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恩诺沙星纳米粒的制备及稳定性研究

安徽农业科学 2009年第5期37卷 2019-2021页

作者：龚露旸杨先乐胡鲲上海海洋大学国家水生动植物病原库上海201306

[目的]优化恩诺沙星纳米粒制备参数,考察其稳定性。[方法]以壳聚糖为辅料,采用离子交联法和冷冻干燥法制备恩诺沙星壳聚糖纳米粒,以包封率为参考指标设计正交试验,确定优化制备参数,以透射电镜观察其表观特征,并对其热稳定性及紫外稳定... 详细信息

[目的]优化恩诺沙星纳米粒制备参数,考察其稳定性。[方法]以壳聚糖为辅料,采用离子交联法和冷冻干燥法制备恩诺沙星壳聚糖纳米粒,以包封率为参考指标设计正交试验,确定优化制备参数,以透射电镜观察其表观特征,并对其热稳定性及紫外稳定性进行考察。[结果]以优化参数制备的恩诺沙星壳聚糖纳米粒平均粒径237.4 nm,平均包封率(71.9±2.2)%,平均载药量(12.4±0.6)%。与原料药相比,4 h热降解率和紫外降解率分别减少了38.4%和13.3%。[结论]离子交联法和冷冻干燥法适用于制备恩诺沙星壳聚糖纳米粒,其产品具有良好的热稳定性和紫外稳定性。

关键词：恩诺沙星壳聚糖纳米粒热稳定性紫外稳定性

草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究——细胞和病毒的扩大培养

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淡水渔业 1992年第1期22卷 3-7页

作者：杨先乐夏春左文功中国水产科学研究院长江水产研究所沙市434000

旋转培养优于静置培养,它不仅表现在可形成细胞单层的面积大,单层细胞的产量高,单位面积所需的培养液(维持液)少,而且细胞生长的速度较快,细胞形成单层的时间较短,接种病毒后收获的病毒滴度也相应较高,它适宜于疫苗工厂化生产。

关键词：草鱼出血病疫苗培养

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我国渔药使用现状、存在的问题及对策

上海水产大学学报 2007年第4期16卷 374-380页

作者：杨先乐郑宗林上海高校水产养殖学E-研究院上海水产大学农业部渔业动植物病原库上海200090 西南大学水产学院

概述了渔药在我国水产动物病害控制中的地位,渔药研发、管理和使用等方面的现状,同时指出了我国在渔药基础理论研究、渔药市场规范以及渔药安全使用等方面所存在的问题,并从加强渔药药理学等应用基础理论与高效低毒渔药及其制剂的研究,... 详细信息

概述了渔药在我国水产动物病害控制中的地位,渔药研发、管理和使用等方面的现状,同时指出了我国在渔药基础理论研究、渔药市场规范以及渔药安全使用等方面所存在的问题,并从加强渔药药理学等应用基础理论与高效低毒渔药及其制剂的研究,建立渔药的评价、研究与检测的基地,规范渔药的管理和使用等方面提出了相应的建议。

关键词：渔药安全管理使用

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鱼药质量的现状及管理对策

中国水产 1999年第4期 9-11页

作者：陈远新杨先乐湖北洪湖市产品质量检验所上海水产大学

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喹乙醇在鱼体内蓄积及其对鱼类的影响

水生生物学报 2005年第1期29卷 13-19页

作者：杨先乐胡鲲邱军强刁进宏农业部渔业动植物病原库上海水产大学上海200090 江苏省国营南通农场南通226000

本文以含 35 0mg/kg和 4 0 0mg/kg喹乙醇的饲料经 99d分别连续投喂鲤和银鲫 ,以测定喹乙醇在鲤和银鲫体内的蓄积及其对鲤、银鲫的影响。试验结果表明 ,无论是银鲫单养还是鲤鲫混养 ,无论是鲤还是银鲫 ,试验组喹乙醇在肝脏组织中蓄积量最... 详细信息

本文以含 35 0mg/kg和 4 0 0mg/kg喹乙醇的饲料经 99d分别连续投喂鲤和银鲫 ,以测定喹乙醇在鲤和银鲫体内的蓄积及其对鲤、银鲫的影响。试验结果表明 ,无论是银鲫单养还是鲤鲫混养 ,无论是鲤还是银鲫 ,试验组喹乙醇在肝脏组织中蓄积量最高 ,99d单养银鲫组可达 10 0 5 7± 0 0 15 (3)mg/kg ,鲤鲫混养组银鲫、鲤分别达 10 10 7± 0 2 2 6 (3)mg/kg,9 883± 0 0 32 (3)mg/kg ,肾脏次之 ,99d单养鲫鱼组的银鲫 ,鲤鲫混养组的银鲫、鲤分别为 7 4 94± 0 0 6 4 (3)mg/kg,7 777± 0 138(3)mg/kg和 7 6 0 8± 0 0 86 (3)mg/kg ,肌肉中较低 ,分别为 0 1170± 0 0 0 3(3)mg/kg ,0 16 0± 0 0 0 3(3)mg/kg,0 4 86± 0 0 0 6 (3)mg/kg;经检验三种组织器官中的蓄积量差异显著 (P <0 0 5 )。由于喹乙醇在鱼体内的蓄积 ,虽鲤鲫混养组的银鲫、鲤的相对增重率达到 10 2 7%和 110 7% ,但是它们的抗应激反应率明显下降 ,而且随喹乙醇摄入量的增加下降趋势更为明显 ,当给予一定程度的应激刺激后 ,单养鲫鱼组的银鲫应激反应率由 5 8d的4 4 8%上升到 99d的 6 4 3% ,鲤鲫混养组的银鲫和鲤分别由 5 8d的 6 6 7%和 4 6 2 %分别上升到 99d的 88 3%和76 9% ,无论是 5 8d还是 99d ,试验组与对照组间差异显著

关键词：鲤银鲫喹乙醇体内蓄积毒性生长饲料添加剂抗应激反应组织病理变化

草鱼孕烷X受体与细胞色素P450 3A mRNA表达相关性初步研究

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海洋渔业 2012年第1期34卷 76-82页

作者：符贵红杨先乐中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开发实验室上海200090 上海海洋大学水产与生命学院国家水生动物病原库上海201306

根据GenBank中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)基因序列设计保守区域简并引物,通过PCR扩增获得草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA核苷酸序列片段为509 bp,经推导获取169 aa序列。对草鱼与其它物种PXR氨基酸序列进行同源性比较,用以鉴定其在物种中的进化。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测草鱼9种组织PXR和细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)基因mRNA相对含量,结果表明,其表达丰度依次为:前肠﹥肝脏﹥肾脏﹥鳃﹥肌肉﹥后肠﹥性腺﹥心脏﹥脾脏,CYP3A和PXR基因在草鱼组织中表达分布基本一致,在前肠、肝脏和肾脏高度表达,而在其它组织低度表达。为了进一步研究PXR和CYP3A基因表达相关性,通过细胞,特选用诱导剂利福平(rifampicin,RIF),最佳诱导浓度40μM,孵育1、2、4、6、8、10、12、24 h后,用qRT-PCR检测CYP3A-PXR基因动态表达过程。结果显示,诱导组CYP3A和PXR基因表达量均高于对照组,显示出显著诱导效应。

关键词：草鱼孕烷X受体细胞色素P450 3A 草鱼肾细胞系

异育银鲫肠道噬菌蛭弧菌BDF-H16的分离及其对嗜水气单胞菌的裂解活性

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水生生物学报 2009年第5期33卷 970-974页

作者：曹海鹏杨先乐上海海洋大学农业部渔业动植物病原库上海201306

摘要: 噬菌蛭弧菌( Bdellovibrio bacter iovorus )是一种通过裂解其他细菌进行生长繁殖的寄生性细菌, 是自然环境中病原菌滋生的天然生物控制因子, 誉有活性抗生素0的美称。

关键词：噬菌蛭弧菌分离嗜水气单胞菌裂解活性

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鱼类组织培养的回顾与展望

水产学报 1999年第S1期 74-81页

作者：杨先乐农业部水产增养殖生态、生理重点开放实验室!上海水产大学 200090

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2种不同无色孔雀石绿单克隆抗体的制备

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2011年第7期39卷 28-34页

作者：陈力胡鲲姜有声黄宣运安健杨先乐上海海洋大学国家水生动物病原库上海201306 中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 连云港市海洋与水产科学研究所江苏连云港222044

【目的】制备无色孔雀石绿（LMG）单克隆抗体,并分析其生物学特性,为建立LMG残留的免疫学检测方法奠定基础。【方法】通过改进的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿-牛血清白蛋白偶联物（LMG-BSA）与副品红-牛血清白蛋白偶联物（PA-BSA）,用紫... 详细信息

【目的】制备无色孔雀石绿（LMG）单克隆抗体,并分析其生物学特性,为建立LMG残留的免疫学检测方法奠定基础。【方法】通过改进的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿-牛血清白蛋白偶联物（LMG-BSA）与副品红-牛血清白蛋白偶联物（PA-BSA）,用紫外扫描、质谱法方法鉴定偶联物。利用制备的LMG-BSA与PA-BSA作为免疫原,免疫4~5周龄Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备LMG单克隆抗体,并对其效价、亲和力、灵敏度和特异性等进行分析。【结果】LMG-BSA与PA-BSA的偶联比率分别为7∶1和37∶1;经间接酶联免疫吸附（ELISA）法筛选,由LMG-BSA和PA-BSA抗原各获得1株杂交瘤细胞,分别命名为L-1、P-1。这2株细胞株分泌的单克隆抗体纯化后,经测定效价分别为1.25×105和6.25×106,亲和力常数分别为4.92×109和1.44×108L/mol,半抑制质量浓度（IC50）分别达8.03和10.5μg/L。L-1分泌的单克隆抗体仅与孔雀石绿存在交叉反应,交叉反应率为100%;P-1分泌的单克隆抗体与孔雀石绿及副品红均存在交叉反应,交叉反应率分别为80%与100%。【结论】成功获得了2株LMG单克隆抗体,其均可用于水产品中LMG残留的快速检测。

关键词：无色孔雀石绿副品红半抗原抗体免疫