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间歇给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂抑制耐药黑色素瘤细胞增殖的研究

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中国热带医学 2022年第2期22卷 106-111,122页

作者：姚琳阮杰林紫均袁源邱思仪蒋智文郑慧玲彭健愉孙明轩刘新光孙雪荣广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室衰老研究所广东东莞523808 广东医科大学医学技术学院广东东莞523808 广东医科大学基础医学院广东东莞523808 广东医科大学生物化学与分子生物学研究所广东东莞523808

目的探讨ERK1/2通路在耐药黑色素瘤药物成瘾性中的作用,并在此基础上,探究间歇性给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂对耐药黑色素瘤细胞增殖的影响。方法体外培养黑色素瘤药物敏感株(A375和M14细胞)和对威罗菲尼耐受的细胞株(A375/R0.5、A37... 详细信息

目的探讨ERK1/2通路在耐药黑色素瘤药物成瘾性中的作用,并在此基础上,探究间歇性给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂对耐药黑色素瘤细胞增殖的影响。方法体外培养黑色素瘤药物敏感株(A375和M14细胞)和对威罗菲尼耐受的细胞株(A375/R0.5、A375/R2.0、M14/R0.5和M14/R2.0),用MEK抑制剂U0126抑制ERK1/2激活,用Western-blot检测ERK1/2等蛋白的表达,用克隆形成实验观察细胞的增殖能力。利用活性分子TBHQ激活ERK1/2通路,利用ML329抑制MITF,二者均可上调ERK1/2-MITF通路活性,导致下游MITF抑制。采用耐药细胞A375/R2.0观察“撤除威罗菲尼”联合“TBHQ或ML329”对细胞增殖的影响。结果克隆形成实验显示,在撤除威罗菲尼后,耐药细胞增殖减慢,如在撤药同时,用MEK抑制剂U0126抑制ERK1/2活化,可逆转撤药导致的增殖抑制,证明ERK1/2活化是耐药细胞药物成瘾性的关键机制。相反,如在撤除威罗菲尼同时,添加ERK1/2激活剂TBHQ或MITF抑制剂ML329,以进一步激活ERK1/2-MITF通路,结果发现,二者均可进一步抑制耐药细胞的增殖,提示撤药和ERK1/2-MITF通路活化产生了协同抑瘤效应。结论本研究从新的角度证明了ERK1/2通路在耐药黑色素瘤细胞药物成瘾性中的作用,并提示间歇性给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂可更有效地抑制耐药黑色素瘤增殖,有望为防治黑色素瘤耐药提供新思路。

关键词：黑色素瘤威罗菲尼药物成瘾性间歇性治疗 ERK1/2通路

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黑色素瘤治疗药物的研究进展

中国医药生物技术 2020年第3期15卷 320-322页

作者：饶敏腊王颖彭健愉刘肖雨刘亭亭陈艺琳赵威刘新光孙雪荣广东医科大学东莞科研中心衰老研究所东莞523808 广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室东莞523808 广东医科大学第二临床医学院东莞523808 广东医科大学药学院东莞523808 广东医科大学生物化学与分子生物学研究所湛江524023

黑色素瘤是一类高复发、高转移及预后差的恶性肿瘤,发病率在全球各地区呈快速增长趋势[1]。研究发现,白肤色和金发人群容易罹患黑色素瘤。它是最具侵略性的癌症之一,更容易发生转移。黑色素瘤早期可通过淋巴道和血行转移扩散到肝脏、肺... 详细信息

黑色素瘤是一类高复发、高转移及预后差的恶性肿瘤,发病率在全球各地区呈快速增长趋势[1]。研究发现,白肤色和金发人群容易罹患黑色素瘤。它是最具侵略性的癌症之一,更容易发生转移。黑色素瘤早期可通过淋巴道和血行转移扩散到肝脏、肺和大脑等其他器官,终末阶段则会发生脑转移。脑转移阶段病情进展迅速,是患者致死的主要原因。在肺癌和乳腺癌之后,黑色素瘤是脑转移的第三大常见原因。有文献报道,75%的黑色素瘤患者会出现脑部扩散,其中95%的病例因脑转移而死亡[2]。

关键词：脑转移黑色素瘤血行转移淋巴道病情进展文献报道侵略性恶性肿瘤

黄芩素对朊蛋白PrP106-126片段引起的神经毒性保护作用研究

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中国医药导报 2019年第34期16卷 7-10,I0002页

作者：秦笙彭健愉柏彩英郑水兰蓝锴曹楠楠程招敏周强广东省中医院检验科广东广州510120 广东省妇幼保健院检验科广东广州511400 广州惠广林科技有限公司广东广州510032

目的利用PrP106-126多肽感染的SH-SY5Y细胞,探究黄芩素对PrP106-126引起的神经毒性保护作用及其机制。方法将SH-SY5Y细胞按照不同的处理分成细胞对照组、药物对照组、PrP106-126对照组、PrPScr对照组、黄芩素作用组。采用细胞病变法及MT... 详细信息

目的利用PrP106-126多肽感染的SH-SY5Y细胞,探究黄芩素对PrP106-126引起的神经毒性保护作用及其机制。方法将SH-SY5Y细胞按照不同的处理分成细胞对照组、药物对照组、PrP106-126对照组、PrPScr对照组、黄芩素作用组。采用细胞病变法及MTT法检测PrP106-126对SH-SY5Y细胞形态和活性的影响,采用MTT法检测黄芩素抑制PrP106-126多肽神经毒性的药效,TUNEL法检测黄芩素对PrP106-126多肽所致细胞凋亡的影响。结果与细胞对照组比较,PrP106-126感染的SH-SY5Y细胞形态明显不同,可见细胞折光性变强,细胞聚集呈破碎样。与PrPScr对照组比较,PrP106-126感染的细胞抑制率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与PrP106-126对照组比较,在治疗模式和预防模式中黄芩素作用组细胞增殖率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与细胞对照组比较,PrP106-126对照组的细胞凋亡指数(AI)明显升高(P<0.01);与PrP106-126对照组比较,黄芩素作用组的细胞AI明显降低(P<0.05)。结论黄芩素在体外对朊病毒具有治疗和预防作用,其作用机制可能与细胞凋亡有关。

关键词： PrP106-126 黄芩素 SH-SY5Y 神经保护

一种基于丝裂霉素诱导的人脂肪干细胞衰老模型

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山西医科大学学报 2019年第4期50卷 415-420页

作者：张明萌饶敏腊刘亭亭陈艺琳赵威廖小欣李晓毅彭健愉刘新光孙雪荣广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室衰老研究所东莞523808 广东医科大学药学院广东医科大学第二临床学院广东医科大学医学检验学院广东医科大学生物化学与分子生物学研究所

目的建立一种简单有效的人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)衰老模型,为研究ADSCs衰老机制及抗衰老药物筛选奠定基础。方法分别用0. 5μg/ml,1μg/ml和3μg/ml的丝裂霉素(MMC)处理ADSCs,以正常培养组作为阴性对照(NC),利用... 详细信息

目的建立一种简单有效的人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)衰老模型,为研究ADSCs衰老机制及抗衰老药物筛选奠定基础。方法分别用0. 5μg/ml,1μg/ml和3μg/ml的丝裂霉素(MMC)处理ADSCs,以正常培养组作为阴性对照(NC),利用β-gal活性染色检测不同浓度MMC对ADSCs衰老情况的影响;然后将正常培养与0. 5μg/ml MMC处理的ADSCs分别进行高通量芯片检测,分析找出两组ADSCs差异表达的衰老相关基因;利用q RT-PCR和ELISA验证部分SASP(IL-6、IL-8、IL-1α、IL-1β和TNF-α)及其他衰老相关基因(p16、p21、p53)的表达,并用Western blot检测p21和γ·H2AX的表达。结果与正常培养的ADSCs相比,0. 5μg/ml,1μg/ml和3μg/ml MMC均可诱导ADSCs增殖停滞,细胞体积增大,β-gal染色阳性率升高(P 0. 05)。结论 MMC处理的ADSCs表现出细胞衰老的一般特点,并可分泌多种衰老相关SASP。本文成功建立了一种基于MMC诱导的、具有典型衰老特征的ADSCs衰老细胞模型。

关键词：脂肪干细胞细胞衰老衰老相关分泌表型丝裂霉素

利用IL-1A-eGFP慢病毒载体构建SASP细胞监测模型的研究

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山西医科大学学报 2021年第6期52卷 700-705页

作者：彭健愉孙明轩姚琳袁源刘肖雨赵威林紫均严詠恩陈维春刘新光孙雪荣广东医科大学衰老研究所东莞523808 广东省医学分子诊断重点实验室广东医科大学医学技术学院广东医科大学第二临床医学院广东医科大学药学院广东医科大学生物化学与分子生物学研究所

目的本文拟建立基于IL-1A基因启动子驱动增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)表达的细胞衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)监测模型,以便通过荧光判断SASP是否产生及其强度。方法构建含IL-1A-eGFP序列的慢病毒表达载体,经NcoⅠ及SalⅠ酶切及测序验证后,制备慢病毒颗粒,并感染人黑色素瘤M14细胞,经嘌呤霉素筛选、单克隆培养等获得整合IL-1A-eGFP序列的细胞株。用顺铂(以溶剂为阴性对照)诱导该细胞株衰老,连续观察荧光变化,并用qRT-PCR检测SASP因子IL-1A、IL-1B、IL-8的表达。结果经酶切和测序证实,IL-1A-eGFP慢病毒表达载体构建正确。用该慢病毒感染人黑色素瘤M14细胞并经过筛选后,得到形态均一、增殖迅速的M14-IL-1A-eGFP细胞株。该细胞常规状态下仅有微弱的绿色荧光背景,加入顺铂后,细胞增殖减慢,形态变大,同时绿色荧光明显增强,qRT-PCR检测发现SASP因子IL-1A,IL-1B和IL-8表达明显增强(P分别为0.002,0.028,0.056)。结论成功构建了SASP细胞监测模型,可通过绿色荧光的强度反映SASP状态,该模型有望为相关研究提供便利。

关键词：衰老 SASP 黑色素瘤 IL-1A GFP

内服活络效灵丹联合肩关节镜下松解术治疗冻结肩临床观察

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中国中医药现代远程教育 2025年第2期23卷 86-89页

作者：彭健江文勇周敏江西省泰和县中医院骨科江西吉安343700

目的探究内服活络效灵丹联合肩关节镜下松解术治疗冻结肩的临床效果。方法选取2017年7月—2022年11月江西省泰和县中医院骨科收治的46例冻结肩患者,随机分为研究组和对照组,各23例。研究组采取内服活络效灵丹联合肩关节镜下松解术治疗,... 详细信息

目的探究内服活络效灵丹联合肩关节镜下松解术治疗冻结肩的临床效果。方法选取2017年7月—2022年11月江西省泰和县中医院骨科收治的46例冻结肩患者,随机分为研究组和对照组,各23例。研究组采取内服活络效灵丹联合肩关节镜下松解术治疗,对照组采取单纯的肩关节镜下松解术治疗,并进行为期6个月的随访。比较两组治疗前后视觉模拟量表(VAS)、加州大学肩关节评分系统(UCLA)评分、美国肩肘外科医师协会(ASES)评分、Constant-Murley评分与肩关节活动度差异,评价两组患者肩关节活动功能;观察治疗后6个月内患者冻结肩康复情况。结果研究组VAS评分显著低于对照组(P<0.05);研究组UCLA评分、ASES评分、Constant-Murley评分显著高于对照组(P<0.05);研究组肩关节活动程度显著高于对照组(P<0.05)。结论内服活络效灵丹联合肩关节镜下松解术在冻结肩治疗中能取得优良的效果,手术以微创为主,以其创伤小、住院周期短、恢复快的特点使得患者容易接受,再结合中药活络效灵丹内服可起到治病求本的作用,中西医结合,标本兼治,在临床中是值得大范围推崇的一种行之有效的方案,能够解决冻结肩患者肩关节疼痛伴活动受限带来的苦恼。

关键词：肩凝冻结肩活络效灵丹关节镜中西医结合疗法

虚拟现实技术在周围神经损伤功能恢复中的应用

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中国组织工程研究 2025年第21期29卷 4593-4601页

作者：张舒扬杜心愉赵冬临邢政褚晓蕾李奇天津体育学院运动健康学院天津市301617 天津大学天津医院天津市300211

背景:虚拟现实技术是近年来较为热门的一项人机智能交互技术,已被广泛应用于休闲娱乐、职业培训及医疗康复等领域。目的:旨在探索虚拟现实技术与不同疗法联合在周围神经损伤患者功能恢复中的潜力,概述其作用机制,评估其应用效果和前景,... 详细信息

背景:虚拟现实技术是近年来较为热门的一项人机智能交互技术,已被广泛应用于休闲娱乐、职业培训及医疗康复等领域。目的:旨在探索虚拟现实技术与不同疗法联合在周围神经损伤患者功能恢复中的潜力,概述其作用机制,评估其应用效果和前景,探讨其优势和不足之处,为周围神经损伤后的康复实践提供新的思路和方法。方法:应用计算机检索中国知网、Pub Med数据库建库时间至2024年5月期间的相关文献,英文检索词为“peripheral nerves injury,virtual reality,endoplasmic reticulum stress,muscle atrophy,cerebral cortex,mirror therapy,tendon vibration,treadmill training”,中文检索词为“周围神经损伤,虚拟现实,内质网应激,肌肉萎缩,大脑皮质,镜像疗法,肌腱振动,跑步机训练”,最终纳入68篇文献进行分析。结果与结论:(1)虚拟现实技术作为一种新兴的辅助手段,通过模拟真实环境为患者提供沉浸式的多感官体验,不仅极大地丰富了康复训练的维度,还显著加速了周围神经损伤患者功能恢复进程;虚拟现实技术的作用机制是通过多感官刺激促进皮质可塑性,相邻的皮质区域入侵沉寂区,这些区域对其他输入作出反应或产生新的肌肉激活,从而促进功能恢复。(2)虚拟现实技术已与传统疗法广泛联合,展现出其独特优势。与镜像疗法联合时,虚拟现实的优势是打破了体位的限制,提前康复介入时间点;与肌腱振动联合,虚拟现实技术通过增强视觉和触觉的双重刺激增强运动错觉,显著提高患者的感知和运动能力,但也存在增加对肢体重量感知的问题;与跑步机训练联合,虚拟现实技术进一步发挥其优势,通过多感官刺激模拟现实环境进行平衡和步行功能,但晕动症等问题依旧存在。(3)因此,在实际应用中,由于虚拟现实与镜像疗法、肌腱振动联合都会增强患者运动错觉,更适用于康复早期,而虚拟现实与跑步机训练联合则适用于康复后期,帮助患者更好地回归日常生活。(4)尽管虚拟现实技术在周围神经损伤康复中已经显示出巨大的潜力,但仍存在一些问题和挑战,如晕动症、虚拟现实康复游戏的设计与应用,以及伦理方面的考量,未来的研究应着重解决这些问题,以推动虚拟现实技术在康复领域的进一步发展。

关键词：虚拟现实周围神经损伤康复内质网应激肌肉萎缩皮质可塑性镜像疗法肌腱振动跑步机训练机制

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依西美坦对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

广东医科大学学报 2017年第5期35卷 478-481页

作者：潘沛锦彭健愉张晓慧王倩操龙斌蔚帅帅周克元李继霞曾今诚林碧华广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室广东东莞523808 广东省教育厅医学生物活性分子研究重点实验室广东东莞523808 广东医科大学医学检验学院广东东莞523808

目的探讨依西美坦(Exemestane,EXE)对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响。方法 CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖;Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白(P27、Mcl-1、Bcl-2和Caspase-3)表达。结... 详细信息

目的探讨依西美坦(Exemestane,EXE)对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响。方法 CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖;Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白(P27、Mcl-1、Bcl-2和Caspase-3)表达。结果 40μmol/L EXE显著抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,抑制率为36.7%;20μmol/L EXE显著促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡,凋亡率为33.5%;20μmol/L EXE有效促进乳腺癌MCF-7细胞P27表达并抑制Mcl-1、Bcl-2和Caspase-3的表达。结论 EXE可有效地诱导乳腺癌MCF-7细胞发生细胞凋亡。

关键词：乳腺癌细胞凋亡依西美坦细胞增殖

颈椎定点旋转手法在体生物力学量化及影响因素分析

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中国组织工程研究 2025年第3期29卷 486-492页

作者：梁基耀周红海韦贵康苏少亭陈龙豪何心愉刘粮酺广西中医药大学研究生院广西壮族自治区南宁市530001 广西中医药大学骨伤学院广西壮族自治区南宁市530001 广西中医骨伤科生物力学与损伤修复重点实验室广西壮族自治区南宁市530001 国医大师韦贵康学术思想与临床诊疗传承发展研究中心广西壮族自治区南宁市530001 浙江中医药大学附属第三临床医学院浙江省杭州市310000

背景:颈椎定点旋转手法属于技术要求较高的力学操作,但目前其生物力学还缺少相关量化数据;且颈椎定点旋转手法的影响因素研究包括了众多参数并且存在差异性,需要进一步对其影响因素进行分析,以完善其相关数据。目的:量化颈椎定点旋转手... 详细信息

背景:颈椎定点旋转手法属于技术要求较高的力学操作,但目前其生物力学还缺少相关量化数据;且颈椎定点旋转手法的影响因素研究包括了众多参数并且存在差异性,需要进一步对其影响因素进行分析,以完善其相关数据。目的:量化颈椎定点旋转手法在体生物力学参数,探讨各生物力学参数之间的相关性,及研究对象个体特征差异对手法力学参数的影响。方法:选取35例颈椎病患者为测试对象,均为广西中医药大学第一附属医院仁爱分院骨伤科门诊就诊者。术者佩戴穿戴式力学测量手套采集手法力学参数,包括拇指预加载力、拇指最大推力、掌心预加载力、掌心旋扳力和掌心旋扳最大作用力。并采集患者个人特征参数,包括年龄、身高、体质量和颈围。对手法操作过程中的关键力学参数进行特征分析及不同个体特征进行量化,对力学指标参数进行Spearman相关性分析;分析不同个体特征参数对生物力学可能存在的影响。结果与结论:(1)双侧力学参数相比,左侧操作与右侧操作无显著差异性(P>0.05)。(2)拇指预加载力均值为(7.21±1.19)N、拇指最大推力均值为(28.40±4.48)N、掌心预加载力均值为(5.67±2.49)N、掌心旋扳力均值为(10.90±5.11)N、掌心旋扳最大作用力均值为(16.00±7.27)N。(3)掌心预加载力和掌心旋扳力存在显著正相关(Rs=0.812,P<0.01);掌心预加载力和掌心旋扳最大作用力存在显著正相关(Rs=0.773,P<0.01);掌心旋扳力和掌心旋扳最大作用力存在显著正相关(Rs=0.939,P<0.01)。(4)患者体质量与拇指预加载力、掌心预加载力、掌心旋扳力及掌心旋扳最大作用力之间存在显著正相关(P<0.05)。(5)结果证实,颈椎定点旋转手法治疗颈椎病操作中生物力学有一定的标准量值。该手法左右侧操作无显著差异性,具有较好的一致性和可重复性。掌心预加载力、掌心旋扳力及掌心旋扳最大作用力3种力之间存在一致性和协调性,对于治疗效果的贡献是相近的。患者的体质量是影响颈椎定点旋转手法重要的因素。

关键词：颈椎定点旋转手法生物力学影响因素分析量化研究颈椎病正骨手法保守治疗个体特征