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补肾活血方促进骨髓间充质干细胞的成骨及其防治大鼠骨质疏松症机制研究

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中华中医药学刊 2024年第9期42卷 144-150,I0007页

作者：许旻鸣楼红侃高麟超金甬方剑利宁波市中医院浙江宁波315000

目的研究表明微核糖核酸(microRNA,MiRNA)和Kruppel样因子10(Kruppel-like factor10, KLF10)调控骨质疏松症的进程。研究旨在探讨miR-26b/KLF10信号调控骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs)分化的机制。方法流失鉴定分离的大鼠BMSCs,不同剂量的补肾活血方处理BMSCs,检测其^([1-2])增殖能力,碱性磷酸酶活性和茜素红染色检测BMSCs的成骨分化潜能。qPCR检测不同剂量的补肾活血方处理BMSCs后,miR-26b和KLF10的表达水平。mirtarBase数据库检测KLF10 mRNA的3’非翻译区(untranslated regions, 3'UTR)上是否有miR-26b的结合位点,双荧光素酶报告实验检测miR-26b对KLF10启动子活性的影响。qPCR检测miR-26b/KLF10信号对BMSCs增殖和成骨分化标志物的表达的影响。Western blot检查Wnt/β-catenin信号是否被激活。结果流式分析显示分离的原代细胞大部分是BMSCs。补肾活血方显著促进骨髓间充质干细胞的增殖,补肾活血方显著提高了BMSCs中碱性磷酸酶的水平和成骨分化的潜能。补肾活血方促进BMSCs中miR-26b和KLF10的表达。在KLF10 mRNA的3’UTR上有miR-26b的结合位点。在BMSCs中,miR-26b抑制KLF10的3’UTR荧光素酶活性。此外,miR-26b也抑制了KLF10的表达水平。CCK8(Cell Counting Kit-8)显示KLF10促进BMSCs增殖,qPCR显示miR-26b显著抑制成骨分化标志物的表达。而KLF10能够逆转miR-26b的抑制效应,提示miR-26b/KLF10信号介导了补肾活血方在BMSCs增殖和成骨分化中的效应,且补肾活血方通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进成骨。结论补肾活血方促进BMSCs的成骨由miR-26b/KLF10/Wnt/β-Catenin信号轴调控。

关键词：补肾活血方骨质疏松症骨髓间充质干细胞增殖成骨

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补肾活血颗粒对去势大鼠血生化的影响

中华中医药杂志 2012年第5期27卷 1435-1438页

作者：刘慧许兵方剑利许应星吴岩肖鲁伟童培建浙江中医药大学第一临床医学院杭州310053 浙江省中医骨伤研究所杭州310053 浙江省中医院骨伤科杭州310053

目的:观察补肾活血颗粒对去势大鼠血生化一般指标钙(Ca)、磷(P)、雌激素(E2),骨形成指标碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP),骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP5b)、I型胶原C端肽(CTX)、羟赖氨酸糖苷(GHYL)的影响。方法:取24只雌性大鼠切除... 详细信息

目的:观察补肾活血颗粒对去势大鼠血生化一般指标钙(Ca)、磷(P)、雌激素(E2),骨形成指标碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP),骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP5b)、I型胶原C端肽(CTX)、羟赖氨酸糖苷(GHYL)的影响。方法:取24只雌性大鼠切除卵巢造成骨质疏松模型,随机分成补佳乐组、模型对照组、假手术组、补肾活血组4组,各组对应给予补佳乐、0.9%氯化钠溶液、0.9%氯化钠溶液、补肾活血方灌胃3个月,采用全自动生化检测Ca、P、ALP,用ELISA方法检测E2、TRAP5b、BGP、CTX、GHYL。结果:应用补肾活血颗粒后大鼠血生化一般指标Ca、P下降,E2升高,成骨细胞分泌的骨形成指标ALP、BGP升高,胶原蛋白的分解产物CTX、GHYL有所升高,而破骨细胞分泌的TRAP5b并没有明显改变。结论:从血生化可以推测补肾活血颗粒对增强成骨细胞分化增值及活性功能作用明显,而对破骨细胞作用并不显著。

关键词：骨质疏松血生化补肾活血

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骨痹相关疾病“从肾论治”的实验研究进展

中华中医药学刊 2011年第11期29卷 2448-2451页

作者：方剑利许兵童培建浙江中医药大学浙江杭州310053 浙江省中医院浙江杭州310053

骨痹的临床范畴包括退行性骨关节病、骨质疏松、骨坏死等。早在内经之中就有关于骨痹的记载。在中医药传统理论"肾主骨"理论指导下,多数医家对骨痹相关疾病主张"从肾论治",并取得了不错的临床效果。随着科学技术的发展进步,许多学者结... 详细信息

骨痹的临床范畴包括退行性骨关节病、骨质疏松、骨坏死等。早在内经之中就有关于骨痹的记载。在中医药传统理论"肾主骨"理论指导下,多数医家对骨痹相关疾病主张"从肾论治",并取得了不错的临床效果。随着科学技术的发展进步,许多学者结合现代细胞分子生物学技术通过开展对补肾药物治疗骨痹相关疾病的实验研究,来阐明骨痹相关疾病"从肾论治"理论的现代含义,并取得了不错的进展,就近年来的研究现状做一综述。

关键词：骨痹肾主骨从肾论治

基于PI3K/Akt信号通路探讨松脂醇二葡萄糖苷对兔膝骨性关节炎软骨细胞保护机制的研究

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中华中医药学刊 2023年第1期41卷 190-193,I0038-I0041页

作者：楼红侃许旻鸣方剑利高麟超宁波市中医院浙江宁波315000

目的探讨松脂醇二葡萄糖苷对兔膝骨性关节炎软骨细胞保护机制。方法制作兔OA模型,建模4周后,不同剂量的PDG干预5周;1周后取膝关节组织进行组织学分析(番红染色)并行Mankin评分;QRT-PCR/Western blot检测各组软骨组织中Aggrecan/collagen... 详细信息

目的探讨松脂醇二葡萄糖苷对兔膝骨性关节炎软骨细胞保护机制。方法制作兔OA模型,建模4周后,不同剂量的PDG干预5周;1周后取膝关节组织进行组织学分析(番红染色)并行Mankin评分;QRT-PCR/Western blot检测各组软骨组织中Aggrecan/collagen type II和MMP-1/MMP-3/MMP-13/TIMP-1的表达;ELISA/qRT-PCR检测各组兔血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表达;TUNEL检测各组兔子软骨组织中软骨细胞凋亡情况;Western blot/免疫组化/qRT-PCR检测软骨组织中PI3K/Akt通路(PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt),以及Bcl-2,Bax等相关因子的表达。结果造模后3周后,模型兔出现关节强直样改变。PDG局部注射给药可缓解关节肿胀,缓解炎症反应。PDG给药可有效降低模型兔的炎症指标。PDG可能对膝骨性关节炎模型的软骨下骨形成有促进作用。PDG高剂量组的软骨破坏程度相对较轻,Akt信号通路在该模型中被激活。结论松脂醇二葡萄糖苷对兔膝骨性关节炎软骨细胞具有保护作用,PI3K/Akt信号介导了该保护机制。

关键词：松脂醇二葡萄糖苷 PI3K/Akt信号骨性关节炎炎症

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补肾通络法治疗膝关节骨性关节炎肾虚血瘀证的临床疗效及对骨代谢指标的影响

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中华中医药学刊 2022年第7期40卷 82-86页

作者：方剑利楼红侃金甬宋舟锋宁波市中医院浙江宁波315012 浙江省中医院浙江杭州310003

目的观察补肾通络法治疗膝关节骨性关节炎肾虚血瘀证的临床疗效及对骨代谢指标的影响。方法选取2020年1月—2021年5月就诊于医院符合纳入标准的膝关节骨性关节炎患者120例,随机均分为对照组和治疗组,对照组予以西药洛索洛芬钠片治疗,治... 详细信息

目的观察补肾通络法治疗膝关节骨性关节炎肾虚血瘀证的临床疗效及对骨代谢指标的影响。方法选取2020年1月—2021年5月就诊于医院符合纳入标准的膝关节骨性关节炎患者120例,随机均分为对照组和治疗组,对照组予以西药洛索洛芬钠片治疗,治疗组在对照组基础上联合补肾通络法治疗,共治疗4周。观察并比较两组患者治疗前和治疗2、4周后血清炎症因子和骨代谢指标水平变化,并对两组患者的临床疗效和不良反应进行比较。结果对照组和治疗组的总有效率分别为78.33%(47/60)、91.67%(55/60),与对照组比较,治疗组的总有效率显著上调,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗2周后,治疗组患者的膝关节VAS评分相较于对照组显著下调,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗4周后,治疗组患者的膝关节VAS和WOMAC评分水平相较于对照组均显著下调,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗2周后,治疗组患者的血清中OPG水平相较于对照组显著上调,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗4周后,治疗组患者的血清中OPG和BGP水平相较于对照组显著上调,COMP水平相较于对照组显著下调,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗2周后,治疗组病人的血清中TNF-α、MMP-3以及IL-3水平相较于对照组有下调趋势,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。治疗4周后,治疗组血清中上述指标水平相较于对照组均显著下调,差异具有统计学意义(P<0.01)。两组患者治疗过程中生命体征平稳,且均未发生药物相关不良反应及过敏反应。结论补肾通络法联合洛索洛芬钠片治疗肾虚血瘀型膝关节骨性关节炎能够显著提高临床疗效,改善患者膝关节疼痛和功能,其机制可能与降低血清中炎症因子和调节骨代谢有关,且无不良反应增加,临床适宜推广。

关键词：补肾通络法膝关节骨性关节炎肾虚血瘀证临床疗效骨代谢

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经口咽入路钢板内固定治疗不稳定性寰椎骨折

中国骨伤 2013年第1期26卷 81-84页

作者：孙韶华方剑利马维虎刘观燚宁波市第六医院脊柱外科浙江宁波310053

目的:分析应用经口咽入路钢板内固定治疗不稳定性寰椎骨折的临床疗效及安全性。方法:2007年7月至2011年6月,应用经口咽入路钢板内固定治疗不稳定性寰椎骨折8例,男6例,女2例;年龄23～48岁,平均39.5岁;高处坠落伤5例,交通伤3例。双侧寰椎... 详细信息

目的:分析应用经口咽入路钢板内固定治疗不稳定性寰椎骨折的临床疗效及安全性。方法:2007年7月至2011年6月,应用经口咽入路钢板内固定治疗不稳定性寰椎骨折8例,男6例,女2例;年龄23～48岁,平均39.5岁;高处坠落伤5例,交通伤3例。双侧寰椎前弓骨折(前1/2 Jefferson骨折,Landells type Ⅰ)3例,单侧寰椎前后弓双骨折(半环Jefferson骨折,Landells typeⅡ)3例,双侧寰椎前后弓双骨折伴单侧侧块骨折(Landells typeⅢ)2例。结果:所有患者获得随访,时间6～24个月,平均13个月。患者的临床症状均得到不同程度的改善。平均手术时间为98min(80～140min);平均出血量为200ml(100～300ml);平均透视时间55s;术中术后均未发生神经、椎动脉损伤和其他手术相关并发症。复查X线片及CT,未发现患者上颈椎失稳或复位丢失,螺钉位置良好,无松动、断钉。结论:经口咽入路采用寰椎侧块螺钉固定钢板重建寰椎前环是治疗不稳定性寰椎骨折的一种可靠及安全的方法。它既保持了寰枢关节的旋转运动功能,同时又恢复了寰枕关节和寰枢关节的协调运动。

关键词：寰椎骨折骨折固定术,内外科手术

胸腰椎骨折后路内固定术后并发椎体真空征的临床分析

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中国骨伤 2011年第7期24卷 557-559页

作者：张晓冬方剑利庄汝杰谢海风马镇川浙江中医药大学浙江杭州310053 浙江省中医院浙江杭州310006

目的:分析胸腰椎骨折术后出现椎体内真空征、椎体塌陷以及假关节形成等术后并发症的原因,探讨TLICS分型对胸腰椎骨折术式选择的重要性。方法:对2006年1月至2010年12月手术治疗的15例胸腰椎骨折患者术后出现并发症的病例进行回顾性分析... 详细信息

目的:分析胸腰椎骨折术后出现椎体内真空征、椎体塌陷以及假关节形成等术后并发症的原因,探讨TLICS分型对胸腰椎骨折术式选择的重要性。方法:对2006年1月至2010年12月手术治疗的15例胸腰椎骨折患者术后出现并发症的病例进行回顾性分析。其中男9例,女6例;年龄18～75岁,平均54.6岁。骨折部位:T127例,L15例,L23例。骨折类型:压缩性骨折12例,爆裂性骨折3例。按TLICS法分型:Ⅰ型12例,Ⅲ型3例。根据患者术后的临床表现以及影像学表现,并结合国内外文献的研究报道分析胸腰椎骨折单纯后路内固定术后出现椎体并发症的原因。结果:15例均获随访,时间10～20个月,平均15个月,发现内固定失败,椎体高度再丢失9例(椎体塌陷4例,其中3例出现螺钉松动),出现空壳征6例。结论:胸腰椎骨折术前应仔细全面的评估患者情况,严格掌握其术式的适应证,依照正确的分型选择正确的手术入路,尤其重视脊柱前中柱稳定性的重建,避免椎体真空征的出现及内固定的失败。

关键词：脊柱骨折外科手术并发症回顾性研究

智能背景下机器学习在柔性应变传感器中的应用研究进展

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纺织学报 2024年第5期45卷 228-238页

作者：卢妍洪岩方剑苏州大学纺织与服装工程学院江苏苏州215021 苏州大学现代丝绸国家工程实验室江苏苏州215123

为深入研究智能纺织品中柔性应变传感器的发展,探讨了其在检测人体运动轨迹、力学/声学特征以及各类生理指标信息方面的应用,着重阐述了机器学习在提升整个柔性应变传感系统性能方面的作用。通过系统综述最新研究进展,旨在深化对机器学... 详细信息

为深入研究智能纺织品中柔性应变传感器的发展,探讨了其在检测人体运动轨迹、力学/声学特征以及各类生理指标信息方面的应用,着重阐述了机器学习在提升整个柔性应变传感系统性能方面的作用。通过系统综述最新研究进展,旨在深化对机器学习在基于智能纺织品的柔性应变传感器领域应用的理解。介绍了几种常见柔性应变传感器的原理结构和相关研究,并概述了与柔性应变传感器阵列相结合的先进机器学习算法;系统分析了基于智能纺织品的柔性应变传感器结合机器学习在不同领域中的最新研究,强调了在柔性应变传感器中使用机器学习的益处;最后针对基于智能纺织品的柔性应变传感器结合机器学习的应用所面临的挑战以及如何提升整个传感系统的实用性进行展望,以期能够推动机器学习在柔性智能可穿戴领域的广泛应用,从而进一步推动智能材料与智能纺织品的发展。

关键词：柔性应变传感器机器学习信号处理智能纺织品智能材料

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阿仑膦酸钠防治假体周围骨溶解的实验研究

中华老年医学杂志 2013年第10期32卷 1117-1119页

作者：吴连国杜文喜史晓林方剑利储小兵刘康叶健童培建浙江中医药大学附属第二医院骨科杭州310005 浙江中医药大学浙江中医药大学附属第一医院骨科宁波市中医院骨科

老年人髋、膝骨关节病和股骨颈骨折发病率日渐增高，尽管人工关节置换术治疗晚期骨关节病和股骨颈骨折已十分成熟，但其并发症之一假体周围骨溶解是目前骨科临床非常棘手的问题。大多数学者认为假体周围骨溶解主要生物学原因为磨损颗粒... 详细信息

老年人髋、膝骨关节病和股骨颈骨折发病率日渐增高，尽管人工关节置换术治疗晚期骨关节病和股骨颈骨折已十分成熟，但其并发症之一假体周围骨溶解是目前骨科临床非常棘手的问题。大多数学者认为假体周围骨溶解主要生物学原因为磨损颗粒引发的由巨噬细胞介导的破骨细胞骨吸收，而阿仑膦酸钠能抑制破骨细胞的分化，那么阿仑膦酸钠能否降低磨损颗粒诱导的假体周围破骨细胞性骨溶解、预防人工关节无菌性松动尚有待于研究。我们于20lO年3月至2011年4月采用聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解大鼠模型，探讨阿仑膦酸钠防治假体周围骨溶解的作用机制和效应环节。

关键词：关节成形术置换髋假体植入