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小鼠可溶性PD-1蛋白疫苗的设计及不同免疫方式的效果研究

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基因组学与应用生物学 2015年第10期34卷 2147-2151页

作者：吴佳雯程超蔺智兵陈磊李荣秀上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240

PD-1是参与免疫抑制调节、肿瘤免疫逃逸的重要因子之一。通过抑制PD-1,可以提高T细胞的活性、细胞因子的分泌水平,从而提高抗肿瘤效果。本研究通过基因重组,构建了小鼠PD-1胞外结构域蛋白m PD-1和m PD-1与喉毒素跨膜结构域(DTT)融合的DT... 详细信息

PD-1是参与免疫抑制调节、肿瘤免疫逃逸的重要因子之一。通过抑制PD-1,可以提高T细胞的活性、细胞因子的分泌水平,从而提高抗肿瘤效果。本研究通过基因重组,构建了小鼠PD-1胞外结构域蛋白m PD-1和m PD-1与喉毒素跨膜结构域(DTT)融合的DTT-m PD-1蛋白。蛋白经大肠杆菌表达后,由镍柱亲和纯化。用蛋白疫苗免疫Balb/c小鼠后发现,DTT-m PD-1蛋白没有在小鼠体内产生抗PD-1的免疫反应。但是,先用DTT免疫三次(隔两周免疫一次),再用m PD-1免疫小鼠,反而引起了抗PD-1的免疫反应,血清效价高达7×104。这一发现,为肿瘤免疫治疗提供了一种全新的方式。

关键词： PD-1 白喉毒素融合蛋白免疫原性

OA和CRA超声检测对缺血性脑血管病患者的临床意义

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西北国防医学杂志 2006年第2期27卷 142-143页

作者：王宝涵李荣秀解放军第451医院门诊部陕西西安710054 解放军第323医院医学影像科

眼动脉(Ophthalmic artery ,OA)是颈内动脉入颅后的第一分支,从颈内动脉虹吸弯处发出,与视神经一起经视神经管入眶内,再发出分支,其中最重要的分支为视网膜中央动脉(Central retinal artery ,CRA).当脑动脉硬化或颈动脉狭窄等原因发生... 详细信息

眼动脉(Ophthalmic artery ,OA)是颈内动脉入颅后的第一分支,从颈内动脉虹吸弯处发出,与视神经一起经视神经管入眶内,再发出分支,其中最重要的分支为视网膜中央动脉(Central retinal artery ,CRA).当脑动脉硬化或颈动脉狭窄等原因发生缺血性脑血管病(Ischemic cerebravascular disease ,ICD)时,OA、CRA也可能随之发生相应的缺血性改变.

关键词：超声波诊断脑血管病缺血性

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尹亚君教授辨治痛风病的经验

云南中医学院学报 2004年第2期27卷 44-45页

作者：高东祥李荣秀云南中医学院云南昆明650200

尹亚君教授治疗痛风病 ,前期以祛风通络、清写脾肾之瘀浊湿痰 ,拟四妙散加味治疗 ;后期以补益肝肾、祛湿通络 ,拟六味四藤饮加减治疗。前后期综合治疗痛风性关节炎 4 8例 ,总有效率 95 8% ,疗效显著。

关键词：尹亚君辨证论治痛风病临床经验中医药疗法四妙散六味四藤饮

假单胞菌株M18 gacA基因的克隆、表达及蛋白纯化

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微生物学通报 2010年第3期37卷 401-406页

作者：任慧娟许煜泉董德贤李荣秀上海交通大学生命科学技术学院生物制造实验室上海200240

GacA是GacS/A双元调控系统的一个组分,克隆假单胞菌株M18中的gacA基因。测序结果同Pseudomonas ***1比较,该基因2个碱基的改变未引起氨基酸的改变。将该基因克隆到表达质粒pET28b(+)中,将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG... 详细信息

GacA是GacS/A双元调控系统的一个组分,克隆假单胞菌株M18中的gacA基因。测序结果同Pseudomonas ***1比较,该基因2个碱基的改变未引起氨基酸的改变。将该基因克隆到表达质粒pET28b(+)中,将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物经金属螯合层析柱纯化,蛋白纯度约为98%,质谱鉴定证明纯化的蛋白为GacA蛋白。CD谱分析GacA包含了4%α-helix,48%β-sheet和48%无规则卷曲。GacA蛋白的获得为进一步研究其晶体结构、生物学性能以及GacS/A双元调控系统奠定了基础。

关键词： GacA 克隆表达纯化质谱鉴定圆二色谱

靶向PCSK9催化结构域的重组蛋白疫苗降胆固醇效果初步评价

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基因组学与应用生物学 2015年第8期34卷 1631-1635页

作者：陈凌程超仲从浩张丽陈磊李荣秀上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240

PCSK9是机体内调节低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)代谢的重要蛋白之一,抑制PCSK9能够显著地降低血清LDL-C的水平。本研究的目的是构建靶向PCSK9的重组蛋白疫苗,为降低胆固醇疫苗药物的开发提供实验基础。本课题通过重叠PCR方法将白喉毒素跨... 详细信息

PCSK9是机体内调节低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)代谢的重要蛋白之一,抑制PCSK9能够显著地降低血清LDL-C的水平。本研究的目的是构建靶向PCSK9的重组蛋白疫苗,为降低胆固醇疫苗药物的开发提供实验基础。本课题通过重叠PCR方法将白喉毒素跨膜结构和人PCSK9催化结构域基因串联,构建重组基因片段DTT-h PCSK9,在大肠杆菌中表达后经GST亲和纯化制备重组蛋白DTT-h PCSK9。用该蛋白免疫Balb/c小鼠后通过ELISA方法检测抗体应答水平,并测定小鼠体内胆固醇含量。结果显示,在小鼠体内DTT-h PCSK9引起了抗人PCSK9免疫反应,抗血清效价为1:10 000,并且该疫苗能够显著降低小鼠体内血清胆固醇含量(p<0.05)。

关键词： PCSK9 疫苗胆固醇白喉毒素跨膜结构域

结核病血清学检测FolB蛋白(Rv3607c)抗体效果的初步评价

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基因组学与应用生物学 2017年第11期36卷 4481-4484页

作者：张康马国荣张舒林邓立李荣秀上海交通大学微生物代谢国家重点实验室上海200240

血清学检测是结核病诊断的主要方法之一,Fol B蛋白(Rv3607c)是结核分枝杆菌的一种分泌蛋白,是潜在的血清学检测生物标记物。本研究的目的是评价Fol B蛋白作为生物标记物的特异性和灵敏度。以结核分枝杆菌基因组DNA为模板,通过PCR的方法... 详细信息

血清学检测是结核病诊断的主要方法之一,Fol B蛋白(Rv3607c)是结核分枝杆菌的一种分泌蛋白,是潜在的血清学检测生物标记物。本研究的目的是评价Fol B蛋白作为生物标记物的特异性和灵敏度。以结核分枝杆菌基因组DNA为模板,通过PCR的方法成功的获得Rv3607c目的基因,克隆到大肠杆菌p ET28a载体上,并在BL21(DE3)中可溶性表达。利用Ni-柱亲和层析系统纯化得到纯度为95%的Fol B蛋白,以此蛋白作为包被抗原,对44例健康人和212例阳性结核患者血清进行了ELISA检测。结果显示Fol B蛋白能区分结核病人和健康对照组,灵敏度和特异性分别为49.3%和90.6%,都比目前公认的临床应用蛋白Pst SI(38 k D)要高,因此Fol B蛋白可以作为一个在结核病临床诊断上有潜在应用意义的生物标记物。

关键词：结核病血清学检测 FolB蛋白(Rv3607c) 生物标记物

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分期治疗子宫内膜异位症的体会

云南中医中药杂志 2008年第5期29卷 19-20页

作者：李荣秀陈林兴云南中医学院云南昆明650200

子宫内膜异位症(EMT,简称内异症)系指有生长功能的子宫内膜组织的现在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位,这些异位的子宫内膜组织在卵巢激素的变化影响下发生周期性出血,伴有周围纤维组织增生和粘连形成.临床表现为痛经、月经失调、不... 详细信息

子宫内膜异位症(EMT,简称内异症)系指有生长功能的子宫内膜组织的现在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位,这些异位的子宫内膜组织在卵巢激素的变化影响下发生周期性出血,伴有周围纤维组织增生和粘连形成.临床表现为痛经、月经失调、不孕、性交痛等,且诸症呈进行性加剧趋势.中医古籍中无子宫内膜异位症的病名,属祖国医学'痛经'、'瘕瘕'等范畴.

关键词：子宫内膜异位症分期治疗中医药疗法

蛋白A-葡聚糖-Fe3O4纳米磁珠的制备及对IgG分离纯化

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生物技术通报 2014年第7期30卷 201-208页

作者：任敬钢程超仲从浩张丽李荣秀上海交通大学微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院上海200240

蛋白A(Staphylococcal Protein A,简称蛋白A或SPA)是对IgG有特异性吸附能力的生物配基,将其偶联到葡聚糖修饰的Fe3O4纳米磁珠上,研究SPA纳米磁珠对IgG的纯化能力。采用高温多元醇法合成不同粒径的纳米磁珠,研究磁珠粒径对IgG吸附量的影... 详细信息

蛋白A(Staphylococcal Protein A,简称蛋白A或SPA)是对IgG有特异性吸附能力的生物配基,将其偶联到葡聚糖修饰的Fe3O4纳米磁珠上,研究SPA纳米磁珠对IgG的纯化能力。采用高温多元醇法合成不同粒径的纳米磁珠,研究磁珠粒径对IgG吸附量的影响,并对磁珠静态载量、吸附时间、可重复性进行研究,为工业化应用提供理论依据。通过控制反应体系中NaOH的浓度成功地合成了平均粒径从30 nm到200 nm的Fe3O4纳米磁珠,通过吸附量试验证明了磁珠粒径对IgG吸附量有较大影响,当磁珠平均粒径在101.5 nm时对IgG的吸附量最大,静态吸附载量为84.85 mg/mL,亲和常数为3.48×106 M-1。对磁珠进行5次循环再生试验后,磁珠的吸附性能没有明显的降低。利用磁珠能高效快速地从人血清中纯化到IgG,纯度达到93.5%(SDS-PAGE),回收率为88.7%。因此,这种磁性分离基质在IgG纯化中有较大的应用潜力,

关键词：葡聚糖纳米磁珠蛋白A IgG纯化

基层医院院前急救救护车返空现状调查分析及改进措施

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科学咨询(科技·管理) 2016年第9期 55-56页

作者：余丽丽李荣秀重庆市垫江县中医院

目的:探讨基层医院院前急救返空原因,提出改进措施,减少院前人力、物力、财力资源浪费。方法:收集并统计重庆市垫江县中医院2013年1月;016年6月在垫江县境内的急救记录及返空记录,并对医护人员、司机进行调查,调查空车原因。结果:2013... 详细信息

目的:探讨基层医院院前急救返空原因,提出改进措施,减少院前人力、物力、财力资源浪费。方法:收集并统计重庆市垫江县中医院2013年1月;016年6月在垫江县境内的急救记录及返空记录,并对医护人员、司机进行调查,调查空车原因。结果:2013年我院院前急救出诊总数为6 817次,其中返空728次,返空率为10.68%;2014年我院院前急救出诊总数为4 779次,其中返空580次,返空率为12.14%;2015年我院院前急救出诊总数为6 779次,其中返空679次,返空率为10.02%;2016年（1;月）我院院前急救出诊总数为3 285次,其中返空351次,返空率为10.68%。造成救护车返空的原因有:患者拒绝来院、被他院接走、患者自行入院、院前死亡、未找到患者、谎报等。结论:通过完善急救网络,健全急救指挥系统,提高医疗护理质量,加大政府部门管理力度,可有效降低救护车返空的发生。

关键词：基层医院院前急救返空现状调查