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转移肿瘤干细胞在肿瘤转移中作用机制的研究进展

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肿瘤 2009年第10期29卷 1006-1009页

作者：张洪也程勇重庆医科大学附属第一医院胃肠外科重庆400016

随着肿瘤干细胞学说的提出及其在肿瘤发生中所起重要作用的不断研究,更多学者将目光聚焦在肿瘤干细胞与肿瘤转移的关系上,认为肿瘤干细胞可能是引起肿瘤转移的元凶,并进一步提出了转移肿瘤干细胞的概念。肿瘤转移是一个复杂的多因素参... 详细信息

随着肿瘤干细胞学说的提出及其在肿瘤发生中所起重要作用的不断研究,更多学者将目光聚焦在肿瘤干细胞与肿瘤转移的关系上,认为肿瘤干细胞可能是引起肿瘤转移的元凶,并进一步提出了转移肿瘤干细胞的概念。肿瘤转移是一个复杂的多因素参与的病理过程,上皮间质转化机制、基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor1,SDF-1)/趋化因子受体4[chemokine(Cys-X-Cysmotif)receptor4,CXCR4]和肿瘤干细胞及其微环境等都在肿瘤转移的过程中起到了不可低估的作用,肿瘤干细胞与它们的相互作用可能贯穿了肿瘤转移过程的始末。阐明转移肿瘤干细胞在肿瘤转移中的作用机制,将为肿瘤转移的靶向治疗提供理论依据。

关键词：肿瘤肿瘤干细胞转移肿瘤干细胞肿瘤转移

基于代谢组学的柴胡疏肝散抗抑郁作用机制及配伍规律的研究

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基于代谢组学的柴胡疏肝散抗抑郁作用机制及配伍规律的研究

作者：张洪也广西医科大学

学位级别：硕士

目的:抑郁症是危害人类身心健康的重大精神疾病,其发病机制复杂,但临床缺乏能长期使用的有效、副作用小的药物。中药复方柴胡疏肝散临床用于治疗抑郁症疗效确切,但其起效的配伍规律尚未有系统研究报道。基于此,本课题以柴胡疏肝散为研... 详细信息

目的:抑郁症是危害人类身心健康的重大精神疾病,其发病机制复杂,但临床缺乏能长期使用的有效、副作用小的药物。中药复方柴胡疏肝散临床用于治疗抑郁症疗效确切,但其起效的配伍规律尚未有系统研究报道。基于此,本课题以柴胡疏肝散为研究对象,以代谢组学技术为核心,采用慢性不可预知温和应激（CUMS）抑郁大鼠模型,对柴胡疏肝散的抗抑郁作用机制和配伍规律进行研究。方法:1.将80只健康的雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组、柴胡疏肝散全方组（CSGS）、柴胡疏肝散缺君药组（NJ）、柴胡疏肝散缺臣药组（NC）、柴胡疏肝散缺佐药组（NZ）、柴胡疏肝散缺使药组（NS）,采用连续32天CUMS刺激建立抑郁大鼠模型。2.采用体重变化、旷场实验（Open-field test,OFT）和蔗糖水偏嗜实验（Sugar preference test,SPT）来评价模型大鼠行为学改变情况。3.采用ELISA法检测各组大鼠检测各组大鼠血清五羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质醇（CORT）含量。4.采用基于超高效液相色谱串联四极杆/飞行时间质谱（UPLC-Q/TOF MS）的代谢组学技术,结合多元统计分析和在线代谢组学数据库,寻找模型组和正常对照组血清代谢组分差异,分析其差异物质与抑郁证可能存在的关系;进一步表征CSGS及其配伍对模型大鼠血清内源性代谢产物的变化规律,发现与抗抑郁药效相关的潜在生物标记物及可能的靶点。结果:1.造模第32天,与正常对照组相比,各组大鼠体重差异均有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,由高到低依次为正常对照组＞CSGS组＞氟西汀组＞NS组＞NJ组＞NZ组＞NC组＞模型组;各组大鼠OFT活动得分差异均有显著性（P＜0.01）,由多到少依次为正常对照组＞氟西汀组＞CSGS组＞NS组＞NJ组＞NC组＞NZ组＞模型组;造模第31天,各组大鼠糖水偏嗜度差异均有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,由高到低依次为正常对照组＞氟西汀组＞CSGS组＞NS组＞NJ组＞NC组＞NZ组＞模型组。2.造模32天后,与正常对照组相比,各组大鼠血清中5-HT的含量差异均有显著性（P＜0.01）,由高到低依次为正常对照组＞氟西汀组＞CSGS组＞NS组＞NJ组＞NC组＞NZ组＞模型组;各组大鼠血清中NE的含量差异均有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,由高到低依次为正常对照组＞氟西汀组＞CSGS组＞NS组＞NC组＞NZ组＞NJ组＞模型组;各组大鼠血清中ACTH的含量升高,其中模型组、NJ组、NC组、NZ组大鼠血清中ACTH的含量差异均有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,由高到低依次为正常对照组模型组＞NZ组＞NC组＞NJ组＞NS组＞CSGS组＞氟西汀组＞正常对照组;各组大鼠血清中CORT的含量升高,其中模型组、NC组、NZ组、NS组大鼠血清中CORT的含量差异均有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,由高到低依次为正常对照组模型组＞NZ组＞NC组＞NS组＞NJ组＞CSGS组＞氟西汀组＞正常对照组。3.偏最小二乘判别分析（PLS-DA）显示模型大鼠的血清样品代谢轮廓偏离正常对照组大鼠,表明CUMS模型引起了大鼠代谢轮廓的变化。共发现24个潜在生物标记物,这些物质与鞘脂类代谢、花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢、含硒氨基酸代谢和脂肪酸代谢密切相关。4.潜在生物标记物中有16个可能与CSGS治疗抑郁症的调节相关,涉及的16个酶和63个基因可能是CSGS治疗CUMS诱发抑郁症的重要的靶点。同时与复方整体抗抑郁作用相关的潜在生物标记物君药涉及5个,臣药涉及5个,佐药涉及6个,使药涉及2个。结论:1.本研究成功建立大鼠CUMS模型,可模拟临床抑郁症症状。***可改善各项异常抑郁样测量指标,其抗抑郁效果与氟西汀相当,且CSGS全方抗抑郁效果优于配伍方效果。***模型可诱导大鼠血清单胺类神经递质和神经内分泌的紊乱。CSGS及其配伍的治疗作用通过调节外周单胺类神经递质5-HT、NE和HPA轴激素ACTH、CORT的分泌。***模型可引起大鼠血清代谢轮廓显著变化,明显扰动鞘脂类代谢、花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢和含硒氨基酸代谢代谢通路,CSGS对这些受扰动的代谢通路可以进行回调。***的君、臣、佐、使各个功能单元对受扰动的鞘脂类代谢、花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢、含硒氨基酸代谢、脂肪酸代谢代谢通路中的不同部分具有不同程度的回调。其中缺少佐药对调节CUMS模型大鼠代谢轮廓的影响最大,缺少使药的影响最小。

关键词：柴胡疏肝散代谢组学抗抑郁配伍规律超高效液相色谱串联四极杆/飞行时间质谱

shRNA抑制Twist表达对结肠癌LoVo细胞系生物学行为的影响

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shRNA抑制Twist表达对结肠癌LoVo细胞系生物学行为的影响

作者：张洪也重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:观察shRNA抑制Twist基因表达后对结肠癌LoVo细胞生物学行为的影响,并探讨Twist与结直肠癌生长转移的关系。方法:采用半定量RT-PCR法和Western blot法从mRNA和蛋白水平分别检测Twist在LoVo、SW620细胞(高转移潜能结肠癌细胞系)以及S... 详细信息

目的:观察shRNA抑制Twist基因表达后对结肠癌LoVo细胞生物学行为的影响,并探讨Twist与结直肠癌生长转移的关系。方法:采用半定量RT-PCR法和Western blot法从mRNA和蛋白水平分别检测Twist在LoVo、SW620细胞(高转移潜能结肠癌细胞系)以及SW480、SW1116细胞(低转移潜能结肠癌细胞系)中的表达。再以Twist相对高表达的LoVo细胞为研究对象,在脂质体Lipofectamin2000TM介导下转入shRNA-Twist重组质粒,转染后48h荧光显微镜下观测转染效率。经G418筛选出稳定转染的阳性细胞后,设立空白对照组(LoVo细胞(只加入脂质体))和阴性对照组(LoVo-shRNA-NC细胞) ,通过Western blot法检测阳性组(LoVo-shRNA-Twist细胞)中Twist蛋白的受抑效果。分别应用MTT法和FACS检测以上三组细胞的增殖和凋亡情况,以及分别采用划痕实验和Transwell小室侵袭实验测定该三组细胞的迁移和侵袭能力。结果:半定量RT-PCR法和Western blot法结果显示,Twist在LoVo、SW620细胞中的mRNA和蛋白水平都显著高于SW480、SW1116细胞(P0.05),采用划痕实验检测细胞体外迁移能力、侵袭实验检测细胞体外侵袭能力结果示,阳性组细胞体外迁移及侵袭力均较两个对照组显著减弱(P0.05)。结论:Twist表达下调减弱了结肠癌LoVo细胞的体外侵袭转移能力,但对LoVo细胞的生长无明显影响,Twist有望成为结直肠癌中抗肿瘤转移治疗的新靶标。

关键词： Twist RNA干扰结肠癌细胞系肿瘤生长肿瘤转移

LoVo细胞系中结肠癌干细胞样细胞的分离、培养及鉴定

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中国肿瘤生物治疗杂志 2010年第2期17卷 149-154页

作者：张洪也程勇胡祥吕原武乃金重庆医科大学附属第一医院胃肠外科重庆400016

目的:从结肠癌LoVo细胞系中分离、鉴定具有CD44+/EPCAMhigh特异表型的结肠癌干细胞样细胞,观察其生物学行为,证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在。方法:从普通血清培养的LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有CD44+/EPCAMhigh表型的细... 详细信息

目的:从结肠癌LoVo细胞系中分离、鉴定具有CD44+/EPCAMhigh特异表型的结肠癌干细胞样细胞,观察其生物学行为,证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在。方法:从普通血清培养的LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有CD44+/EPCAMhigh表型的细胞,接种于添加生长因子的无血清培养基中,观察其增殖过程,继而诱导分化。MTT法、流式细胞术检测CD44+/EPCAMhigh、EPCAMlow和未分选LoVo细胞的增殖能力及细胞周期分布。3种细胞接种裸鼠,比较不同细胞的成瘤率;免疫荧光技术检测小鼠次代CD44+/EPCAMhigh细胞中CD44/EPCAM的表达。结果:LoVo细胞中有17.4%的CD44+/EPCAMhigh细胞,并能在添加生长因子的无血清培养基中呈细胞球样生长,且可连续传代;在血清的诱导下,呈贴壁分化生长,其形态与未分选LoVo细胞无差别。CD44+/EPCAMhigh细胞增殖能力高于EPCAMlow细胞及未分选LoVo细胞,且细胞周期多集中在G0/G1期。以500个CD44+/EPCAMhigh细胞接种裸鼠成瘤率为90%(9/10),而1×104个EPCAMlow细胞成瘤率为0(0/10)。小鼠移植瘤中次代CD44+/EPCAMhigh细胞仍能少量表达CD44和EPCAM。结论:LoVo细胞中存在CD44+/EPCAMhigh结肠癌干细胞样细胞,CD44+/EPCAMhigh可用于结肠癌肿瘤干细胞的深入研究。

关键词：结肠癌 LoVo细胞株肿瘤干细胞干细胞样细胞 CD44/EPCAM

工资、年终奖及红利个人所得税税务筹划——基于员工持股计划的引入

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财会通讯（中） 2016年第11期 119-121页

作者：张洪也袁玉娟中国石油大学(华东)经济管理学院

当前市场竞争剧烈的情况下,企业越来越重视人才的竞争。一般企业多采取薪酬激励的方式吸引员工,然而在我国现行的税法累进税率制度下,收入越高缴纳的税费相对越高。在此过程中,多缴纳的税费大大降低了企业的激励效果。本文引入员工持股... 详细信息

当前市场竞争剧烈的情况下,企业越来越重视人才的竞争。一般企业多采取薪酬激励的方式吸引员工,然而在我国现行的税法累进税率制度下,收入越高缴纳的税费相对越高。在此过程中,多缴纳的税费大大降低了企业的激励效果。本文引入员工持股计划这一长期激励方式,将工资、红利、年终奖相结合,运用排列组合和临界值的方法,将7种方案的税费进行对比,从而提出最优筹划方案,以此提出税务筹划思路。

关键词：税务筹划员工持股计划临界值

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基于企业利润角度的增值税优惠政策思考

财会通讯（上） 2018年第2期 49-52页

作者：李真真张洪也中国石油大学(华东)经济管理学院北京国家会计学院

目前国家出台了一系列的增值税税收优惠政策,主要包括直接减免的增值税,即征即退、先征后退、先征后返以及零税率等税收优惠政策。但并不是所有的税收优惠政策都能给企业带来利润的增加。因此,对于这些税收优惠政策,企业应该从自身价值... 详细信息

目前国家出台了一系列的增值税税收优惠政策,主要包括直接减免的增值税,即征即退、先征后退、先征后返以及零税率等税收优惠政策。但并不是所有的税收优惠政策都能给企业带来利润的增加。因此,对于这些税收优惠政策,企业应该从自身价值最大化的角度出发,来选择是否享受这些税收优惠政策。本文将从主要税收优惠政策的角度出发,分析如何通过税收优惠政策的取舍,达到企业利润最大化的目标。

关键词：增值税税收优惠政策企业利润

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企业财务战略的制定

商场现代化 2016年第9期 220-221页

作者：张洪也中国石油大学(华东)

公司的决策要以财务为基础,财务战略对企业的长期发展具有重大意义,制定适应企业自身发展的财务战略成为企业发展的重中之重。财务战略的制定首先要以财务环境分析为基础。在此基础上,进而分析企业所处的生命周期阶段,分别从筹资战略、... 详细信息

公司的决策要以财务为基础,财务战略对企业的长期发展具有重大意义,制定适应企业自身发展的财务战略成为企业发展的重中之重。财务战略的制定首先要以财务环境分析为基础。在此基础上,进而分析企业所处的生命周期阶段,分别从筹资战略、投资战略、分配战略、税收筹划战略,对初创期、成长期、成熟期、衰退期的企业进行分析,制定适合其发展的财务战略。

关键词：财务战略筹资战略投资战略分配战略税收筹划战略

使用小切口阑尾切除术治疗急性阑尾炎的效果观察

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当代医药论丛 2017年第12期15卷 56-57页

作者：张洪也重庆市合川区人民医院重庆401520

目的 :探讨使用小切口阑尾切除术治疗急性阑尾炎的效果。方法 :选取近两年重庆市合川区人民医院收治的67例急性阑尾炎患者作为研究对象。随机将这些患者分为对照组和治疗组。为对照组患者使用开腹阑尾切除术进行治疗,为治疗组患者使用... 详细信息

目的 :探讨使用小切口阑尾切除术治疗急性阑尾炎的效果。方法 :选取近两年重庆市合川区人民医院收治的67例急性阑尾炎患者作为研究对象。随机将这些患者分为对照组和治疗组。为对照组患者使用开腹阑尾切除术进行治疗,为治疗组患者使用小切口阑尾切除术进行治疗。然后比较两组患者术后住院的时间、手术持续的时间、术中的出血量及并发症的发生情况。结果 :治疗组患者术后住院的时间及手术持续的时间均短于对照组患者,其术中的出血量少于对照组患者,其并发症的发生率低于对照组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 :使用小切口阑尾切除术治疗急性阑尾炎对患者造成的创伤小,其身体康复的速度快,并发症的发生率低。

关键词：小切口阑尾切除术急性阑尾炎

基于^1H-NMR的当归四逆汤抗凝血作用的代谢组学研究

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中国中药杂志 2015年第20期40卷 4088-4093页

作者：郑华秦霞宋慧唐超玲阮俊翔张洪也陆世银梁永红苏志恒广西医科大学医学科学实验中心广西南宁530021 广西医科大学药学院广西南宁530021

采用1H-NMR代谢组学技术研究当归四逆汤抗凝血作用机制以及对小鼠血浆内源性代谢产物的影响。当归四逆汤灌胃给药1周后,观察当归四逆汤对小鼠凝血酶时间的影响,并采用1H-NMR技术分析小鼠血浆代谢指纹图谱,采用主成分分析(principal comp... 详细信息

采用1H-NMR代谢组学技术研究当归四逆汤抗凝血作用机制以及对小鼠血浆内源性代谢产物的影响。当归四逆汤灌胃给药1周后,观察当归四逆汤对小鼠凝血酶时间的影响,并采用1H-NMR技术分析小鼠血浆代谢指纹图谱,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA),研究给药组与正常组之间的代谢物组差异,筛选与抗凝血作用相关的潜在生物标志物。连续当归四逆汤灌胃给药1周后,能显著延长小鼠凝血酶时间(P<0.05)。代谢组学结果显示空白组和复方组能明显区分,与空白组比较,复方组内源性代谢产物肉碱、苯丙氨酸和异丁酸显著上调(P<0.01),赖氨酸、组氨酸和胆固醇显著下调(P<0.05)。肉碱、苯丙氨酸、组氨酸和胆固醇为当归四逆汤抗凝过程中潜在代谢标志物,当归四逆汤可能通过调节脂质代谢、能量代谢和氨基酸代谢影响血小板聚集功能和组织因子、纤维蛋白酶的表达来发挥抗凝作用。

关键词：当归四逆汤抗凝 1H-NMR 代谢组学代谢标志物