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GFP拆分方法示踪幽门螺杆菌CagA的转运研究

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中国病原生物学杂志 2024年第5期19卷 502-506,513页

作者：吴倩文刘书振张建辉曹新颖孙泽坤贾钰刚张莹李波清赵慧琳季晓飞滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院第二临床医学院

目的用GFP拆分方法示踪幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染过程中CagA向胃上皮细胞内的转运过程。方法(1)PCR扩增CagA基因的上下游同源臂,连入敲除质粒pSJHK4中,将质粒通过电击转化的方法转入Hp中,利用卡那霉素筛选CagA敲除突变株... 详细信息

目的用GFP拆分方法示踪幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染过程中CagA向胃上皮细胞内的转运过程。方法(1)PCR扩增CagA基因的上下游同源臂,连入敲除质粒pSJHK4中,将质粒通过电击转化的方法转入Hp中,利用卡那霉素筛选CagA敲除突变株ΔCagA。(2)PCR扩增绿色荧光蛋白GFP第11β折叠(GFP11)的基因序列并与CagA基因序列的3′端相连,将融合序列连入Hp-大肠埃希菌穿梭质粒pCHFHp中,并通过电击转化的方法转入ΔCagA中,利用氯霉素筛选CagA与GFP-11的融合表达突变株。(3)PCR扩增GFP第1-10β折叠(GFP1-10)的基因序列,包装慢病毒,利用病毒感染的方法将其转入胃上皮细胞GES-1中。将(2)中构建的Hp突变株以100∶1的感染复数感染(3)构建的表达GFP(1-10)的GES-1细胞体系,利用荧光显微镜观察细胞内的荧光情况,通过Western blot检测细胞内的CagA蛋白含量。结果构建了CagA敲除质粒pSJHK4-cagA,转入Hp中得到CagA敲除突变株ΔCagA。构建了CagA与GFP-11的融合表达质粒pCHFHp-cagAgfp11,转入ΔCagA中获得CagA与GFP-11的融合表达突变株HpG27-cagAgfp11。构建了含有GFP1-10基因序列的慢病毒,感染GES-1细胞后获得GFP1-10稳定表达的细胞株。在HpG27-cagAgfp11感染GES-1模型中,观察到细胞中的绿色荧光,说明CagA被转运到GES-1细胞内部,其融合表达的GFP-11与细胞内表达的GFP1-10结合发出荧光,Western blot结果也证实CagA被转运至胞内。结论在Hp感染GES-1细胞模型中,GFP拆分方法能够示踪CagA向细胞的转运过程,这为CagA的转运研究提供了新方法,有助于HpIV型分泌系统(T4SS)作用机制的深入研究。

关键词：幽门螺杆菌 CagA GFP拆分 T4SS

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探究电动汽车充电桩现场检测的方法

时代汽车 2021年第22期 123-124页

作者：曹新颖付涵霍宣敏杨泽垠王茜闫泽民国网河南省电力公司新乡供电公司河南省新乡市453000 国网河南省电力公司河南省郑州市450000 国网河南省电力公司物资公司河南省郑州市450000

随着新能源的推广和应用,促使大量的新能源电动汽车开始出现,电动汽车供能设备主要是充电桩,在此趋势下,电动汽车充电桩数量也逐渐增多。传统的汽车采用燃油作为动力,因为燃油燃烧会污染环境、消耗化石燃料,也对充电桩安全、稳定运行带... 详细信息

随着新能源的推广和应用,促使大量的新能源电动汽车开始出现,电动汽车供能设备主要是充电桩,在此趋势下,电动汽车充电桩数量也逐渐增多。传统的汽车采用燃油作为动力,因为燃油燃烧会污染环境、消耗化石燃料,也对充电桩安全、稳定运行带来了较大的影响。对此需要汽车产业加快产业转型,研究出新型节能电动汽车,以此推动汽车产业健康发展。

关键词：电动汽车充电桩现场检测

导航辅助下经皮椎间孔镜微创治疗腰椎间盘突出症的手术护理

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循证护理 2019年第10期5卷 914-916页

作者：袁瑞敏王明玲曹新颖马超刘光旺徐州市中心医院

[目的]探讨导航辅助下经皮椎间孔镜微创手术治疗腰椎间盘突出症的手术护理效果。[方法]对我院2016年1月-2017年6月采用经皮椎间孔镜微创手术治疗的42例腰椎间盘突出症病人进行术前及术中护理,于术前、术后3个月、术后6个月时对病人腰痛... 详细信息

[目的]探讨导航辅助下经皮椎间孔镜微创手术治疗腰椎间盘突出症的手术护理效果。[方法]对我院2016年1月-2017年6月采用经皮椎间孔镜微创手术治疗的42例腰椎间盘突出症病人进行术前及术中护理,于术前、术后3个月、术后6个月时对病人腰痛及腰椎功能障碍进行评价,于术后1周对病人并发症发生情况进行评价,于术后第2天对病人直腿抬高加强试验结果进行评价。[结果]42例病人术后视觉模拟评分法及Oswestry功能障碍指数评分降低(P<0.05),病人术后直腿抬高加强试验(-),无并发症发生。[结论]良好的术前心理沟通,充分的手术用物准备,术中积极进行防水护理、体位约束、防辐射护理、密切观察病人生命体征变化,有利于降低病人腰痛程度,减轻病人腰椎功能障碍,减少并发症发生,促进病人康复。

关键词：腰椎间盘突出症导航辅助经皮椎间孔镜防水辐射

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装配整体式剪力墙产业化住宅环境表现测评

工程管理学报 2011年第6期25卷 684-688页

作者：曹新颖李小冬刘国权李建树李浩李永敢清华大学建设管理系北京100084 北京万科企业有限公司北京100125 中建一局集团建设发展有限公司北京100102

为了客观评价装配整体式剪力墙产业化住宅和传统钢筋混凝土现浇剪力墙住宅的环境表现,论文选择规模相似、户型一致、参建单位相同的两种不同建造模式的住宅项目作为测评对象,对其高度相同的多个标准层的构件生产、施工安装及外装修过程... 详细信息

为了客观评价装配整体式剪力墙产业化住宅和传统钢筋混凝土现浇剪力墙住宅的环境表现,论文选择规模相似、户型一致、参建单位相同的两种不同建造模式的住宅项目作为测评对象,对其高度相同的多个标准层的构件生产、施工安装及外装修过程进行了全面细致地调研,获取了资源消耗、能源消耗和施工废弃物产生量等三个方面的统计数据,并据此进行了比较和原因分析。希望本研究可为进一步的研究提供扎实的数据基础,为有关技术和管理改进、标准和政策的制定提供客观、科学的依据。

关键词：产业化住宅传统住宅环境表现测评

下肢灌注评估量表预防股静脉-动脉体外膜氧合患者下肢缺血的护理实践

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中国体外循环杂志 2023年第2期21卷 107-110,128页

作者：刘艳陈志兰曹新颖孙斌丁文平王立伟甄宁徐州市中心医院手术室徐州221000 徐州市中心医院麻醉科徐州221000

目的评价下肢灌注评估量表用于股静脉-动脉体外膜氧合(V-A ECMO)患者的临床疗效。方法回顾性分析本院2015年9月至2022年3月行V-A ECMO治疗的患者41例,根据是否应用下肢灌注评估量表分为对照组(n=20)和量表组(n=21)。对照组采用常规护理... 详细信息

目的评价下肢灌注评估量表用于股静脉-动脉体外膜氧合(V-A ECMO)患者的临床疗效。方法回顾性分析本院2015年9月至2022年3月行V-A ECMO治疗的患者41例,根据是否应用下肢灌注评估量表分为对照组(n=20)和量表组(n=21)。对照组采用常规护理方案,量表组应用下肢灌注评估量表评估V-A ECMO患者下肢灌注情况。比较两组患者一般资料和下肢缺血发生率,采用Logistic回归分析下肢缺血的危险因素。结果两组患者在一般资料方面差异均无统计学意义(P>0.05),在下肢缺血发生率方面存在统计学差异(4.8%vs.30.0%,P=0.045)。多因素Logistic回归分析结果显示未使用下肢灌注评估量表(OR=1.12,95%CI:1.06~1.18,P=0.025)、未预置远端灌注管(OR=1.55,95%CI:1.08~2.23,P=0.018)以及未实施清醒ECMO(OR=2.50,95%CI:1.69~3.70,P<0.001)是患者下肢缺血的危险因素。结论应用下肢灌注评估量表能够早期识别V-A ECMO下肢缺血的患者,有利于医护人员尽早实施干预措施,提高护理质量和患者满意度。

关键词：静脉-动脉体外膜氧合下肢灌注下肢缺血评估量表护理

缔造趣味数学,催放思维之花——以《高矮》教学为例

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小学生(下旬刊) 2017年第2期 43-43页

作者：曹新颖江苏省扬州市邗江区启智学校

"数学是思维的体操",发展学生的思维是数学教学的重要任务,启智学校的孩子思维水平往往低于同龄人,他们的思维存在着一定的障碍,为他们思维插上翅膀,助力他们飞跃思维的沟壑,实现思维的跨越式发展,是我的理想与追求。兴趣是学生学习的... 详细信息

"数学是思维的体操",发展学生的思维是数学教学的重要任务,启智学校的孩子思维水平往往低于同龄人,他们的思维存在着一定的障碍,为他们思维插上翅膀,助力他们飞跃思维的沟壑,实现思维的跨越式发展,是我的理想与追求。兴趣是学生学习的动力与老师,培养学生的学习兴趣是第一要务,只有对数学产生兴趣,他们的思维之花才会绽放。笔者在多年的数学教学中打造趣味课堂,以趣引思、以趣导思。现以《高矮》教学为例,把自己

关键词：趣味数学数学活动趣味情境

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论中学生信用档案的建立

读写算 2019年第11期 153-153页

作者：曹新颖保定市满城区职业技术教育中心

中国传统伦理中关于诚信的要求,在今天仍然有着一定的适用性。为人诚恳,待人诚实,做事实在,重视然诺,讲究信用,追求信誉,以诚实见信于人,这是一个人为人处世应当遵循的基本道理,也是一个社会维持正常秩序和有效运行的必然要求。诚信没... 详细信息

中国传统伦理中关于诚信的要求,在今天仍然有着一定的适用性。为人诚恳,待人诚实,做事实在,重视然诺,讲究信用,追求信誉,以诚实见信于人,这是一个人为人处世应当遵循的基本道理,也是一个社会维持正常秩序和有效运行的必然要求。诚信没有速成法,没有捷径可走,它靠一点一滴来建立,通过一人一事来体现;必须从大处着眼,从小处入手,从娃娃抓起,从日常生活抓起。要在全社会树立诚信光荣、失信可耻的社会风气和强有力的舆论氛围。

关键词：中学生信用档案建立

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以职业生涯规划为载体的班级管理的实践研究

长江丛刊 2017年第19期 244-244页

作者：曹新颖山东省临沂市信息工程学校

在中职班级管理工作里,要以职业生涯规划教育为载体,笔者通过和自身工作经验相结合,通过分析中职班级管理的模式,分析以职业生涯规划为载体得中职班级管理模式的意义,为相关的中职班级管理教师提供合理性参考.

关键词：职业生涯规划中职班级管理

来源：评论

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浅析公证介入遗嘱信托

活力 2011年第11期 112-112页

作者：曹新颖青岛市市中公证处青岛266000

随着财富的积累和增加以及人们法律意识的增强，遗嘱信托在财产管理及运用上的优势将会逐渐显现，有必要在现在对遗嘱信托进行研究，以备不时之需。本文作者从遗嘱信托的研究动机与目的、遗嘱信托的概念、遗嘱信托制度的优点、公证介入... 详细信息

随着财富的积累和增加以及人们法律意识的增强，遗嘱信托在财产管理及运用上的优势将会逐渐显现，有必要在现在对遗嘱信托进行研究，以备不时之需。本文作者从遗嘱信托的研究动机与目的、遗嘱信托的概念、遗嘱信托制度的优点、公证介入遗嘱信托的分析等方面作相关阐述，与各位共勉。

关键词：遗嘱信托受托人信托公示