检索结果-南通市图书馆

肺炎克氏杆菌的nifA基因产物在巴西固氮螺菌中的功效

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微生物学报 1991年第5期31卷 338-345页

作者：张耀平李季伦北京农业大学生物学院

通过三亲本杂交将质粒 pCK3[携带改变了启动子的肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)nifA 基因]引入巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)Yu62菌株中,由此获得的转移接合子巴西固氮螺菌 Yu62-4菌株在6.0 mmol/L 以上 NH^+_4浓度下,... 详细信息

通过三亲本杂交将质粒 pCK3[携带改变了启动子的肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)nifA 基因]引入巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)Yu62菌株中,由此获得的转移接合子巴西固氮螺菌 Yu62-4菌株在6.0 mmol/L 以上 NH^+_4浓度下,能表现出微弱的固氮酶活性(相当于无 NH^+_4时活性的0.3—0.5%),而野生型 Yu62则全部丧失固氮酶活性。固氮酶的丙烯酰胺凝胶电泳和铁蛋白的免疫杂交实验表明,转移接合子 Yu62-4在高 NH^+_4(50mmol/L)下,虽有铁蛋白合成,但合成量比无 NH^+_4时少得多,而且有一部分铁蛋白未被共价修饰;野生型菌株 Yu62在此 NH^+_4浓度下无铁蛋白合成。实验结果表明:外源(来自肺炎克。’氏杆菌)的基因产物在巴西固氮螺菌 Yu62中不能有效地解除 NH^+_4对该菌固氮酶合成的阻遏作用。本文分析了出现这种现象的原因。

关键词：巴西固氮螺菌固氮基因功能

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腐马素的研究概况

微生物学通报 1997年第1期24卷 37-40页

作者：章红李勇李季伦中国农业大学生物学院北京100094

综述了腐马素与人类食管癌的关系、作用机制、研究方法、生物合成及今后的研究工作方向。

关键词：腐马素镰刀菌毒素真菌毒素肿瘤

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λgtll克隆载体及其衍生物

微生物学通报 1994年第2期21卷 93-101页

作者：马荣才李季伦北京农业大学生物学院

λｇｔｌｌ克隆载体及其衍生物马荣才，李季伦（北京农业大学生物学院，北京１０００９４）基因的分离可以用核酸探针（ｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｐｒｏｂｅ）或抗体探针（ａｎｔｉｂｏｄｙｐｒｏｂｅ），抗体探针又称蛋白质探针可以用于... 详细信息

λｇｔｌｌ克隆载体及其衍生物马荣才，李季伦（北京农业大学生物学院，北京１０００９４）基因的分离可以用核酸探针（ｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｐｒｏｂｅ）或抗体探针（ａｎｔｉｂｏｄｙｐｒｏｂｅ），抗体探针又称蛋白质探针可以用于直接分离产生目的蛋白的重组克隆，不...

关键词： λgt11载体衍生物 DNA文库

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几种固氮菌nifA基因片段的同源性分析

微生物学报 1992年第5期32卷 309-313页

作者：阎大来李季伦北京农业大学微生物专业

参照已知数种固氮菌 nifA 基因的 DNA 序列,选择其中间区域的两个保守性较强的序列合成引物,利用肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)、棕色固氮菌(Azotobacter vinela-ndii)、巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)、草螺菌(Herbaspi... 详细信息

参照已知数种固氮菌 nifA 基因的 DNA 序列,选择其中间区域的两个保守性较强的序列合成引物,利用肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)、棕色固氮菌(Azotobacter vinela-ndii)、巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)、草螺菌(Herbaspirillum seropedicae)和深红红螺菌(Rhodospirillum rubrum)的总 DNA 进行聚合酶链反应,结果均扩增出约450bp大小的片段,经证实为各种固氮菌的 nifA 基因部分片段。核酸印迹分子杂交结果显示出nifA 基因在不同固氮菌中的同源性不强。

关键词：固氮菌 nifA基因聚合酶链反应

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快生型大豆根瘤菌的渗透调节

微生物学报 1993年第2期33卷 86-91页

作者：杨苏声曾静李季伦北京农业大学微生物专业

弗雷德中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)RT19是快生型大豆根瘤菌。该菌株在不同浓度 NaCl 条件下,其细胞内的游离谷氨酸和钾离子含量随盐浓度的提高而急剧增加。在无盐和低浓度 NaCl 条件下,测不出细胞内有游离苏氨酸,但在较高浓度盐... 详细信息

弗雷德中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)RT19是快生型大豆根瘤菌。该菌株在不同浓度 NaCl 条件下,其细胞内的游离谷氨酸和钾离子含量随盐浓度的提高而急剧增加。在无盐和低浓度 NaCl 条件下,测不出细胞内有游离苏氨酸,但在较高浓度盐存在时,其含量也随着盐浓度的提高而递增。RT19在对数生长后期,突然加入 NaCl,使其培养液中的 NaCl 的最终浓度达到300mmol/L,定时取样测定细胞内氨基酸含量,发现5分钟后谷氨酸含量急剧上升,比不加盐的对照高出5倍,而且在3小时内保持不变.苏氨酸也出现类似情况。测定了 RT19及其转化子 RTt19和 RTt50的谷氨酸脱氢酶(GDH)、谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合成酶(GOGAT)在盐压下的活性,发现在300 mmol/L NaCl 或300mmol/L KC1存在时,GDH 酶活性稍为下降或不变,而 GS 和 GOGAT 酶活性则显著提高。

关键词：快生型大豆根瘤菌根瘤菌调节

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透明颤菌血红蛋白基因在阿维链霉菌中的表达

微生物学报 2000年第1期40卷 50-56页

作者：文莹李季伦中国农业大学生物学院北京100094

将含有自身启动子的透明颤菌血红蛋白基因（ｖｈｂ）克隆至大肠杆菌—链霉菌穿梭质粒载体ｐＩＪ６５３中构建成表达载体ｐＷＹ１０１和ｐＷＹ１０２，用它们转化阿维菌素（ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎｓ）产生菌———阿维链霉菌（ ... 详细信息

将含有自身启动子的透明颤菌血红蛋白基因（ｖｈｂ）克隆至大肠杆菌—链霉菌穿梭质粒载体ｐＩＪ６５３中构建成表达载体ｐＷＹ１０１和ｐＷＹ１０２，用它们转化阿维菌素（ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎｓ）产生菌———阿维链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓａｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ），经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析并未检测到ｖｈｂ基因表达，但用穿梭载体ｐＨＺ１２５２（其中的ｖｈｂ基因位于受硫链丝菌素诱导的链霉菌强启动子ＰｔｉｐＡ之下）转化阿维链霉菌并经硫链丝菌素诱导，则在该菌中表达出了有活性的ＶＨｂ蛋白。ｐＨＺ１２５２在阿维链霉菌中发生了重组缺失，但缺失的ｐＨＺ１２５２上仍含有完整的ｖｈｂ基因及诱导型强启动子，且可在阿维链霉菌中稳定遗传，却不能再转化大肠杆菌。

关键词：透明颤菌血红蛋白阿维链霉菌 vhb 基因表达

黄杆菌(Flavobacterium sp.)几丁质酶的纯化和性质

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微生物学报 1994年第1期34卷 14-19页

作者：陈三凤李季伦北京农业大学生物学院北京100094

黄杆菌(Flavobacteium sp.)在几丁质的诱导下产生几丁质酶.通过(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE纤维素柱层析、Sephacryl 300柱层析及Sephadex G-75柱层析,从Flavobacterium sp.培养上清液中分离纯化了几丁质酶.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)纯度分析表明,纯化后的几丁质酶达到了均一的程度.用SDS-PAGE测得该酶的分子量约45D00道尔顿.该酶水解几丁质的最适pH为 7.0,最适温度为50℃,-20C贮存两年以上仍有活性.水解几丁质的Km值为5.0mg/ml.金属离子对几丁质酶活性影响较大,Ca^(2+) 、Co^(2+)’和Cu^(2+)对酶有激活作用.而NH_4^-、Ba^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)对酶有抑制作用.几丁质酶水解几丁质的产物是几丁质二糖.

关键词：几丁质酶提纯黄杆菌属

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电导率仪在测定发酵液体积中的应用

微生物学通报 1993年第3期20卷 185-186页

作者：王玉万郭正李季伦北京农业大学国家微生物工程工业试验基地北京100094

本文简要介绍了用电导率仪测定发酵罐中液体培养基体积的方法。该方法准确、快速、方便,是测定发酵液体积的较好方法。

关键词：电导率仪测定培养液体积

阿维链霉菌中aveD基因缺失对阿维菌素合成的影响

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微生物学报 2002年第5期42卷 534-538页

作者：陈芝文莹宋渊李季伦中国农业大学生物学院微生物学系北京100094

利用aveD基因的缺失载体pCZ8(pKC1 1 3 9∷△aveD)对阿维菌素 (Avermectin)产生菌阿维链霉菌 (Streptomycesavermitilis) 76 9的aveD基因进行缺失获得aveD缺失突变株。经摇瓶发酵和HPLC检测 ,发现该突变株只产生阿维菌素B组分。说明将... 详细信息

利用aveD基因的缺失载体pCZ8(pKC1 1 3 9∷△aveD)对阿维菌素 (Avermectin)产生菌阿维链霉菌 (Streptomycesavermitilis) 76 9的aveD基因进行缺失获得aveD缺失突变株。经摇瓶发酵和HPLC检测 ,发现该突变株只产生阿维菌素B组分。说明将阿维链霉菌的aveD基因缺失 ,并不影响下游aveF的表达。缺失突变株的阿维菌素的总产量与出发菌株的总产量基本相同 ,突变株中B1的产量略有提高。

关键词：阿维链霉菌 aveD基因缺失阿维菌素合成