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携带hTERT I540-PTD表达框重组复制缺陷型腺病毒的构建与鉴定

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第四军医大学学报 2009年第9期30卷 796-799页

作者：郭晓彤黎静薛妍宣敏李立文广州军区广州总医院肿瘤科广东广州510010 第四军医大学西京医院肿瘤科陕西西安710033 西北大学生命科学学院陕西西安710069

目的:构建携带人端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)I540-PTD,I540-PTD4融合基因表达框的重组复制缺陷型腺病毒.方法:将pDC315-I540-PTD,pDC315-I540-PTD4与腺病毒基因组质粒pBHGloxdeltaE13Cre共转染HEK293细胞,出现典型的细胞病变反应后收获细胞,反复冻融法制备病毒粗提液,经扩增和纯化获得重组复制缺陷型腺病毒Ad-I540-PTD和Ad-I540-PTD4.使用终点稀释实验和空斑形成实验测定纯化后病毒滴度.采用聚合酶链式反应(PCR)对Ad-I540-PTD,Ad-I540-PTD4进行鉴定.使用病毒感染人骨肉瘤U2OS细胞后,进行免疫组化定性并观察I540-PTD,I540-PTD4的表达情况.结果:共转染10d后,HEK293细胞出现典型的细胞病变反应.经扩增、纯化后,终点稀释法和孔板形成法测定Ad-I540-PTD滴度分别为(8.9×1012),(6.3×1012)pfu/L;Ad-I540-PTD4滴度分别为(5.8×1012),(5.4×1012)pfu/L.以纯化的病毒为模板,使用自行设计的鉴定引物进行PCR均获得167bp目标片段.抗组胺酸标签抗体对病毒感染后的U2OS细胞免疫组化分析发现Ad-I540-PTD,Ad-I540-PTD4转染的U2OS细胞均呈强染,表明Ad-I540-PTD,Ad-I540-PTD4中携带的I540-PTD,I540-PTD4真核表达读框可在人类细胞内高效表达.结论:成功构建可高效表达I540-PTD,hTERTI540-PTD4的重组复制缺陷型重组腺病毒Ad-I540-PTD,Ad-I540-PTD4,为其作为基因疫苗诱发针对hTERT I540表位的抗瘤免疫奠定了基础.

关键词：癌症疫苗端粒酶逆转录酶肿瘤免疫疗法

一氧化氮供体偶联的阿司匹林衍生物ZA-6的抗血栓作用

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中国药科大学学报 2008年第6期39卷 548-552页

作者：李立文季晖张奕华余珊周洲中国药科大学药理学教研室南京210009 中国药科大学新药研究中心南京210009

目的:研究新型NO-阿司匹林衍生物ZA-6抗血栓作用。方法:采用血小板聚集试验和实验性血栓动物模型,测定ZA-6的抗血栓活性;给予ZA-6后,采用金属镉还原法测定大鼠血浆中NO浓度的变化;采用放免法测定大鼠血浆中环磷腺苷酸(cAMP)和环磷鸟苷酸... 详细信息

目的:研究新型NO-阿司匹林衍生物ZA-6抗血栓作用。方法:采用血小板聚集试验和实验性血栓动物模型,测定ZA-6的抗血栓活性;给予ZA-6后,采用金属镉还原法测定大鼠血浆中NO浓度的变化;采用放免法测定大鼠血浆中环磷腺苷酸(cAMP)和环磷鸟苷酸(cGMP)的含量变化。结果:在不同诱导剂(ADP、花生四烯酸和胶原蛋白)诱导的血小板聚集试验中,ZA-6均能显著抑制血小板的聚集,IC50均低于阿司匹林的IC50(P<0.05)。在大鼠动-静脉旁路模型中,ZA-6高、低剂量组均能明显抑制血栓的形成(P<0.05);在小鼠肺血栓栓塞模型中,ZA-6可以提高小鼠的生存率(P<0.05);在给予ZA-6后,大鼠血浆中NO的浓度明显升高(P<0.05),血浆中cAMP浓度明显升高(P<0.05),但cGMP浓度却没有增加。结论:ZA-6具有较强的抗血栓活性,可能是由于经过体内代谢为阿司匹林和NO发挥协同作用。

关键词：阿司匹林 3-芳基-1, 2, 3, 4-噁三唑-5-亚胺一氧化氮供体抗血栓活性

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老龄飞机的导线绝缘问题

国际航空 1999年第5期 60-62页

作者：李立文

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通用成功开发世界首辆可驾驶线控燃料电池车

轻型汽车技术 2002年第12期 80-81页

作者：李立文

通用汽车公司将要重新为汽车定义。通用汽车日前宣布,公司已经研制成功世界首辆可驾驶的融合燃料电池技术与线传操控技术(by-wire)的概念车Hy-wire,标志着通用汽车在重新定义汽车的事业上又迈出一大步。今年9月,Hy-wire 概念车将在巴黎... 详细信息

通用汽车公司将要重新为汽车定义。通用汽车日前宣布,公司已经研制成功世界首辆可驾驶的融合燃料电池技术与线传操控技术(by-wire)的概念车Hy-wire,标志着通用汽车在重新定义汽车的事业上又迈出一大步。今年9月,Hy-wire 概念车将在巴黎国际车展上向公众正式亮相。Hy-wire 为 Hydrogen 与 by-wire 的合成词。

关键词：美国通用汽车公司产品开发可驾驶性线传操控技术 Hy-wire概念车燃料电池车

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森林管护中责任制落实途径研究

农村科学实验 2020年第14期 79-80页

作者：李立文海南省乐东黎族自治县尖峰岭森林发展有限公司南望森林资源管护站海南乐东572542

随着重工业的迅速发展,生态危机正在悄然发生。重工业的土地占用和生态环境的破坏大大减少了中国的森林面积,并引起了一系列生态问题。深入探讨现代社会森林经营与保护所引起的问题,分析其成因,并采取与森林经营与保护政策有关的措施和... 详细信息

随着重工业的迅速发展,生态危机正在悄然发生。重工业的土地占用和生态环境的破坏大大减少了中国的森林面积,并引起了一系列生态问题。深入探讨现代社会森林经营与保护所引起的问题,分析其成因,并采取与森林经营与保护政策有关的措施和行动,以促进森林经营与保护政策的发展。

关键词：森林管护责任制落实

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高层建筑消防给水几个问题的讨论

中国勘察设计 2004年第6期 54-56页

作者：李立文广西建工集团第二建筑工程有限公司设备水电安装分公司

本文根据近几年来在消防给水系统的施工、调试、验收以及使用过程中存在一些问题进行探讨,提出解决问题的对策。

关键词：高层建筑消防给水消防安全喷水灭火系统

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长江中,下游两岸“矶”的形成及其作用

中学地理教学参考 1980年第Z1期 5-9页

作者：李立文南京师范学院地理系

一、"矶"的意义、影响及命名长江自摆脱三峡约束,自宜昌以下进入湖沼平原地带,平均比降为0.0276米/公里,流势剧减,此长1850公里的江流,几经拐弯,略呈"W"形东流入海,这段长江中下游两岸,特别是湖北、湖南、江西、安徽和江苏一带,常见基... 详细信息

一、"矶"的意义、影响及命名长江自摆脱三峡约束,自宜昌以下进入湖沼平原地带,平均比降为0.0276米/公里,流势剧减,此长1850公里的江流,几经拐弯,略呈"W"形东流入海,这段长江中下游两岸,特别是湖北、湖南、江西、安徽和江苏一带,常见基岩矗立江边,悬崖峭壁。有的石滩突出江边,三面环水,形似半岛,当地人民称为"矶"。它是具有浓郁的地方性地理意义的名称。矶,对于长江河床的发育和演变有很大的影响,特别是矶的分布形式与

关键词：隆起带石英砂岩河床边界条件采石矶白云质灰岩水动力条件

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郑和下西洋的深远意义

江苏教育学院学报（自然科学版） 2006年第2期22卷 1-4页

作者：李立文南京师范大学地理科学学院江苏南京210097

郑和远航开辟亚非航线,比15世纪晚期到17世纪中期的"地理大发现"早上80多年.如果郑和首先发现美洲进一步被证实,那么,郑和的创举有更深远的意义.郑和把中国古代发达的物质文明和精神文明传遍世界,对中国地理学发展产生了重大的影响.郑... 详细信息

郑和远航开辟亚非航线,比15世纪晚期到17世纪中期的"地理大发现"早上80多年.如果郑和首先发现美洲进一步被证实,那么,郑和的创举有更深远的意义.郑和把中国古代发达的物质文明和精神文明传遍世界,对中国地理学发展产生了重大的影响.郑和在南京的遗迹保存较完好,成为南京三大风光带之一景,为古都南京建成"融古都风貌与现代文明的滨江城市"的目标增添光彩,对提高南京城市的文化品位有着特殊的意义.

关键词：郑和下西洋地理大发现航海南京

德国“双元制”职业教育决策与执行机制及其启示(二)

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职业 2018年第29期 15-17页

作者：李立文

在《职业》杂志9月中旬刊中,刊登了《德国"双元制"职业教育决策与执行机制及其启示(一)》,介绍了德国双元制职业教育的立法与决策以及德国双元制职业教育的运行与成效。在本期《职业》杂志中,我们将继续介绍德国双元制职业教育给我国现... 详细信息

在《职业》杂志9月中旬刊中,刊登了《德国"双元制"职业教育决策与执行机制及其启示(一)》,介绍了德国双元制职业教育的立法与决策以及德国双元制职业教育的运行与成效。在本期《职业》杂志中,我们将继续介绍德国双元制职业教育给我国现代技工教育机制建构带来的启示。

关键词：德国“双元制”职业教育职业学校《职业教育法》德国双元制职业教育校企合作