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猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin信号通路相关基因及脂肪转录因子的时序表达

作者：杨公社

来源：南通市图书馆图书评论

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生物工程学报 2008年第5期24卷 746-753页

作者：罗肖李惠侠杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早... 详细信息

为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早期标志基因LPL mRNA的表达变化;石蜡切片免疫组化方法定性检测β-catenin在脂肪组织发育中的时序表达变化。SQRT-PCR结果显示,β-catenin mRNA在猪出生第1天有高水平表达,随着个体日龄的增长,其表达量逐渐降低,60日龄后维持在一个较低水平。GSK3β和Fz1mRNA的表达量也伴随脂肪组织的发育而逐渐降低。而LPL、PPARγ和C/EBPα的mRNA表达量随着个体日龄的增长而逐渐升高,60日龄后仍保持高水平的表达。石蜡切片免疫组化结果显示,随着脂肪组织的发育,β-catenin蛋白的表达也随之降低,并且β-catenin蛋白的表达部位逐渐由细胞核和细胞质共表达变为只在细胞质中表达。上述基因表达的时序变化规律提示,β-catenin在维持前体脂肪细胞的未分化状态,抑制脂肪组织发育中具有重要作用,其作用机制可能是通过对脂肪细胞转录因子PPARγ、C/EBPα及分化早期标志基因LPL mRNA的调控来进行的。

关键词： Wnt/β-catenin 猪脂肪发育时序表达

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大黄酸对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响

中国药学杂志 2007年第15期42卷 1148-1151页

作者：杨永青杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室

目的研究大黄酸（rhein，Rh）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法和流式细胞术测定RH对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响。采用油红O染色提取法，检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察，检... 详细信息

目的研究大黄酸（rhein，Rh）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法和流式细胞术测定RH对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响。采用油红O染色提取法，检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察，检测前体脂肪细胞充脂率、充脂程度及形态变化。结果 RH在5-160μmol·L^-1内，对前体脂肪细胞增殖与分化的抑制作用呈剂量和时间依赖性变化，并可在一定程度上诱发脂肪细胞凋亡。结论 Rh可抑制前体脂肪细胞的增殖与分化，具有潜在的减肥降脂作用。

关键词：大黄酸前体脂肪细胞增殖与分化凋亡

中国山羊mtDNA D-loop遗传多样性及其起源研究(英文)

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Acta Genetica Sinica 2006年第5期33卷 420-428页

作者：刘若余杨公社雷初朝西北农林科技大学动物科技学院

采用DNA测序技术分析了中国9个山羊品种(板角山羊、成都麻羊、贵州黑山羊、贵州白山羊、黔北麻羊、马头山羊、陕南白山羊、黄淮山羊和雷州山羊)共计128个个体的mtDNA D-loop全序列。结果表明:山羊mtDNA D-loop全序列长度为1 212-1 213 ... 详细信息

采用DNA测序技术分析了中国9个山羊品种(板角山羊、成都麻羊、贵州黑山羊、贵州白山羊、黔北麻羊、马头山羊、陕南白山羊、黄淮山羊和雷州山羊)共计128个个体的mtDNA D-loop全序列。结果表明:山羊mtDNA D-loop全序列长度为1 212-1 213 bp,检测到102个变异位点,约占分析位点总数的8.42%,可变位点中转换占99个,颠换2个,1个转换/颠换共存;界定了92种单倍型,有78种为各品种独享单倍型,另外14种为群体内或群体间共享单倍型。9个山羊品种单倍型多样度为0.9333-1.0000,核苷酸多样度为0.7062%-1.8265%,表明中国山羊品种遗传多样性丰富。根据92种mtDNA单倍型构建了中国山羊的NJ分子系统树,聚类表明,中国山羊mtDNA D-loop序列单倍型分为支系A和支系B两大类。支系A包括75种单倍型,代表95个样本,占总数的74.22%;支系B包括17种单倍型,代表33个样本,占总数的25.78%,说明中国山羊存在支系A和支系B两大母系起源。对中国山羊mtDNA D-loop的支系A和支系B进行核苷酸不配对分布曲线分析和Fu的Fs中性检验,分析表明,支系A的分布曲线呈单峰形,Fs值为-24.6491,P值为0.0000,显著偏离中性,表明山羊支系A曾经历群体扩张;支系B呈近似双峰分布,Fs值为-3.3947,P值为0.0980,中性检验差异不显著,表明山羊支系B没有经历群体扩张,群体大小保持相对稳定。山羊支系B可能起源于中国。

关键词：山羊线粒体DNA D-loop 遗传多样性起源

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猪肌卫星细胞的分离培养及鉴定

细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 823-825页

作者：罗桂芬文旭辉杨公社西北农林科技大学脂肪沉积与肌肉发育实验室陕西杨凌712100

目的:建立一种有效的猪肌卫星细胞分离、培养及鉴定体系。方法:取仔猪3只,从三角肌群处切取骨骼肌,分别用链霉蛋白酶、胰酶及胶原酶消化组织。用差速贴壁法纯化肌卫星细胞,并比较3种酶消化所获得的细胞数和细胞的存活率。最后采用Desmi... 详细信息

目的:建立一种有效的猪肌卫星细胞分离、培养及鉴定体系。方法:取仔猪3只,从三角肌群处切取骨骼肌,分别用链霉蛋白酶、胰酶及胶原酶消化组织。用差速贴壁法纯化肌卫星细胞,并比较3种酶消化所获得的细胞数和细胞的存活率。最后采用Desmin免疫组化和MyoG和MyoD的RT-PCR鉴定肌卫星细胞。结果:链霉蛋白酶消化所得肌卫星细胞数显著高于胰酶和I型胶原酶。3种酶消化所得细胞的存活率都较高,无明显差异。Desmin免疫组化染色法的结果表明,链霉蛋白酶消化所得肌卫星细胞中95%呈阳性反应。RT-PCR也检测到MyoG和MyoD的表达。结论:链霉蛋白酶消化法是一种简便、高效分离猪肌卫星细胞的方法。

关键词：猪肌卫星细胞细胞培养链霉蛋白酶

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大黄素对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响

中国中药杂志 2007年第5期32卷 424-427页

作者：杨永青杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室

目的：研究大黄素（emodin，EMO）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法：分离培养大鼠前体脂肪细胞，按照EMO添加剂量不同，把培养板中接种细胞的培养孔随机分为0，5，10，20，40，80，160μmol·L^-1处理组；采用MTT比色法和流... 详细信息

目的：研究大黄素（emodin，EMO）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法：分离培养大鼠前体脂肪细胞，按照EMO添加剂量不同，把培养板中接种细胞的培养孔随机分为0，5，10，20，40，80，160μmol·L^-1处理组；采用MTT比色法和流式细胞术测定EMO对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响；采用油红O染色提取法，检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察，检测前体脂肪细胞分化的形态学变化。结果：20～160μmol·L^-1的EMO对大鼠前体脂肪细胞的增殖与分化呈剂量和时间依赖性地抑制作用，并可在一定程度上诱发前体脂肪细胞凋亡。结论：EMO具有潜在的减肥降脂作用。

关键词：大黄素大鼠前体脂肪细胞增殖分化

二十二碳六烯酸对大鼠脂肪细胞增殖分化的影响

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生物工程学报 2005年第5期21卷 840-843页

作者：李惠侠杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

体外培养大鼠脂肪细胞,分别以0μmolL(对照组)、40μmolL(低剂量组)和160μmolL(高剂量组)的二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞。采用台盼蓝排斥试验和MTT比色法检测细胞活性及增殖状况;油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分... 详细信息

体外培养大鼠脂肪细胞,分别以0μmolL(对照组)、40μmolL(低剂量组)和160μmolL(高剂量组)的二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞。采用台盼蓝排斥试验和MTT比色法检测细胞活性及增殖状况;油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度;逆转录聚合酶链反应(RT_PCR)分析过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)mRNA表达情况,探讨DHA对前体脂肪细胞增殖分化的影响及其可能机制。结果显示,各组细胞活力及MTT测得的光密度值(OD值)均低于对照组,160μmolL组在60～72h作用显著(P<0.05);脂肪细胞经DHA处理后,160μmolL组细胞油红O染色的OD值及PPARγ2mRNA表达量均显著下降(P<0.01)。以上结果说明,DHA对脂肪细胞增殖分化均有一定抑制作用,高剂量DHA(160μmolL)可显著减少细胞内脂肪的合成、抑制脂肪细胞分化,PPARγ2mRNA表达量的下降可能是DHA抑制细胞分化的部分原因。

关键词：二十二碳六烯酸脂肪细胞增殖分化

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脂肪组织源性干细胞研究进展

生理科学进展 2007年第2期38卷 129-132页

作者：李惠侠屈长青罗肖杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室陕西杨凌712100

增加具有完整功能的种子细胞数目是细胞移植的首要环节。近来研究发现,成体动物脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能的间充质干细胞,在特定条件下可分化为多种组织细胞,如脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌细胞及神经星状细胞等,且具... 详细信息

增加具有完整功能的种子细胞数目是细胞移植的首要环节。近来研究发现,成体动物脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能的间充质干细胞,在特定条件下可分化为多种组织细胞,如脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌细胞及神经星状细胞等,且具有极强的自我复制能力,有望成为组织工程理想的种子细胞。本文综述了脂肪组织源性干细胞(ADSCs)的发现、生物学特性、多向分化潜能、应用前景及存在的问题。

关键词：脂肪源性干细胞细胞分化组织工程

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IGF-Ⅰ对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响

中国畜牧杂志 2009年第5期45卷 18-20页

作者：向钊张毅杨公社西南大学荣昌校区动物科学系重庆荣昌402460 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨陵712100

前体脂肪细胞是定向的干细胞系,其增殖与分化受诸多因素影响,调控前体脂肪细胞增殖分化意味着可能成功控制脂肪发育。本文采用原代培养的大鼠前体脂肪细胞,通过胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)处理,用细胞计数、生长曲线绘制、细胞倍增时... 详细信息

前体脂肪细胞是定向的干细胞系,其增殖与分化受诸多因素影响,调控前体脂肪细胞增殖分化意味着可能成功控制脂肪发育。本文采用原代培养的大鼠前体脂肪细胞,通过胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)处理,用细胞计数、生长曲线绘制、细胞倍增时间测定以及MTT比色的方法研究IGF-Ⅰ对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响,探索控制脂肪发育的可能途径。结果表明:IGF-Ⅰ可以显著促进大鼠前体脂肪细胞增殖,缩短倍增时间。IGF-Ⅰ浓度80ng/mL为适宜浓度,倍增时间由67.49h下降到44.24h。

关键词： IGF—Ⅰ 前体脂肪细胞增殖 MTT比色生长曲线大鼠

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波形纤维蛋白在前体脂肪细胞分化中的表达

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2002年第3期30卷 1-5页

作者：田志华杨公社西北农林科技大学动物科技学院陕西杨陵712100

采用免疫组化 (HIGH- SABC)法对前体脂肪细胞分化中波形纤维蛋白的表达进行了定性和定量检测 ,并结合计算机图像分析系统对细胞形态参数值 (细胞总面积、胞核面积、细胞周长、等效直径及胞核质比 )进行了分析。结果表明 :(1)波形纤维蛋... 详细信息

采用免疫组化 (HIGH- SABC)法对前体脂肪细胞分化中波形纤维蛋白的表达进行了定性和定量检测 ,并结合计算机图像分析系统对细胞形态参数值 (细胞总面积、胞核面积、细胞周长、等效直径及胞核质比 )进行了分析。结果表明 :(1)波形纤维蛋白参与前体脂肪细胞分化的全过程 ,而且其表达具有明显的时间依赖性——随分化的进行呈下降的趋势 ,染色模式为细胞质 ;(2 )在前体脂肪细胞积聚脂滴向脂肪细胞分化的过程中 ,细胞总面积、胞核面积、细胞周长和等效直径总的呈上升趋势 ,胞核质比呈下降倾向。

关键词：波形纤维蛋白前体脂肪细胞分化表达脂肪细胞免疫组化细胞形态基因表达