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牛诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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畜牧兽医学报 2020年第7期51卷 1728-1736页

作者：师志海王文佳兰亚莉张彬孟红丽王亚州滑留帅徐照学河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州450002 河南牧业经济学院动物医药学院郑州450046 河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室郑州450002

牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值... 详细信息

牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102~2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好,相关系数R2=0.997,扩增效率为98.44%;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL-1;批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好。对2017年9月—2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%(25/221),采样场阳性率为92.86%(13/14)。本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段。

关键词：牛诺如病毒实时荧光定量PCR 犊牛腹泻检测

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奶牛健康养殖技术集成与示范

中国科技成果 2010年第11期11卷 20-21,23页

作者：魏成斌施巧婷楚秋霞冯亚杰徐照学河南省农业科学院畜牧兽医研究所河南郑州450002

健康养殖是针对我国畜牧业的现状和特点设计的一种具有以畜为本、动物福利观念的养殖概念。文章介绍了健康养殖的意义，从遗传育种、动物营养、疾病防治及重大疫病监测、环境工程几方面重点阐述了其关键技术措施，最后分析其经济效益情况。

关键词：奶牛健康养殖技术集成示范

中草药添加剂对热应激奶牛产奶性能和血液生化指标的影响

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中国饲料 2018年第8期 66-69页

作者：冯亚杰王二耀施巧婷辛晓玲乔智慧徐照学河南省农业科学院畜牧兽医研究所河南郑州450002

本文旨在研究复方中草药添加剂对热应激奶牛干物质采食量、泌乳性能和血液生化指标的影响。试验挑选60头体况、产奶量、泌乳日龄和胎次相近的荷斯坦奶牛,采用完全随机试验设计,随机分为4组,每组15头奶牛,每组分别在基础饲粮中添加0、100... 详细信息

本文旨在研究复方中草药添加剂对热应激奶牛干物质采食量、泌乳性能和血液生化指标的影响。试验挑选60头体况、产奶量、泌乳日龄和胎次相近的荷斯坦奶牛,采用完全随机试验设计,随机分为4组,每组15头奶牛,每组分别在基础饲粮中添加0、100、200和300 g/头·d的复方中草药添加剂,预饲期1周,正试期8周。结果表明,200和300 g/头·d添加组奶牛的干物质采食量和产奶量显著高于0和100 g/头·d添加组奶牛(P0.05)。复方中草药添加剂显著提高了热应激奶牛血液甲状腺激素和皮质醇浓度(P<0.05),其中以200 g/头·d添加组浓度最高。复方中草药添加剂显著提高了热应激奶牛血液超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,降低了血液丙二醛含量。综上所述,本试验条件下使用的复方中草药添加剂以200 g/头·d的添加剂量具有最佳效果,可以显著改善热应激奶牛的干物质采食量和泌乳性能。

关键词：中草药添加剂干物质采食量泌乳性能抗氧化能力

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良种肉牛MOET育种技术研究

中国农学通报 2003年第5期19卷 4-6,9页

作者：徐照学贺文杰辛晓玲魏成斌张震河南省农业科学院生物技术研究所郑州450002

通过MOET育种技术 ,在研究期间选育出良种肉牛 80头 ,其中德国黄牛 4 2头 ,皮埃蒙特牛 2 0头 ,比利时蓝白花牛 1

关键词：良种繁育肉牛 MOET育种技术场地设施供体牛

添加外源激素FSH对绵羊卵丘颗粒细胞增殖的影响

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黑龙江畜牧兽医 2020年第2期 38-40,44,147页

作者：滑留帅赵培杰梁浩王璟柏中林徐照学王二耀河南省农业科学院畜牧兽医研究所河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室郑州450002 河南农业大学牧医工程学院郑州450002 泌阳县动物疫病预防控制中心河南泌阳463700

为了分析外源激素促卵泡激素(FSH)对绵羊卵丘颗粒细胞增殖的影响,试验分离并体外培养了绵羊卵丘颗粒细胞,然后使用促卵泡激素受体(FSHR)免疫组织化学法鉴定了分离培养的细胞,进而分析了添加不同浓度FSH对细胞增殖速度的影响。结果表明:... 详细信息

为了分析外源激素促卵泡激素(FSH)对绵羊卵丘颗粒细胞增殖的影响,试验分离并体外培养了绵羊卵丘颗粒细胞,然后使用促卵泡激素受体(FSHR)免疫组织化学法鉴定了分离培养的细胞,进而分析了添加不同浓度FSH对细胞增殖速度的影响。结果表明:将卵丘颗粒细胞从卵丘颗粒细胞-卵母细胞复合体(COCs)上分离24 h之后,能够观察到部分卵丘颗粒细胞开始贴壁,传代之后细胞形态未发生明显变化。FSHR免疫组织化学法鉴定结果证明分离培养的绵羊卵丘颗粒细胞能够特异性地表达FSHR。培养基中添加FSH后,在培养前4 d,高浓度(100 ng/mL)和低浓度(10 ng/mL)的FSH均能促进卵丘颗粒细胞的增殖,但在培养6 d之后,高浓度的FSH对卵丘颗粒细胞的增殖存在抑制作用。说明外源激素FSH在不同浓度下对卵母颗粒细胞的增殖具有不同的影响。

关键词：绵羊卵丘颗粒细胞分离鉴定促卵泡激素(FSH) 增殖

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提高牛胚胎移植效益的操作方案

提高牛胚胎移植效益的操作方案

牛环曲病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

第六届（2011）中国牛业发展大会

作者：魏成斌施巧婷冯亚杰辛晓玲徐照学河南省农业科学院畜牧兽医研究所

提高牛胚胎移植的规模化、商业化运作的经济效益,不仅仅依靠胚胎的生产和移植技术水平的提高,还需制订系列的的操作方案。本文从供体牛的选择与处理、提高胚胎生产效率、提高移植受胎率、降低胚胎生产成本和受体牛成本等方面,分析制订... 详细信息

提高牛胚胎移植的规模化、商业化运作的经济效益,不仅仅依靠胚胎的生产和移植技术水平的提高,还需制订系列的的操作方案。本文从供体牛的选择与处理、提高胚胎生产效率、提高移植受胎率、降低胚胎生产成本和受体牛成本等方面,分析制订提高牛胚胎移植效益的操作方案。

关键词：牛胚胎移植经济效益双胚移植

来源： cnki会议评论

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中国兽医学报 2019年第12期39卷 2305-2309页

作者：师志海徐照学兰亚莉王文佳孟红丽王亚州河南省农业科学院畜牧兽医研究所河南郑州450002 河南牧业经济学院制药工程学院河南郑州450046 河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室河南郑州450002

为建立牛环曲病毒快速检测方法,针对牛环曲病毒的保守区域S基因设计合成1对特异性引物,建立了检测牛环曲病毒的RT-PCR方法,并对其进行了敏感性、特异性和重复性检测。结果显示,仅牛环曲病毒阳性模板扩增得到698bp大小的目的条带,测序结... 详细信息

为建立牛环曲病毒快速检测方法,针对牛环曲病毒的保守区域S基因设计合成1对特异性引物,建立了检测牛环曲病毒的RT-PCR方法,并对其进行了敏感性、特异性和重复性检测。结果显示,仅牛环曲病毒阳性模板扩增得到698bp大小的目的条带,测序结果与GenBank中牛环曲病毒S基因序列(登录号:MG957145.1)的同源性为97%。敏感性试验显示,该方法能检测到的最低核酸含量为1.36×10^4 copies/μL。利用该方法对采集自河南省部分地区的164份临床样品进行检测,结果显示牛环曲病毒的检出率为9.15%(15/164)。结果表明,所建立的牛环曲病毒RTPCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于牛环曲病毒的临床检查和流行病学调查。

关键词：牛环曲病毒反转录-聚合酶链式反应 S基因

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改良的N.F.T乳房炎检验法

中国兽医杂志 1987年第10期 39-41页

作者：王光亚徐照学朱壁科王长泰西北农业大学

奶牛隐性乳房炎是严重危害奶牛业的疾病之一,世界各国均普遍存在。为诊断和防治隐性乳房炎,各国先后研究出了多种检验法。我们在实践中发现,传统的氯化钙凝乳试验(Negretti Field Test)其试剂配方组成不够合理,配制过程复杂,浪费试剂和... 详细信息

奶牛隐性乳房炎是严重危害奶牛业的疾病之一,世界各国均普遍存在。为诊断和防治隐性乳房炎,各国先后研究出了多种检验法。我们在实践中发现,传统的氯化钙凝乳试验(Negretti Field Test)其试剂配方组成不够合理,配制过程复杂,浪费试剂和时间,通过对原配方化学反应过程分析计算,对其组成及配制方法进行了较大的改

关键词：乳区阳性检出率隐性乳房炎 N.F.T 奶牛场乳样假阳性反应符合率检验法玻片法

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牛超数排卵技术的研究

黄牛杂志 1999年第3期25卷 17-18页

作者：徐照学李峰王二耀辛晓玲贺文杰河南省农科院畜牧兽医研究所

用ＦＳＨ＋ＰＧＦ１。超排处理７２头次供体牛，采卵３６１枚（头均６．５１±３．８２），可用胚２３５枚（头均３．２６±３．４７）。黄牛胚胎可用率高于奶牛、肉牛（Ｐ＜０．０１），育成牛胚胎可用用率高于经产牛（Ｐ＜０．０１）... 详细信息

用ＦＳＨ＋ＰＧＦ１。超排处理７２头次供体牛，采卵３６１枚（头均６．５１±３．８２），可用胚２３５枚（头均３．２６±３．４７）。黄牛胚胎可用率高于奶牛、肉牛（Ｐ＜０．０１），育成牛胚胎可用用率高于经产牛（Ｐ＜０．０１），秋冬季超排效果明显好于春季（Ｐ＜０．０１）。

关键词：超数排卵胚胎牛