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2020年云南省鸡呼吸系统疫病病因分析

家畜生态学报 2024年第3期45卷 68-74页

作者：张振兴李占鸿王斌宋建领云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224 威信县动物疫病预防控制中心云南威信657900

为了分析云南省2020年度鸡呼吸系统疫病病因,分别在昆明、红河、曲靖、大理、楚雄、昭通等地111个养鸡场采集疑似发生呼吸系统疫病鸡肺脏、脾脏、喉气管等组织混合样品111份。采用PCR检测方法对疑似样品进行副鸡禽杆菌、鸡毒支原体(MG)... 详细信息

为了分析云南省2020年度鸡呼吸系统疫病病因,分别在昆明、红河、曲靖、大理、楚雄、昭通等地111个养鸡场采集疑似发生呼吸系统疫病鸡肺脏、脾脏、喉气管等组织混合样品111份。采用PCR检测方法对疑似样品进行副鸡禽杆菌、鸡毒支原体(MG)、滑液囊支原体(MS)、新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、禽流感病毒(AIV)、鼻气管鸟杆菌(ORT)等传染性疾病病原核酸检测,对部分核酸样品进行测序验证。结果表明,副鸡禽杆菌、MG、MS、NDV、IBV、ILTV、ATV、ORT的检测阳性率分别为18.92%(21/111)、10.81%(12/111)、5.41%(6/111)、4.50%(5/111)、2.70%(3/111)、39.64%(44/111)、9.00%(10/111)、18.92%(21/111);混合感染占32.43%(36/111),2种、3种和4种病原混合感染分别占18.92%(21/111)、11.71%(13/111)和1.80%(2/111)。由此可见,云南省2020年度鸡呼吸系统疾病由多种原因引起,其中以副鸡禽杆菌、ILTV、ORT为主。

关键词：鸡呼吸系统疫病进化分析阳性率

帕利亚姆病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

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畜牧兽医学报 2024年第1期55卷 395-400页

作者：杨恒李占鸿宋子昂高林李卓然廖德芳肖雷李华春昆明学院农学与生命科学学院昆明650214 云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224 南京农业大学动物医学院南京210095

本研究拟建立帕利亚姆病毒(Palyam virus,PALV)血清型特异性实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法用于临床样本或媒介中PALV血清型鉴定。根据我国流行PALV毒株的基因节段2序列,设计扩增引物和TaqMan探针,建立PALV血清型特异型qRT-PCR方法,... 详细信息

本研究拟建立帕利亚姆病毒(Palyam virus,PALV)血清型特异性实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法用于临床样本或媒介中PALV血清型鉴定。根据我国流行PALV毒株的基因节段2序列,设计扩增引物和TaqMan探针,建立PALV血清型特异型qRT-PCR方法,对方法的特异性、灵敏性与重复性进行评估;以我国分离的28株PALV和90份核酸阳性血液样本评估检测方法的可靠性;利用建立的方法对采集库蠓样本中携带的PALV进行血清型鉴定。结果显示,建立的PALV血清型qRT-PCR检测方法具有良好的特异性与灵敏性,可检出核酸拷贝数下限在22至28 copies·μL^(-1)。对28株PALV的qRT-PCR检测结果与病毒测序鉴定结果一致;对PALV不同感染阶段哨兵动物血液(90份)中的qRT-PCR鉴定结果与分离病毒的血清型鉴定结果一致;建立的方法可准确鉴定库蠓中携带PALV的血清型。本研究建立的PALV血清型qRT-PCR定型方法具有良好的特异强、敏感性与重复性,可用于PALV感染动物与媒介中PALV血清型的鉴定,具有良好的应用价值。

关键词：帕利亚姆病毒血清型鉴定实时荧光定量RT-PCR 检测方法

1株多重耐药大肠杆菌噬菌体BP32的分离鉴定及生物学特性分析

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中国畜牧兽医 2024年第8期51卷 3540-3551页

作者：吴静楠李占鸿李富祥张振兴张以芳宋建领云南农业大学动物医学院昆明650201 云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224

[目的]拟分离1株可裂解多重耐药大肠杆菌的噬菌体,明确其生物学特性及基因组特征。[方法]本研究从病死山羊肺脏组织中分离大肠杆菌,并通过药敏试验分析其耐药性。以大肠杆菌ER2738菌株为宿主菌,从养殖场污水中进行噬菌体的初步增殖,通... 详细信息

[目的]拟分离1株可裂解多重耐药大肠杆菌的噬菌体,明确其生物学特性及基因组特征。[方法]本研究从病死山羊肺脏组织中分离大肠杆菌,并通过药敏试验分析其耐药性。以大肠杆菌ER2738菌株为宿主菌,从养殖场污水中进行噬菌体的初步增殖,通过点滴法确定分离噬菌体的宿主谱,采用双层琼脂平板法分离纯化特异性裂解大肠杆菌的噬菌体,进一步对其形态、最佳感染复数(MOI)、生长曲线、酸碱度和温度耐受性等生物学特性进行研究;通过高通量测序平台测定其全基因组序列,并对其基因组及遗传进化特征进行分析。[结果]从病死山羊肺脏中分离到1株多重耐药性大肠杆菌,命名为YNEC001。从养殖场污水中分离到1株可特异性裂解YNEC001菌株的噬菌体BP32,电镜观察显示噬菌体BP32属于肌尾科噬菌体,最佳MOI为0.1,潜伏期约为30 min,爆发期持续约60 min,裂解量约为660 PFU/cell,在30~50℃和pH 4.0~10.0条件下可保持稳定的活性。噬菌体BP32基因组长度为166346 bp,GC含量偏低(35.42%),未发现耐药基因和毒力因子,基因组共包含261个开放阅读框(ORF),其中125个为已知功能基因,含有8个tRNA。在全基因组水平上,噬菌体BP32与肠杆菌噬菌体Escherichia phage BF15(MW822007)核苷酸序列相似性最高(98.25%),但基于末端酶大亚基序列的进化分析则表明BP32与大肠杆菌噬菌体Escherichia phage vB_EcoM_SP1(MT682709)的亲缘关系最近,而与Escherichia phage BF15(MW822007)的关系较远。[结论]本研究分离到1株多重耐药大肠杆菌YNEC001,并分离到可特异性裂解YNEC001菌株的噬菌体BP32,该噬菌体具有较强的裂解能力和良好的稳定性,具备开发为耐药性大肠杆菌治疗制剂的潜力。

关键词：多重耐药大肠杆菌噬菌体生物学特征全基因组分析

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我国新分离芒市病毒基因组特征与细胞感染特性研究

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中国人兽共患病学报 2024年第6期40卷 504-511,528页

作者：杨恒李占鸿肖雷李卓然谢佳蕊廖德芳高林李华春昆明学院农学与生命科学学院昆明650214 云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224

目的获取我国新发现芒市病毒(Mangshi virus, MSV)基因组特征以及在细胞上的感染特性,为开展MSV进化与致病性方面研究奠定基础。方法通过高通量测序技术获取MSV毒株V301/YNJH/2019全基因组序列,使用IQtree、RPD4与Simplot等软件进行... 详细信息

目的获取我国新发现芒市病毒(Mangshi virus, MSV)基因组特征以及在细胞上的感染特性,为开展MSV进化与致病性方面研究奠定基础。方法通过高通量测序技术获取MSV毒株V301/YNJH/2019全基因组序列,使用IQtree、RPD4与Simplot等软件进行系统发育树的构建与基因重配分析;测定病毒在白伊蚊细胞(C6/36)、非洲绿猴肾细胞(Vero)与仓鼠肾细胞细(BHK)上的增殖特性,通过血清中和试验调查当地牛羊上病毒的感染情况。结果病毒基因组全长20 623 bp,由12节段的双链RNA(Seg-1至Seg-12)组成。序列分析显示V301/YNJH/2019为基因重配毒株,病毒的Seg-1与Seg-11与我国湖水沉积物中发现的MSV对应基因节段序列高度相似,而Seg-2至Seg-10以及Seg-12则与我国蚊上分离的MSV毒株具有最近的亲缘关系。病毒在C6/36与BHK细胞上可高效增殖并引起细胞明显的细胞病变,在Vero细胞上可低水平复制但不引起细胞病变。在芒市采集的20份羊血清样本中未检测到MSV的中和抗体,但在采集20份牛血清中检测到2份阳性样本,其中和抗体效价分别为1∶128与1∶54。结论 V301/YNJH/2019为基因重配毒株,病毒可感染C6/36、BHK与Vero细胞,在芒市牛群中检测到感染动物。

关键词：芒市病毒全基因组测序基因重配细胞感染特性流行病学调查

装配式冷弯厚壁型钢半刚性梁-柱节点抗震性能试验研究

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结构工程师 2024年第3期40卷 95-106页

作者：李占鸿李元齐白雪伍福炜马福栋同济大学土木工程学院上海200092 上海市建筑科学研究院有限公司上海市工程结构安全重点实验室上海200032

冷弯型钢在装配式结构中应用具有天然的优势,为了扩展冷弯厚壁型钢结构的使用范围,克服冷弯厚壁钢的缺点,设计6个新型分层装配式“十字型”梁-柱节点,进行循环加载试验,对梁-柱节点的破坏模式、初始刚度、骨架曲线、等效黏滞阻尼系数、... 详细信息

冷弯型钢在装配式结构中应用具有天然的优势,为了扩展冷弯厚壁型钢结构的使用范围,克服冷弯厚壁钢的缺点,设计6个新型分层装配式“十字型”梁-柱节点,进行循环加载试验,对梁-柱节点的破坏模式、初始刚度、骨架曲线、等效黏滞阻尼系数、能量耗散系数、割线刚度、滞回曲线和关键部位应变分布进行研究,主要得到以下结论:通过螺栓和节点板的滑移,半刚性节点具有一定的耗能能力。增设高强螺栓可以提高梁柱节点的承载力,初始刚度和耗能能力也得到提高,避免梁端与连接板孔壁承压。增加可更换节点翼缘板,对梁-柱节点的破坏模式没有明显影响,承载能力、耗能能力、初始刚度分别得到较大提高。

关键词：冷弯厚壁型钢梁-柱节点半刚性初始刚度耗能能力

装配式冷弯厚壁型钢半刚性梁-柱节点抗震性能试验简介

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结构工程师 2024年第3期40卷 F0004-F0004页

作者：李占鸿不详

冷弯厚壁型钢由于冷弯效应影响,材性沿截面明显不均匀,弯角处屈服强度提升但塑性下降较大,且残余应力较高。为了避免这些缺点,采用冷弯厚壁型钢框架-支撑/剪力墙结构体系时可采用铰接或半刚接节点,以降低对梁柱构件延性的要求,结构抗侧... 详细信息

冷弯厚壁型钢由于冷弯效应影响,材性沿截面明显不均匀,弯角处屈服强度提升但塑性下降较大,且残余应力较高。为了避免这些缺点,采用冷弯厚壁型钢框架-支撑/剪力墙结构体系时可采用铰接或半刚接节点,以降低对梁柱构件延性的要求,结构抗侧和耗能可通过剪力墙或支撑等抗侧力构件实现。该试验所提出的新型刚度可调节的全螺栓连接半刚性梁-柱节点构造,有利于施工现场实现高度分层装配,更好地满足国家对建筑工业化的需求。

关键词：建筑工业化冷弯厚壁型钢抗侧力构件剪力墙结构体系施工现场分层装配冷弯效应构件延性

口蹄疫病毒通用型RT-RAA-LFD快速检测方法的建立

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中国动物检疫 2024年第6期41卷 97-102页

作者：寇美玲谢佳芮李占鸿张振兴苏晓航王轶男宋建领苗海生云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224

为建立一种操作简便、有效的口蹄疫病毒(FMDV)核酸通用型检测方法,以FMDV 3D基因为靶基因,设计标记引物及探针,建立了一种新的检测FMDV的反转录-重组酶介导链置换核酸扩增结合侧流层析试纸检测(RT-RAA-LFD)方法。该方法操作简便,耗时短... 详细信息

为建立一种操作简便、有效的口蹄疫病毒(FMDV)核酸通用型检测方法,以FMDV 3D基因为靶基因,设计标记引物及探针,建立了一种新的检测FMDV的反转录-重组酶介导链置换核酸扩增结合侧流层析试纸检测(RT-RAA-LFD)方法。该方法操作简便,耗时短,40℃35 min内即可完成检测,通过肉眼观察可判定结果;具有较好的覆盖面,能够检出我国O型、A型FMDV主要流行拓扑型病毒,与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)等其他猪病病原无交叉反应;对RNA标准品的最低检测限为10^(-7)拷贝/μL,敏感性较高。利用建立的FMDV RT-RAA-LFD方法对5份临床样品进行检测,其结果与RT-PCR结果一致。结果表明,本研究建立的FMDVRT-RAA-LFD方法具有快速、直观、特异强、重复性好等优点,适合在基层兽医防疫部门和养殖场推广应用。

关键词：口蹄疫病毒重组酶介导链置换核酸扩增侧流层析试纸恒温扩增快速检测

虹桥机场周边某既有住宅阳台改造加固的ANSYS有限元分析及荷载试验验证

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结构工程师 2014年第3期30卷 175-180页

作者：李占鸿上海市房地产科学研究院上海房屋质量检测站上海200031

虹桥机场周边既有住宅因降噪隔声要求需对阳台进行改造,设计方案保留原阳台板、新增钢筋混凝土阳台围护薄腹梁,薄腹梁与墙交接处设置混凝土柱。为确保房屋结构安全,按改造方案对改造后阳台采用ANSYS软件进行有限元分析计算,分析加固设... 详细信息

虹桥机场周边既有住宅因降噪隔声要求需对阳台进行改造,设计方案保留原阳台板、新增钢筋混凝土阳台围护薄腹梁,薄腹梁与墙交接处设置混凝土柱。为确保房屋结构安全,按改造方案对改造后阳台采用ANSYS软件进行有限元分析计算,分析加固设计的安全性。改造加固实施完成后,采用加载试验进行了实测验证,并将实测结果与计算结果进行对比分析,两者比较吻合。

关键词：既有住宅阳台 ANSYS 有限元分析荷载试验

砖木结构优秀历史建筑检测与评定常见问题探讨

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工业建筑 2013年第S1期43卷 289-293页

作者：陈志强李占鸿上海房屋质量检测站上海200031

在砖木结构优秀历史建筑检测与评定过程中,由于检测鉴定人员经验不足、结构计算软件不完善等原因,可能导致检测与评定结果与实际情况不符,现就检测工作中常见问题,如承重墙体厚度确定、楼盖结构布置检测、砖强度检测方法的选用,以及对... 详细信息

在砖木结构优秀历史建筑检测与评定过程中,由于检测鉴定人员经验不足、结构计算软件不完善等原因,可能导致检测与评定结果与实际情况不符,现就检测工作中常见问题,如承重墙体厚度确定、楼盖结构布置检测、砖强度检测方法的选用,以及对结构安全性进行评定时的常见问题,如底层计算层高的确定、楼面活荷载折减以及计算模型节点位置不同对计算结果的影响等问题进行探讨。

关键词：砖木结构优秀历史建筑 PKPM 检测与鉴定