任何处理外,其余治疗组均使用Alzet微量泵直接植入并固定于豚鼠背部皮下,每天以180 mg/L的质量浓度泵入TN14003、T140、AMD3100药物,干预12周后,取膝关节软骨行苏木精-伊红染色、番红-固绿染色、改良Mankin组织学评分;免疫组织化学检测白细胞介素1和肿瘤坏死因子α的表达水平。结果与结论:①苏木精-伊红染色、番红-固绿染色显示:TN14003治疗组显著延缓了软骨退变程度,Mankin评分最高;T140治疗组次之,AMD3100治疗组较差,空白对照组最差;各组Mankin评分差异有显著性意义(P<0.05);②免疫组织化学染色分析显示:各治疗组关节软骨组织中白细胞介素1和肿瘤坏死因子α阳性表达均低于空白对照组,其中以TN14003治疗组最少(P<0.05);③结果表明,3种C-X-C趋化因子受体4拮抗剂均可通过阻断基质细胞衍生因子1/C-X-C趋化因子受体4信号通路,降低白细胞介素1和肿瘤坏死因子α的表达水平,延缓软骨退变,其中TN14003治疗组效果最优。

关键词：骨关节炎 SDF-1 CXCR4 信号通路 CXCR4受体拮抗剂软骨退变豚鼠

食蟹猴自体腘绳肌腱移植重建前交叉韧带模型制备研究

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中国修复重建外科杂志 2023年第7期37卷 862-867页

作者：卢晓君余洋谢冰王国梁杨腾云熊波涵刘津瑞李彦林昆明医科大学第一附属医院运动医学科昆明650032 昆明医科大学第一附属医院产科昆明650032

目的探讨采用食蟹猴制备自体腘绳肌腱移植重建前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)模型的可行性。方法取健康成年雄性食蟹猴12只,体质量8~13 kg,随机分为两组(n=6)。其中,实验组动物按照单束腘绳肌腱重建ACL方法制备右下肢膝... 详细信息

目的探讨采用食蟹猴制备自体腘绳肌腱移植重建前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)模型的可行性。方法取健康成年雄性食蟹猴12只,体质量8~13 kg,随机分为两组(n=6)。其中,实验组动物按照单束腘绳肌腱重建ACL方法制备右下肢膝关节自体腘绳肌腱移植重建ACL模型,对照组仅切断右下肢膝关节ACL。术后观察两组动物存活情况。于术前和术后3、6、12个月,测量两组术侧膝关节活动度、大腿围、小腿围,使用Ligs关节韧带数字体查仪测量13~20 N载荷条件下双膝胫骨前移距离差值(anterior tibial translation Dvalue,ATTD)。同时,实验组行MRI检查,观察重建术后移植物形态,并测量信噪比(signal/noise quotient,SNQ)以评估移植物成熟度。结果术后两组动物均存活至实验完成;实验组术后膝关节活动度、大腿围、小腿围均呈先降低再逐渐增加趋势,术后3、6个月小于术前(P0.05)。对照组术后膝关节活动度无明显变化,手术前后比较差异均无统计学意义(P>0.05);但术后大腿围、小腿围均逐渐减小(P0.05)。而对照组术后3、6、12个月ATTD无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),但均高于术前(P<0.05)。在相同载荷下,术后各时间点实验组ATTD均小于对照组(P<0.05)。实验组MRI检查示,重建后ACL边界逐渐清晰,并被滑膜覆盖;术后各时间点SNQ均高于术前,但随时间延长SNQ逐渐降低,各时间点间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论采用食蟹猴成功建立自体腘绳肌腱移植重建ACL模型。

关键词：动物模型食蟹猴前交叉韧带重建自体肌腱移植腘绳肌腱

联合培养血管内皮细胞和脂肪干细胞与部分脱蛋白生物骨构建组织工程骨修复颌骨缺损

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中国组织工程研究 2022年第13期26卷 2027-2033页

作者：廖欣宇王福科李彦林王国梁杨桂然侯建飞杨腾云钟瑞颖昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650032

背景:临界骨缺损的修复一直是困扰临床外科医生的关键问题,骨组织工程研究提供了解决该问题的新思路。如何加快组织工程骨的血管化,进而促进种子细胞的成骨分化是骨组织工程研究中的关键问题。目的:探讨血管内皮细胞和脂肪干细胞联合培... 详细信息

背景:临界骨缺损的修复一直是困扰临床外科医生的关键问题,骨组织工程研究提供了解决该问题的新思路。如何加快组织工程骨的血管化,进而促进种子细胞的成骨分化是骨组织工程研究中的关键问题。目的:探讨血管内皮细胞和脂肪干细胞联合培养体系与部分脱蛋白生物骨构建组织工程骨修复骨缺损的能力。方法:体外构建3种组织工程骨:部分脱蛋白生物骨+血管内皮细胞、部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞、部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞(血管内皮细胞∶脂肪干细胞比例为1∶1),以单纯部分脱蛋白生物骨为对照组。取18周龄SD大鼠60只,随机分为5组,每组12只,分别将4种支架材料植入相应的SD大鼠下颌骨骨缺损处,空白对照组仅制造骨缺损,不做修复。术后2,4,8,12周处死动物行大体观察、X射线检查、苏木精-伊红染色和Masson染色组织学观察,并取Masson染色切片行骨胶原定量检测。结果与结论:①大体观察示术后部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞组骨支架降解最快,修复骨缺损能力强于其他组,空白对照组骨缺损未被修复;②X射线片示术后8周时部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞组出现骨性联合,骨缝消失,至12周时骨密度明显增加,骨形态已经基本恢复正常;其他组至12周时材料大体形态依然存在,空白对照组骨缺损未被修复;③组织学观察可见部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞组与单纯部分脱蛋白生物骨组比较差异无显著性意义(P=0.607>0.05),部分脱蛋白生物骨+血管内皮细胞组与部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞组比较差异有显著性意义(P=0.011<0.05),其余各组两两比较差异均有非常显著性意义(P<0.01);④结果表明,联合培养细胞构建的组织工程骨修复骨缺损能力最强,血管内皮细胞的影响力大于脂肪干细胞。

关键词：脂肪干细胞血管内皮细胞联合培养组织工程骨骨缺损修复