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遗传改造刺糖多孢菌构建多杀菌素高产菌株

遗传改造刺糖多孢菌构建多杀菌素高产菌株

作者：徐妙湖南师范大学

学位级别：硕士

土壤放线菌刺糖多孢菌（Saccharopolyspora spinosa）产生的次级代谢产物多杀菌素（Spinosyns）是一种新型大环内酯类天然产物,具有高效生物杀虫活性,是理想的绿色生物杀虫剂。但是野生刺糖多孢菌合成多杀菌素的能力较弱、产量极低,因此... 详细信息

土壤放线菌刺糖多孢菌（Saccharopolyspora spinosa）产生的次级代谢产物多杀菌素（Spinosyns）是一种新型大环内酯类天然产物,具有高效生物杀虫活性,是理想的绿色生物杀虫剂。但是野生刺糖多孢菌合成多杀菌素的能力较弱、产量极低,因此,利用基因工程技术定向改造刺糖多孢菌,有望成为提高多杀菌素产量的有效方法。本研究利用PCR扩增了环腺苷酸受体蛋白基因crp和细胞分裂激活因子基因ssgA,利用酶切、连接的方法将crp与ssgA分别置于红霉素增强型启动子PermE的控制之下。随后利用Red/ET同源重组技术将PermE-crp基因片段和PermE-ssgA基因片段分别亚克隆到本室构建的大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pUC-spn上,构建获得重组载体pUC-spn-PermE-crp和pUC-spn-PermE-ssgA。通过接合转移方法将重组载体分别导入刺糖多孢菌中,利用单交换同源重组将其整合至刺糖多孢菌染色体上,获得了遗传性能稳定的重组工程菌株***-Crp和***-SsgA。借用扫描电子显微镜观察工程菌株菌丝体形态变化,结果显示,工程菌株***-SsgA菌丝片段化程度较对照菌株高,并形成了一定数量的孢子隔膜;采用高效液相色谱检测多杀菌素生物合成情况,摇瓶发酵结果表明,与对照菌株相比,工程菌株***-Crp中的多杀菌素产量提高1.28倍,工程菌株***-SsgA中多杀菌素产量与对照菌株相比提高了 1.55倍;RT-qPCR结果显示工程菌中相应基因的转录水平上调。这些结果表明crp与ssgA的过表达对刺糖多孢菌的形态及生长产生了一定的影响,并有效地促进了刺糖多孢菌中多杀菌素的生物合成。丁烯基多杀菌素（butenyl-spinosyns）由须糖多孢菌（Saccharopolyspora pogona）产生,分子结构与多杀菌素高度类似,其杀虫活性与多杀菌素相比更高,但野生型须糖多孢菌菌株中丁烯基多杀菌素的产量极低。3’-O-甲基鼠李糖是丁烯基多杀菌素发挥活性的重要组成成分,同时也是该菌株细胞壁的组成成分。为了提高丁烯基多杀菌素合成关键底物3’-O-甲基鼠李糖的合成,本研究扩增了三段分散排列在刺糖多孢菌基因组上的鼠李糖生物合成基因gtt、epi和gdh+kre,并将其克隆至大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pJN100上,构建成鼠李糖表达载体pJNRM;通过接合转移方式将其导入须糖多孢菌菌株中,获得了鼠李糖生物合成基因加倍的工程菌株SPOG-RM。PCR鉴定结果表明,该质粒已成功地整合至须糖多孢菌基因组上;实时荧光定量PCR结果显示,工程菌中gtt、epi、kre和gdh基因的转录水平分别比原始菌株提高了54.1倍、26.8倍、14.0倍和11.9倍;HPLC检测结果表明,重组工程菌SPOG-RM中丁烯基多杀菌素产量比原始菌株提高了214%。总之,本研究通过定向遗传改造的方法,首次实现了正调控基因crp和ssgA的在刺糖多孢菌中的过表达,以及鼠李糖生物合成基因在须糖多孢菌菌株中的过表达,有效地促进了多杀菌素及丁烯基多杀菌素的生物合成,证明了此方法的高效可行性,为通过其它正调控基因或限速酶基因的超量表达提高多杀菌素及其类似物的生物合成奠定了重要基础。

关键词：刺糖多孢菌多杀菌素 Red/ET同源重组环腺苷酸受体蛋白细胞分裂激活因子鼠李糖生物合成基因

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浅谈宗教史教学

历史教学问题 1996年第4期 44-46页

作者：徐妙龙上海市沪东中学

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双PWM变频器控制策略的研究及其系统设计

双PWM变频器控制策略的研究及其系统设计

作者：徐妙婧河南理工大学

学位级别：硕士

由于传统变频器整流器使用二极管、晶闸管等不可控、相控开关器件,所以网侧电流谐波大,功率因数低,造成电网污染,在电动机制动运行的工作状态下,能量不能回馈电网,浪费大量电能。针对这种情况提出了双PWM变频器。双PWM变频器的整流部分... 详细信息

由于传统变频器整流器使用二极管、晶闸管等不可控、相控开关器件,所以网侧电流谐波大,功率因数低,造成电网污染,在电动机制动运行的工作状态下,能量不能回馈电网,浪费大量电能。针对这种情况提出了双PWM变频器。双PWM变频器的整流部分采用全控型开关器件IGBT,使用PWM调制方式,可以使网侧电流接近正弦波,提高了网侧的功率因数,并实现了能量的双向流动。本课题首先研究了双PWM变频器的拓扑结构、工作方式,与传统的变频器进行比较,指出双PWM变频器的优越之处。根据拓扑结构,将双PWM变频器分为整流部分与逆变部分进行分析,由于逆变部分控制策略的研究已比较成熟,在本文中主要研究整流部分的控制策略。整流部分采用电压外环,功率内环的直接功率控制系统,本文首先分析了三相电压型PWM整流器在abc、αβ和dq坐标系下的数学模型,针对传统直接功率控制策略中开关频率不固定,开关频率高的缺点,提出了空间矢量法,以改善功率滞环、开关表带来的这些缺点;针对传统直接功率控制策略中网侧谐波含量大,易受电网侧干扰的缺陷,提出了用虚拟磁链矢量定向旋转坐标系,改善了传统直接功率控制策略中的这些缺点,并减少了传感器的数量,节约了系统成本。对于逆变部分,本文使用了转子磁场定向的电机矢量控制策略。最后,设计了基于DSP的双闭环控制PWM整流器系统的硬件、软件,达到解耦整流器有功、无功功率,并完成了系统仿真,仿真结果表明电压和功率双闭环PI参数选择的合理性以及整个系统的可行性。

关键词：直接功率虚拟磁链双PWM变频器 PI调节

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基于用户画像的YN移动APP运营策略研究

基于用户画像的YN移动APP运营策略研究

作者：徐妙云南财经大学

学位级别：硕士

通信技术、信息技术更新换代,智能终端硬件设备普及,成就移动互联网蓬勃发展。在大数据时代背景下,用户的社交、消费行为向线上聚集,企业为消费者提供产品销售、用户服务也随之从线下向线上转移,纷纷建立连接企业产品服务与用户的新型渠... 详细信息

通信技术、信息技术更新换代,智能终端硬件设备普及,成就移动互联网蓬勃发展。在大数据时代背景下,用户的社交、消费行为向线上聚集,企业为消费者提供产品销售、用户服务也随之从线下向线上转移,纷纷建立连接企业产品服务与用户的新型渠道APP(移动应用程序Application,简称APP),其意图在于记录用户数据,挖掘数据价值,为企业生产运营提供有力支持。APP是企业实现数据驱动创新转型的重要阵地。YN移动是Y省移动通信用户市场占有率最高的企业,用户规模超过3000万。为应对互联网时代消费者向线上迁移的趋势,2016年建立并开始运营面向个人用户的YN移动APP,旨在面向为Y省移动用户提供通信业务办理、影音娱乐和生活购物等综合服务内容。经过数年的运营,虽YN移动APP用户规模已经达到千万级,但整体运营模式、运营思路还是受限于传统通信运营商业务经营管理模式,APP用户运营管理存在问题和困难,难以适应千变万化的互联网环境。因此,论文运用一种科学的方法解决YN移动APP运营管理存在的问题。首先运用Kmeans聚类算法对APP样本用户分群,其次参考AARRR模型五个方面分析提炼YN移动APP运营管理中存在的问题,最后针对性地提出适合YN移动APP运营五个方面的优化策略:APP获取用户优化举措;APP用户活跃度提升举措;APP用户留存率提升举措;APP变现能力增强举措;APP用户自传播增进举措。为从事互联网行业的产品运营经理和运营商市场分析人员提供用户运营的解决思路和解决办法。

关键词：用户运营策略 APP 用户画像 K-means聚类算法 AARRR模型

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脉冲干扰下RPC抗干扰性能研究

脉冲干扰下RPC抗干扰性能研究

作者：徐妙弈华中科技大学

学位级别：硕士

RPC(Random Projected Coding,随机映射编码)作为一种自适应编码调制方式,能够最大程度利用信道资源,具有良好的传输性能,但在通信过程中容易受到各种自然和人为的噪声干扰,使得通信质量下降。因此本文对RPC在不同复杂干扰条件下的抗干... 详细信息

RPC(Random Projected Coding,随机映射编码)作为一种自适应编码调制方式,能够最大程度利用信道资源,具有良好的传输性能,但在通信过程中容易受到各种自然和人为的噪声干扰,使得通信质量下降。因此本文对RPC在不同复杂干扰条件下的抗干扰性能进行研究。在实际信道中往往存在具有较强脉冲性的干扰,可以用?稳定分布模型较好地对其建模,将其与高斯噪声混合构建干扰信道模型,研究不同统计特性的脉冲噪声对于RPC译码性能的影响。针对大幅值脉冲对RPC译码性能产生较大影响的问题,本文设计并实现了限幅与剔除两种信号预处理手段,并提出自适应信号预处理门限,抑制了RPC译码过程中错误置信信息的传递,能够在信噪比较低时达到良好的抗干扰效果。同时,考虑到RPC译码时需要使用噪声的概率密度函数,而现有的使用估计信噪比方法构建的噪声概率分布与真实分布之间存在较大偏差。本文将核估计算法应用于噪声分布的估计,设计使用合适的核函数及最优的窗长,降低了估计值与理论值之间的偏差。在固定窗长的核估计算法的基础上,提出使用自适应窗长核估计算法,更好地估计噪声概率密度的拖尾,实现RPC译码性能的提升。同时,提出反编码概率密度估计方案,降低导频资源开销的同时提升估计准确性。在完成两种抗干扰算法的设计后,本论文对其抗干扰性能进行了测试与仿真。相比于无抗干扰措施的RPC系统,两种抗干扰算法下的误码率都有了较大程度的下降,当信噪比小于等于6dB时,基于信号预处理的抗干扰算法能达到更低的误码率,而当信噪比高于6dB时,基于概率密度估计的抗干扰算法能实现更好的抗干扰性能。

关键词： RPC 抗干扰核估计脉冲噪声 α稳定分布

绿色润滑油（10W/30SG）的可生物降解性研究

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绿色润滑油（10W/30SG）的可生物降解性研究

作者：徐妙侠长安大学

学位级别：硕士

本文介绍了国内外汽油机油的发展概况及趋势，并提出发展绿色润滑油。分析了汽油机对润滑油的性能要求、润滑油的生物降解机理及基础油和添加剂对绿色润滑油生物降解性的影响，还介绍了目前国际上测定绿色润滑油生物降解性的试验方法。... 详细信息

本文介绍了国内外汽油机油的发展概况及趋势，并提出发展绿色润滑油。分析了汽油机对润滑油的性能要求、润滑油的生物降解机理及基础油和添加剂对绿色润滑油生物降解性的影响，还介绍了目前国际上测定绿色润滑油生物降解性的试验方法。选用10W／30 SG绿色润滑油，将其与同级矿物油进行使用性能对比试验，重点考察了10W／30 SG绿色润滑油及其基础油的生物降解过程。结果表明：其质量水平已达到10W／30 SG汽油机油的使用性能要求;绿色润滑油及其基础油都是可生物降解的，基础油的生物降解性明显优于绿色润滑油，由此可见各功能添加剂的加入抑制了绿色润滑油的生物降解性。

关键词：汽油机油绿色润滑油生物降解性植物油合成油添加剂生物需氧量化学需氧量

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国外期刊互联网转型的现状与策略分析

出版发行研究 2016年第9期 88-92页

作者：徐妙郭全中中国传媒大学国家行政学院

在网民尤其是手机网民快速增加的背景下,国外期刊积极采取多平台融合发展、网络版等六种方式,取得了一定的成效。文章在分析《经济学人》等互联网转型实践的基础上,提出了期刊互联网转型的三种可行路径。

关键词：期刊互联网转型数字化期刊

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多视角多情感聚焦大事件

新闻实践 2007年第11期 19-20页

作者：徐妙菊章勤今日早报

相比往年多个台风，今年的“罗莎”非常特殊。针对特殊的事件，需要特殊的报道手段。“罗莎”来袭，今日早报运筹帷幄，在调兵谴将、运用独特报道策略、拿捏新颖报道手法上，倾注了更多的心思。

关键词：事件聚焦情感报道手段报道策略报道手法早报

Copula理论及其在金融市场相依性分析中的应用

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Copula理论及其在金融市场相依性分析中的应用

作者：徐妙志电子科技大学

学位级别：硕士

掌握金融变量间的相依结构是研究金融体系的运作模式，提高投资策略准确率的基础和关键所在。Copula函数具有传统相关性分析方法不具备的刻画非线性、非对称相依结构的能力，尤其是在刻画尾部相关性的能力方面具有明显的优势，恰恰符合... 详细信息

掌握金融变量间的相依结构是研究金融体系的运作模式，提高投资策略准确率的基础和关键所在。Copula函数具有传统相关性分析方法不具备的刻画非线性、非对称相依结构的能力，尤其是在刻画尾部相关性的能力方面具有明显的优势，恰恰符合了研究者对金融变量相依结构分析的需求。论文从Copula函数的定义、主要性质、种类以及相应的相关性测度等方面对Copula理论做了系统的介绍，并梳理和总结了Copula模型的建立方法和步骤，包括边缘分布的确定方法，参数估计方法，Copula模型的选择和模型拟合优度评价，着重研究了Copula函数的参数估计方法，讨论了精确极大似然估计（EML估计）、分步估计（IFM估计）、基于样本经验分布函数的CML估计、基于核密度估计方法的MLK方法以及Genest&Rivest估计法，通过分析和蒙特卡洛模拟给出了它们的适用条件，并得到结论：当样本边缘分布难以确定，或者边缘分布拟合效果不好的时候，MLK估计是最佳参数估计方法。将Copula理论应用到高频金融数据的相依结构分析中。根据高频数据的特点，构造了结合BP神经网络拟合和Copula函数的新模型，并实证了该模型能够比较有效地刻画股指期货每分钟绝对收益率和成交量的相依结构。首先采用BP神经网络方法拟合并消除日历效应，再用核密度估计方法来确定边缘分布，并根据边缘分布的频率直方图，分别选取Gumbel Copula函数和混合阿基米德Copula函数对其进行拟合，最后利用多种相依性测度来评价模型拟合的效果。结果表明：相关参数为(?)=1.5421的Gumbel Copula模型很好的描述和刻画了股指期货每分钟绝对收益率和成交量之间的相依结构，捕捉到了两者之间明显的上尾相关性和下尾渐近独立性，并从投资行为学上进行解释：当市场波动剧烈时，即交易会导致较大的收益或者损失时，投资者为了获得收益或者保本，交易欲望就会增强，导致交易量的上涨，而当市场波动很小时，投资者基于自己对未来市场的预期，会保持一定的交易量。

关键词： Copula函数高频金融数据相依结构