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IgG FcRn介导奶牛乳房炎无乳链球菌和金黄色葡萄球菌保护性抗原亚单位疫苗的研究

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IgG FcRn介导奶牛乳房炎无乳链球菌和金黄色葡萄球菌保护性抗原亚...

作者：李松建内蒙古农业大学

学位级别：硕士

新生儿的Fc受体(FcRn)对于向胎儿和新生儿提供具有保护性的母源抗体具有至关重要的作用,同时具有促进局部保护性免疫的功能。FcRn还可以将特异性IgG与抗原结合的抗原-抗体复合物转运到粘膜的固有层,抗原复合物通过抗原递呈细胞递呈给T... 详细信息

新生儿的Fc受体(FcRn)对于向胎儿和新生儿提供具有保护性的母源抗体具有至关重要的作用,同时具有促进局部保护性免疫的功能。FcRn还可以将特异性IgG与抗原结合的抗原-抗体复合物转运到粘膜的固有层,抗原复合物通过抗原递呈细胞递呈给T淋巴细胞,引起机体的免疫反应。为探究由IgG FcRn介导奶牛乳房炎无乳链球菌和金黄色葡萄球菌保护性抗原亚单位疫苗的免疫效果,验证IgG FcRn在奶牛乳腺发挥局部免疫过程中的重要作用。本研究采用分子生物学技术,构建了牛IgG Fc和无乳链球菌(***)重要的表面抗原Sip的重组质粒pET-22b-Fc-Sip,通过原核表达并配合佐剂制备了亚单位疫苗Fc-Sip。在本实验室过去研究的基础上,制备了金黄色葡萄球菌Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗。将无乳链球菌Fc-Sip亚单位疫苗、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗、Fc-Sip和Fc-FnBPB-ClfA二联亚单位疫苗对即将干奶的患有隐性乳房炎奶牛进行免疫试验。通过免疫前后乳样细菌分离、乳样体细胞数测定、免疫血清间接ELISA方法,评价上述亚单位疫苗的免疫学特性。结果显示,免疫组0 d的乳样细菌分离率为83.3%,其中无乳链球菌检出率为20%,金黄色葡萄球菌检出率为23.3%;免疫组90 d后乳样细菌分离率降至26.6%,无乳链球菌检出率降至3.3%,金黄色葡萄球菌的检出率降至6.6%。免疫前后分菌试验结果说明Fc-Sip亚单位疫苗和Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗,不但针对无乳链球菌性奶牛乳房炎和金黄色葡萄球菌性乳房炎具有治疗效果,而且还可以抑制其它奶牛乳房炎致病菌的侵入。免疫后第90 d,使用利拉伐牛奶体细胞检测仪对所有试验奶牛的乳汁进行体细胞数检测,免疫组奶牛乳样体细胞数小于3.3×10个/mL,而对照组奶牛乳样体细胞数大于4.0×10个/mL。监测0 d、7 d、14 d、28 d、60 d免疫组、对照组的血清抗体滴度,对照组奶牛血清抗体滴度一直保持在1:256至1:512之间。第一次免疫后7 d,免疫组80%的奶牛血清抗体滴度为1:1024;第14 d后,血清抗体滴度升高明显,免疫组90%奶牛血清抗体滴度为1:2048;第28 d后,免疫组80%奶牛血清抗体滴度在1:4096至1:8192之间,比对照组平均上升3至4个抗体滴度;第60 d后,免疫各组的血清抗体滴度呈现下降趋势。牛奶中体细胞数检测结果和抗体监测结果说明,该亚单位疫苗具有降低牛奶体细胞数的作用,也证明该亚单位疫苗促进了奶牛免疫反应的发生。免疫组中的A组是使用Fc-Sip和Fc-FnBPB-ClfA制备的二联亚单位疫苗对奶牛进行试验的,综合免疫效果在各免疫组中最佳。

关键词： IgG FcRn 奶牛乳房炎无乳链球菌 Sip基因金黄色葡萄球菌粘膜免疫亚单位疫苗

高能震波治疗对Colles骨折后Sudeck萎缩患者骨密度的影响

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中国临床康复 2005年第43期9卷 130-131页

作者：李松建张力南方医科大学珠江医院骨科广东省广州市510282

目的:观察高能震波治疗Colles骨折后Sudeck萎缩患者对其骨密度的影响。方法:实验于2002-01/2004-10在南方医科大学珠江医院骨科完成。选取Colles骨折后Sudeck萎缩患者54例,随机分为治疗组28例,对照组26例。治疗组采用瑞士HMT公司OssaTro... 详细信息

目的:观察高能震波治疗Colles骨折后Sudeck萎缩患者对其骨密度的影响。方法:实验于2002-01/2004-10在南方医科大学珠江医院骨科完成。选取Colles骨折后Sudeck萎缩患者54例,随机分为治疗组28例,对照组26例。治疗组采用瑞士HMT公司OssaTron140型震波治疗仪治疗,对照组采用星状神经阻滞治疗,两组均治疗1个疗程。在治疗后第4周和第8周分别进行骨密度测定,并于治疗后第8周进行临床疗效评估。结果:54例患者全部纳入结果分析。①两组患者治疗后第8周疼痛评分均显著降低,与治疗前比较差异有显著性意义(P<0.001)。②治疗组治疗后第8周临床症状明显改善,治愈率78.6%,明显高于对照组的42.3%(χ2=7.45,P<0.01)。③治疗后第4周治疗组的骨密度犤(0.435±0.124)g/cm2犦高于对照组犤(0.377±0.120)g/cm2犦,治疗后第8周治疗组的骨密度犤(0.482±0.122)g/cm2犦明显高于对照组犤(0.382±0.138)g/cm2犦(t=4.33,P<0.01),与治疗前犤(0.381±0.143)g/cm2犦相比,差异有显著性意义(P<0.001)。结论:体外高能震波治疗Sudeck萎缩疗效确切,尤其在改善骨质疏松方面较传统疗法具有显著的优势。

关键词：高能量冲击波 Colles骨折萎缩骨质疏松

The application of sartorius muscle for treatment of extension disorders of knee

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中国临床康复 2002年第12期6卷 1848-1849页

作者：陈秋生李松建等 ZhujiangHospital FirstMilitaryMedicalUniversityGuangzhou510282China

Objective: Sartorius muscle was applied to treat dislocation or subluxation of patella and extension disorder of knee resulted from poliomyelitis, patellectomy and quadriceps femoris injury. Method: The distal one-third part or two-thirds part of sartorius muscle excluded its insertion was freed, then transposed and threaded to the front surface of patella. Result: 30 cases (37 knees) with dislocation or subluxation of patella were treated and 25 cases (28 knees) were followed-up (mean followed-up time 4 years). pain in the patello-femeral joint disappeared without any recurrence of dislocation. 75 with weak extensor of knee were treated and 50 were followed-up for mean 2 years and 1 month. The extensor strength in the patients with poliomyelitis increased from 0.89 preoperatively to 2.76 postoperatively. The joint movement in the patients with extension stiffness of knee increased from 15° preoperatively to 102° postoperatively. The extensor strength in the patients with patellectomy increased by 2 grades postoperatively, which enable the patients to complete the last 10° to 15° extension movement of knee. Conclusion: The authors modified the usual surgery methods, by which the results were far from perfect, in treatment of the lateral displacement of patella and advanced a new treatment for the patients with extension stiffness of knee and the patients with weak extensor strength after patellectomy.

关键词：缝匠肌伸膝功能障碍手术治疗膝关节

实时超声在介导评估可注射CS/nHAC骨支架材料中的应用

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中国临床解剖学杂志 2014年第2期32卷 162-166页

作者：阎禹廷李鹤袁月李松建陈彦南方医科大学第二临床医学院广州510282 南方医科大学珠江医院骨科广州510282 南方医科大学珠江医院超声科广州510282

目的探讨实时超声在介导可注射骨材料的注入过程和评估其原位成骨情况中的应用价值。方法将可注射性壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原(CS/nHAC)支架材料注入大鼠皮下组织,分别于注射后1、14、28 d进行超声成像检查,定量测定支架的灰度值,半... 详细信息

目的探讨实时超声在介导可注射骨材料的注入过程和评估其原位成骨情况中的应用价值。方法将可注射性壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原(CS/nHAC)支架材料注入大鼠皮下组织,分别于注射后1、14、28 d进行超声成像检查,定量测定支架的灰度值,半定量监测支架的体积及内部血供情况。结果在实时超声的监测下,支架材料准确注入骨缺损部位,并且在通过超声对材料的体内评估中发现,与壳聚糖/胶原(CS)支架相比,CS/nHAC支架表现出较大的硬度,较稳定的体内降解率及较好的血供。结论实时超声可直观、安全、准确地介导骨支架材料的注入过程,并能无创地评估可注射性骨支架材料在体内的固化过程、降解过程和血供情况,在评估可注射性骨材料方面有较好的应用前景。

关键词：实时超声可注射骨支架材料评估

微创三角肌外侧入路内固定治疗肱骨近端骨折的临床研究

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中国临床解剖学杂志 2011年第5期29卷 585-587页

作者：李松建陈彦于博南方医科大学珠江医院骨科广州510282 南方医科大学珠江医院超声科广州510282

目的探讨经肩峰下横切口与臂外侧近端纵切口微创间接复位解剖钢板内固定治疗治疗肱骨近端骨折的方法。方法自2006年6月～2010年6月应用经肩峰下横切口与臂外侧近端纵切口微创间接复位解剖钢板内固定治疗43例肱骨近端骨折,男17例,女26例... 详细信息

目的探讨经肩峰下横切口与臂外侧近端纵切口微创间接复位解剖钢板内固定治疗治疗肱骨近端骨折的方法。方法自2006年6月～2010年6月应用经肩峰下横切口与臂外侧近端纵切口微创间接复位解剖钢板内固定治疗43例肱骨近端骨折,男17例,女26例,年龄17～84岁,平均67.2岁。按Neer分型,二部分骨折27例,三部分骨折13例,四部分骨折3例。结果随访时间6～24个月,骨折全部获得愈合,愈合时间8～12周,根据肩关节Neer功能百分评分标准:优34例,良7例,可2例,优良率95%。结论经肩峰下横切口与臂外侧近端纵切口微创间接复位钢板固定治疗肱骨近端骨折,不破坏骨折端的血运,同时可获得较为满意的复位和坚强的固定,术后能进行早期功能锻炼,是一种安全、微创、有效的治疗方法。

关键词：经肩峰下横切口臂外侧纵切口肱骨近端骨折微创内固定

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断指再植的临床经验与体会

中华显微外科杂志 2003年第2期26卷 138-139页

作者：刘宁富杨绍安李松建曾博龙第一军医大学第二附属医院创伤骨科广州市510282

目的　分析断指再植的近期和远期疗效。　方法　彻底清创 ,细致修复肌腱 ,精确的吻合血管、必要时行小血管移植修复。　结果　再植 992例 1678个断指 ,其中 15 61指成活 (成活率 93 % ) ,随访半年～ 8年 ,用中野和玉井功能评价标准来评... 详细信息

目的　分析断指再植的近期和远期疗效。　方法　彻底清创 ,细致修复肌腱 ,精确的吻合血管、必要时行小血管移植修复。　结果　再植 992例 1678个断指 ,其中 15 61指成活 (成活率 93 % ) ,随访半年～ 8年 ,用中野和玉井功能评价标准来评定疗效 ,其中优 93 5指 (占 5 9 91% ) ,良 468指 (占 2 9 98% ) ,中 13 9指 (占 8 91% ) ,差 19指 (占 1 2 % )。　结论　精湛的显微外科技术是提高断指再植成功率的关键。

关键词：断指再植术显微外科手术血管吻合血管移植血管危象

rhBMP-2增强腱骨界面愈合的生物力学研究

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中国临床解剖学杂志 2008年第5期26卷 547-550页

作者：张力靳安民李松建南方医科大学珠江医院骨科中心广州510282

目的:探讨rhBMP-2增强移植腱骨隧道界面愈合能力。方法:取成年新西兰兔同侧半腱肌肌腱作为自体移植材料,建立70只新西兰兔双侧前交叉韧带重建动物模型。实验组在移植腱-骨隧道界面注射填充以纤维蛋白胶作为载体的rhBMP-2,对照组仅填充... 详细信息

目的:探讨rhBMP-2增强移植腱骨隧道界面愈合能力。方法:取成年新西兰兔同侧半腱肌肌腱作为自体移植材料,建立70只新西兰兔双侧前交叉韧带重建动物模型。实验组在移植腱-骨隧道界面注射填充以纤维蛋白胶作为载体的rhBMP-2,对照组仅填充纤维蛋白胶,完全空白对照组则不作任何填充。分别于术后第2、4和8周取材,进行生物力学检测。结果:实验组最大载荷在2、4、8周较对照组分别增强13.53%、82.13%、93.23%。实验组刚度在4、8周较对照组分别增强71.91%、121.99%,差异在统计学上显著(P<0.05)。结论:rhBMP-2可以在术后早期提高腱骨界面的最大载荷和刚度,增强了腱骨界面的结合力,促进腱骨界面愈合。

关键词：前交叉韧带重建骨形态发生蛋白腱骨愈合

PcDNA3-hBMP3基因转染关节软骨细胞及其稳定表达

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中华外科杂志 1999年第7期37卷 391-394,I026页

作者：韩一生胡蕴玉惠宏襄崔大祥李松建第四军医大学西京医院全军骨科研究所第四军医大学生物化学教研室

目的探讨外源性基因ｈＢＭＰ３在软骨细胞获得稳定表达的可能性。方法将人ＢＭＰ３的ｃＤＮＡ构建于真核表达载体ＰｃＤＮＡ３，形成重组真核表达载体ＰｃＤＮＡ３ｈＢＭＰ３，转染培养状态下兔关节软骨细胞。利用重组ＤＮＡ和基因克... 详细信息

目的探讨外源性基因ｈＢＭＰ３在软骨细胞获得稳定表达的可能性。方法将人ＢＭＰ３的ｃＤＮＡ构建于真核表达载体ＰｃＤＮＡ３，形成重组真核表达载体ＰｃＤＮＡ３ｈＢＭＰ３，转染培养状态下兔关节软骨细胞。利用重组ＤＮＡ和基因克隆技术构建重组真核表达载体ＰｃＤＮＡ３ｈＢＭＰ３；利用细胞培养和细胞基因转染技术体外转染ｈＢＭＰ３基因至关节软骨细胞；利用核酸提取（ＮｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ）和核酸杂交技术检测细胞转染后４周ｈＢＭＰ３基因的表达情况。结果兔关节软骨细胞属贴壁生长，呈多角形，细胞一代时间５天，指数生长期为接种后２～４天。ＰｃＤＮＡ３ｈＢＭＰ３用ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ双酶切下的片段和λＤＮＡ／ＨｉｎｄⅢＭａｒｋｅｒｓ于１５％琼脂糖电泳，为５４ｋｂ和１４ｋｂ，符合各自的物理图谱，表明构建重组基因成功。细胞转染后用Ｇ４１８筛选至４周，仍有新的细胞克隆形成，提取克隆细胞的ｍＲＮＡ做斑点杂交，结果显示阳性。结论在脂质体的介导下，重组真核表达载体ＰｃＤＮＡ３ｈＢＭＰ３转染兔关节软骨细胞且获得了稳定表达。

关键词：骨形态蛋白软骨细胞基因转染 PcDNA3-hBMP3

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促凋亡基因bax在骨巨细胞瘤中的表达意义

中国肿瘤临床 1999年第3期26卷 194-195页

作者：李松建黄耀添王臻王剑波吕荣杨光第四军医大学西京医院骨科研究所西安市710032 西京医院病理科

研究促凋亡基因ｂａｘ在骨巨细胞瘤中的表达及其与Ｊａｆｆｅ分级和预后的关系。方法：采用兔抗人Ｂａｘ多克隆抗体及免疫组织化学ＳＡＢＣ法。结果：７３例骨巨细胞瘤中，Ｂａｘ阳性４７例（６４．４％）；其中Ｊａｆｆｅ病理分级Ⅰ级... 详细信息

研究促凋亡基因ｂａｘ在骨巨细胞瘤中的表达及其与Ｊａｆｆｅ分级和预后的关系。方法：采用兔抗人Ｂａｘ多克隆抗体及免疫组织化学ＳＡＢＣ法。结果：７３例骨巨细胞瘤中，Ｂａｘ阳性４７例（６４．４％）；其中Ｊａｆｆｅ病理分级Ⅰ级２７例中，阳性２２例（８１．５％），Ⅱ级３８例中阳性２３例（６０．５％），Ⅲ级８例中２例阳性（２５．０％），Ｐ＜０．０５。在不同预后分组中Ｂａｘ阳性率间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论：促凋亡基因在骨巨细胞瘤中不同程度的表达可能参与骨巨细胞瘤凋亡的调节，并与肿瘤分化程度有关。单一Ｂａｘ表达不能反应预后。

关键词：骨巨细胞瘤免疫组织化学骨肿瘤 bax基因