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鸦胆因D通过影响胰岛素信号通路和诱导中肠细胞凋亡抑制黑腹果蝇生长

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江西农业大学学报 2024年第3期46卷 648-655页

作者：陈冬平李康龙诗慧田永清林菲徐汉虹华南农业大学植物保护学院广东广州510642 华南师范大学生命科学学院广东广州510631

【目的】鸦胆因D(BD)是从中药鸦胆子(Brucea javanica)中提取的植物源农药,具有良好的杀虫活性,能有效抑制包括黑腹果蝇在内的多种害虫的生长发育,但是关于BD的毒性机制研究较少,研究旨在探索BD抑制黑腹果蝇生长的毒性机制。【方法】以... 详细信息

【目的】鸦胆因D(BD)是从中药鸦胆子(Brucea javanica)中提取的植物源农药,具有良好的杀虫活性,能有效抑制包括黑腹果蝇在内的多种害虫的生长发育,但是关于BD的毒性机制研究较少,研究旨在探索BD抑制黑腹果蝇生长的毒性机制。【方法】以黑腹果蝇为研究对象,给2龄末黑腹果蝇喂食含20μg/g BD的人工饲料后,测定用药处理24 h和48 h时,BD对黑腹果蝇体质量、中肠和脂肪体的影响,通过免疫组化、蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR试验,研究BD是否诱导果蝇中肠细胞凋亡、影响脂肪体细胞生长和影响营养信号通路。【结果】20μg/g BD能显著抑制黑腹果蝇的生长,体现在抑制其体质量增加和脂肪体细胞生长,同时,20μg/g BD处理48 h后,会导致果蝇脂肪体细胞核皱缩和中肠细胞凋亡。实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹试验发现,BD显著上调胰岛素信号通路负调控基因4EBP和InR的转录水平,同时下调脂肪体4EBP的磷酸化水平,抑制细胞生长。【结论】BD主要通过诱导细胞凋亡和影响胰岛素信号,进而影响营养物质的消化和吸收,最终抑制黑腹果蝇的生长发育。

关键词：鸦胆因D 抑制生长凋亡 4EBP InR

皂角发酵物对红托竹荪病害防治及土壤主要微生物群落影响

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菌物学报 2022年第4期41卷 618-629页

作者：张雪张学学胡鑫徐汉虹田永清亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室天然农药与化学生物学教育部重点实验室华南农业大学植物保护学院广东广州510642

为了研究皂角发酵物对贵州当地特色产业红托竹荪的病害防治及促生长作用,本研究在室内分离病原菌并进行平板对峙实验,田间试验设计4个处理:不施用药剂的常规处理、解淀粉芽孢杆菌HN11菌液、皂角粉末、皂角发酵物,调查防治效果,测量菌蛋... 详细信息

为了研究皂角发酵物对贵州当地特色产业红托竹荪的病害防治及促生长作用,本研究在室内分离病原菌并进行平板对峙实验,田间试验设计4个处理:不施用药剂的常规处理、解淀粉芽孢杆菌HN11菌液、皂角粉末、皂角发酵物,调查防治效果,测量菌蛋大小及个数,检测土壤微生物群落变化。从发病组织中分离出一株病原菌,鉴定为阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae。皂角发酵物对竹荪病害田间防治效果达77.86%,生长面积提高61.22%。土壤微生物群落中细菌和真菌分析结果显示,相较于其他处理组,皂角发酵物处理组中竹荪相对丰度占比最大,达25.83%。皂角发酵物能有效防治红托竹荪病害,促进红托竹荪菌蛋生长,减少化学农药的用量,促进生态循环,保障农产品食用安全,提升皂角和竹荪产业综合效益。

关键词：皂角发酵物红托竹荪阴沟肠杆菌促生长土壤微生物

分子对接阐明草甘膦与水稻醛酮还原酶(OsALR2)的作用及OsALR2的表达纯化

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植物保护 2023年第6期49卷 23-31页

作者：孙跃刘蓉王思威徐汉虹吴鹰花华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室广州510642 中山榄菊日化实业有限公司广东省博士后创新实践基地中山528400

草甘膦是一种广谱高效的有机磷类除草剂,因其对水稻等禾本科作物缺乏选择性,导致其在水稻田中的应用受到限制。杂草中醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)具有降解小分子农药草甘膦的功能,但是水稻响应草甘膦的作用机制未知。本文通过... 详细信息

草甘膦是一种广谱高效的有机磷类除草剂,因其对水稻等禾本科作物缺乏选择性,导致其在水稻田中的应用受到限制。杂草中醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)具有降解小分子农药草甘膦的功能,但是水稻响应草甘膦的作用机制未知。本文通过生物信息学分析、分子对接研究草甘膦与其在水稻中的靶标AKR蛋白OsALR2的互作机制。采用TMHMM 2.0和DiANNA 1.1 web server等在线软件对OsALR2蛋白的跨膜特性和二硫键含量等生物学特性进行了分析,结果表明OsALR2分子量为35 kD,等电点为5.89;OsALR2不是膜蛋白,但是含有3组二硫键。使用AlphaFold预测OsALR2蛋白的三级结构,并利用Auto Dock Vina将草甘膦与OsALR2进行分子对接,结果显示,最低结合能为-13.4 kcal/mol,草甘膦与OsALR2的结合主要通过氢键作用。通过Ramachandran图,ERRAT和Verify 3D证明对接获得的三维结构是合理的。进一步通过分子克隆技术构建重组表达载体pET-32a-OsALR2并进行原核表达,结果显示OsALR2主要以包涵体的形式表达,对包涵体进行变复性后,蛋白表现出酶活性且蛋白结构有较好的均一性。本文的研究结果助于阐明草甘膦与水稻蛋白互作的分子机制,为研发抗草甘膦水稻新品种和新型小分子农药提供理论指导。

关键词：水稻草甘膦分子对接原核表达包涵体变复性酶活测定

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基于FRET原理构建AtLHT1转运底物筛选探针

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华南农业大学学报 2022年第1期43卷 77-84页

作者：李志伟李本杰刘志兵林菲徐汉虹舒薇华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室广东广州510642 华南农业大学测试中心广东广州510642

【目的】为提高导向药物筛选通量,加快导向农药分子设计、合成、筛选等研发速度,构建基于拟南芥氨基酸转运蛋白AtLHT1的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)探针作为导向农药筛选平台。【方法】构建CFP-LHT1... 详细信息

【目的】为提高导向药物筛选通量,加快导向农药分子设计、合成、筛选等研发速度,构建基于拟南芥氨基酸转运蛋白AtLHT1的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)探针作为导向农药筛选平台。【方法】构建CFP-LHT1-YFP的三明治探针,分别在大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3)原核细胞和BY4741酵母细胞中进行表达、鉴定和纯化。采用荧光酶标仪和激光共聚焦检测FRET效率的变化。【结果】CFPAtLHT1-YFP融合蛋白探针纯化后,分别与供试氨基酸和草甘膦混合,供试氨基酸和草甘膦的加入导致探针蛋白的FRET比率发生明显变化,草甘膦处理使D535 nm/D480 nm升高7%~12%,其变化趋势与阳性配体甘氨酸和谷氨酸接近,而加入阴性配体精氨酸则没有明显变化。同时,FRET比率呈现底物浓度依赖。样品中分别加入1、5和30 mmol/L的草甘膦溶液,20 min后检测到D535 nm/D480 nm分别升高3%、1%和13%,阳性配体也存在FRET比率随着底物浓度上升而升高的趋势,而阴性配体变化不规则。利用光漂白法检测到氨基酸或草甘膦处理后单个酵母细胞的FRET效率发生明显变化。加入阳性对照的甘氨酸和谷氨酸后,FRET效率变化明显,其中,甘氨酸和谷氨酸的FRET效率分别达到30%和26%;加入草甘膦处理的FRET效率与谷氨酸接近,达26%;含PBS的空白对照组没有明显的FRET效率变化。【结论】AtLHT1-FRET探针可以与中性氨基酸甘氨酸和酸性氨基酸谷氨酸结合,但不结合碱性氨基酸精氨酸;FRET效率因不同底物有所差异,且具有一定的底物浓度依赖性;同时,证明了草甘膦能够被氨基酸转运蛋白AtLHT1转运。

关键词：荧光共振能量转移 AtLHT1 FRET探针导向农药

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植物源光活化毒素的研究与新农药开发

华南农业大学学报 2003年第4期24卷 100-105页

作者：徐汉虹鞠荣华南农业大学昆虫毒理研究室广东广州510642 华南农业大学昆虫毒理研究室

植物源光活化农药作用机理独特,在光照下能显著提高杀虫、抑菌、除草的生物活性,在发挥作用的同时自身降解,被誉为绿色农药.光活化农药现已成功地用于防治卫生害虫,通过结构改造和新剂型开发用于农业病、虫、草害的防治是未来的发展趋势... 详细信息

植物源光活化农药作用机理独特,在光照下能显著提高杀虫、抑菌、除草的生物活性,在发挥作用的同时自身降解,被誉为绿色农药.光活化农药现已成功地用于防治卫生害虫,通过结构改造和新剂型开发用于农业病、虫、草害的防治是未来的发展趋势.本文结合作者十多年的研究,总结了植物源光活化毒素的研究进展和光活化农药的开发与应用概况,并提出了自己的观点和见解.

关键词：植物源农药光活化毒素研究与应用

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农药剂型与加工配制

农药剂型与加工配制

1997年

作者：徐汉虹

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萃取效率定律的证明

华南农业大学学报 1998年第4期19卷 101-103页

作者：陈立徐汉虹华南农业大学昆虫毒理研究室

根据分配定律提出了萃取效率定律，并根据极限法则和拉格朗日中值定理对萃取效率定律进行了证明

关键词：萃取萃取效率萃取效率定律证明

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杀虫植物与植物性杀虫剂 1

杀虫植物与植物性杀虫剂

虚实结合模式下滴灌施药创新性实验设计和实践

2001年

作者：徐汉虹

国家科学技术学术著作出版基金资助:本书共分11章，内容包括：植物源光活化杀虫毒素，杀虫生物碱，植物精油，柠檬素，植物源昆虫激素，黄酮类化合物，杀虫植物的生物技术研究等。

关键词：植物性杀虫剂

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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实验室研究与探索 2022年第2期41卷 198-201,273页

作者：林菲袁腾吴瀚翔张志祥徐汉虹华南农业大学植物保护学院广州510642 华南农业大学材料与能源学院广州510642

滴灌施药法防控农作物害虫是近年来取得的科研成果。受限于季节、场地和突如其来的疫情影响,将最新研究成果融入本科实验实习存在实际困难。为了贯彻三全育人理念,培养新农科学生的科研创新意识,促进科研反哺教学,对植物化学保护课程教... 详细信息

滴灌施药法防控农作物害虫是近年来取得的科研成果。受限于季节、场地和突如其来的疫情影响,将最新研究成果融入本科实验实习存在实际困难。为了贯彻三全育人理念,培养新农科学生的科研创新意识,促进科研反哺教学,对植物化学保护课程教学实践开展了虚实结合模式探索。从滴灌施药的虚拟仿真实验设计入手,介绍了实验背景、实验教学设计思想和具体实施方案,探索了虚实结合模式下新农科教学实践课程的建设成效,推动了融合型卓越农林创新人才培养目标的实现。

关键词：植物化学保护滴灌施药虚拟仿真虚实结合实验设计