检索结果-南通市图书馆

嗜热真菌植酸酶基因的克隆及其在巴斯德毕赤酵母中高效表达

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食品与发酵工业 2009年第12期35卷 10-14页

作者：张文荟诸葛斌沈微饶志明方慧英诸葛健江南大学教育部工业生物技术重点实验室江南大学生物工程学院工业微生物中心江苏无锡214122

根据已报道的植酸酶基因序列设计一对引物,用PCR方法从嗜热真菌(Thermomyces sp.)中扩增获得不含信号肽和内含子的植酸酶基因(phyT),对该1.4kb的片段进行克隆与序列测定。序列分析表明该基因与已报道的嗜热疏绵霉(Thermomyces lanuginos... 详细信息

根据已报道的植酸酶基因序列设计一对引物,用PCR方法从嗜热真菌(Thermomyces sp.)中扩增获得不含信号肽和内含子的植酸酶基因(phyT),对该1.4kb的片段进行克隆与序列测定。序列分析表明该基因与已报道的嗜热疏绵霉(Thermomyces lanuginosus)的植酸酶基因相似性最高,DNA和氨基酸水平相似性分别达到95%和99%。将phyT基因插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-phyT并电转化毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)。植酸酶基因成功在毕赤酵母中表达并对重组酶酶学性质进行了研究。诱导表达酶活结果显示与野生型菌株相比,活性提高了67.8%,最适温度65℃,75℃处理20min后仍有70%以上酶活活性。最适pH为6.0。SDS-PAGE分析显示其分子量约55ku以上。

关键词：嗜热真菌植酸酶重组毕赤酵母热稳定性

产甘油假丝酵母基因CgZWF片段的克隆与序列分析

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安徽农业科学 2007年第11期35卷 3161-3162页

作者：张永光饶志明沈微方慧英诸葛健江南大学生物工程学院工业微生物研究中心工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

以产甘油假丝酵母基因组DNA为模板,通过简并PCR和反向PCR扩增得到了一个长为1 244 bp片段,并将其克隆到pMD18-Tvector。基因序列分析表明,此片段编码的氨基酸序列与Kluyveromyces lactis的G6pdp同源性最高(62.7%),表明已经得到编码葡萄... 详细信息

以产甘油假丝酵母基因组DNA为模板,通过简并PCR和反向PCR扩增得到了一个长为1 244 bp片段,并将其克隆到pMD18-Tvector。基因序列分析表明,此片段编码的氨基酸序列与Kluyveromyces lactis的G6pdp同源性最高(62.7%),表明已经得到编码葡萄糖6-磷酸脱氢酶的目的基因片段。该研究为阐明磷酸戊糖途径在产甘油假丝酵母耐高渗和甘油高产中的作用奠定了基础。

关键词：产甘油假丝酵母葡萄糖 6-磷酸脱氢酶基因克隆

利用PCR-DGGE技术筛选分离海南黄帝椒产品微生物

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食品与发酵工业 2012年第3期38卷 38-42页

作者：李汉文诸葛斌方慧英孙进龚星慧诸葛健江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 江南大学食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 江南大学生物工程学院工业微生物研究中心江苏无锡214122 浙江正味食品有限公司浙江义乌322000

黄帝椒是海南特产高辣度辣椒。该研究以黄帝椒产品为原料,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析了其微生物种群关系,并结合传统平板筛选法进行菌种分离及鉴定,获得了海南特辣黄帝椒产品优势微生物。研究结果显示,海... 详细信息

黄帝椒是海南特产高辣度辣椒。该研究以黄帝椒产品为原料,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析了其微生物种群关系,并结合传统平板筛选法进行菌种分离及鉴定,获得了海南特辣黄帝椒产品优势微生物。研究结果显示,海南黄帝椒产品平板筛选分离到了Pseudomonas stutzeri,Lactobacillus plantarum,Lactobacillus brevis等可培养的菌株;DGGE图谱中检测到了6个条带,其中,乳酸菌占总菌数的65%,处于最优势地位,假单胞菌占总菌数的16%,处于次要地位。该研究也首次提及了不同的微生物对黄帝椒产品的颜色、脆性的影响。

关键词：黄帝椒 PCR DGGE 微生物

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海南黄帝椒酶促褐变控制的研究

食品工业科技 2013年第18期34卷 202-205页

作者：宗红诸葛斌方慧英孙进龚星慧冯倩楼笑笑诸葛健江南大学工业生物技术教育部重点实验室工业微生物研究中心江苏无锡214122 浙江正味食品有限公司浙江省调味食品制造工程技术研究中心浙江义乌322000

本文采用丙酮法提取了海南黄帝椒中的多酚氧化酶(PPO),并对其酶学特性进行了研究。海南黄帝椒PPO的米氏常数K m为117.38mmol/L,最大反应速率V max为416.67U/min,最适温度为40℃,最适pH为6.0。不同抑制剂对PPO活力的影响表明,较低浓度的... 详细信息

本文采用丙酮法提取了海南黄帝椒中的多酚氧化酶(PPO),并对其酶学特性进行了研究。海南黄帝椒PPO的米氏常数K m为117.38mmol/L,最大反应速率V max为416.67U/min,最适温度为40℃,最适pH为6.0。不同抑制剂对PPO活力的影响表明,较低浓度的柠檬酸、L-抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐对黄帝椒PPO活力具有一定的的抑制作用,而EDTA抑制效果较差;在单因素实验的基础上,通过正交实验设计对黄帝椒酶促褐变的抑制剂配方进行了优化,结果表明当添加L-抗坏血酸0.35%、半胱氨酸盐酸盐0.02%和柠檬酸0.2%时,黄帝椒的褐变度最小。此研究结果为海南黄帝椒产品的深度开发提供了基础。

关键词：黄帝椒多酚氧化酶酶促褐变抑制剂

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耐高渗压是产甘油假丝酵母甘油高产的基础

微生物学通报 1999年第1期26卷 24-26页

作者：王正祥方慧英诸葛健无锡轻工大学生物工程学院无锡214036

运用化学诱变法从产甘油假丝酵母获得１９株渗透压突变株。对其生理及发酵性能的研究结果显示，所有渗透压敏感突变株的甘油产率皆显著降低并巨大多数渗透压敏感突变株的糖利用速度减慢．耐渗透压性能提高突变株的糖利用率几乎与亲株相... 详细信息

运用化学诱变法从产甘油假丝酵母获得１９株渗透压突变株。对其生理及发酵性能的研究结果显示，所有渗透压敏感突变株的甘油产率皆显著降低并巨大多数渗透压敏感突变株的糖利用速度减慢．耐渗透压性能提高突变株的糖利用率几乎与亲株相同而甘油发酵性能改变呈现多样性，突变株如ＷＬ－ＯｓｍＤ、ＷＬ－ＯｓｍＦ以及ＷＬ-ＯｓｍＨ甘油转化率极度降低而突变株ＷＬ－ＯｓｍＢ的甘油耗糖转化率接近亲株。

关键词：产甘油假丝酵母发酵甘油耐高渗压

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高效降解棉酚菌株的分离鉴定及诱变选育

微生物学通报 2011年第8期38卷 1166-1171页

作者：孙中超方慧英诸葛斌张濛诸葛健江南大学工业生物技术教育部重点实验室和工业微生物研究中心江苏无锡214122 德班理工大学生物技术学院南非德班4000

作为一种蛋白资源,棉籽粕因其含有毒素——游离棉酚限制了其在饲料工业中的应用。为获得能高效降解棉籽粕中棉酚的菌株,以醋酸棉酚为唯一碳源培养基从16份样品中筛选出一株高效降解棉酚菌株(Y-2),经生理生化及18S rDNA鉴定为Pichia guil... 详细信息

作为一种蛋白资源,棉籽粕因其含有毒素——游离棉酚限制了其在饲料工业中的应用。为获得能高效降解棉籽粕中棉酚的菌株,以醋酸棉酚为唯一碳源培养基从16份样品中筛选出一株高效降解棉酚菌株(Y-2),经生理生化及18S rDNA鉴定为Pichia guilliermondii,此菌种为非致病酵母,且首次报道用于棉酚的降解,在工业生产中具有潜在的应用前景。通过紫外诱变获得一株棉酚降解率更高的突变株YUV-51。通过对突变株YUV-51发酵温度、时间及接种量的初步优化,获得其固态发酵优化条件:30°C培养48 h,接种量0.025 g湿菌体/g棉籽粕,初始水分含量50%。为避免游离棉酚在前处理中大量降解棉籽粕,不进行湿热处理,经接种发酵后脱毒率可达到58%。这使微生物脱毒在实际生产中应用成为可能。

关键词：生物降解紫外诱变季也蒙毕赤酵母

测量万瓦级CO2激光器连续输出功率的鼠笼式能量计

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激光 1978年第Z1期 140-141页

作者：陈致英李伟方慧英中国科学院力学研究所

CO2激光器连续输出功率可达数万瓦以上,运转时间短的仅几秒,一般的功率计很难兼顾承受高功率密度和响应时间快这两个要求.因此我们采用配有旋转盘衰减器的鼠笼式能量计进行测量.Baker给出,鼠笼能量计在不小于毫秒时间里最大可接收的能... 详细信息

CO2激光器连续输出功率可达数万瓦以上,运转时间短的仅几秒,一般的功率计很难兼顾承受高功率密度和响应时间快这两个要求.因此我们采用配有旋转盘衰减器的鼠笼式能量计进行测量.Baker给出,鼠笼能量计在不小于毫秒时间里最大可接收的能量密度为10焦耳/厘米2.我们制作的74-6#鼠笼能量计的实验表明,只要通过旋转盘衰减器的每个光脉冲满足上述要求,在重复频率为数十次/秒的连续光脉冲照射下,仍可实现测量.74-6#已实测了3×104瓦CO2激光器连续输出功率,它的最大功率密度已超过6×103

关键词：能量计激光器光激射器电子器件鼠笼输出功率

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一株腐乳生产菌的筛选、鉴定及其生理特征

食品与生物技术学报 2007年第5期26卷 116-120页

作者：张丽英沈微方慧英诸葛健江南大学教育部工业生物技术教育重点实验室江苏无锡214122

以家制腐乳毛坯为对象,筛选出一株腐乳生产菌。这株菌产生以中性和碱性蛋白酶为主的蛋白酶系,酶活力高达1100 U/g干曲。根据菌株在PSA上的菌落特征、菌丝形态、产孢结构及其孢子形态等对毛霉鉴定的基础上,结合18S rDNA序列分析表明,该... 详细信息

以家制腐乳毛坯为对象,筛选出一株腐乳生产菌。这株菌产生以中性和碱性蛋白酶为主的蛋白酶系,酶活力高达1100 U/g干曲。根据菌株在PSA上的菌落特征、菌丝形态、产孢结构及其孢子形态等对毛霉鉴定的基础上,结合18S rDNA序列分析表明,该株毛霉菌为雅致放射毛霉（Actinomucor elegans WL3.006）。生产菌能在土豆、麸皮及豆腐坯等固体培养基上茂盛生长,对数生长期在12～36 h,最适生长温度为25～28℃,最适碳源为果糖,最适氮源为牛肉浸膏,适宜pH值为6～8;40 g/L NaCl对其生长有明显抑制;用卤水或石膏点制的豆腐白坯均适于此菌的生长。

关键词：腐乳雅致放射毛霉鉴定

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猪骨泥功能性双菌发酵

食品与发酵工业 2013年第3期39卷 94-97页

作者：秦斌钰诸葛斌方慧英宗红孙进龚星慧楼笑笑诸葛健江南大学工业生物技术教育部重点实验室工业微生物研究中心江苏无锡214122 浙江正味食品有限公司浙江省调味食品制造工程技术研究中心浙江义乌322000

为充分利用含有大量不易消化吸收的蛋白质、钙磷盐等营养物质的废弃猪骨,利用枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌,采用液态发酵法对猪骨泥进行功能性发酵,旨在同时提高骨泥中易于吸收且具有功能的小分子蛋白、多肽及可溶性钙的含量,强化发酵骨泥... 详细信息

为充分利用含有大量不易消化吸收的蛋白质、钙磷盐等营养物质的废弃猪骨,利用枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌,采用液态发酵法对猪骨泥进行功能性发酵,旨在同时提高骨泥中易于吸收且具有功能的小分子蛋白、多肽及可溶性钙的含量,强化发酵骨泥的功能性。分别对单菌和双菌发酵骨泥的水解度、鲜味氨基酸和可溶性钙含量进行分析,并考察了骨泥发酵前后的表观变化。结果表明:双菌发酵后骨泥水解度达到42.5%,鲜味氨基酸含量达到2.01 mg/mL,可溶性钙含量达到1.16 mg/mL,比单菌发酵更有优势。双菌发酵蛋白酶系多样,水解更加充分,同时还能提高骨泥可溶性钙的含量,为猪骨深度开发提供依据。

关键词：猪骨泥蛋白水解度鲜味氨基酸可溶性钙