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作者：张照婧郑州大学

学位级别：硕士

研究背景与目的过敏性哮喘是一种以肺部炎症、气道高反应性、粘液分泌过多和气道重塑为特征的复杂的呼吸道异质性疾病。在过敏性哮喘中,ILC2s在2型免疫反应的起始和进展阶段起到了十分关键的促进作用。当呼吸道受到抗原、寄生虫或病毒... 详细信息

研究背景与目的过敏性哮喘是一种以肺部炎症、气道高反应性、粘液分泌过多和气道重塑为特征的复杂的呼吸道异质性疾病。在过敏性哮喘中,ILC2s在2型免疫反应的起始和进展阶段起到了十分关键的促进作用。当呼吸道受到抗原、寄生虫或病毒的刺激之后,受损的气道上皮细胞可以分泌IL-33、IL-25以及TSLP等“警报素”,这些细胞因子能够激活ILC2s产生IL-5、IL-13、IL-9等Th2型细胞因子,促使肺部嗜酸性粒细胞的浸润,气道黏液的分泌和气道平滑肌收缩。此外,ILC2s可以协调细胞反应网络,与多种类型的免疫细胞进行交互作用,促使肺损伤炎症反应和组织修复。Friedrich ***等人通过动物研究发现,具有血栓素抑制特性的COX产物可以改善哮喘模型小鼠的哮喘症状,即COX产物能够抑制过敏原诱导的过敏性炎症反应;PGI2是花生四烯酸经COX途径的代谢产物,在肺部的来源主要是是血管内皮细胞,可通过G蛋白偶联受体IP发挥生物学效应。PGI2类似物伊洛前列素在临床一直被应用于治疗肺动脉高压;伊洛前列素作为COX产物类似物的一种,它是否可以扩展应用于过敏性气道炎症疾病的治疗?直到目前还未被认证。本课题组通过预实验发现伊洛前列素可以明显减轻由IL-33诱导的气道炎症模型小鼠的肺部炎症情况:如小气道及血管周围炎细胞浸润减轻,气道黏膜上皮杯状细胞增生及黏液分泌减少,肺组织、BALF中嗜酸性粒细胞和ILC2s含量减少等炎症减轻现象。初步证实了伊洛前列素能够明显改善肺部炎症情况。ILC2s与Th2型细胞具有相似功能,在气道炎症发生的早期阶段可受到“警报素”刺激,分泌大量Th2型细胞因子,被称作Th2的“镜像细胞”,是过敏性气道炎症早期Th2型细胞因子的主要来源。由于课题组前期已经在小鼠气道炎症模型中验证了伊洛前列素可以改善肺部及气道炎症情况,但还未有研究证实伊洛前列素可以抑制ILC2s的增殖及功能活化,根据预实验结果及查阅相关文献我们推测伊洛前列素可以通过G蛋白偶联受体IP,对ILC2s的功能也产生抑制作用,从而在炎症发生的早期发挥抑制炎症的作用。为了从细胞水平及分子水平验证研究设想,本研究拟选用退役(半年以上)C57BL/6J小鼠肺组织中分离出的ILC2s,在体外探究伊洛前列素对ILC2s的增殖及其分泌IL-5、IL-13的能力的影响,为哮喘的治疗提供新的治疗依据。方法1.体内预实验:选用6-8周雌性C57BL/6J小鼠,随机分为vehicle组、IL-33刺激组、IL-33+iloprost干预组、伊洛前列素对照组,采用IL-33滴鼻法建立小鼠气道炎症模型,HE染色观察肺组织中小气道及血管周围炎症浸润情况;PAS染色检测气道上皮杯状细胞增生及黏液分泌情况。2.体外实验:选取C57BL/6J退役雌鼠,密度梯度离心法结合磁珠分选法分离出肺组织中的Lineage-淋巴细胞,流式细胞术分选出lineage-KLRG-1+Sca-1+细胞,即ILC2s。将分选得到的ILC2s分为vehicle、IL-33、IL-33+伊洛前列素和单独伊洛前列素组。细胞计数检测不同组细胞数;IC检测ILC2s内Ki-67、GATA3、STAT5表达情况;3.分子实验:ELISA检测细胞培养72h后上清中IL-5、IL-13水平;实时荧光定量PCR检测ILC2s中IL-5、IL-13、GATA3、PPARγ的m RNA相对表达量。结果一、体内预实验结果***和PAS染色结果经鼻滴入IL-33后,IL-33刺激组小鼠肺组织切片可见大量炎性细胞浸润、杯状细胞增生以及黏液分泌增加;使用伊洛前列素干预后小气道及血管周围炎细胞浸润明显减少,气道上皮杯状细胞增生情况减轻,黏液分泌减少。二、体外实验结果1.细胞计数结果对培养72h的ILC2s进行分组计数,结果发现IL-33刺激组(11170.41±2210.20个/孔)较vehicle(8334.46±2020.11个/孔)、单独伊洛前列素组(6972.57±850.13个/孔)细胞数明显增多(P<0.05),IL-33+伊洛前列素干预组(6972.57±850.13个/孔)细胞数目则较IL-33组明显减少(P<0.05)。***结果对分组培养24h的ILC2s细胞进行胞内染色,检测核内磷酸化蛋白p STAT5水平,结果发现IL-33组p STAT5水平(MFI:4706.91±1343.11)明显较vehicle组(MFI:2051.63±794.10)、单独伊洛前列素组(MFI:2429.37±635.00)明显升高,而IL-33+伊洛前列素组p STAT5水平(MFI:2706.01±579.29)较IL-33组明显降低(P<0.05);对培养72h的ILC2s进行胞内染色检测转录因子GATA3表达量,研究结果趋势与p STA

关键词： 2型固有淋巴细胞伊洛前列素白细胞介素-33 过敏性哮喘

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全球变化下海岸带微生物生态研究进展

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微生物学报 2021年第6期61卷 1743-1760页

作者：周煜琦张照婧位光山张政邓晔山东大学海洋研究院自然资源部第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室中山大学海洋科学学院中国科学院生态环境研究中心中国科学院环境生物技术重点实验室

海岸带地区是元素循环最活跃的自然区域之一,微生物作为地球元素循环的主要驱动者,对该区域生态系统中物质转化与能量流动起着至关重要的作用。本文从典型海岸带生态系统:海岸带湿地、海草床与海藻森林、近岸水体出发,围绕微生物参与的... 详细信息

海岸带地区是元素循环最活跃的自然区域之一,微生物作为地球元素循环的主要驱动者,对该区域生态系统中物质转化与能量流动起着至关重要的作用。本文从典型海岸带生态系统:海岸带湿地、海草床与海藻森林、近岸水体出发,围绕微生物参与的碳、氮循环过程以及其中的温室气体排放情况,综述了在全球气候变化与人为活动干扰的作用下,海岸带地区的微生物群落对外界环境变化的响应机制以及生态功能维持机制,最后对海岸带系统中微生物生态研究进行了初步的展望。

关键词：全球变化海岸带生态系统海岸带微生物碳循环氮循环

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IFN-γ对小鼠急性过敏性气道炎症的抑制作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2017年第8期37卷 573-579页

作者：甘秋红蒋莉莉李倩阳杨柳张照婧李付广郑州大学基础医学院免疫学系 450001 郑州大学基础医学院遗传学系 450001 郑州大学护理学院 450001 河南科技大学医学院临床医学系洛阳471023

目的探究IFN-γ对IL-33诱导的小鼠急性过敏性气道炎症中2型固有淋巴细胞（ILC2s）的抑制作用.方法将24只6～8周的雌性C57BL/6小鼠随机分为4组：IL-33模型组、单独IFN-γ组、IL-33＋IFN-γ联合刺激组、PBS对照组.用IL-33成功构建小鼠... 详细信息

目的探究IFN-γ对IL-33诱导的小鼠急性过敏性气道炎症中2型固有淋巴细胞（ILC2s）的抑制作用.方法将24只6～8周的雌性C57BL/6小鼠随机分为4组：IL-33模型组、单独IFN-γ组、IL-33＋IFN-γ联合刺激组、PBS对照组.用IL-33成功构建小鼠支气管过敏性炎症模型,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织,使用流式细胞术对ILC2s和嗜酸性粒细胞进行分析.酶联免疫吸附法（ELISA）测定肺匀浆和BALF上清中IL-5和IL-13的含量.Real-time PCR检测IL-5、IL-13和ST2 mRNA表达量的变化.肺组织切片进行HE和PAS染色观察病理变化.结果与PBS对照组相比,IFN-γ组未见炎细胞浸润、杯状细胞增生及黏液分泌;ILC2s和嗜酸性粒细胞含量无差异（P〉0.05）;IL-5、IL-13水平差异无统计学意义（P〉0.05）;IL-5、IL-13、ST2 mRNA表达量差异无统计学意义（P〉0.05）.与PBS对照组相比,IL-33模型组有大量炎性细胞浸润,杯状细胞增生并分泌大量黏液;ILC2s和嗜酸性粒细胞含量明显增多,差异有统计学意义（P〈0.05）;IL-5、IL-13水平升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;IL-5、IL-13、ST2 mRNA表达量增高,差异有统计学意义（P〈0.05）.与IL-33组相比,IFN-γ＋IL-33组炎细胞浸润减弱,杯状细胞增生受到抑制且黏液分泌量减少;IL-5、IL-13水平降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;IL-5、IL-13、ST2 mRNA表达量降低,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论实验证实IFN-γ可抑制IL-33引起的嗜酸性粒细胞和ILC2s的增殖,减弱IL-5、IL-13的分泌,提示：IFN-γ对IL-33诱导的小鼠急性过敏性气道炎症有抑制作用.

关键词：干扰素-γ 2型固有淋巴细胞白细胞介素-33 过敏性气道炎症

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单壁碳纳米管对Arthrobacter sp.W1生长及苯酚降解功能的影响

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应用与环境生物学报 2015年第3期21卷 483-488页

作者：李端行王经伟沈文丽张照婧厉舒祯李会杰刘紫嫣马桥曲媛媛周集体大连理工大学环境学院工业生态与环境工程教育部重点实验室大连116024

单壁碳纳米管(SWCNTs)对大肠杆菌等模式菌株的生长抑制作用明显,为了解SWCNTs对具有环境功能的菌株的作用,以苯酚降解菌Arthrobacter sp.W1为对象,考察不同浓度SWCNTs下菌株W1的生长曲线和苯酚降解曲线,并通过扫描电镜观察、细胞凋亡检... 详细信息

单壁碳纳米管(SWCNTs)对大肠杆菌等模式菌株的生长抑制作用明显,为了解SWCNTs对具有环境功能的菌株的作用,以苯酚降解菌Arthrobacter sp.W1为对象,考察不同浓度SWCNTs下菌株W1的生长曲线和苯酚降解曲线,并通过扫描电镜观察、细胞凋亡检测、DNA泄漏量分析和活性氧产量分析考察作用机制.结果表明,特定浓度范围的SWCNTs(0.5-5.0 mg/L)会加快W1的苯酚降解速率,且1.5-2.0 mg/L SWCNTs不抑制W1的生长.SWCNTs在溶液中形成团簇并吸附W1细胞,且对W1产生以物理穿刺为主的毒性作用,但在特定浓度范围的SWCNTs条件下,SWCNTs-菌株-苯酚体系增加了菌体与苯酚的接触机会,从而对W1生长和苯酚降解产生明显的促进作用.本研究结果可为进一步揭示SWCNTs的环境微生物效应提供理论依据.

关键词：单壁碳纳米管苯酚作用机制生物降解 Arthrobacter sp.

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微生物介导的金纳米颗粒合成

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微生物学通报 2015年第8期42卷 1584-1592页

作者：刘紫嫣周豪沈娥王经伟张照婧沈文丽马桥曲媛媛周集体大连理工大学环境学院辽宁大连116024 大连理工大学食品与环境学院辽宁盘锦124221

金纳米颗粒凭借其独特的光学和电化学特性,广泛应用于信息存储、化学传感、医学成像、药物传输以及生物标记等领域。近年来,生物法合成金纳米颗粒因其环境友好、绿色低毒等特点引起研究者的广泛关注。研究表明,多种微生物包括细菌、放... 详细信息

金纳米颗粒凭借其独特的光学和电化学特性,广泛应用于信息存储、化学传感、医学成像、药物传输以及生物标记等领域。近年来,生物法合成金纳米颗粒因其环境友好、绿色低毒等特点引起研究者的广泛关注。研究表明,多种微生物包括细菌、放线菌、真菌和病毒等均具有合成金纳米颗粒的能力。本文综述了微生物介导合成金纳米颗粒的特性、机制及应用,并对未来发展趋势进行了展望。

关键词：生物合成微生物金纳米颗粒合成机制

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16S/18S/ITS扩增子高通量测序引物的生物信息学评估和改进

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微生物学通报 2020年第9期47卷 2897-2912页

作者：吴悦妮冯凯厉舒祯王朱珺张照婧邓晔中国科学院生态环境研究中心中国科学院环境生物技术重点实验室北京100085 中国科学院大学资源与环境学院北京100049 大连理工大学环境学院工业生态与环境工程教育部重点实验室辽宁大连116024 山东大学海洋研究院山东青岛266237

【背景】在过去的十几年里,基于核糖体RNA基因的扩增子测序技术被广泛用于各种生态系统中微生物群落的多样性检测。扩增子测序的使用极大地促进了土壤、水体、空气等环境中微生物生态的相关研究。【目的】随着高通量测序技术的不断发展... 详细信息

【背景】在过去的十几年里,基于核糖体RNA基因的扩增子测序技术被广泛用于各种生态系统中微生物群落的多样性检测。扩增子测序的使用极大地促进了土壤、水体、空气等环境中微生物生态的相关研究。【目的】随着高通量测序技术的不断发展和参考数据库的不断更新,针对不同的环境样本的引物选择和改进仍然需要更深入的校验。【方法】本文收集了目前在微生物群落研究中被广泛采用的标记基因扩增通用引物,包括16S rRNA基因扩增常用的8对通用引物和2对古菌引物、9对真菌转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)基因扩增引物,以及18S rRNA基因扩增的4对真核微生物通用引物和1对真菌特异性引物。这些引物中包括了地球微生物组计划(Earth Microbiome Project,EMP)推荐的2对16S rRNA基因扩增引物、1对ITS1基因扩增引物和1对18S rRNA基因扩增引物。采用最近更新的标准数据库对这些引物进行了覆盖度和特异性评价。【结果】EMP推荐的引物依然具有较高的覆盖度,而其他引物在覆盖度及对特定环境或类群的特异性上也各有特点。此外,最近有研究对这些通用引物进行了一些改进,而我们也发现,一个碱基的变化都可能会导致评价结果或扩增产物发生明显变化,简并碱基的引入既可以覆盖更多的物种,但同时也会在一定程度上降低关注物种的特异性。【结论】研究结果为微生态研究中标记基因的引物选择提供了一个广泛的指导,但在关注具体科学问题时,引物的选择仍需数据指导与实验尝试。

关键词：扩增子测序 16S rRNA基因 ITS基因 18S rRNA基因 PCR扩增引物引物覆盖度引物特异性扩增产物片段长度

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真菌介导的纳米金合成及其应用研究进展

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环境科学与技术 2016年第9期39卷 82-87,158页

作者：厉舒祯沈文丽刘洋荧邓晔由胜男裴晓芳李会杰张照婧曲媛媛工业生态与环境工程教育部重点实验室大连理工大学环境学院辽宁大连116024 中国科学院生态环境研究中心环境生物技术重点实验室北京100085

纳米金(AuNPs)凭借其独特的物理化学性质在多个领域得到了广泛的应用。相比于传统的化学、物理合成方法,微生物合成AuNPs凭借其环境友好、条件温和、绿色低毒等优势成为纳米技术领域的研究热点。相较于其他微生物,真菌能够分泌大量胞内... 详细信息

纳米金(AuNPs)凭借其独特的物理化学性质在多个领域得到了广泛的应用。相比于传统的化学、物理合成方法,微生物合成AuNPs凭借其环境友好、条件温和、绿色低毒等优势成为纳米技术领域的研究热点。相较于其他微生物,真菌能够分泌大量胞内或胞外蛋白/酶以及生物小分子,能够耐受较高浓度的AuCl_4^-,并且合成AuNPs的速度快、产量高、尺寸较为均一,因此具有大规模生产AuNPs的潜力。文章主要从合成AuNPs的真菌资源、影响纳米粒子形态的因素、合成机制与应用等方面进行综述,提出利用人工真菌群落合成AuNPs的新概念,并对未来该研究方向进行展望。

关键词：纳米金真菌介导纳米金形态合成机制

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合成微生物群落及其生物处理应用研究新进展

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应用与环境生物学报 2015年第6期21卷 981-986页

作者：张照婧厉舒祯邓晔李会杰李端行刘紫嫣王经伟沈文丽马桥曲媛媛周集体大连理工大学环境学院工业生态与环境工程教育部重点实验室大连116024 中国科学院生态环境中心中国科学院环境生物技术重点实验室北京100085

合成微生物群落是合成生物学在微生物群落水平上一个新的研究前沿.本文综述了合成微生物群落的特点、种间相互作用与微生物调控模式,以及其在生物处理领域应用的最新研究进展.合成微生物群落由多种遗传背景完全解析的微生物组成,通过微... 详细信息

合成微生物群落是合成生物学在微生物群落水平上一个新的研究前沿.本文综述了合成微生物群落的特点、种间相互作用与微生物调控模式,以及其在生物处理领域应用的最新研究进展.合成微生物群落由多种遗传背景完全解析的微生物组成,通过微生物之间的相互作用实现特定功能,具有复杂度低、可控性高、稳定性好等优点.合成微生物群落中存在多种相互作用类型,包括互利共生(协同作用)、偏利共生、寄生或捕食以及竞争.这些相互作用可以通过改变细胞间交流、物种代谢作用以及空间结构等方式进行调控,从而实现对合成群落的改造.近年来,合成微生物群落在生物处理方面应用广泛,主要集中于燃料生产、高附加值化学品合成以及污染物降解等.然而,合成微生物群落中相互作用尚未完全解析,结构与功能同时调控能力有限,因此利用合成生物学、系统生物学以及生物信息学等技术,合理设计和构建稳定高效的合成微生物群落,优化和调控生物处理过程将成为该方向的研究重点.

关键词：合成微生物群落种间相互作用微生物调控生物处理

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河南汉族肺结核患者PTPN22基因多态性检测

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郑州大学学报（医学版） 2013年第2期48卷 207-210页

作者：肖海杨洪毅张照婧张言鹏李晓文郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 郑州大学第一附属医院生殖医学中心郑州450052 郑州大学临床医学系郑州450052

目的:检测河南汉族肺结核患者蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)基因rs33996649与rs2488457位点的多态性。方法:采用PCR-RFLP方法检测河南汉族205例正常人和214肺结核患者PTPN22基因rs33996649与rs2488457位点的多态性,并进行基因型... 详细信息

目的:检测河南汉族肺结核患者蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)基因rs33996649与rs2488457位点的多态性。方法:采用PCR-RFLP方法检测河南汉族205例正常人和214肺结核患者PTPN22基因rs33996649与rs2488457位点的多态性,并进行基因型频率、等位基因频率的比较。结果:河南汉族群体中未发现rs33996649位点多态性;肺结核组和对照组rs2488457位点等位基因频率差异无统计学意义(χ2=2.134,P=0.144),G/G基因型频率差异有统计学意义(χ2=4.976,P=0.026)。结论:PTPN22基因rs33996649多态性与河南汉族肺结核发生无关;rs2488457的G/G基因型与河南汉族肺结核易感性有一定关系。

关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22基因肺结核基因多态性河南汉族

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亨廷顿舞蹈病家系分析

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中国实用神经疾病杂志 2013年第9期16卷 95-96页

作者：肖海雷冬梅张照婧李晨郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450052 郑州大学第三附属医院病理科郑州450052 郑州大学医学院 2010级5年制13班郑州450000 郑州大学临床医学系 2008级7年制6班郑州450000

亨廷顿舞蹈病（Huntingtondisease，HD）是以神经系统退行性改变为特征的常染色体显性遗传病，因Huntington首次对该病进行描述而得名，临床表现为不自主舞蹈样动作、进行性痴呆、精神障碍“三联征”，患者通常35～50岁发病，多数在患病... 详细信息

亨廷顿舞蹈病（Huntingtondisease，HD）是以神经系统退行性改变为特征的常染色体显性遗传病，因Huntington首次对该病进行描述而得名，临床表现为不自主舞蹈样动作、进行性痴呆、精神障碍“三联征”，患者通常35～50岁发病，多数在患病后15～20a死亡。

关键词：亨廷顿舞蹈病病例分析

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