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克林霉素对穿通支原体诱导小鼠膀胱移行细胞癌Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

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中国免疫学杂志 2011年第S1期27卷 1171-1174,1179页

作者：任帆方周溪曹淑彦周丽萍温州医学院检验学院温州325000

目的:探讨克林霉素对穿通支原体(Mycoplsama penetrans,Mpe)诱导免疫缺陷小鼠膀胱移行细胞癌凋亡相关蛋白表达的影响。方法:50只ICR免疫抑制小鼠,分克林霉素干预试验组(n=20只)上行感染0.1 ml Mpe(6×108-9/ml),连续3天,同时肌肉注射克... 详细信息

目的:探讨克林霉素对穿通支原体(Mycoplsama penetrans,Mpe)诱导免疫缺陷小鼠膀胱移行细胞癌凋亡相关蛋白表达的影响。方法:50只ICR免疫抑制小鼠,分克林霉素干预试验组(n=20只)上行感染0.1 ml Mpe(6×108-9/ml),连续3天,同时肌肉注射克林霉素(25 mg/kg.d),连续保护4天;Mpe非干预对照组(n=20)上行感染相同菌量Mpe,连续3天;NS对照组(n=10)上行感染相同剂量的NS,连续3天。各组在8、18周分批宰杀,取8周小鼠血清Mpe再培养,观察8周、18周小鼠膀胱超微结构的形态学改变,同时用免疫组化检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的变化。结果:克林霉素干预组较非干预组Mpe菌落显著减少。光镜和电镜结果显示克林霉素干预组小鼠的膀胱组织超微结构未见多核仁等分裂相。免疫组化显示克林霉素干预组较非干预组小鼠膀胱移行上皮细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达显著降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低。结论:克林霉素可降低膀胱移行上皮细胞Bcl-2的表达,此结果提示克林霉素对穿通支原体诱导小鼠膀胱移行上皮细胞癌具有一定干预作用。

关键词：穿通支原体膀胱移行上皮细胞癌 Bcl-2/Bax蛋白表达

三七总皂苷对肺缺血/再灌注损伤时细胞凋亡及c-Jun氨基末端激酶的影响

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生理学报 2012年第2期64卷 135-141页

作者：邱晓晓宋张娟戴雍月方周溪王万铁温州医学院病理生理学教研室温州325035 温州医学院电镜室温州325035

本研究旨在探讨三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对大鼠肺缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤时细胞凋亡及凋亡相关蛋白和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的影响。实验用健康清洁级Wistar大鼠30只,随机分为假手术对照组(Control组)、缺血/再灌注组(I/R组)与缺血/再灌注+三七总皂苷干预组(PNS组)。采用阻断左肺门30min后松开结扎的方法复制在体大鼠原位单肺缺血/再灌注模型,PNS干预方法为缺血前60min与再灌注前10min腹腔注射PNS。实验结束时取部分左肺组织测湿/干重比(wet/dry weight ratio,W/D);采用蛋白免疫印迹法检测肺组织JNK、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白的表达;免疫组化法检测肺组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达;原位末端标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡指数(apoptotic index,AI),光镜、电镜观察肺组织形态结构变化,并测定肺泡损伤数(injured alveolus rate,IAR)。结果显示,与Control组相比,I/R组肺组织p-JNK、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达均显著增加(均P<0.01),Bcl-2/Bax的比值明显下降(P<0.05),AI、W/D及IAR均显著升高(均P<0.01),光镜、电镜示肺组织结构呈明显损伤性变化;与I/R组相比,PNS组肺组织p-JNK、Bax、Caspase-3蛋白的表达均显著下调(均P<0.01),Bcl-2蛋白的表达及Bcl-2/Bax的比值显著上调(均P<0.01),AI、W/D及IAR也显著降低(均P<0.01),肺组织形态学异常改变不同程度减轻。以上结果提示:PNS对缺血/再灌注肺具有保护作用,该作用可能与其抑制JNK信号转导通路、上调Bcl-2/Bax的比值从而减少Caspase-3依赖性的肺细胞凋亡有关。

关键词：三七总皂苷肺再灌注损伤细胞凋亡 c-Jun氨基末端激酶 Bcl-2/Bax Caspase-3

梨支原体和发酵支原体致死性感染大鼠肺上皮细胞,肾血管内皮细胞超微结构改变

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中国卫生检验杂志 2013年第1期23卷 5-8页

作者：管瑜方周溪周丽萍温州医学院检验学院浙江温州325035

目的:探讨梨支原体(Mpi)和发酵支原体(Mf)致死性感染大鼠肺、肾超微结构改变。方法:38只免疫缺陷SD大鼠。实验组:Mf和Mpi致死性感染(n=12),免疫抑制NS和非免疫抑制Mf感染对照组(n=7)。观察死亡率,透射电镜下观察肺、肾超微结构改变。结... 详细信息

目的:探讨梨支原体(Mpi)和发酵支原体(Mf)致死性感染大鼠肺、肾超微结构改变。方法:38只免疫缺陷SD大鼠。实验组:Mf和Mpi致死性感染(n=12),免疫抑制NS和非免疫抑制Mf感染对照组(n=7)。观察死亡率,透射电镜下观察肺、肾超微结构改变。结果:实验组死亡率均为100%,高于对照组(P<0.01)。电镜下见Mf和Mpi感染致死大鼠肺泡Ⅰ型上皮细胞肿胀,胞核固缩,空泡变性;肾内皮细胞细胞质溶解,胞核固缩,细胞溶解、线粒体空泡形成等超微结构改变。结论:发酵支原体和梨支原体感染致死大鼠肺泡Ⅰ型上皮细胞和肾毛细血管内皮细胞超微结构异常。

关键词：梨支原体发酵支原体上皮细胞血管内皮细胞

核因子-κB、细胞间黏附分子-1和炎症细胞因子在急性胰腺炎肝损伤中的作用

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中华实验外科杂志 2007年第9期24卷 1083-1086页

作者：万涛卓阳贺亚东滕龙方周溪朱冠保浙江温州市第二人民医院普外科 325000 解放军第118医院外科(卓阳)温州医学院电镜室温州医学院附属第一医院普外科

目的观察核因子(NF)-κB、细胞间黏附分子(ICAM)-1和炎症细胞因子在急性胰腺炎(AP)肝损伤中的作用。方法36只SD大鼠随机分为AP组、假手术组(SO组),通过胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠溶液制作大鼠AP模型。术后3、6、12 h胰腺组织光镜检查... 详细信息

目的观察核因子(NF)-κB、细胞间黏附分子(ICAM)-1和炎症细胞因子在急性胰腺炎(AP)肝损伤中的作用。方法36只SD大鼠随机分为AP组、假手术组(SO组),通过胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠溶液制作大鼠AP模型。术后3、6、12 h胰腺组织光镜检查;肝组织光镜、电镜观察;检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT);放射免疫法(RIA)测定血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6;酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-10;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测肝组织TNF-αmRNA、IL-6 mRNA;肝组织Envision法免疫组织化学测定NF-κB、ICAM-1。结果病理学证实建立AP组,出现肝损伤的病理形态变化;与SO组比较,AP组的血清ALT以及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10水平显著增高(P<0.05),其中血TNF-α水平在3 h升高、6 h达高水平,血IL-6在AP 3 h明显升高,下降缓慢。AP 6、12 h组肝NF-κB活化,AP各组间肝NF-κB活性表达差异均有统计学意义(x^2=15.048,P<0.05),ICAM-1无表达。AP 3～12 h内,AP组肝TNF-αmRNA在3 h明显升高、6 h高表达;AP组的肝IL-6 mRNA则在3 h已增加、3 h后缓慢下降,均显著高于各自时段的SO组(P<0.05)。结论AP发生后,肝脏NF-κB活化,可能介导肝TNF-αmRNA、IL-6 mRNA的表达来参与肝损伤,ICAM-1对AP早期肝损伤元明显作用。

关键词：急性胰腺炎肝损伤核因子-κB 细胞因子

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两种石龙子精子超微结构的比较

动物学报 2006年第3期52卷 591-602页

作者：张永普方周溪计翔温州师范学院生命与环境科学学院浙江温州325027 温州医学院生命科学学院浙江温州325035 南京师范大学生命科学学院南京210097

利用透射电镜研究多线南蜥和印度蜓蜥附睾精子的超微结构。两种卵胎生石龙子的精子具有一些有鳞类精子的共同特征,即具有顶体囊、顶体下锥、单个核前穿孔器和核喙,无核内管,纤维鞘伸入中段,与双联微管3和8相邻的外周致密纤维具双份纤维... 详细信息

利用透射电镜研究多线南蜥和印度蜓蜥附睾精子的超微结构。两种卵胎生石龙子的精子具有一些有鳞类精子的共同特征,即具有顶体囊、顶体下锥、单个核前穿孔器和核喙,无核内管,纤维鞘伸入中段,与双联微管3和8相邻的外周致密纤维具双份纤维结构。多线南蜥和印度蜓蜥精子超微结构的种间差异主要表现在:多线南蜥精子核前方的顶体下锥电子密度较小,顶体囊具单侧嵴,横切面上可见非连续的致密体环或11个线粒体;印度蜓蜥无单侧嵴,横切面上可见连续的致密体环或12个线粒体。迄今未发现石龙子科精子的独征,但该科不同类群的顶体囊、顶体下腔、核前方的顶体下锥电子致密程度、核肩、纵切面线粒体与致密体的排列方式、横切面致密体环形状和线粒体等精子超微结构特征有一定程度的差异。这些差异可为研究石龙子科系统发生提供辅助信息。

关键词：多线南蜥印度蜓蜥石龙子科精子超微结构

显微外科技术在大鼠急性胰腺炎肝损伤模型建立中的应用

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中华显微外科杂志 2007年第6期30卷 444-446页

作者：万涛贺亚东滕龙方周溪朱冠保浙江省温州市第二人民医院普外科 325000 温州医学院

目的建立大鼠的急性胰腺炎(AP)肝损伤模型。方法36只SD大鼠随机分为AP组、假手术组(SO组),使用手术显微镜、显微器械,通过胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠溶液诱导大鼠AP,术后3、6、12 h胰腺组织光镜俭查;放射免疫法(RIA)测定血清肿瘤坏... 详细信息

目的建立大鼠的急性胰腺炎(AP)肝损伤模型。方法36只SD大鼠随机分为AP组、假手术组(SO组),使用手术显微镜、显微器械,通过胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠溶液诱导大鼠AP,术后3、6、12 h胰腺组织光镜俭查;放射免疫法(RIA)测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-Iβ)、IL-6;酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-10;检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT);肝组织光镜、电镜观察。结果病理学证实建立AP动物模型出现肝损伤的病理形态变化;与SO组相比,AP组的血清ALT升高以及TNF-α、IL-6、IL-1B、IL-10水平增高,均显著高于各自时段的SO组(P<0.05)。结论胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠溶液可以制作大鼠AP肝损伤模型,异氟烷吸入诱导配合腹腔内麻醉是保证手术顺利进行的前提,熟练、精细的显微手术技术是成功建立模型的关键。

关键词：急性胰腺炎肝损伤动物模型显微外科技术

左旋硝基精氨酸对肺缺血预处理的抗缺血/再灌注损伤作用的影响

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中国应用生理学杂志 2005年第3期21卷 358-360页

作者：吴成云徐正衸戴元荣王万铁方周溪温州医学院第二附属医院呼吸内科浙江温州325027 温州医学院病理生理教研室浙江温州325053

目的:观察一氧化氮合酶(NOS)阻滞剂左旋硝基精氨酸(L-NNA)对肺缺血预处理的影响,探讨NOS在肺缺血预处理效应中的作用。方法:40只日本大耳兔随机分成假手术(S)组,缺血/再灌注组(I/R组),缺血预处理组(IPC组)和左旋硝基精氨酸组(LNNA组),... 详细信息

目的:观察一氧化氮合酶(NOS)阻滞剂左旋硝基精氨酸(L-NNA)对肺缺血预处理的影响,探讨NOS在肺缺血预处理效应中的作用。方法:40只日本大耳兔随机分成假手术(S)组,缺血/再灌注组(I/R组),缺血预处理组(IPC组)和左旋硝基精氨酸组(LNNA组),观察各组血浆丙二醛(MDA)含量、超氧歧化酶(SOD)活力,肺组织湿干重比(W/D),肺损伤定量评价指标(IQA),肺组织NOS活力以及肺组织超微结构变化。结果:IPC组与I/R组比较,MDA、W/D、IQA下降(P<0.05或P<0.01),SOD活力上升(P<0.05),总NOS(TNOS)、原生型NOS(cNOS)活性明显增高(P<0.05),电镜下肺组织损伤较轻;而预先用L-NNA(LNNA组)后使上述改变发生逆转。结论:左旋硝基精氨酸可以拮抗肺缺血预处理的抗缺血再灌注损伤作用;NOS可能是介导肺IPC效应的重要酶蛋白。

关键词：左旋硝基精氨酸肺缺血预处理一氧化氮合酶

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慢性肝病并发创伤弧菌败血症12例临床研究

中华消化杂志 2003年第4期23卷 247-248页

作者：应斌宇孙来芳周丽萍林锡芳方周溪浙江温州医学院附属第二医院急诊科ICU 325027 温州医学院附属第一医院急诊科ICU 温州医学院电镜室

1995-2001年我们共收治12例创伤弧菌（VV）原发性败血症病例，均为慢性肝病并发VV败血症患者，病情凶险，病死率极高，县就其病情演变过程、临床特征、组织病理学改变、防治的主要措施分析总结如下。

关键词：慢性肝病并发症创伤弧菌败血症临床症状实验室检查病理检查

克氏综合征睾丸体积大小与性激素的相关性及睾丸组织超微结构的研究

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解剖学报 2005年第6期36卷 665-669页

作者：刘永章方周溪竺海波温州医学院生命科学学院生物系温州医学院电镜室温州医学院附属第二医院泌尿科温州325027

目的探讨克氏综合征睾丸体积大小与性激素的相关性及造成克氏综合征男性不育的发病机理。方法对20例克氏综合征患者和10例正常对照组血清进行性激素测定,同时作睾丸组织活检进行病理切片及电镜超薄切片观察。结果克氏综合征与正常对照... 详细信息

目的探讨克氏综合征睾丸体积大小与性激素的相关性及造成克氏综合征男性不育的发病机理。方法对20例克氏综合征患者和10例正常对照组血清进行性激素测定,同时作睾丸组织活检进行病理切片及电镜超薄切片观察。结果克氏综合征与正常对照组睾丸体积、生精小管直径和管壁厚度及血清FSH、LH、T之间均有极显著的差异(P<0.001),患者睾丸体积大小与FSH和LH值呈负相关性,与T值呈正相关性;睾丸组织超微结构观察结果表明生精小管界膜有不同程度的显著异常变化,主要表现为界膜增厚及纤维化增生,基膜增厚及纤维化增生,肌样细胞的空泡状变性或去分化增生。支持细胞病理变化呈现多样性特征,胞质内有大量内质网呈空泡状变性,部分线粒体扩张。间质内血管壁明显增厚及血管内皮细胞肿胀,基膜及血管腔内大量胶原纤维增生。结论推导出患者睾丸体积大小与FSH、LH、T的多重相关回归方程;同时认为克氏综合征睾丸组织结构发生严重的纤维化增生,促使其生精细胞形成过程发生早期的、程度严重的障碍和病理学变化,这是造成其男性不育的主要原因。

关键词：克氏综合征 47XXY综合征超微结构睾丸