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广东省水稻孢囊线虫病调查与鉴定

中国水稻科学 2024年第4期38卷 456-462页

作者：刘福祥甄浩洋彭焕郑刘春彭德良文艳华华南农业大学植物保护学院广东510642 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193

【目的】明确广东省水稻上孢囊线虫发生种类、分布。【方法】从广东省的14个市采集了231份水稻根系和根际土壤样品,从水稻根系及根际土壤样品中分离孢囊线虫,采用形态学和分子生物学方法鉴定孢囊线虫种类。【结果】在广东清远、肇庆、... 详细信息

【目的】明确广东省水稻上孢囊线虫发生种类、分布。【方法】从广东省的14个市采集了231份水稻根系和根际土壤样品,从水稻根系及根际土壤样品中分离孢囊线虫,采用形态学和分子生物学方法鉴定孢囊线虫种类。【结果】在广东清远、肇庆、江门等地水稻根系及根际土样中发现孢囊线虫,孢囊检出率分别为40%、23.7%、10%。形态学研究表明,孢囊柠檬形或近圆形,主要为柠檬形,阴门锥双半膜孔,膜孔近圆形,阴门桥窄,下桥中等大小;二龄幼虫唇区半球形,略缢缩;尾圆锥形,尾端尖,透明尾长占尾长的53%~66%。分子生物学研究表明,该线虫28S rDNA D2-D3区序列与NCBI数据库中旱稻孢囊线虫相似度99.73%~100%,rDNA-ITS区序列与NCBI数据库中旱稻孢囊线虫相似度96.72%~99.91%。系统进化树分析表明,该线虫与旱稻孢囊线虫处于同一分支,置信度为100%。使用旱稻孢囊线虫特异性引物He-F/He-R扩增清远、肇庆、江门采集的孢囊线虫rDNA-ITS区均得到281 bp的单一条带,与已报道结果一致。【结论】清远、肇庆、江门采集到的孢囊线虫均为旱稻孢囊线虫。这是首次在广东省发现旱稻孢囊线虫。

关键词：旱稻孢囊线虫水稻发生分布种类鉴定

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应急液压油箱失效分析

机械科学与技术 2017年第S1期36卷 79-83页

作者：马飞亚文艳华哈尔滨飞机工业集团有限责任公司哈尔滨150066

某应急液压油箱于地面检查中发现油箱漏油,本报告对油箱进行了外观观察,对裂纹断口进行了宏微观观察,对油箱材料的组织和硬度进行了检测,确定了油箱的漏油原因。通过分析,应急液压油箱漏油是由在油箱后端盖与筒壁的焊缝出现由油箱内部... 详细信息

某应急液压油箱于地面检查中发现油箱漏油,本报告对油箱进行了外观观察,对裂纹断口进行了宏微观观察,对油箱材料的组织和硬度进行了检测,确定了油箱的漏油原因。通过分析,应急液压油箱漏油是由在油箱后端盖与筒壁的焊缝出现由油箱内部向外部扩展的贯穿性裂纹引起,油箱开裂性质为疲劳开裂,油箱后端盖处焊缝存在未熔合缺陷导致焊缝有效承载面积过小,是导致油箱疲劳开裂的主要原因。

关键词：应急液压油箱漏油疲劳开裂焊缝未熔合缺陷

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三尖杉对花生根结线虫发育的影响

植物病理学报 2003年第6期33卷 509-512页

作者：文艳华冯志新华南农业大学植物线虫研究室广州510642

采用室内培养和盆栽试验的方法,研究了三尖杉(Cephalotaxus fortunei)枝叶提取物及三尖杉枝叶粉末,对花生根结线虫(Meloidogyne arenaria)发育的影响。结果表明,三尖杉枝叶提取物对花生根结线虫胚胎发育及二龄幼虫孵化有明显抑制作用。... 详细信息

采用室内培养和盆栽试验的方法,研究了三尖杉(Cephalotaxus fortunei)枝叶提取物及三尖杉枝叶粉末,对花生根结线虫(Meloidogyne arenaria)发育的影响。结果表明,三尖杉枝叶提取物对花生根结线虫胚胎发育及二龄幼虫孵化有明显抑制作用。三尖杉枝叶粉末处理对花生根结线虫胚后发育的影响,主要表现在推迟二龄幼虫及成虫的发育,而对三龄及四龄幼虫的发育无明显影响。三尖杉枝叶粉末处理可显著降低雌虫的产卵量。

关键词：三尖杉花生根结线虫胚胎发育胚后发育

SOX9基因真核表达载体转染诱导BMSCs分化为类髓核细胞

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中国修复重建外科杂志 2010年第7期24卷 811-816页

作者：张琦钱济先文艳华裘秀春马保安范清宇第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所西安710038

目的椎间盘退行性变的生物学治疗方法是骨科学研究热点,寻找一种有效诱导BMSCs向椎间盘细胞分化的方法成为应用细胞移植治疗椎间盘退变的必要前提。探讨重组质粒pcDNA3.1IE-SOX9 Flag体外转染诱导兔BMSCs向类髓核细胞分化的影响。方法... 详细信息

目的椎间盘退行性变的生物学治疗方法是骨科学研究热点,寻找一种有效诱导BMSCs向椎间盘细胞分化的方法成为应用细胞移植治疗椎间盘退变的必要前提。探讨重组质粒pcDNA3.1IE-SOX9 Flag体外转染诱导兔BMSCs向类髓核细胞分化的影响。方法构建真核表达载体pcDNA3.1IE-SOX9 Flag。取1月龄新西兰大白兔骨髓分离培养BMSCs,体外诱导BMSCs向成骨细胞分化并鉴定;流式细胞仪检测细胞表面标记。将第3代BMSCs随机分为转染组、阴性对照组和空白对照组。转染组转染pcDNA3.1IE-SOX9Flag重组质粒,阴性对照组转染质粒pcDNA3.1,空白对照组不转染任何质粒。将构建好的重组质粒pcDNA3.1IE-SOX9Flag转染第3代BMSCs,72h后加入浓度为500mg/L的G418筛选7d后,改为浓度200mg/L的G418维持筛选压力并培养转染细胞。取各组BMSCs采用RT-PCR检测SOX9和Ⅱ型胶原基因(Col2al)的mRNA表达,Western blot检测SOX9蛋白的表达,免疫组织化学染色观察Ⅱ型胶原的表达。结果 BMSCs成骨诱导7d后ALP染色呈阳性;CD44表达阳性,CD34和CD45表达阴性。成功构建了真核表达载体pcDNA3.1IE-SOX9Flag。将重组质粒转染兔BMSCs,72h后转染效率为34.32%±1.75%;转染2周后BMSCs形态改变,呈多角形或椭圆形,细胞体积增大,增殖速度减缓,与椎间盘髓核细胞生长特点十分接近。RT-PCR鉴定发现转染组细胞SOX9 mRNA和Col2al mRNA表达阳性,对照组均为阴性。Westernblot检测发现转染组SOX9基因蛋白表达阳性,对照组未见表达。转染组BMSCs的Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈阳性。结论 SOX9基因真核表达载体成功转染兔BMSCs,被转染的干细胞向类髓核细胞分化,为进一步研究应用BMSCs移植治疗椎间盘退行性变奠定了理论基础。

关键词： BMSCs SOX9基因转染诱导分化髓核细胞椎间盘退行性变

人脊索瘤细胞系CM3-19的建立及其生物学特性的观察

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中华肿瘤杂志 2003年第3期25卷 234-236页

作者：张殿忠马保安范清宇常恒文艳华第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所西安710038

目的　建立人脊索瘤细胞系 ,为脊索瘤研究提供实验模型。方法　取经病理证实的新鲜脊索瘤手术标本 ,进行体外原代组织块培养。对存活细胞进行形态学观察、组织化学染色、细胞周期检查、染色体分析、电镜观察、异种移植和体外侵袭实验等... 详细信息

目的　建立人脊索瘤细胞系 ,为脊索瘤研究提供实验模型。方法　取经病理证实的新鲜脊索瘤手术标本 ,进行体外原代组织块培养。对存活细胞进行形态学观察、组织化学染色、细胞周期检查、染色体分析、电镜观察、异种移植和体外侵袭实验等。结果　建成细胞系CM 319,经近两年的体外培养 ,已连续传代百余次。其形态学表现、组织化学染色、电镜观察和异种移植等均符合脊索瘤细胞特征。细胞倍增时间为 33h。细胞周期测定显示 :G1 期为 5 5 .6 % ,G2 期为 2 1.9% ,S期为2 2 .5 % ,G2 G1 为 1.90。染色体具有亚三倍体核型。异种移植成瘤率 10 0 % ,具有侵袭性。结论　CM 319是一株人脊索瘤细胞系 ,可用于对脊索瘤的研究。

关键词：脊索瘤 CM-3l9细胞系生物学特性细胞形态学细胞培养

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三尖杉枝叶粉末防治花生根结线虫病

植物保护学报 2004年第2期31卷 161-165页

作者：文艳华冯志新陈立徐汉虹华南农业大学昆虫毒理研究室华南农业大学昆虫毒理研究室广州 510642 华南农业大学植物线虫研究室

采用盆栽及大田小区试验,研究了三尖杉 Cephalotaxus fortunei 枝叶干粉末对花生根结线虫病的防治效果。盆栽试验结果表明,每盆(2kg 土)施用三尖杉枝叶干粉末10、15及20 g 三种处理,与对照组相比,初侵染相应推迟4、6、10天,并能减少侵染... 详细信息

采用盆栽及大田小区试验,研究了三尖杉 Cephalotaxus fortunei 枝叶干粉末对花生根结线虫病的防治效果。盆栽试验结果表明,每盆(2kg 土)施用三尖杉枝叶干粉末10、15及20 g 三种处理,与对照组相比,初侵染相应推迟4、6、10天,并能减少侵染量,降低根结增长率,显著减轻花生根结线虫病病情。大田小区试验结果与盆栽试验结果相似,每小区(5m~2)沟施三尖杉枝叶干粉末120、80、50 g,处理后34及53天的2次平均防治效果分别为89%、82%及50%,施药对照10%益舒宝颗粒剂25g 处理(相当于45kg/hm~2)为74%。综合使用剂量及花生生长情况,建议沟施150kg/hm~2三尖杉枝叶干粉为宜。

关键词：三尖杉花生根结线虫防治

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人脊索瘤细胞的体外侵袭性

第四军医大学学报 2001年第15期22卷 1392-1394页

作者：常恒马保安张殿忠文艳华第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所陕西西安710038

目的　观察人脊索瘤细胞在体外侵袭性的大小 ,探讨与肿瘤侵袭性密切相关的尿激酶型纤溶酶原激活物 (uroki nase typeplasminogenactivator,uPA)在侵袭中的作用 .方法　利用体外球体侵袭模型观察人脊索瘤细胞的侵袭特性和侵袭过程 ;应用... 详细信息

目的　观察人脊索瘤细胞在体外侵袭性的大小 ,探讨与肿瘤侵袭性密切相关的尿激酶型纤溶酶原激活物 (uroki nase typeplasminogenactivator,uPA)在侵袭中的作用 .方法　利用体外球体侵袭模型观察人脊索瘤细胞的侵袭特性和侵袭过程 ;应用免疫组化SABC法检测脊索瘤细胞中uPA的表达情况 ,并且观察用uPA抗体后肿瘤细胞侵袭性的变化 .结果　肿瘤细胞球体在接触预培养的鸡胚心肌块 (precultureheartfragment,PHF)后 3d即包绕PHF ,并有部分侵袭 ,接触培养 5d ,每个PHF即有一半左右被侵袭 ,10d左右 ,PHF即完全被侵袭 .免疫组化染色 ,阳性细胞占 6 3% ,为uPA高表达 .在培养液中加入uPA抗体后 ,肿瘤细胞侵袭性减低 .结论　人脊索瘤细胞具有一定的侵袭性 ;该细胞uPA高表达 ;

关键词：脊索瘤肿瘤侵袭尿激酶型纤溶酶原激活物免疫组织化学

完整瘤组织块原位移植法建立人成骨肉瘤转移模型

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癌症 2000年第10期19卷 843-846页

作者：杨宁范清宇殷剑宁张殿忠文艳华第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所陕西西安710038

目的：建立人成骨肉瘤裸鼠转移模型。方法：采用完整瘤组织块原位移植法获得裸鼠自发性肺转移模型，并对转移模型进行影像学检查、组织学检查及 PCR同源性分析。结果：建立裸鼠体内人成骨肉瘤转移模型，其自发性肺转移率达到 100％，... 详细信息

目的：建立人成骨肉瘤裸鼠转移模型。方法：采用完整瘤组织块原位移植法获得裸鼠自发性肺转移模型，并对转移模型进行影像学检查、组织学检查及 PCR同源性分析。结果：建立裸鼠体内人成骨肉瘤转移模型，其自发性肺转移率达到 100％，肝转移率达 30％。影像学检查及组织学检查均与人成骨肉瘤临床情况相似， PCR同源性分析证实裸鼠肺部转移灶为人成骨肉瘤细胞。结论：裸鼠体内人成骨肉瘤自发性转移模型模拟了临床发病过程，对人成骨肉瘤的治疗、局部肿瘤的生长及转移机制的研究提供了更为理想的模型。

关键词：骨肉瘤裸鼠原位移植肿瘤转移动物模型

Capacity of bone induction of compound material of decalcified bone matrix combined with rhBMP-2 and impregnated with bone cement

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中国临床康复 2003年第6期7卷 1010-1011页

作者：周勇董玉霞范清宇文艳华 DepartmentofOrthopaedics TangduHospitalFourthMilitaryMedicalUniversity

AIM:To analyze bone inductive capacity of the compound material of decalcified bone matrix combined with rhBMP 2 and impregnated with bone ***:To assess the experimental study, histological and Masson’s methods were ***:The effects of compound material on the induction of bone formation were investigated in NIH mouse *** was observed that in the with rhBMP 2 group, mesenchymal cells gathered in the implanted material at the 7th day postoperation,chondrogenesis were found at 14 to 21 days after implantation,new bone formation were observed at about 21 to 28 days after surgery and the DBM particles were absorbed by the new generated tissues ***:The compound material of DBM combined with rhBMP 2 and impregnated with bone cement could induce the proliferation and migration of mesenchymal tissues that could be differentiated into cartilage and formed new bone *** new bone could absorb DBM particles *** compound material had fair capacity of bone induction.

关键词：异体脱钙骨基质骨粒骨水泥骨形态发生蛋白复合材料诱导活性