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改善大分子质粒DNA重组效率的新方法

生物化学与生物物理进展 1997年第3期24卷 281-283页

作者：谭德勇邓双胜孟玲昝瑞光云南大学生物系昆明650091

采用两次连接法对一个质粒载体为 7 65kb ,插入子为 1 4 7kb的片段进行重组连接 ,使连接效率大大提高 .此方法对于大分子的质粒DNA重组是非常有效的 .

关键词： DNA 质粒DNA 重组效率二次连接法

云南滇池高背鲫鱼胚胎发育过程中酯酶(EST)同工酶分析

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西南农业学报 1997年第2期10卷 100-104页

作者：蒋晓华昝瑞光云南大学生物系云南大学省微生物研究所

采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳技术，对滇池高背鲫鱼胚胎不同发育时期的酯酶（ＥＳＴ）同工酶的表达情况进行了比较分析，结果如下：１，在从未受精卵到肝形成期的整个发育过程中，ＥＳＴ同工酶在４组胚胎上持续不断地表达了３条酶带，但... 详细信息

采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳技术，对滇池高背鲫鱼胚胎不同发育时期的酯酶（ＥＳＴ）同工酶的表达情况进行了比较分析，结果如下：１，在从未受精卵到肝形成期的整个发育过程中，ＥＳＴ同工酶在４组胚胎上持续不断地表达了３条酶带，但第Ⅰ组胚胎在血液循环期以前未表达任何酶带。２，随着胚胎发育的进展，从血液循环期起尤其到肝形成期，ＥＳＴ同工酶增加了新酶带。３，滇池高背鲫鱼胚胎发育过程中的ＥＳＴ同工酶表达也显示出它的特点：不同组胚胎之间存在相当明显而恒定的差异性。

关键词：酯酶同功酶胚胎发育电泳云南滇池鲫鱼

原癌基因c-myc、c-H-ras、c-sis在小鼠卵巢和睾丸中的转录表达研究

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遗传 1998年第5期20卷 2-6页

作者：王晓燕谭德勇周翔昝瑞光云南大学生物系

以地高辛标记ｃ－ｍｙｃ、ｃ－Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｓｉｓ基因作探针，利用组织切片原位杂交的方法，检测了昆明种小鼠５周龄、１０周龄和孕期卵巢，以及１天龄、５周龄和１０周龄睾丸，初步研究了这３种原癌基因在生殖腺中的转录表达及其... 详细信息

以地高辛标记ｃ－ｍｙｃ、ｃ－Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｓｉｓ基因作探针，利用组织切片原位杂交的方法，检测了昆明种小鼠５周龄、１０周龄和孕期卵巢，以及１天龄、５周龄和１０周龄睾丸，初步研究了这３种原癌基因在生殖腺中的转录表达及其可能的功能作用。结果显示：（１）ｃ－ｍｙｃ基因在孕鼠卵巢的个别卵泡的卵泡细胞中有强转录信号，但在３组卵巢的卵母细胞中及３组睾丸切片中均未见杂交信号。（２）ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因在孕鼠卵巢黄体中有较强转录表达，但在３组卵巢的卵母细胞中及３组睾丸切片中均无杂交信号，（３）ｃ－ｓｉｓ基因在１０周龄睾丸曲细精管的精原细胞层和精母细胞有强转录表达，而在１天龄、５周龄睾丸及３组卵巢切片中均无杂交信号。上述结果表明：ｃ－ｍｙｃ基因可能与精子发生和卵子的发育关系不大，但可能与卵泡的退化有关；ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因可能与精子发生和卵子的发育关系也不大，但可能与妊娠黄体的形成有关；ｃ－ｓｉｓ基因可能与卵子的发育无关。

关键词：原癌基因 c-myc c-H-ras c-sis 卵巢睾丸基因

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牛蛙标准Ag-NOR_s形态的初步观察

云南大学学报（自然科学版） 1990年第4期12卷 356-358页

作者：麦明昝瑞光云南大学生物系

银染核仁组织者(Ag-NORs)是1975年由Goodpasture和Bloom所做的开创性工作.后来,通过原位杂交的方法证明银染核仁组织者区就是18S+28S+5.8SrRNA基因所在的位点.由此,银染为各类生物rRNA基因的研究提供了一种简单、快速的方法.按Schmid的... 详细信息

银染核仁组织者(Ag-NORs)是1975年由Goodpasture和Bloom所做的开创性工作.后来,通过原位杂交的方法证明银染核仁组织者区就是18S+28S+5.8SrRNA基因所在的位点.由此,银染为各类生物rRNA基因的研究提供了一种简单、快速的方法.按Schmid的报道,无尾类中有68％个体的NOR异形是由NOR串接重复造成的.

关键词：牛蛙 NOR 银染中期染色体

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紫外线诱发小鼠染色体C带的产生

云南大学学报（自然科学版） 1989年第3期 269-271页

作者：麦明昝瑞光云南大学生物系

本文报道了一种用紫外线处理小鼠骨髓细胞产生染色体C带的方法。初步分析了紫外线—C带的产生原因。本工作证明了Comings提出的C显带机理。

关键词：小鼠紫外线染色体C带

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洱海鲤属鱼类同域分化形成的分子遗传学证据

Acta Genetica Sinica 2004年第9期31卷 976-982页

作者：郑冰蓉张亚平肖春杰肖蘅昝瑞光云南大学生命科学学院昆明650091 中科院昆明动物研究所

对洱海的 3种鲤鱼———洱海鲤 (C .barbatus)、春鲤 (C .longipectoralis)和杞麓鲤 (C .carpiochila)线粒体DNA(mtDNA)进行了限制性片段长度多态 (RFLP)分析和mtDNA控制区 (D loop)序列测定。RFLP分析结果表明 ,16种酶在洱海鲤、春鲤... 详细信息

对洱海的 3种鲤鱼———洱海鲤 (C .barbatus)、春鲤 (C .longipectoralis)和杞麓鲤 (C .carpiochila)线粒体DNA(mtDNA)进行了限制性片段长度多态 (RFLP)分析和mtDNA控制区 (D loop)序列测定。RFLP分析结果表明 ,16种酶在洱海鲤、春鲤和杞麓鲤 3个种共 14个个体上 ,仅DraⅠ在春鲤的一个个体上检出一个位点的限制性片段长度多态 ,独立为单倍型Ⅱ ,3个种的其余 13个个体共享单倍型Ⅰ ,种间遗传距离为 0 %～ 0 0 0 75 % ,此种间差异值比已报道的鱼类的种间差异甚至种内差异都低得多。D loop区的序列测定结果表明 ,长为 4 4 9bp的序列共显示有 7个变异位点 ,均为碱基替换 ,变异比例为 1 5 6 % ,在 14个鲤鱼个体中共检出 6种单倍型 ,种间的遗传距离为 0 0 82 %～ 0 171% ,与已研究的其他几种异域分布的鲤鱼相比 ,也至少小一个数量级。mtDNA的RFLP及D loop区的序列比较都揭示出洱海 3种鲤鱼之间的遗传差异远小于异域分布的鲤属鱼类物种之间及其他鱼类的同属种间的遗传差异。对洱海鲤属鱼类种间如此小的遗传差异唯一合理的解释就是 :它们确是由同域分化而形成的。

关键词：洱海鲤属鱼类同域分化线粒体DNA RFLP D—loop区测序

甲肝病毒减毒株(H_2)RNA的全长RT-PCR扩增

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生物化学与生物物理进展 1998年第5期25卷 472-475页

作者：周翔谭德勇赖建华昝瑞光云南大学生物系昆明医学院生物教研室

通过ＲＴＰＣＲ技术扩增了甲肝病毒减毒株（Ｈ２）全长ＲＮＡ，并对长片段ＲＴＰＣＲ扩增进行了方法学上的探讨．采用抗血清特异沉淀病毒；盐酸胍酸性酚、氯仿一步法分离纯化病毒ＲＮＡ，可得到高质量的ＲＮＡ样品；以此ＲＮＡ为... 详细信息

通过ＲＴＰＣＲ技术扩增了甲肝病毒减毒株（Ｈ２）全长ＲＮＡ，并对长片段ＲＴＰＣＲ扩增进行了方法学上的探讨．采用抗血清特异沉淀病毒；盐酸胍酸性酚、氯仿一步法分离纯化病毒ＲＮＡ，可得到高质量的ＲＮＡ样品；以此ＲＮＡ为模板，在无ＲＮＡ酶的逆转录酶作用下，合成单链ｃＤＮＡ；继续以此ｃＤＮＡ为模板，利用３２ｍｅｒ寡核苷酸引物，在Ｔａｑ和ＤｅｅｐＶｅｎｔＤＮＡ多聚酶的作用下进行ＰＣＲ扩增。

关键词：甲肝病毒全长RNA RT-PCR扩增

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鱼类中的多倍性及其在鱼类演化中的作用

云南大学学报(自然科学版) 1985年第2期 235-243页

作者：昝瑞光云南大学生物系

基因组的多倍化在鱼类演化中起过重要作用。国外已有约170个种、亚种和类型的鱼类被证明或推断为多倍体,涉及14个科,其中有些科被整科地视为四倍体起源。核型的比较表明我国鱼类中同样存在进化多倍体,数目已达28个种、亚种和类型;核DNA... 详细信息

基因组的多倍化在鱼类演化中起过重要作用。国外已有约170个种、亚种和类型的鱼类被证明或推断为多倍体,涉及14个科,其中有些科被整科地视为四倍体起源。核型的比较表明我国鱼类中同样存在进化多倍体,数目已达28个种、亚种和类型;核DNA值的测定结果进一步确证了这一事实。鱼类多倍体可能主要通过间接途径也可能通过杂种繁殖系统起源,但直接起源方式也许还不能过分排除,特别在我国古代。鱼多倍体一般有比亲缘两性二倍体更强的适应和生长繁殖能力,有进一步演化的能力,但对雌核发育多倍体尚难全面下此结论。研究鱼类中的多倍性现象不但在理论上而且在实践上也有重要意义。

关键词：鱼类多倍化核型亚种水生动物多倍体多元体多倍性二倍性雌核发育二倍体两倍体裂腹鱼亚科

滇池两种类型鲫鱼的性染色体和C-带核型研究

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Journal of Genetics and Genomics 1982年第1期 32-39+85-86页

作者：昝瑞光云南大学生物系昆明

滇池现有鲫鱼(Carassius auratus)分低背型和高背型两个种群。低背型鲫鱼在滇池早有记录,云南许多地区均有分布。高背型鲫鱼仅滇池有,是1975年左右发现的,其来源不明。本研究使用C-带染色和常规Giemsa染色研究了这两种类型鲫鱼肾细胞和... 详细信息

滇池现有鲫鱼(Carassius auratus)分低背型和高背型两个种群。低背型鲫鱼在滇池早有记录,云南许多地区均有分布。高背型鲫鱼仅滇池有,是1975年左右发现的,其来源不明。本研究使用C-带染色和常规Giemsa染色研究了这两种类型鲫鱼肾细胞和胚胎细胞的染色体组型,目的有两个:(1)鲫鱼具有XX(♀):XY((?))的性别决定机制,这早为Yamamoto等所证明,但X和Y染色体长期未得到细胞学上的证实。这种情况在两年前开始被突破。一方面,Ojima运用C-带技术在2n=100的金鱼和金鲫(C.

关键词：染色体组型肾细胞超数染色体额外染色体大染色体胚胎细胞滇池核型研究鲫鱼