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胰岛素信号通路调控中华绒螯蟹蜕壳的机制研究

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胰岛素信号通路调控中华绒螯蟹蜕壳的机制研究

作者：李嘉铭大连海洋大学

学位级别：硕士

中华绒螯蟹(Eroicheir sinensis),隶属于节肢动物门(Arthropoda)、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)又名河蟹,大闸蟹,是我国重要的水产经济物种。蜕壳是甲壳动物生长所必需的生物学过程,受蜕皮激素(20-hydroxyecdysone,20E)和蜕皮... 详细信息

中华绒螯蟹(Eroicheir sinensis),隶属于节肢动物门(Arthropoda)、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)又名河蟹,大闸蟹,是我国重要的水产经济物种。蜕壳是甲壳动物生长所必需的生物学过程,受蜕皮激素(20-hydroxyecdysone,20E)和蜕皮抑制激素(molt inhibiting hormone,MIH)相互拮抗调控。相较于水产养殖鱼类,甲壳动物的饲料含糖量较高,饲料中适量添加糖,用糖类取代饲料中蛋白供能部分的消耗,这样既可以促进养殖动物生长,又可以缓解饲料中鱼粉压力,有效降低饲料成本。胰岛素作为调控动物体内糖代谢的重要激素,与动物的生长过程紧密相连。甲壳动物的生长受限于外壳,蜕壳是其必需的生物学过程。由此,本论文以蜕壳过程中的糖代谢为切入点,首先聚焦中华绒螯蟹不同蜕壳时期糖代谢水平和胰岛素信号通路相关因子的的动态变化,进而通过解析胰岛素信号通路参与蜕壳调控的的作用机制,初步构建了中华绒螯蟹胰岛素信号对蜕壳的调控网络。论文主要结果如下:1.不同蜕壳时期中华绒螯蟹糖类储存模式和糖代谢过程变化本实验选取中华绒螯蟹3个重要的蜕壳时期,即蜕壳前期、蜕壳后期和蜕壳间期。在不同蜕壳时期检测葡萄糖、肝糖原与肌糖原含量以及糖代谢关键酶:丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)和己糖激酶(HK)含量。结果显示,葡萄糖、肌糖原和肝糖原含量在蜕壳间期最高,蜕壳前期其次,蜕壳后期最低。由于中华绒螯蟹在蜕壳前期的蜕皮激素(20E)含量高于蜕壳后期,推测20E可能参与调控血糖。为验证这一假设,我们对中华绒螯蟹进行外源性20E刺激,结果显示,葡萄糖含量升高,糖代谢水平降低,推测20E可以通过调控糖代谢来调控血糖变化。2.胰岛素信号与蜕皮信号在中华绒螯蟹蜕壳过程中的相互作用通过基因组数据库及在NCBI,筛选并鉴定出中华绒螯蟹类胰岛素受体(Insulin-like Receptor,IR)与下游叉头盒转录因子(Forkhead box,FOXO)基因序列。结构域分析发现EsIR包含FU、FN3、Tyr Kc三个蛋白结构域,而EsFOXO-like含有FH蛋白结构域;进化树分析表明,EsIR和EsFOXO-like均处于甲壳动物分支;组织分布检测显示,二者均在肝胰腺中表达量最高;进一步,EsIR和EsFOXO-like在不同蜕壳时期的表达模式不同,EsIR在蜕壳后期表达量最高,而EsFOXO-like在蜕壳前期表达量最高。为了进一步探究蜕皮激素(20E)和胰岛素信号通路的相互调控作用,首先对中华绒螯蟹进行20E注射刺激,发现20E能够抑制胰岛素信号通路相关因子(EsIR、EsAKT和EsFOXO)的表达。进一步,通过分别注射胰岛素和IR抑制剂(GSK1838705A)以激活和抑制EsIR基因后,检测20E及MIH的表达变化。结果发现,注射胰岛素激活EsIR,20E含量以及20E受体基因(EsEcR、EsRXR)的mRNA表达量降低,而蜕皮抑制激素EsMIH的mRNA表达量升高;当抑制EsIR基因表达后,20E及其受体表达量升高,EsMIH的表达量降低。以上结果表明,EsIR和蜕皮激素信号相互负向调控。3.胰岛素信号通过mTOR对中华绒螯蟹蜕壳相关通路基因的调控作用为进一步探究胰岛素信号通路对中华绒螯蟹蜕壳的调控过程,我们锚定胰岛素信号末端的FOXO基因。抑制EsFOXO(注射AS1842856)后,蜕皮激素与蜕壳相关因子(EsEcR、EsRXR)mRNA表达升高,EsMIHmRNA表达降低。此外,EsmTOR的mRNA表达也同样升高,推测胰岛素通路调控蜕壳与mTOR有关。我们抑制mTOR(注射雷帕霉素)后,蜕皮激素浓度降低,蜕壳信号相关因子(EsEcR、EsRXR)的mRNA表达量升高,EsMIH表达量降低,结果表明了mTOR也参与蜕壳的调控。为了进一步确认EsFOXO与EsmTOR之间的关联,我们对中华绒螯蟹抑制FOXO后再抑制mTOR以抑制胰岛素通路和mTOR信号。结果显示,抑制后,20E浓度降低,蜕壳信号相关因子(EsEcR、EsRXR)的mRNA表达量升高,EsMIH表达量降低。综上,我们明确了EsFOXO能够通过EsmTOR调控中华绒螯蟹的蜕壳信号。本研究以中华绒螯蟹蜕壳过程中的糖代谢为切入点,初步探讨了胰岛素信号通路参与蜕壳调控的的作用机制。胰岛素作为调控能量代谢的重要激素,在甲壳动物蜕壳过程中的作用不可忽视。鉴于甲壳动物在蜕壳期间涉及众多能量代谢相关途径,深入探究胰岛素信号通路在甲壳动物蜕壳生长中的作用具有科学价值。本文通过检测不同蜕壳时期葡萄糖和糖原含量的动态变化,发现20E参与调控糖代谢;通过分析胰岛素通路分子的表达模式变化,明确了胰岛素信号和蜕壳信号在蜕壳过程中的相互拮抗作用;通过阐明

关键词：中华绒螯蟹胰岛素信号通路蜕皮激素蜕壳糖代谢

理工科本科生心理健康普测有效性分析及提升策略

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心理学进展 2024年第5期14卷 73-79页

作者：李嘉铭宁波工程学院学生处浙江宁波

通过对浙江某理工科本科新生的心理普测为研究对象,以主动咨询和重点关注为检验指标,发现大学生心理健康普查量表的实效性较好,新生普测测验分数在是否主动咨询、是否属于重点关注对象上均存在显著差异。从被试方面、测验本身、测验流... 详细信息

通过对浙江某理工科本科新生的心理普测为研究对象,以主动咨询和重点关注为检验指标,发现大学生心理健康普查量表的实效性较好,新生普测测验分数在是否主动咨询、是否属于重点关注对象上均存在显著差异。从被试方面、测验本身、测验流程三方面总结高校新生心理普测及约谈过程中影响实效性的因素,提出提升心理普测有效性的建议策略。

关键词：高校心理普测提升策略

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传统节日文化融入幼儿德育课程的探索

好家长 2024年第20期 30-31页

作者：李嘉铭江苏省南通市海门区东洲幼儿园

中共中央办公厅、国务院办公厅《关于实施中华优秀传统文化传承发展工程的意见》中明确指出，要实施中国传统节日振兴工程，丰富传统节日文化内涵，形成新的节日习俗。传统节日文化中蕴含着丰富的德育元素，是幼儿园德育课程的重要资源...

中共中央办公厅、国务院办公厅《关于实施中华优秀传统文化传承发展工程的意见》中明确指出，要实施中国传统节日振兴工程，丰富传统节日文化内涵，形成新的节日习俗。传统节日文化中蕴含着丰富的德育元素，是幼儿园德育课程的重要资源。如何将传统节日文化有效地融入幼儿德育课程，实现德育与传统文化的有机结合，是一个值得探索的问题。本文旨在探索如何将传统节日文化有效地融入幼儿德育课程，通过营造文化氛围、融入生活经验、融合社会场景等方式，激发幼儿对传统节日文化的兴趣，培养幼儿的家国情怀和美好品质，实现德育与传统文化的有机结合。

关键词：

数字赋能视域下高校心理困难学生危机预警机制构建与应用策略

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宁波工程学院学报 2024年第1期36卷 112-118页

作者：李嘉铭宁波工程学院大学生心理健康与指导中心浙江宁波315211

为了有效提升高校心理困难学生危机预警能力,分析了高校心理危机发现机制现存的问题与不足;提取高校数据管理平台中的三类场景六个特征数据,并根据设定的预警阈值数据分级判定不同程度的危机情境;从数字赋能的视角构建了心理困难学生危... 详细信息

为了有效提升高校心理困难学生危机预警能力,分析了高校心理危机发现机制现存的问题与不足;提取高校数据管理平台中的三类场景六个特征数据,并根据设定的预警阈值数据分级判定不同程度的危机情境;从数字赋能的视角构建了心理困难学生危机预警机制。同时提出了不断完善学生管理数据库、制定动态预警等级与标准、健全责任监督制度和加强各部门间协作联动等应用策略。以期不断提升心理困难学生的心理危机识别与处置精度,为全体学生的心理危机预防体系提供理论与实践参考。

关键词：心理危机预警数字赋能心理困难学生

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蝴蝶兰种质资源倍性鉴定及育性相关性研究

核农学报 2024年第6期38卷 1012-1023页

作者：张文滔李嘉铭王铫铃崔永一浙江农林大学园艺科学学院浙江杭州311300

为探究蝴蝶兰种质资源倍性与育性的关系,本研究采用染色体计数法结合流式细胞术鉴定蝴蝶兰属33个品种(种或变种)的倍性水平,并通过完全双列杂交试验探究不同倍性蝴蝶兰种质资源的育性。染色体计数结果表明,二倍体和三倍体蝴蝶兰均有5个... 详细信息

为探究蝴蝶兰种质资源倍性与育性的关系,本研究采用染色体计数法结合流式细胞术鉴定蝴蝶兰属33个品种(种或变种)的倍性水平,并通过完全双列杂交试验探究不同倍性蝴蝶兰种质资源的育性。染色体计数结果表明,二倍体和三倍体蝴蝶兰均有5个,均占15.15%;四倍体蝴蝶兰有10个,占30.30%;非整倍体蝴蝶兰有13个,占39.39%。蝴蝶兰不同品种之间染色体大小构成存在差异。流式细胞术检测结果表明,蝴蝶兰属25个品种(种或变种)的流式细胞术倍性估计结果与染色体计数结果相符。供试材料的流式直方图均呈现出3~4个峰,且循环值均大于0.1。杂交育性结果表明,作为亲本杂交的四倍体蝴蝶兰具有最高的坐果率和萌发率;在三倍体和非整倍体蝴蝶兰中,不同品种之间的育性差异较大,同一品种作为父本或母本杂交和自交后,其育性差异也较大。上述结果表明,大多数蝴蝶兰杂交品种的倍性为多倍体或非整倍体,蝴蝶兰的育性与其倍性水平和染色体大小构成相关;流式细胞术的倍性估计适用于蝴蝶兰种内以及含有小而均匀染色体的杂交品种;供试蝴蝶兰叶片均存在内多倍体化且不同倍性蝴蝶兰叶片的内多倍体化模式存在显著差异。本研究为蝴蝶兰种质资源鉴定、亲本选配、遗传改良以及多倍体育种提供了参考依据。

关键词：蝴蝶兰染色体倍性染色体构成流式细胞术内多倍体

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红外飞秒光纤激光焊接石英玻璃与304不锈钢

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中国激光 2024年第16期51卷 31-39页

作者：袁锦辉霍靖宇张博元王磊郑重李嘉铭郭亮罗爱平张庆茂华南师范大学信息光电子科技学院广东省微纳光子功能材料与器件重点实验室广东广州510006 深圳市中基自动化股份有限公司广东深圳518105 深圳市青锐科技有限公司广东深圳518000 广东省工业超短脉冲激光技术企业重点实验室广东深圳518055 华南师范大学广州市特种光纤光子器件与应用重点实验室广东广州510006

研究探索金属与玻璃异种材料的连接技术是推动其大规模应用的关键,其中,对热膨胀系数相差大的玻璃与金属进行连接的超短脉冲激光焊接技术,对于提升精密微型器件的制造水平和应用具有重要意义。笔者利用有限元模型分析了石英玻璃与304不... 详细信息

研究探索金属与玻璃异种材料的连接技术是推动其大规模应用的关键,其中,对热膨胀系数相差大的玻璃与金属进行连接的超短脉冲激光焊接技术,对于提升精密微型器件的制造水平和应用具有重要意义。笔者利用有限元模型分析了石英玻璃与304不锈钢飞秒激光焊接过程的温度场,验证了所用激光焊接工艺参数的焊接可行性。为优化飞秒脉冲激光焊接工艺参数,研究了飞秒激光焊接单脉冲能量对焊接质量的影响规律。结果表明:激光单脉冲能量对热效应有显著影响;热应力因热效应的增强而增大,当其超过石英玻璃的损伤阈值后会导致微裂纹产生,进而导致焊接样品的焊接强度降低;最佳工艺参数是激光单脉冲能量5.6μJ,重复频率500 kHz,扫描速度60 mm/s,此工艺参数下焊接样品的剪切强度最大,可达到13 MPa。对两种材料的焊接机理进行了研究,结果表明:激光焊接石英玻璃与304不锈钢实现了冶金结合;Fe、Cr在界面与SiO2可能发生了氧化还原反应,形成了Fe2O3和Cr2O3。

关键词：激光技术飞秒激光焊接异种材料焊接焊缝形貌焊接强度焊接机理

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金融中心的形成机制、功能与前沿发展的综合研究

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现代商业 2024年第18期 58-61页

作者：彭景曹煜晗李嘉铭西华大学经济学院四川成都610039 电子科技大学计算机科学与工程学院四川成都611731

目前全球金融中心仍由欧美发达国家的金融中心所主导,中国作为最大的发展中国家,其金融中心的建设与发展相较于发达国家仍有较大差距。近年来,随着我国金融中心战略的升级和实施,以中心城市为主,中国各大金融中心的发展日新月异。基于... 详细信息

目前全球金融中心仍由欧美发达国家的金融中心所主导,中国作为最大的发展中国家,其金融中心的建设与发展相较于发达国家仍有较大差距。近年来,随着我国金融中心战略的升级和实施,以中心城市为主,中国各大金融中心的发展日新月异。基于此背景,回顾了历年来金融中心的相关研究文献,着重从五个方面进行探讨:金融中心的涵义、金融中心的形成机制、金融中心的功能、金融中心对于经济的影响以及利用CiteSpace分析出金融中心的前沿研究方向,总结了不同时期的学者对于金融中心的研究成果,以期为我国金融中心的建设和深化提供理论参考。

关键词：金融中心金融集聚经济增长碳金融数字金融

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儿童免疫规划宣教对家长预防接种知晓率的影响

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2024年第4期 0034-0038页

作者：李嘉铭韦淇珍广西贵港市港北区疾病预防控制中心广西贵港537100

分析儿童免疫规划宣教模式对家长预防接种知晓率的影响。方法选取接种门诊2023年1月-2023年8月的200份儿童家属作为观察对象,其中,100例儿童家属并未采取免疫规划宣教(对照组),100例儿童家属采取免疫规划宣教(研究组),调查儿童家属带... 详细信息

分析儿童免疫规划宣教模式对家长预防接种知晓率的影响。方法选取接种门诊2023年1月-2023年8月的200份儿童家属作为观察对象,其中,100例儿童家属并未采取免疫规划宣教(对照组),100例儿童家属采取免疫规划宣教(研究组),调查儿童家属带领儿童预防接种的情况及家属对预防接种的知晓率。结果研究组儿童接种率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组认知率比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童免疫规划宣教模式可增长儿童家属对预防接种的认知,并积极带领儿童参与预防接种项目,为儿童传染性疾病预防提供支持。

关键词：儿童免疫规划预防接种接种率认知率

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食品中食源性致病菌活菌检测方法研究进展

食品工业科技 2024年

作者：刘婷宇董庆利李嘉铭干鸿翔肖林林秦晓杰上海理工大学健康科学与工程学院

食源性致病菌是危害食品安全和公众健康的重要因子，及时、准确检测食品中的食源性致病菌活菌是保障食品安全的关键。近年来针对食源性致病菌活菌的检测方法发展显著，与传统培养相比更加快速、准确和灵敏。本文系统总结食品中食源性致... 详细信息

食源性致病菌是危害食品安全和公众健康的重要因子，及时、准确检测食品中的食源性致病菌活菌是保障食品安全的关键。近年来针对食源性致病菌活菌的检测方法发展显著，与传统培养相比更加快速、准确和灵敏。本文系统总结食品中食源性致病菌活菌的不同状态，从可培养性、核酸、细胞膜完整性、代谢产物及噬菌体角度，归纳当前食源性致病菌活菌检测方法的最新研究进展，并讨论各方法的优缺点以及未来发展前景，提出基于噬菌体的活菌检测在特异性、检测速度和灵敏性方面具有独特优势，旨在为食源性致病菌活菌快速检测技术研发提供参考。

关键词：食品安全食源性致病菌活菌检测方法噬菌体