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斜纹夜蛾取食诱导棉花抑制性消减文库的初步构建及生物信息学分析

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棉花学报 2009年第6期21卷 474-479页

作者：许冬张永军曹广春陈洋吴孔明郭予元中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193

为了筛选棉花抗逆基因,实验室构建了棉花被斜纹夜蛾幼虫取食诱导的正、反向抑制性消减文库。文库随机各挑取1000个克隆进行PCR鉴定,发现插入片段长度主要集中在200～1000bp之间。经反向Northern杂交筛选,正向文库随机挑取250个克隆测序... 详细信息

为了筛选棉花抗逆基因,实验室构建了棉花被斜纹夜蛾幼虫取食诱导的正、反向抑制性消减文库。文库随机各挑取1000个克隆进行PCR鉴定,发现插入片段长度主要集中在200～1000bp之间。经反向Northern杂交筛选,正向文库随机挑取250个克隆测序,得到了35条非重复序列ESTs,反向挑取150个克隆,得到24条ESTs。GenBank数据库BLAST序列相似性比对功能分析表明,斜纹夜蛾幼虫取食胁迫棉花的应答过程涉及信号传导、基因调控、抗胁迫、防御反应、能量合成代谢、细胞生长延伸等多个生物途径。诱导表达的基因对斜纹夜蛾取食胁迫功能表现为一定的直接或间接保护作用。

关键词：抑制性消减杂交表达序列标签棉花斜纹夜蛾

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马拉硫磷对东亚飞蝗解毒酶活性的影响

环境昆虫学报 2013年第2期35卷 165-170页

作者：赵霞贾苗王磊曹广春张泽华沈阳农业大学植物保护学院沈阳110161 中国农业科学院植物保护研究所农业部生物防治重点开放实验室北京100081

为有效延缓东亚飞蝗对马拉硫磷的抗药性,明确相关解毒代谢酶在抗药性产生过程中的动态变化,本试验在马拉硫磷对东亚飞蝗3龄蝗蝻毒力测定的基础上,测定了相关解毒代谢酶的活力。结果表明,马拉硫磷处理48h后其LC50值为448.89mg/L。马拉硫... 详细信息

为有效延缓东亚飞蝗对马拉硫磷的抗药性,明确相关解毒代谢酶在抗药性产生过程中的动态变化,本试验在马拉硫磷对东亚飞蝗3龄蝗蝻毒力测定的基础上,测定了相关解毒代谢酶的活力。结果表明,马拉硫磷处理48h后其LC50值为448.89mg/L。马拉硫磷低浓度(7.48-187mg/L)显著抑制东亚飞蝗乙酰胆碱酯酶、全酯酶和CDNB为底物时谷胱甘肽-S-转移酶的活性,处理间酶活性随着马拉硫磷浓度的升高出现先降低后升高的趋势;马拉硫磷对DCNB为底物时谷胱甘肽-S-转移酶活性呈显著诱导作用,处理间酶活随马拉硫磷浓度升高出现先升高后降低的趋势;马拉硫磷对多功能氧化酶活性影响差异不显著。以上结果说明,乙酰胆碱酯酶、全酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶均参与了东亚飞蝗对马拉硫磷的解毒代谢过程;马拉硫磷通过抑制昆虫体内相关解毒代谢酶活性从而达到其杀虫效果。综合前人对马拉硫磷抗性研究结果可以看出,以上生化酶抑制剂的添加可以在一定程度上延缓昆虫对马拉硫磷抗性的产生,并在抗性治理中发挥一定作用。

关键词：马拉硫磷东亚飞蝗乙酰胆碱酯酶全酯酶谷胱甘肽-S-转移酶

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温度对意大利蝗生长发育的影响

应用昆虫学报 2013年第2期50卷 466-473页

作者：赵忠伟张英财曹广春张泽华中国农业科学院植物保护研究所农业部作物有害生物综合治理重点实验室北京100081 农业部锡林郭勒草原有害生物科学观测实验站锡林浩特026000 沈阳农业大学植物保护学院沈阳110161

为了全面掌握意大利蝗Calliptamus italicus(L.)生长发育规律,明确该虫的越冬和适宜生长区域,为该虫预测预报和合理防治提供科学依据。本文研究了恒温条件下意大利蝗蝗卵越冬低温、各虫态发育起点温度和有效积温。研究结果表明意大利蝗... 详细信息

为了全面掌握意大利蝗Calliptamus italicus(L.)生长发育规律,明确该虫的越冬和适宜生长区域,为该虫预测预报和合理防治提供科学依据。本文研究了恒温条件下意大利蝗蝗卵越冬低温、各虫态发育起点温度和有效积温。研究结果表明意大利蝗蝗卵越冬低温高于-20℃;发育速率与温度呈线性正相关:卵、幼虫、雌成虫、雄成虫和雌成虫世代和雄成虫世代发育起点温度为8.62、16.12、17.07、17.82、15.02、16.27℃,有效积温为249.84、397.46、377.9、323.78、1053.82、931.53日·度;发育速率随着温度的升高而加快,同时通过测量发现33℃意大利蝗雌虫和雄虫体重均最大。

关键词：意大利蝗越冬低温发育速率最适温度

不同碳源对金龟子绿僵菌IMI330189生长的影响

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中国生物防治学报 2014年第1期30卷 58-64页

作者：王磊赵霞曹广春张泽华沈阳农业大学植物保护学院沈阳110161 中国农业科学院植物保护研究所/农业部作物有害生物综合治理重点实验室北京100081

本文以单糖葡萄糖、果糖、蔗糖、葡萄糖+果糖(1:1)、多糖可溶性淀粉以及可溶性淀粉经酶处理后的水解产物为碳源,测定了发酵过程中糖消耗水平及绿僵菌生物量,分析了碳源对绿僵菌生长代谢的影响。结果表明,供试碳源中,葡萄糖+果糖的生物... 详细信息

本文以单糖葡萄糖、果糖、蔗糖、葡萄糖+果糖(1:1)、多糖可溶性淀粉以及可溶性淀粉经酶处理后的水解产物为碳源,测定了发酵过程中糖消耗水平及绿僵菌生物量,分析了碳源对绿僵菌生长代谢的影响。结果表明,供试碳源中,葡萄糖+果糖的生物量最大(16.16 g/L)、达到最大生物量时的增长速度也最大(0.4238 g/L·h),并且被绿僵菌利用最快(48 h);其它依次为蔗糖、葡萄糖、果糖、可溶性淀粉;相同质量淀粉经外源α-淀粉酶水解12 h后作为碳源,与直接利用可溶性淀粉相比绿僵菌生物量增加14.3%左右。由此可见多糖基质碳源不利于绿僵菌的吸收利用,若在多糖基质碳源中添加外源糖类水解酶提前将多糖降解为单糖供绿僵菌生长,可提高绿僵菌对其利用率,进而提高发酵水平,降低发酵成本。

关键词：发酵碳源生物量外源α-淀粉酶成本

小菜蛾阿维菌素和虫酰肼抗性品系对几种新型药剂的交互抗性研究

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南京农业大学学报 2010年第5期33卷 60-64页

作者：殷茜钱路曹广春韩召军南京农业大学植物保护学院/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室江苏南京210095

以敏感品系为对照,利用室内筛选获得的虫酰肼和阿维菌素高抗品系Teb-R和Aba-R,测定了小菜蛾对几种新型杀虫剂的交互抗性。结果发现:小菜蛾对虫酰肼产生高水平抗性后(抗性倍数185.5倍),对阿维菌素表现出中等水平交互抗性(41.0倍),对茚虫... 详细信息

以敏感品系为对照,利用室内筛选获得的虫酰肼和阿维菌素高抗品系Teb-R和Aba-R,测定了小菜蛾对几种新型杀虫剂的交互抗性。结果发现:小菜蛾对虫酰肼产生高水平抗性后(抗性倍数185.5倍),对阿维菌素表现出中等水平交互抗性(41.0倍),对茚虫威(11.4倍)和溴虫腈(5.3倍)仅表现出低水平交互抗性,对多杀菌素(1.7倍)和氯虫苯甲酰胺(1.4倍)则没有表现出明显的交互抗性。用阿维菌素筛选Teb-R品系39代后获得阿维菌素高抗品系Aba-R(593.8倍),该品系对茚虫威(12.3倍)表现出中等水平交互抗性,对多杀菌素(7.9倍)表现出低水平交互抗性,对溴虫腈(2.7倍)和氯虫苯甲酰胺(0.9倍)的交互抗性不明显;同时该品系对虫酰肼的抗性也由阿维菌素筛选前的185.5倍下降到筛选后的28.0倍,也没有交互抗性。基于上述研究结果认为,使用虫酰肼防治小菜蛾出现抗性后,可以使用多杀菌素和氯虫苯甲酰胺进行替代防治,但不宜用阿维菌素、茚虫威和溴虫腈进行替代防治;利用阿维菌素防治小菜蛾产生抗性后,可以用溴虫腈、氯虫苯甲酰胺和虫酰肼进行替代防治,但不宜用多杀菌素和茚虫威。

关键词：小菜蛾虫酰肼阿维菌素溴虫腈多杀菌素茚虫威氯虫苯甲酰胺交互抗性

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误诊致使阿托品中毒1例报道

基层医刊 1984年第3期 41-42页

作者：曹广春河南省光山县医院儿科

周×,男,5岁,住院号:729。于1983年9月15日上午11时急诊入院。患儿于本月14日下午8时,因腹痛、呕吐,经乡村医生注射阿托品2支后送入某公社医院住院治疗。其父代诉在发病前患儿接触过农药,故诊断为有机磷农药中毒。立即每20分钟肌注阿托... 详细信息

周×,男,5岁,住院号:729。于1983年9月15日上午11时急诊入院。患儿于本月14日下午8时,因腹痛、呕吐,经乡村医生注射阿托品2支后送入某公社医院住院治疗。其父代诉在发病前患儿接触过农药,故诊断为有机磷农药中毒。立即每20分钟肌注阿托品1毫克,在治疗过程中病情逐渐加重,出现四肢抽动,体温升高至38℃(原体温正常)。医生认为阿托品用量不足,故每5分钟肌注阿托品1毫克,并加用解磷定静注。在

关键词：阿托品中毒解磷定乡村医生住院治疗代诉中毒症状急性胃炎镇静药物神志昏迷新斯的明

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新课标下的作文教学

林区教学 2014年第7期 23-24页

作者：曹广春富锦市联合中学

在语文新课程标准的指导下,探索一种作文教学形式,即：关注生活,走进生活;阅读搜索,整理储存;以文为范,文后练笔;引导鼓励,激发创新;教有法,写有程序。希望能给作文教学注入新的理念,让学生把写作当作一件快乐的事情,在快乐的情感中,完... 详细信息

在语文新课程标准的指导下,探索一种作文教学形式,即：关注生活,走进生活;阅读搜索,整理储存;以文为范,文后练笔;引导鼓励,激发创新;教有法,写有程序。希望能给作文教学注入新的理念,让学生把写作当作一件快乐的事情,在快乐的情感中,完成培养学生表情达意能力的目标。

关键词：作文教学真情实感阅读整理练笔创新

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棉铃虫对Bt杀虫剂的抗性遗传方式

昆虫学报 2010年第4期53卷 385-390页

作者：郭芳梁革梅曹广春高希武郭予元中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 中国农业大学农学与生物技术学院北京100193

随着转基因棉花种植面积的日益增加,棉铃虫Helicoverpa armigera(Hbner)对Bt的抗性已经成为一个不容忽视的问题。发展转多价基因作物是当前缓解害虫对Bt抗性的最有效措施。本研究以经室内多年筛选的、抗性倍数达2000多倍的Bt杀虫剂(... 详细信息

随着转基因棉花种植面积的日益增加,棉铃虫Helicoverpa armigera(Hbner)对Bt的抗性已经成为一个不容忽视的问题。发展转多价基因作物是当前缓解害虫对Bt抗性的最有效措施。本研究以经室内多年筛选的、抗性倍数达2000多倍的Bt杀虫剂(含多种蛋白)抗性品系为材料,通过生物测定和不同的杂交试验,测定棉铃虫对Bt杀虫剂的抗性遗传方式,以期为Bt生物农药的抗性治理提供一定的依据,同时为制定棉铃虫对转多基因作物的抗性治理策略提供一定的参考。对敏感亲本和抗性亲本杂交产生的F1代的研究结果表明,杂交品系的抗性倍数分别为22.2倍和24.6倍;抗性显性度D值均小于0,分别为-0.20和-0.17,抗性为常染色体不完全隐性遗传。对4种回交后代和2种自交后代F2的研究结果表明,实际死亡率与期望死亡率差异较大,说明抗性是由单基因多个位点或多基因控制。

关键词：棉铃虫转Bt基因棉花 Bt杀虫剂抗性遗传抗性治理

用Real-Time PCR评价花生田间金龟子绿僵菌的存活能力

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菌物学报 2013年第4期32卷 710-720页

作者：李兴佳农向群曹广春刘迅王广君张泽华中国农业科学院植物保护研究所农业部作物有害生物综合治理重点实验室北京100081

为了能够对金龟子绿僵菌在花生田间的存活能力进行精确的定量研究,通过比对真菌ITS序列,设计出针对金龟子绿僵菌的特异性引物,并建立金龟子绿僵菌Real-Time PCR反应体系。结果表明,标准品在拷贝数为8.49×103–8.49×109copies/μL之间... 详细信息

为了能够对金龟子绿僵菌在花生田间的存活能力进行精确的定量研究,通过比对真菌ITS序列,设计出针对金龟子绿僵菌的特异性引物,并建立金龟子绿僵菌Real-Time PCR反应体系。结果表明,标准品在拷贝数为8.49×103–8.49×109copies/μL之间,线性关系良好,线性方程为y=-3.257x+6.969,相关系数为R=0.9980,扩增效率E=102.8%,检出痕量为20个孢子/g土壤。以Real-Time PCR方法和平板稀释法,分别对花生根部施用金龟子绿僵菌后不同时期的土壤进行定量分析,结果表明两种方法检测的金龟子绿僵菌数量变化趋势相似,施用的金龟子绿僵菌在根围与根际都呈现先快速下降后缓慢回升的趋势,90d时金龟子绿僵菌DNA量和CFU值均下降至初始的10%以下,之后出现回升;根际的金龟子绿僵菌相对地下降较慢而回升较快,在120d时可恢复到初始的52.17%和38.65%,显著高于根围的数量。试验建立的Real-Time PCR体系可用于金龟子绿僵菌土壤宿存的定量检测,而且适用于低含量的检测。

关键词：金龟子绿僵菌种群动态定量分析